專題基因工程一輪復(fù)習(xí)課件

專題基因工程一輪復(fù)習(xí)專題基因工程一輪復(fù)習(xí)專題基因工程一輪復(fù)習(xí)基因工程的概念理解1.供體：提供_________。2.操作環(huán)境：_____。3.操作水平：_____水平。4.原理：_________。5.受體：表達(dá)目的基因。6.本質(zhì)：性狀在_____體內(nèi)表達(dá)。7.優(yōu)點(diǎn)：克服________________障礙，定向改造生物_____。目的基因體外分子基因重組受體遠(yuǎn)緣雜交不親和性狀一、基因工程——指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組核和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，定向地改造生物的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。專題基因工程一輪復(fù)習(xí)專題基因工程一輪復(fù)習(xí)專題基因工程一輪復(fù)習(xí)1基因工程的概念理解1.供體：提供_________。2.操作環(huán)境：_____。3.操作水平：_____水平。4.原理：_________。5.受體：表達(dá)目的基因。6.本質(zhì)：性狀在_____體內(nèi)表達(dá)。7.優(yōu)點(diǎn)：克服________________障礙，定向改造生物_____。目的基因體外分子基因重組受體遠(yuǎn)緣雜交不親和性狀一、基因工程——指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組核和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，定向地改造生物的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?；蚬こ痰母拍罾斫饽康幕蝮w外分子基因重組受體遠(yuǎn)緣雜交不親和21.1DNA重組技術(shù)的基本工具限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”DNA連接酶——“分子縫合針”運(yùn)載體——“分子運(yùn)輸車(chē)”1.1DNA重組技術(shù)的基本工具限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手3分子手術(shù)刀——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)1.來(lái)源:原核生物2.作用:3.特點(diǎn):特異性（1）、識(shí)別特定核苷酸序列；（2）、切開(kāi)特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。4.結(jié)果：產(chǎn)生黏性末端或平末端一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。分子手術(shù)刀——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)1.來(lái)源:原核生物24AATTCG下列黏性末端屬于同種內(nèi)切酶切割而成的是

A、①②B、①③C、①④D、②③TCGAGCTTAAAGGTTCCAAGCTTCAGAATTCG③①②④ATCGAGCTTAAAATTC下列黏性末5“分子縫合針”————DNA連接酶

2、分類E.coliDNA連接酶T4DNA連接酶想一想:DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎?(1)、來(lái)源：大腸桿菌(2)、作用：“縫合”黏性末端(1)、來(lái)源：T4噬菌體(2)、作用：“縫合”黏性末端和平末端1、作用：恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵?！胺肿涌p合針”————DNA連接酶2、分類E.coliDN6DNA聚合酶DNA連接酶區(qū)別1區(qū)別2相同點(diǎn)尋根問(wèn)底DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎?為什么?只能將單個(gè)核苷酸連接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵形成磷酸二酯鍵在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵以一條DNA鏈為模板。將單個(gè)核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵連接成一條互補(bǔ)的DNA鏈不需要模板。將DNA雙鏈上的兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來(lái)。DNA聚合酶DNA連接酶相同點(diǎn)尋根問(wèn)底DNA連接酶與DNA聚7下圖表示DNA片段，有關(guān)該圖的敘述中，不正確的是A．②③④構(gòu)成了DNA的基本組成單位

B．②③④的特定排列順序所含的遺傳信息能指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成

C．解旋酶可使⑤處的化學(xué)鍵斷裂

D．DNA連接酶可連接①處斷裂的化學(xué)鍵B下圖表示DNA片段，有關(guān)該圖的敘述中，不正確的是A．②③④構(gòu)8基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌和酵母菌等生物中,是細(xì)菌擬核DNA之外能夠自主復(fù)制的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒等。基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌和酵母菌等9作為載體的必要條件：1、能自我復(fù)制或整合到受體染色體DNA上隨染色體DNA的復(fù)制而同步復(fù)制；2、有一或多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn)；3、必須帶有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇4、對(duì)受體細(xì)胞無(wú)毒害5、大小應(yīng)合適，便于提取和體外操作?；虻倪\(yùn)輸工具——運(yùn)載體作為載體的必要條件：1、能自我復(fù)制或整合到受體染色體DNA上10四個(gè)主要步驟:目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與鑒定1、2基因工程的基本操作程序四個(gè)主要步驟:目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)?1一、目的基因的獲取1、目的基因主要是指______________________編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因如：抗蟲(chóng)基因3、獲取目的基因的常用方法（1）從基因文庫(kù)中獲?。?）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（3）人工合成（通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成）2、目的基因的來(lái)源:①?gòu)淖匀唤缫延械奈锓N分離②人工方法合成一、目的基因的獲取1、目的基因主要是指___________121、基因文庫(kù)（一）從基因文庫(kù)中獲取目的基因?qū)⒑心撤N生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫(kù)2、基因文庫(kù)的種類:種類基因組文庫(kù)：含有一種生物的全部基因部分基因文庫(kù)：只包含了一種生物的部分基因，如：cDNA文庫(kù)1、基因文庫(kù)（一）從基因文庫(kù)中獲取目的基因?qū)⒑心撤N生物不131)反轉(zhuǎn)錄法：雜交雙鏈(單鏈RNA/單鏈DNA)單鏈DNA雙鏈DNA(cDNA)目的基因的mRNA某種酶DNA聚合酶反轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄法化學(xué)合成法3.怎樣構(gòu)建基因文庫(kù)?人工合成法（真核生物）1)反轉(zhuǎn)錄法：雜交雙鏈單鏈DNA雙鏈D14（2)根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列基因的脫氧核苷酸序列推測(cè)推測(cè)目的基因化學(xué)合成（2)根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：蛋白質(zhì)的氨基酸序列15（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因1、定義：PCR——多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一項(xiàng)生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。通過(guò)此技術(shù)，可獲取大量的目的基因。DNA復(fù)制2、原理：3、條件：4、原料：5、過(guò)程：6、方式：一段已知目的基因的核苷酸序列模板DNA；DNA引物；四種脫氧核苷酸；熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）以_____方式擴(kuò)增，即____（n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）指數(shù)2n7、儀器：PCR擴(kuò)增儀（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因1、定義：PCR——多聚酶16PCR技術(shù)擴(kuò)增與DNA復(fù)制的比較PCR技術(shù)DNA復(fù)制相同點(diǎn)原理原料條件不同點(diǎn)解旋方式場(chǎng)所酶結(jié)果堿基互補(bǔ)配對(duì)四種脫氧核苷酸模板、能量、酶高溫下變性解旋解旋酶催化體外復(fù)制(PCR擴(kuò)增儀內(nèi))主要在細(xì)胞核內(nèi)熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（Taq酶）大量的DNA片段形成整個(gè)DNA分子解旋酶、普通的DNA聚合酶等PCR技術(shù)擴(kuò)增與DNA復(fù)制的比較PCR技術(shù)DNA復(fù)制相同點(diǎn)原17二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建——核心（1）用一定的_________切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出____________。（2）用___________切斷目的基因，使其產(chǎn)生_________________。（3）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的______處，再加入適量___________，形成了一個(gè)重組DNA分子（重組質(zhì)粒）限制酶黏性末端同一種限制酶相同的黏性末端切口DNA連接酶1.過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建——核心（1）用一定的________183.基因表達(dá)載體的組成：a、目的基因b、啟動(dòng)子c、終止子d、標(biāo)記基因位于基因的首端,是mRNA識(shí)別并結(jié)合位點(diǎn)。位于基因的末端,終止轉(zhuǎn)錄。檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。2、基因表達(dá)載體的作用a、使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代b、同時(shí)使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用3.基因表達(dá)載體的組成：a、目的基因b、啟動(dòng)子c、終止子d、19三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因進(jìn)入_____

____內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持_

___和___

__的過(guò)程。轉(zhuǎn)化:受體細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)1、導(dǎo)入植物細(xì)胞:2、導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞:3、導(dǎo)入微生物細(xì)胞:常用方法：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法顯微注射法感受態(tài)細(xì)胞法（或Ca2+轉(zhuǎn)化法）三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因進(jìn)入________201、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法特點(diǎn):能感染雙子葉植物和祼子植物,對(duì)單子葉植物無(wú)感染能力Ti質(zhì)粒的T—DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到其染色體上轉(zhuǎn)化過(guò)程:Ti質(zhì)粒目的基因構(gòu)建表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞插入植物細(xì)胞染色DNA表達(dá)新性狀轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌1、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法特點(diǎn):能感染雙子21（2）基因槍法基因槍法又稱微彈轟擊法，是利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力，將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體DNA打入受體細(xì)胞中，使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。適用于單子葉植物（2）基因槍法基因槍法又稱微彈轟擊法，是利用壓縮氣體產(chǎn)22（3）花粉通道法花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管還未愈合前，剪去柱頭，然后，滴加DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞。（3）花粉通道法花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成232、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞方法:顯微注射技術(shù)操作程序:提純含目的基因表達(dá)載體取受精卵顯微注射移植到子宮受精卵發(fā)育新性狀動(dòng)物常用受體細(xì)胞：受精卵2、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞方法:顯微注射技術(shù)操作程序:提純含243、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用法：Ca2+處理常用受體細(xì)胞：大腸桿菌微生物作受體細(xì)胞原因：繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)少過(guò)程：Ca2+處理大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA（用Ca2+處理，增加細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性）處于能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)的細(xì)胞3、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用法：Ca2+處理常用受體細(xì)胞25(1)________________→目的基因的有無(wú)(2)分子雜交技術(shù)→_________________(3)_______________→目的基因是否翻譯(4)生物性狀的表達(dá)與否→目的基因是否表達(dá)(個(gè)體水平)DNA分子雜交技術(shù)目的基因是否轉(zhuǎn)錄抗原—抗體雜交分子水平四、目的基因的檢測(cè)與鑒定(1)________________→目的基因的有無(wú)DNA26檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因1、導(dǎo)入檢測(cè)目的：方法：DNA分子雜交技術(shù)過(guò)程：①.首先取出轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA②.將含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作標(biāo)記,以此做探針。③使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交,若顯示出雜交帶,表明目的基因已插入染色體DNA中檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因1、導(dǎo)入檢測(cè)27從轉(zhuǎn)基因生物中提取的基因組DNA探針：雜交的對(duì)象：用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段15N15N14N探針轉(zhuǎn)基因生物的DNA變性變性14N從轉(zhuǎn)基因生物中提取的基因組DNA探針：雜交的對(duì)象：用放射性同282、轉(zhuǎn)錄檢測(cè)目的：檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA方法：分子雜交技術(shù)用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段探針：雜交的對(duì)象：從轉(zhuǎn)基因生物中提取的mRNA.2、轉(zhuǎn)錄檢測(cè)目的：檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA方法：分子293、翻譯檢測(cè)目的：檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)方法:抗原抗體雜交技術(shù)從轉(zhuǎn)基因生物中提取的蛋白質(zhì)抗原：抗體：將目的基因編碼的蛋白質(zhì)注射進(jìn)動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行免疫產(chǎn)生的相應(yīng)抗體4、個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等3、翻譯檢測(cè)目的：檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)方法:抗原抗體301.轉(zhuǎn)基因植物類別應(yīng)用實(shí)例抗蟲(chóng)抗病抗逆改良?xì)⑾x(chóng)的基因主要有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因等抗病毒基因:病毒外殼蛋白基因和病毒的復(fù)制酶基因;抗真菌基因:幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因抗鹽堿和抗干旱的調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓基因、抗凍蛋白基因、抗除草劑基因①轉(zhuǎn)基因玉米中賴氨酸的含量比對(duì)照提高30%②轉(zhuǎn)基因延熟番茄儲(chǔ)存時(shí)間可延長(zhǎng)1～2個(gè)月③轉(zhuǎn)基因矮牽牛呈現(xiàn)出自然界沒(méi)有的顏色變異1、3基因工程的應(yīng)用1.轉(zhuǎn)基因植物類別應(yīng)用實(shí)例抗蟲(chóng)抗病抗逆改良?xì)⑾x(chóng)的312.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物類別應(yīng)用實(shí)例提高生長(zhǎng)速度改善畜產(chǎn)品品質(zhì)生產(chǎn)藥物作器官移植的供體如轉(zhuǎn)外源生長(zhǎng)激素基因綿羊和轉(zhuǎn)外源生長(zhǎng)激素基因鯉魚(yú)生長(zhǎng)速率快、體型大如將腸乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M,使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中,乳糖的含量大大減低,而其他營(yíng)養(yǎng)成分不受影響目前,已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白、生長(zhǎng)激素和α-抗胰蛋白酶等重要藥品科學(xué)家正試圖利用基因工程方法對(duì)豬的器官進(jìn)行改造,抑制抗原決定基因的表達(dá),或設(shè)法除去抗原決定基因,再結(jié)合克隆技術(shù),培育出沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官2.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物類別應(yīng)用實(shí)例提高生改善畜生產(chǎn)藥物作323.基因工程藥物(1)來(lái)源：轉(zhuǎn)基因的_______。(2)成果：_________、抗體、_____、激素等。(3)作用：預(yù)防和治療_________、心血管疾病、_______、各種傳染病、糖尿病、類風(fēng)濕等疾病。4.基因治療(1)方法：把_________導(dǎo)入病人體內(nèi)，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能。(2)效果：治療_______的最有效的手段。(3)分類：_____基因治療和_____基因治療。工程菌細(xì)胞因子疫苗人類腫瘤遺傳病正?；蜻z傳病體內(nèi)體外3.基因工程藥物工程菌細(xì)胞因子疫苗人類腫瘤遺傳病正?；蜻z傳33基因治療的方法①體外基因治療：從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)，然后，在體外完成基因轉(zhuǎn)移，再篩選成功轉(zhuǎn)移的細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內(nèi)。直接向人體組織細(xì)胞中轉(zhuǎn)移基因的治病方法。②體內(nèi)基因治療：基因治療的方法①體外基因治療：從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞，進(jìn)行培34用于基因治療的基因種類①正?；颍簭慕】等梭w上分離得到的功能正常的基因，用以取代病變基因，或依靠其表達(dá)產(chǎn)物。②反義基因。即通過(guò)產(chǎn)生的mRNA分子，與病變基因產(chǎn)生的mRNA進(jìn)行互補(bǔ)，來(lái)阻斷非正常蛋白質(zhì)的合成。③自殺基因：即編碼可以殺死癌變細(xì)胞的蛋白酶基因。用于基因治療的基因種類35干擾素是動(dòng)物體內(nèi)合成的一種蛋白質(zhì)，可以用于治療病毒感染和癌癥，但體外保存相當(dāng)困難，如果將其分子上的一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸，就可在-70℃條件下保存半年，給廣大患者帶來(lái)福音。(1)蛋白質(zhì)的合成是受基因控制的，因此獲得能夠控制合成“可以保存的干擾素”的基因是生產(chǎn)的關(guān)鍵，依據(jù)蛋白質(zhì)工程原理，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程，讓動(dòng)物生產(chǎn)“可以保存的干擾素”：設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)推測(cè)合成預(yù)期的蛋白質(zhì)功能預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)應(yīng)有的氨基酸序列相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)1、4蛋白質(zhì)工程干擾素是動(dòng)物體內(nèi)合成的一種蛋白質(zhì)，可以用于治療病毒感染和癌癥36(2)基因工程和蛋白質(zhì)工程相比較，基因工程在原則上只能生產(chǎn)_______的蛋白質(zhì)，不一定符合_______需要。而蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)_______或_______

，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行_______

或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活需要。(3)蛋白質(zhì)工程實(shí)施的難度很大，原因是蛋白質(zhì)具有十分復(fù)雜的______________

結(jié)構(gòu)。自然界已存在人類生產(chǎn)和生活基因修飾基因合成改造空間(或高級(jí))(2)基因工程和蛋白質(zhì)工程相比較，基因工程在原則上只能生產(chǎn)_37(4)對(duì)天然蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，應(yīng)該直接對(duì)蛋白質(zhì)分子進(jìn)行操作，還是通過(guò)對(duì)基因的操作來(lái)實(shí)現(xiàn)？______________________。原因是：________________________________。應(yīng)該通過(guò)對(duì)基因的操作來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)天然蛋白質(zhì)的改造首先，任何一種天然蛋白質(zhì)都是由基因編碼的，改造了基因也就是對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行了改造，而且改造過(guò)的蛋白質(zhì)可以通過(guò)改造過(guò)的基因遺傳下去。如果對(duì)蛋白質(zhì)直接改造，即使改造成功，被改造過(guò)的蛋白質(zhì)分子也無(wú)法遺傳；其次，對(duì)基因進(jìn)行改造比對(duì)蛋白質(zhì)直接進(jìn)行改造要容易操作，難度要小得多。(4)對(duì)天然蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，應(yīng)該直接對(duì)蛋白質(zhì)分子進(jìn)行操作，還38蛋白質(zhì)工程與基因工程比較蛋白質(zhì)工程基因工程區(qū)別過(guò)程目的結(jié)果從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)目的基因的獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性,獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品可生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)工程與基因工程比較蛋白質(zhì)工程基39高溫變性低溫復(fù)性中溫延伸加熱到90-95℃，DNA雙鏈的氫鍵斷裂解旋為單鏈降到55-60℃，引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與單鏈DNA結(jié)合升溫到70-75℃，在DNA聚合酶的作用下，以四種脫氧核苷酸為原料，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。PCR反應(yīng)過(guò)程循環(huán)高溫變性低溫復(fù)性中溫延伸加熱到90-95℃，DNA雙鏈的氫鍵40PCR反應(yīng)具體過(guò)程PCR反應(yīng)具體過(guò)程41原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)(補(bǔ)充內(nèi)容）非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子終止子①不編碼蛋白質(zhì)。：編碼蛋白質(zhì),連續(xù)不間斷編碼區(qū)非編碼區(qū)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)②調(diào)控遺傳信息表達(dá),上游有啟動(dòng)子，下游有終止子原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)(補(bǔ)充內(nèi)容）非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上42真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)（補(bǔ)充內(nèi)容）編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)內(nèi)含子外顯子啟動(dòng)子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)的序列：有調(diào)控作用,上游有啟動(dòng)子，下游有終止子非編碼序列：包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)（補(bǔ)充內(nèi)容）編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA43①獲取目的基因（例如血清白蛋白基因）②構(gòu)建基因表達(dá)載體（在血清白蛋白基因前加特異表達(dá)的啟動(dòng)子）③顯微注射導(dǎo)入哺乳動(dòng)物受精卵中④形成胚胎⑤將胚胎送入母體動(dòng)物⑥發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（只有在產(chǎn)下的雌性個(gè)體中，轉(zhuǎn)入的基因才能表達(dá)）。思考:用基因工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器來(lái)生產(chǎn)人類血清白蛋白的操作過(guò)程是怎樣的？乳腺生物反應(yīng)器的優(yōu)點(diǎn)：①產(chǎn)量高；②質(zhì)量好；③成本低；④易提取。①獲取目的基因（例如血清白蛋白基因）思考:用基因工程技44如圖是某種動(dòng)物蛋白質(zhì)工程的示意圖，請(qǐng)分析回答：(1)目前蛋白質(zhì)工程中難度最大的是圖中編號(hào)______所示的過(guò)程，實(shí)現(xiàn)③過(guò)程的依據(jù)有___________________________。(2)若相關(guān)蛋白質(zhì)的核酸片段是從細(xì)胞質(zhì)獲取的，則④過(guò)程包括______________、_____________。如圖是某種動(dòng)物蛋白質(zhì)工程的示意圖，請(qǐng)分析回答：(1)目前蛋白45(3)⑤過(guò)程中對(duì)核苷酸序列有嚴(yán)格要求的工具酶是____，進(jìn)行⑤過(guò)程的目的是______________________________。(4)為獲得較多的受精卵用于研究，⑥過(guò)程的處理方案是___________。若⑥過(guò)程所得的卵母細(xì)胞是從卵巢中獲得的，則體外受精前的⑧過(guò)程表示______________________________。(3)⑤過(guò)程中對(duì)核苷酸序列有嚴(yán)格要求的工具酶是____，進(jìn)行46謝謝！謝謝！47專題基因工程一輪復(fù)習(xí)專題基因工程一輪復(fù)習(xí)專題基因工程一輪復(fù)習(xí)基因工程的概念理解1.供體：提供_________。2.操作環(huán)境：_____。3.操作水平：_____水平。4.原理：_________。5.受體：表達(dá)目的基因。6.本質(zhì)：性狀在_____體內(nèi)表達(dá)。7.優(yōu)點(diǎn)：克服________________障礙，定向改造生物_____。目的基因體外分子基因重組受體遠(yuǎn)緣雜交不親和性狀一、基因工程——指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組核和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，定向地改造生物的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。專題基因工程一輪復(fù)習(xí)專題基因工程一輪復(fù)習(xí)專題基因工程一輪復(fù)習(xí)48基因工程的概念理解1.供體：提供_________。2.操作環(huán)境：_____。3.操作水平：_____水平。4.原理：_________。5.受體：表達(dá)目的基因。6.本質(zhì)：性狀在_____體內(nèi)表達(dá)。7.優(yōu)點(diǎn)：克服________________障礙，定向改造生物_____。目的基因體外分子基因重組受體遠(yuǎn)緣雜交不親和性狀一、基因工程——指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組核和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，定向地改造生物的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?；蚬こ痰母拍罾斫饽康幕蝮w外分子基因重組受體遠(yuǎn)緣雜交不親和491.1DNA重組技術(shù)的基本工具限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”DNA連接酶——“分子縫合針”運(yùn)載體——“分子運(yùn)輸車(chē)”1.1DNA重組技術(shù)的基本工具限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手50分子手術(shù)刀——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)1.來(lái)源:原核生物2.作用:3.特點(diǎn):特異性（1）、識(shí)別特定核苷酸序列；（2）、切開(kāi)特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。4.結(jié)果：產(chǎn)生黏性末端或平末端一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。分子手術(shù)刀——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)1.來(lái)源:原核生物251AATTCG下列黏性末端屬于同種內(nèi)切酶切割而成的是

A、①②B、①③C、①④D、②③TCGAGCTTAAAGGTTCCAAGCTTCAGAATTCG③①②④ATCGAGCTTAAAATTC下列黏性末52“分子縫合針”————DNA連接酶

2、分類E.coliDNA連接酶T4DNA連接酶想一想:DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎?(1)、來(lái)源：大腸桿菌(2)、作用：“縫合”黏性末端(1)、來(lái)源：T4噬菌體(2)、作用：“縫合”黏性末端和平末端1、作用：恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵?！胺肿涌p合針”————DNA連接酶2、分類E.coliDN53DNA聚合酶DNA連接酶區(qū)別1區(qū)別2相同點(diǎn)尋根問(wèn)底DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎?為什么?只能將單個(gè)核苷酸連接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵形成磷酸二酯鍵在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵以一條DNA鏈為模板。將單個(gè)核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵連接成一條互補(bǔ)的DNA鏈不需要模板。將DNA雙鏈上的兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來(lái)。DNA聚合酶DNA連接酶相同點(diǎn)尋根問(wèn)底DNA連接酶與DNA聚54下圖表示DNA片段，有關(guān)該圖的敘述中，不正確的是A．②③④構(gòu)成了DNA的基本組成單位

B．②③④的特定排列順序所含的遺傳信息能指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成

C．解旋酶可使⑤處的化學(xué)鍵斷裂

D．DNA連接酶可連接①處斷裂的化學(xué)鍵B下圖表示DNA片段，有關(guān)該圖的敘述中，不正確的是A．②③④構(gòu)55基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌和酵母菌等生物中,是細(xì)菌擬核DNA之外能夠自主復(fù)制的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒等?；虻倪\(yùn)輸工具——運(yùn)載體質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌和酵母菌等56作為載體的必要條件：1、能自我復(fù)制或整合到受體染色體DNA上隨染色體DNA的復(fù)制而同步復(fù)制；2、有一或多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn)；3、必須帶有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇4、對(duì)受體細(xì)胞無(wú)毒害5、大小應(yīng)合適，便于提取和體外操作?；虻倪\(yùn)輸工具——運(yùn)載體作為載體的必要條件：1、能自我復(fù)制或整合到受體染色體DNA上57四個(gè)主要步驟:目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與鑒定1、2基因工程的基本操作程序四個(gè)主要步驟:目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)?8一、目的基因的獲取1、目的基因主要是指______________________編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因如：抗蟲(chóng)基因3、獲取目的基因的常用方法（1）從基因文庫(kù)中獲?。?）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（3）人工合成（通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成）2、目的基因的來(lái)源:①?gòu)淖匀唤缫延械奈锓N分離②人工方法合成一、目的基因的獲取1、目的基因主要是指___________591、基因文庫(kù)（一）從基因文庫(kù)中獲取目的基因?qū)⒑心撤N生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫(kù)2、基因文庫(kù)的種類:種類基因組文庫(kù)：含有一種生物的全部基因部分基因文庫(kù)：只包含了一種生物的部分基因，如：cDNA文庫(kù)1、基因文庫(kù)（一）從基因文庫(kù)中獲取目的基因?qū)⒑心撤N生物不601)反轉(zhuǎn)錄法：雜交雙鏈(單鏈RNA/單鏈DNA)單鏈DNA雙鏈DNA(cDNA)目的基因的mRNA某種酶DNA聚合酶反轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄法化學(xué)合成法3.怎樣構(gòu)建基因文庫(kù)?人工合成法（真核生物）1)反轉(zhuǎn)錄法：雜交雙鏈單鏈DNA雙鏈D61（2)根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列基因的脫氧核苷酸序列推測(cè)推測(cè)目的基因化學(xué)合成（2)根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：蛋白質(zhì)的氨基酸序列62（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因1、定義：PCR——多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一項(xiàng)生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。通過(guò)此技術(shù)，可獲取大量的目的基因。DNA復(fù)制2、原理：3、條件：4、原料：5、過(guò)程：6、方式：一段已知目的基因的核苷酸序列模板DNA；DNA引物；四種脫氧核苷酸；熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）以_____方式擴(kuò)增，即____（n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）指數(shù)2n7、儀器：PCR擴(kuò)增儀（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因1、定義：PCR——多聚酶63PCR技術(shù)擴(kuò)增與DNA復(fù)制的比較PCR技術(shù)DNA復(fù)制相同點(diǎn)原理原料條件不同點(diǎn)解旋方式場(chǎng)所酶結(jié)果堿基互補(bǔ)配對(duì)四種脫氧核苷酸模板、能量、酶高溫下變性解旋解旋酶催化體外復(fù)制(PCR擴(kuò)增儀內(nèi))主要在細(xì)胞核內(nèi)熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（Taq酶）大量的DNA片段形成整個(gè)DNA分子解旋酶、普通的DNA聚合酶等PCR技術(shù)擴(kuò)增與DNA復(fù)制的比較PCR技術(shù)DNA復(fù)制相同點(diǎn)原64二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建——核心（1）用一定的_________切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出____________。（2）用___________切斷目的基因，使其產(chǎn)生_________________。（3）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的______處，再加入適量___________，形成了一個(gè)重組DNA分子（重組質(zhì)粒）限制酶黏性末端同一種限制酶相同的黏性末端切口DNA連接酶1.過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建——核心（1）用一定的________653.基因表達(dá)載體的組成：a、目的基因b、啟動(dòng)子c、終止子d、標(biāo)記基因位于基因的首端,是mRNA識(shí)別并結(jié)合位點(diǎn)。位于基因的末端,終止轉(zhuǎn)錄。檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。2、基因表達(dá)載體的作用a、使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代b、同時(shí)使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用3.基因表達(dá)載體的組成：a、目的基因b、啟動(dòng)子c、終止子d、66三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因進(jìn)入_____

____內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持_

___和___

__的過(guò)程。轉(zhuǎn)化:受體細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)1、導(dǎo)入植物細(xì)胞:2、導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞:3、導(dǎo)入微生物細(xì)胞:常用方法：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法顯微注射法感受態(tài)細(xì)胞法（或Ca2+轉(zhuǎn)化法）三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因進(jìn)入________671、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法特點(diǎn):能感染雙子葉植物和祼子植物,對(duì)單子葉植物無(wú)感染能力Ti質(zhì)粒的T—DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到其染色體上轉(zhuǎn)化過(guò)程:Ti質(zhì)粒目的基因構(gòu)建表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞插入植物細(xì)胞染色DNA表達(dá)新性狀轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌1、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法特點(diǎn):能感染雙子68（2）基因槍法基因槍法又稱微彈轟擊法，是利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力，將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體DNA打入受體細(xì)胞中，使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。適用于單子葉植物（2）基因槍法基因槍法又稱微彈轟擊法，是利用壓縮氣體產(chǎn)69（3）花粉通道法花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管還未愈合前，剪去柱頭，然后，滴加DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞。（3）花粉通道法花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成702、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞方法:顯微注射技術(shù)操作程序:提純含目的基因表達(dá)載體取受精卵顯微注射移植到子宮受精卵發(fā)育新性狀動(dòng)物常用受體細(xì)胞：受精卵2、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞方法:顯微注射技術(shù)操作程序:提純含713、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用法：Ca2+處理常用受體細(xì)胞：大腸桿菌微生物作受體細(xì)胞原因：繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)少過(guò)程：Ca2+處理大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA（用Ca2+處理，增加細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性）處于能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)的細(xì)胞3、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用法：Ca2+處理常用受體細(xì)胞72(1)________________→目的基因的有無(wú)(2)分子雜交技術(shù)→_________________(3)_______________→目的基因是否翻譯(4)生物性狀的表達(dá)與否→目的基因是否表達(dá)(個(gè)體水平)DNA分子雜交技術(shù)目的基因是否轉(zhuǎn)錄抗原—抗體雜交分子水平四、目的基因的檢測(cè)與鑒定(1)________________→目的基因的有無(wú)DNA73檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因1、導(dǎo)入檢測(cè)目的：方法：DNA分子雜交技術(shù)過(guò)程：①.首先取出轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA②.將含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作標(biāo)記,以此做探針。③使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交,若顯示出雜交帶,表明目的基因已插入染色體DNA中檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因1、導(dǎo)入檢測(cè)74從轉(zhuǎn)基因生物中提取的基因組DNA探針：雜交的對(duì)象：用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段15N15N14N探針轉(zhuǎn)基因生物的DNA變性變性14N從轉(zhuǎn)基因生物中提取的基因組DNA探針：雜交的對(duì)象：用放射性同752、轉(zhuǎn)錄檢測(cè)目的：檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA方法：分子雜交技術(shù)用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段探針：雜交的對(duì)象：從轉(zhuǎn)基因生物中提取的mRNA.2、轉(zhuǎn)錄檢測(cè)目的：檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA方法：分子763、翻譯檢測(cè)目的：檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)方法:抗原抗體雜交技術(shù)從轉(zhuǎn)基因生物中提取的蛋白質(zhì)抗原：抗體：將目的基因編碼的蛋白質(zhì)注射進(jìn)動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行免疫產(chǎn)生的相應(yīng)抗體4、個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等3、翻譯檢測(cè)目的：檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)方法:抗原抗體771.轉(zhuǎn)基因植物類別應(yīng)用實(shí)例抗蟲(chóng)抗病抗逆改良?xì)⑾x(chóng)的基因主要有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因等抗病毒基因:病毒外殼蛋白基因和病毒的復(fù)制酶基因;抗真菌基因:幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因抗鹽堿和抗干旱的調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓基因、抗凍蛋白基因、抗除草劑基因①轉(zhuǎn)基因玉米中賴氨酸的含量比對(duì)照提高30%②轉(zhuǎn)基因延熟番茄儲(chǔ)存時(shí)間可延長(zhǎng)1～2個(gè)月③轉(zhuǎn)基因矮牽牛呈現(xiàn)出自然界沒(méi)有的顏色變異1、3基因工程的應(yīng)用1.轉(zhuǎn)基因植物類別應(yīng)用實(shí)例抗蟲(chóng)抗病抗逆改良?xì)⑾x(chóng)的782.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物類別應(yīng)用實(shí)例提高生長(zhǎng)速度改善畜產(chǎn)品品質(zhì)生產(chǎn)藥物作器官移植的供體如轉(zhuǎn)外源生長(zhǎng)激素基因綿羊和轉(zhuǎn)外源生長(zhǎng)激素基因鯉魚(yú)生長(zhǎng)速率快、體型大如將腸乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M,使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中,乳糖的含量大大減低,而其他營(yíng)養(yǎng)成分不受影響目前,已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白、生長(zhǎng)激素和α-抗胰蛋白酶等重要藥品科學(xué)家正試圖利用基因工程方法對(duì)豬的器官進(jìn)行改造,抑制抗原決定基因的表達(dá),或設(shè)法除去抗原決定基因,再結(jié)合克隆技術(shù),培育出沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官2.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物類別應(yīng)用實(shí)例提高生改善畜生產(chǎn)藥物作793.基因工程藥物(1)來(lái)源：轉(zhuǎn)基因的_______。(2)成果：_________、抗體、_____、激素等。(3)作用：預(yù)防和治療_________、心血管疾病、_______、各種傳染病、糖尿病、類風(fēng)濕等疾病。4.基因治療(1)方法：把_________導(dǎo)入病人體內(nèi)，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能。(2)效果：治療_______的最有效的手段。(3)分類：_____基因治療和_____基因治療。工程菌細(xì)胞因子疫苗人類腫瘤遺傳病正?；蜻z傳病體內(nèi)體外3.基因工程藥物工程菌細(xì)胞因子疫苗人類腫瘤遺傳病正常基因遺傳80基因治療的方法①體外基因治療：從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)，然后，在體外完成基因轉(zhuǎn)移，再篩選成功轉(zhuǎn)移的細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內(nèi)。直接向人體組織細(xì)胞中轉(zhuǎn)移基因的治病方法。②體內(nèi)基因治療：基因治療的方法①體外基因治療：從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞，進(jìn)行培81用于基因治療的基因種類①正?；颍簭慕】等梭w上分離得到的功能正常的基因，用以取代病變基因，或依靠其表達(dá)產(chǎn)物。②反義基因。即通過(guò)產(chǎn)生的mRNA分子，與病變基因產(chǎn)生的mRNA進(jìn)行互補(bǔ)，來(lái)阻斷非正常蛋白質(zhì)的合成。③自殺基因：即編碼可以殺死癌變細(xì)胞的蛋白酶基因。用于基因治療的基因種類82干擾素是動(dòng)物體內(nèi)合成的一種蛋白質(zhì)，可以用于治療病毒感染和癌癥，但體外保存相當(dāng)困難，如果將其分子上的一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸，就可在-70℃條件下保存半年，給廣大患者帶來(lái)福音。(1)蛋白質(zhì)的合成是受基因控制的，因此獲得能夠控制合成“可以保存的干擾素”的基因是生產(chǎn)的關(guān)鍵，依據(jù)蛋白質(zhì)工程原理，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程，讓動(dòng)物生產(chǎn)“可以保存的干擾素”：設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)推測(cè)合成預(yù)期的蛋白質(zhì)功能預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)應(yīng)有的氨基酸序列相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)1、4蛋白質(zhì)工程干擾素是動(dòng)物體內(nèi)合成的一種蛋白質(zhì)，可以用于治療病毒感染和癌癥83(2)基因工程和蛋白質(zhì)工程相比較，基因工程在原則上只能生產(chǎn)_______的蛋白質(zhì)，不一定符合_______需要。而蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)_______或_______

，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行_______

或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活需要。(3)蛋白質(zhì)工程實(shí)施的難度很大，原因是蛋白質(zhì)具有十分復(fù)雜的______________

結(jié)構(gòu)。自然界已存在人類生產(chǎn)和生活基因修飾基因合成改造空間(或高級(jí))(2)基因工程和蛋白質(zhì)