土壤酸性轉(zhuǎn)化酶（S-AI）活性檢測(cè)試劑盒說明書-可見分光光度法UPLC-MS-4020

電話：400-998-2324郵箱：service_uplc_ms@163.com網(wǎng)址：本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用！請(qǐng)勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測(cè)等用途！-上海液質(zhì)檢測(cè)技術(shù)有限公司第第頁(yè)土壤酸性轉(zhuǎn)化酶（S-AI）活性檢測(cè)試劑盒說明書注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。貨號(hào)：UPLC-MS-4020規(guī)格：50T/24S

可見分光光度法產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系工作人員。試劑名稱規(guī)格保存條件試劑一液體100mL×1瓶2-8℃保存試劑二粉劑×2瓶2-8℃保存試劑三液體30mL×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×1支2-8℃保存溶液的配制：1、試劑二：臨用前取1瓶加入15mL試劑一充分溶解備用，用不完的試劑2-8℃保存2周；2、標(biāo)準(zhǔn)品：10mg無水葡萄糖。臨用前加入1mL試劑一充分溶解，制備10mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液待用，2-8℃保存兩周。產(chǎn)品說明：S-AIpH4.5~5.0（酸性S-AI3,5-540nm有特540nmS-AI活性成正比。3,5-Dinitrosalicylicacidsoil

Reducingsugar 3-amino-5-nitrosalicylicacid(540nm)2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。需自備的儀器和用品：可見分光光度計(jì)、恒溫培養(yǎng)箱/水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水、30-50目篩、甲苯（不允許快遞）。操作步驟：一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可參考文獻(xiàn)）37℃30~50目篩。二、測(cè)定步驟1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm，蒸餾水調(diào)零。210mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液用試劑一稀釋至0.080.06mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液備用。3、標(biāo)準(zhǔn)液稀釋表序號(hào)（mg/mL）標(biāo)準(zhǔn)液體積（μL）試劑一體積（μL）稀釋后濃度（mg/mL）11010019000.520.54006000.230.53007000.1540.52008000.150.51608400.0860.51208800.06試劑名稱測(cè)定管對(duì)照管標(biāo)準(zhǔn)管空白管風(fēng)干土樣（試劑名稱測(cè)定管對(duì)照管標(biāo)準(zhǔn)管空白管風(fēng)干土樣（g）0.10.1--試劑一（μL）-800-800試劑二（μL）800標(biāo)準(zhǔn)液（μL）--800-甲苯（μL）20202020混勻，于37℃水浴/恒溫培養(yǎng)箱準(zhǔn)確反應(yīng)1h1h后，煮沸10min左右（蓋緊，以防止水分散失），流水或冰浴冷卻后充分混勻（以保證濃度不變），10000rpm，常溫離心10min，取上清。上清（μL）700700700700試劑三（μL）30030030030010min左右（蓋緊，以防止水分流失），流水冷卻后充分混勻，540nm處蒸餾水調(diào)零，記錄各管AA測(cè)定管、A對(duì)照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A1-2次。三、S-AI活性計(jì)算1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（x，mg/mL）和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)（y，ΔA標(biāo)準(zhǔn)），建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA測(cè)定（y，ΔA測(cè)定）帶入公式計(jì)算樣本濃度（x，mg/mL）。2、S-AI活性計(jì)算單位定義：37℃每g土壤每天產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個(gè)酶活性單位。S-AI（U/g土樣）=x×V÷W÷T=19.2×x÷WV：加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積，0.8mL；W：樣本質(zhì)量，g；