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實驗十二大腸桿菌和沙門氏菌的血清學(xué)檢驗實驗?zāi)康?.了解細胞凝集實驗的原理;2.學(xué)習(xí)并掌握大腸菌群血清學(xué)檢驗的方法;實驗原理
抗體和抗血清:抗體(antibody)指機體的免疫系統(tǒng)在抗原刺激下,由B淋巴細胞或記憶細胞增殖分化成的漿細胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。抗血清(antiserum)是一種含有多克隆抗體的血清。凝集反應(yīng):
顆粒性抗原(如細菌、紅細胞或表面帶有抗原的乳膠顆粒)與相應(yīng)抗體結(jié)合,在一定條件下可形成凝集團塊的現(xiàn)象。實驗器材
1.培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨斜面固體培養(yǎng)基(瓊脂為1.5%);2.
Eppendorf離心管,Tips,微量加樣槍;3.無菌生理鹽水,250ml三角瓶(滅菌處理),滅菌培養(yǎng)皿。4.兔抗大腸桿菌、沙門氏菌血清實驗步驟一、菌懸液的制備將5mL無菌生理鹽水分別加入大腸桿菌和沙門氏菌的斜面試管中。用接種環(huán)輕輕刮取并震蕩數(shù)次,制成菌懸液。二、大腸桿菌、沙門氏菌抗原性檢測事先將干凈載玻片做上標(biāo)記,取10倍稀釋的大腸桿菌抗血清和沙門氏菌抗血清,各50uL于載玻片上。然后,分別加入大腸桿菌和沙門氏菌的菌懸液各50uL。放置于空培養(yǎng)皿中,于37度保溫15-20分鐘大沙大腸桿菌菌懸液沙門氏菌菌懸液大沙待測1菌懸液待測2菌菌懸液沙門氏菌菌懸液大+—+生理鹽水大空白對照溫育15-20min后,檢查是否有顆粒狀沉淀,并對照陽性、陰性
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