家畜組織胚胎學1緒論課件

家畜組織胚胎學家畜組織胚胎學第一章緒論第一章緒論第一節(jié)家畜組織胚胎學的研究內(nèi)容和意義組織胚胎學包括組織學和胚胎學兩部分。組織學（histology）是研究動物體微細結構及功能的科學。動物體是由各種器官系統(tǒng)構成的，每個器官都包括幾種不同的組織，而每一種組織又是由細胞和細胞間質(zhì)構成的。因此，組織學的研究內(nèi)容包括細胞、基本組織和器官組織三個部分。第一節(jié)家畜組織胚胎學的研究內(nèi)容和意義組織胚胎學包括組織學和胚胎學（embryology）是研究動物個體胚胎發(fā)育的科學。胚胎學的研究內(nèi)容包括配子發(fā)生、受精、卵裂、原腸胚和神經(jīng)胚形成、胎膜和胎盤以及器官發(fā)生等。胚胎學（embryology）是研究動物個體胚胎發(fā)育的科學。組織胚胎學屬于動物科學和醫(yī)學專業(yè)的專業(yè)基礎課。只有掌握了動物的正常形態(tài)結構和胚胎發(fā)育規(guī)律，才能進一步了解動物的生理活動規(guī)律，并利用這些規(guī)律去合理地飼養(yǎng)、繁殖和改良動物以及防治各種疾病。因此，學好組織學與胚胎學是學好生理學、繁殖學、飼養(yǎng)學、動物生產(chǎn)學、病理學、免疫學和臨床醫(yī)學等課程所必不可少的基礎。組織胚胎學屬于動物科學和醫(yī)學專業(yè)的專業(yè)基礎課。只有掌握了動物第二節(jié)組織胚胎學研究方法及基本原理所有的組織胚胎學研究方法均需將有機體的器官和組織經(jīng)過特殊處理，再應用各種顯微鏡進行觀察研究后得出科學的結果。第二節(jié)組織胚胎學研究方法及基本原理1.組織學制片技術一般是先把組織制成薄片，最常用的是石蠟切片，其制備方法是：①取材與固定：把新鮮組織放到甲醛溶液等固定液中，使蛋白質(zhì)等成分迅速凝固，盡可能保持其活體時的結構狀態(tài)。②脫水與透明：為使石蠟浸入組織內(nèi)，把固定好的材料用乙醇逐級（70%-100%）脫水。用二甲苯或乙醚等石蠟溶劑使組織浸透，便于浸蠟。一、固定組織研究法1.組織學制片技術一、固定組織研究法③浸蠟與包埋：把組織放入融化（58-60℃）的石蠟中，進行浸透和包埋成蠟塊，目的是使石蠟進入細胞間隙和細胞內(nèi)，以增加組織的硬度，便于切片。④切片與貼片：將蠟塊用切片機切成5-10μm厚的組織切片，并鋪展粘到載玻片上。③浸蠟與包埋：把組織放入融化（58-60℃）的石蠟中，進行浸⑤染色與封固：把粘好的切片脫蠟后，用適當?shù)娜玖线M行染色。染色后，再經(jīng)脫水和透明，最后把組織用樹膠和蓋片封片。除了石蠟切片外，血液可以制成血涂片，疏松結締組織和腸系膜等薄層組織可制成鋪片，骨組織可制成磨片,然后固定和染色。⑤染色與封固：把粘好的切片脫蠟后，用適當?shù)娜玖线M行染色。染色

最常用的染色方法是蘇木精（hematoxylin）和伊紅（eosin）染色的染色方法，簡稱H.E.染色。蘇木精是堿性染液，可以使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)和細胞質(zhì)中的核糖體等成分染成藍紫色，故這些成分被說成是嗜堿性著色的。伊紅是酸性染料，可使多數(shù)細胞的細胞質(zhì)染成粉紅色，這些細胞質(zhì)被稱為嗜酸性的。對堿性和酸性染料親和力都不強的結構，稱為嗜中性的。染色方法最常用的染色方法是蘇木精（hematoxylin）和伊紅染色方法HE染色蘇木精伊紅嗜堿性結構：細胞核粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)游離核糖體等嗜酸性結構：細胞質(zhì)基質(zhì)溶酶體、線粒體等細胞器膠原纖維等染色方法HE染色蘇木精伊紅嗜堿性結構：嗜酸性結構：染色方法HE染色法以外的所有染色法，通常是為了顯示某些用HE染色法顯示不出的細胞和結構。如：蘇丹法——顯示脂肪鍍銀法——顯示神經(jīng)細胞、嗜銀顆粒鐵蘇木素法——顯示心肌閏盤馬氏三色法——顯示胰島細胞甲苯胺藍法——顯示糖胺多糖

特殊染色染色方法HE染色法以外的所有染色法，通常是為了顯示某些用HE鍍銀染色，顯示大腦皮質(zhì)神經(jīng)元鍍銀染色，顯示大腦皮質(zhì)神經(jīng)元氯化金染色，顯示運動終板氯化金染色，顯示運動終板Hemalum染色，顯示心肌纖維及閏盤Hemalum染色，顯示心肌纖維及閏盤2、組織化學技術組織化學(histochemistry)：

通過化學或物理反應原理顯示組織或細胞內(nèi)化學成分，通常是使其形成有色終末產(chǎn)物，以便在鏡下觀察，可進行定位和定量。2、組織化學技術1．一般組織化學術是利用化學試劑與組織內(nèi)的某些物質(zhì)進行化學反應，在局部形成能夠在顯微鏡下觀察到的沉淀物。例如，過碘酸雪夫氏反應（periodicacidchiff’sreaction,PAS反應）的基本原理是通過過碘酸的氧化作用，使多糖生成醛基，后者與雪夫氏試劑中的無色堿性品紅反應，在反應部位形成紫紅色沉淀，從而證明細胞內(nèi)含有糖原或粘多糖成分。

HIO4Shiff試劑多糖醛紫紅色沉淀物（氧化）（堿性品紅）組織化學術組織化學術PAS反應，顯示小腸上皮杯狀細胞的粘原顆粒組織化學術PAS反應，顯示小腸上皮杯狀細胞的粘原顆粒組織化學術⒉免疫組織化學術（immunocytochemistry)

利用組織化學技術的原理，再結合免疫學方法，則為免疫細胞化學術。主要的檢測對象為肽和蛋白質(zhì)。組織化學術免疫組織化學，顯示胰島B細胞⒉免疫組織化學術（immunocytochemistry)組織化學術⒊原位雜交術（insituhybridization)

為核酸（DNA和RNA）組織化學術。用帶有標記物的已知堿基順序的核酸探針，與細胞內(nèi)待測的核酸結合（雜交），從而在原位顯示該核酸。組織化學術原位雜交，顯示臍靜脈內(nèi)皮細胞的心房鈉尿肽陽性組織化學術原位雜交，顯示臍靜脈內(nèi)皮細胞的心房鈉尿肽陽性組織化學術活體組織研究法二、其它研究方法自學細胞培養(yǎng)術細胞融合組織工程術細胞電泳新的研究方法

放射自顯影術圖像分析術流式細胞術二、其它研究方法自學細胞培養(yǎng)術新的研究方法放射自顯影術光學顯微鏡（lightmicroscopeLM）電子顯微鏡（electronmicroscopeEM）三、顯微鏡光學顯微鏡（lightmicroscopeLM）三、顯微一．光學顯微鏡光鏡普通光學顯微鏡（lightmicroscope）的分辨率為0.2μm，可放大1000倍左右，能觀察組織和細胞的一般結構。分辨率是指能夠分辨兩顆粒之間的最小距離。一．光學顯微鏡光鏡普通光學顯微鏡（lightmicrosc顯微鏡下常用的長度單位在光鏡下所見的組織和細胞的結構叫做一般微細結構，而在電鏡下所見的結構則稱之為超微結構。在光鏡和電鏡下進行觀察時，常用的計量單位有：1μm（微米，micrometer）=1/1000mm（毫米，millimeter）1nm（納米，nanometer）=1/1000μm1pm（皮米）＝1/1000nm光鏡顯微鏡下常用的長度單位在光鏡下所見的組織和細胞的結構叫做一般光學顯微鏡的分類1、生物顯微鏡2、熒光顯微鏡3、相差顯微鏡4、暗視野顯微鏡5、偏光顯微鏡6、激光共聚焦顯微鏡光鏡光學顯微鏡的分類1、生物顯微鏡光鏡光鏡光鏡光鏡光鏡大鼠附睪上皮細胞微絲（肌動蛋白）及細胞核光鏡大鼠附睪上皮細胞微絲（肌動蛋白）及細胞核光鏡二電子顯微鏡技術常用的電鏡有透射電鏡和掃描電鏡兩種。與光鏡比較，電鏡的基本原理是以電子束代替光線，以電磁透鏡代替光學透鏡。電鏡二電子顯微鏡技術電鏡透射電鏡（TEM）的分辨率已達到0.2nm左右，可放大幾萬到幾十萬倍。其工作原理是，電子束透過樣品后，投射到熒光屏上，形成物像。由于電子易散射和被物體吸收，所以必須制備超薄切片（90-100nm）。透射電鏡（TEM）的分辨率已達到0.2nm左右，可放大幾萬到電鏡樣品的制備過程：取小材料塊（1mm3以內(nèi)）用戊二醛和鋨酸雙重固定→環(huán)氧樹脂包埋→超薄切片機切片→鉛鈾重金屬電子染色→電鏡觀察。被金屬鹽所染的部位，因透過的電子束少而在熒光屏上顯得暗，稱為電子密度高，反之則稱為電子密度低。電鏡樣品的制備過程：透射電鏡電鏡透射電鏡電鏡電鏡電鏡掃描電鏡（SEM） 是用極細的電子束在樣品表面進行掃描并用特定的探測器收集所發(fā)生的二次電子，形成電信號傳送到顯像管，在熒光屏上顯現(xiàn)出物體表面的立體圖象。掃描電鏡的樣品制備方法： 將較大的組織塊用戊二醛和鋨酸雙重固定，經(jīng)脫水和干燥后，再于樣品表面上噴涂一薄層金，以增加二次電子數(shù)。電鏡掃描電鏡（SEM）電鏡電鏡電鏡電鏡電鏡電鏡技術細胞側面的緊密連接電鏡技術細胞側面的緊密連接電鏡技術

脾紅髓電鏡技術脾紅髓第三節(jié)家畜組織胚胎學的研究方法學習組胚的思維方式1.理論聯(lián)系實際2.形態(tài)聯(lián)系機能3.平面聯(lián)系立體4.靜態(tài)聯(lián)系動態(tài)5.共性聯(lián)系個性第三節(jié)家畜組織胚胎學的研究方法學習組胚的思維方式形態(tài)聯(lián)系機能舒張狀態(tài)收縮狀態(tài)形態(tài)聯(lián)系機能舒張狀態(tài)收縮狀態(tài)平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體平面聯(lián)系立體靜態(tài)與動態(tài)靜態(tài)與動態(tài)共性聯(lián)系個性共性聯(lián)系個性課后習題1.解釋組織學的概念和研究內(nèi)容2.什么是H.E.染色？3.什么是組織化學技術？4.簡述石蠟切片技術課后習題1.解釋組織學的概念和研究內(nèi)容家畜組織胚胎學家畜組織胚胎學第一章緒論第一章緒論第一節(jié)家畜組織胚胎學的研究內(nèi)容和意義組織胚胎學包括組織學和胚胎學兩部分。組織學（histology）是研究動物體微細結構及功能的科學。動物體是由各種器官系統(tǒng)構成的，每個器官都包括幾種不同的組織，而每一種組織又是由細胞和細胞間質(zhì)構成的。因此，組織學的研究內(nèi)容包括細胞、基本組織和器官組織三個部分。第一節(jié)家畜組織胚胎學的研究內(nèi)容和意義組織胚胎學包括組織學和胚胎學（embryology）是研究動物個體胚胎發(fā)育的科學。胚胎學的研究內(nèi)容包括配子發(fā)生、受精、卵裂、原腸胚和神經(jīng)胚形成、胎膜和胎盤以及器官發(fā)生等。胚胎學（embryology）是研究動物個體胚胎發(fā)育的科學。組織胚胎學屬于動物科學和醫(yī)學專業(yè)的專業(yè)基礎課。只有掌握了動物的正常形態(tài)結構和胚胎發(fā)育規(guī)律，才能進一步了解動物的生理活動規(guī)律，并利用這些規(guī)律去合理地飼養(yǎng)、繁殖和改良動物以及防治各種疾病。因此，學好組織學與胚胎學是學好生理學、繁殖學、飼養(yǎng)學、動物生產(chǎn)學、病理學、免疫學和臨床醫(yī)學等課程所必不可少的基礎。組織胚胎學屬于動物科學和醫(yī)學專業(yè)的專業(yè)基礎課。只有掌握了動物第二節(jié)組織胚胎學研究方法及基本原理所有的組織胚胎學研究方法均需將有機體的器官和組織經(jīng)過特殊處理，再應用各種顯微鏡進行觀察研究后得出科學的結果。第二節(jié)組織胚胎學研究方法及基本原理1.組織學制片技術一般是先把組織制成薄片，最常用的是石蠟切片，其制備方法是：①取材與固定：把新鮮組織放到甲醛溶液等固定液中，使蛋白質(zhì)等成分迅速凝固，盡可能保持其活體時的結構狀態(tài)。②脫水與透明：為使石蠟浸入組織內(nèi)，把固定好的材料用乙醇逐級（70%-100%）脫水。用二甲苯或乙醚等石蠟溶劑使組織浸透，便于浸蠟。一、固定組織研究法1.組織學制片技術一、固定組織研究法③浸蠟與包埋：把組織放入融化（58-60℃）的石蠟中，進行浸透和包埋成蠟塊，目的是使石蠟進入細胞間隙和細胞內(nèi)，以增加組織的硬度，便于切片。④切片與貼片：將蠟塊用切片機切成5-10μm厚的組織切片，并鋪展粘到載玻片上。③浸蠟與包埋：把組織放入融化（58-60℃）的石蠟中，進行浸⑤染色與封固：把粘好的切片脫蠟后，用適當?shù)娜玖线M行染色。染色后，再經(jīng)脫水和透明，最后把組織用樹膠和蓋片封片。除了石蠟切片外，血液可以制成血涂片，疏松結締組織和腸系膜等薄層組織可制成鋪片，骨組織可制成磨片,然后固定和染色。⑤染色與封固：把粘好的切片脫蠟后，用適當?shù)娜玖线M行染色。染色

最常用的染色方法是蘇木精（hematoxylin）和伊紅（eosin）染色的染色方法，簡稱H.E.染色。蘇木精是堿性染液，可以使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)和細胞質(zhì)中的核糖體等成分染成藍紫色，故這些成分被說成是嗜堿性著色的。伊紅是酸性染料，可使多數(shù)細胞的細胞質(zhì)染成粉紅色，這些細胞質(zhì)被稱為嗜酸性的。對堿性和酸性染料親和力都不強的結構，稱為嗜中性的。染色方法最常用的染色方法是蘇木精（hematoxylin）和伊紅染色方法HE染色蘇木精伊紅嗜堿性結構：細胞核粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)游離核糖體等嗜酸性結構：細胞質(zhì)基質(zhì)溶酶體、線粒體等細胞器膠原纖維等染色方法HE染色蘇木精伊紅嗜堿性結構：嗜酸性結構：染色方法HE染色法以外的所有染色法，通常是為了顯示某些用HE染色法顯示不出的細胞和結構。如：蘇丹法——顯示脂肪鍍銀法——顯示神經(jīng)細胞、嗜銀顆粒鐵蘇木素法——顯示心肌閏盤馬氏三色法——顯示胰島細胞甲苯胺藍法——顯示糖胺多糖

特殊染色染色方法HE染色法以外的所有染色法，通常是為了顯示某些用HE鍍銀染色，顯示大腦皮質(zhì)神經(jīng)元鍍銀染色，顯示大腦皮質(zhì)神經(jīng)元氯化金染色，顯示運動終板氯化金染色，顯示運動終板Hemalum染色，顯示心肌纖維及閏盤Hemalum染色，顯示心肌纖維及閏盤2、組織化學技術組織化學(histochemistry)：

通過化學或物理反應原理顯示組織或細胞內(nèi)化學成分，通常是使其形成有色終末產(chǎn)物，以便在鏡下觀察，可進行定位和定量。2、組織化學技術1．一般組織化學術是利用化學試劑與組織內(nèi)的某些物質(zhì)進行化學反應，在局部形成能夠在顯微鏡下觀察到的沉淀物。例如，過碘酸雪夫氏反應（periodicacidchiff’sreaction,PAS反應）的基本原理是通過過碘酸的氧化作用，使多糖生成醛基，后者與雪夫氏試劑中的無色堿性品紅反應，在反應部位形成紫紅色沉淀，從而證明細胞內(nèi)含有糖原或粘多糖成分。

HIO4Shiff試劑多糖醛紫紅色沉淀物（氧化）（堿性品紅）組織化學術組織化學術PAS反應，顯示小腸上皮杯狀細胞的粘原顆粒組織化學術PAS反應，顯示小腸上皮杯狀細胞的粘原顆粒組織化學術⒉免疫組織化學術（immunocytochemistry)

利用組織化學技術的原理，再結合免疫學方法，則為免疫細胞化學術。主要的檢測對象為肽和蛋白質(zhì)。組織化學術免疫組織化學，顯示胰島B細胞⒉免疫組織化學術（immunocytochemistry)組織化學術⒊原位雜交術（insituhybridization)

為核酸（DNA和RNA）組織化學術。用帶有標記物的已知堿基順序的核酸探針，與細胞內(nèi)待測的核酸結合（雜交），從而在原位顯示該核酸。組織化學術原位雜交，顯示臍靜脈內(nèi)皮細胞的心房鈉尿肽陽性組織化學術原位雜交，顯示臍靜脈內(nèi)皮細胞的心房鈉尿肽陽性組織化學術活體組織研究法二、其它研究方法自學細胞培養(yǎng)術細胞融合組織工程術細胞電泳新的研究方法

放射自顯影術圖像分析術流式細胞術二、其它研究方法自學細胞培養(yǎng)術新的研究方法放射自顯影術光學顯微鏡（lightmicroscopeLM）電子顯微鏡（electronmicroscopeEM）三、顯微鏡光學顯微鏡（lightmicroscopeLM）三、顯微一．光學顯微鏡光鏡普通光學顯微鏡（lightmicroscope）的分辨率為0.2μm，可放大1000倍左右，能觀察組織和細胞的一般結構。分辨率是指能夠分辨兩顆粒之間的最小距離。一．光學顯微鏡光鏡普通光學顯微鏡（lightmicrosc顯微鏡下常用的長度單位在光鏡下所見的組織和細胞的結構叫做一般微細結構，而在電鏡下所見的結構則稱之為超微結構。在光鏡和電鏡下進行觀察時，常用的計量單位有：1μm（微米，micrometer）=1/1000mm（毫米，millimeter）1nm（納米，nanometer）=1/1000μm1pm（皮米）＝1/1000nm光鏡顯微鏡下常用的長度單位在光鏡下所見的組織和細胞的結構叫做一般光學顯微鏡的分類1、生物顯微鏡2、熒光顯微鏡3、相差顯微鏡4、暗視野顯微鏡5、偏光顯微鏡6、激光共聚焦顯微鏡光鏡光學顯微鏡的分類1、生物顯微鏡光鏡光鏡光鏡光鏡光鏡大鼠附睪上皮細胞微絲（肌動蛋白）及細胞核光鏡大鼠附睪上皮細胞微絲（肌動蛋白）及細胞核光鏡二電子顯微鏡技術常用的電鏡有透射電鏡和掃描電鏡兩種。與光鏡比較，電鏡的基本原理是以電子束代替光線，以電磁透鏡代替光學透鏡。電鏡二電子顯微鏡技術電鏡透射電鏡（TEM）的分辨率已達到0.2