手性分子的拆分技術

手性分子的拆分技術郝婷玉級材料工程摘要：對外消旋體實施拆分是獲得手性物質(zhì)的重要途徑。本及綜述了外消旋體的拆分方法，主要有直接結(jié)晶拆分法、化學拆分法、動力學拆分法、色譜拆分法（含毛細管電泳法）和手性膜拆分法等五大類。其中，包括目前作為手性拆分主要方法的色譜技術在內(nèi)的前4類方法，由于批處理能力小、工業(yè)放大成本高，不適合大規(guī)模生產(chǎn)；相反，膜分離技術具有能耗低、易于連續(xù)操作等優(yōu)點，被普遍認為是進行大規(guī)模手性拆分非常有潛力的方法之一，具有良好的應用前景。關鍵詞：手性分子；拆分；對映體；外消旋化合物手性是自然界存在的一種普遍現(xiàn)象,在藥物化學領域尤為突出,已知藥物中有30%—40%是手性的。手性是生物體系的一個基本特征,很多內(nèi)源性大分子物質(zhì),如酶、蛋白、核酸、糖，以及各種載體、受體等都具有手性特征。此外，手性還在醫(yī)藥、食品添加劑、殺蟲劑、昆蟲性信息素、香料和材料等領域有著深刻影響。特別是在醫(yī)藥行業(yè)，手性藥物對映體通過與體內(nèi)大分子的立體選擇性結(jié)合，產(chǎn)生不同的吸收、分布、代謝和排泄過程，可能具有不同的藥理毒理作用［1］。隨著醫(yī)藥行業(yè)對手性單體需求量的增加和對藥理的探究，如何獲得高純度手性單體已成為一個令人困擾的問題。因此，手性藥物的分離分析就顯得尤為重要。隨著對手性分子認識的不斷深入，人們對單一手性物質(zhì)的需求量越來越大，對其純度的要求也越來越高。單一手性物質(zhì)的獲得方法大致有以下三種：（1）手性源合成法：是以手性物質(zhì)為原料合成其它手性化合物，這是最常用的方法。但由于天然手性物質(zhì)的種類有限，要合成多種多樣的目的產(chǎn)物會遇到很大困難，而且合成路線步驟繁多，也使得產(chǎn)物成本十分高昂。（2）不對稱合成法：是在催化劑或酶的作用下合成得到過量的單一對映體化合物的方法。化學不對稱合成高旋光收率的反應仍然有限，即使如此，所得產(chǎn)物的旋光純度對于多數(shù)應用仍不夠高；生物的不對稱合成具有很高的選擇性，反應介質(zhì)通常為稀緩沖水溶液，反應條件溫和，但對底物要求高、反應慢、產(chǎn)物的分離困難，因而在應用上也受到一定的限制。（3）外消旋體拆分法：是在拆分劑的作用下，將外消旋體拆分成對映體。因為化學法合成外消旋體比較簡單，這種方法成本相對較低，因而得到廣泛應用。據(jù)統(tǒng)計，大約有65%的非天然手性藥物是由外消旋體或中間產(chǎn)物拆分得到的。本及依據(jù)國內(nèi)外相關文獻報道，總結(jié)了外消旋體的拆分方法。迄今，手性拆分技術主要有直接結(jié)晶拆分法、化學拆分法、動力學拆分法、色譜拆分法（含毛細管電泳法）和手性膜拆分法等五大類［%。直接結(jié)晶拆分法對于一個外消旋混合物，其兩種對映體常自發(fā)地以宏觀晶體分別析出，如果這些晶體可以用肉眼區(qū)別，那么就可在放大鏡的幫助下，用鑷子之類的工具將他們揀出分開，從而達到拆分的目的。這就是所謂的機械拆分法。機械拆分法的缺點是過于繁瑣，不能應用于外消旋化合物和外消旋固體溶液。Wynbery等囹用（-）-必蒎烯作溶劑，通過直接結(jié)晶法拆分了類似七環(huán)雜螺烯的外消旋體。但這種方法需要尋找特殊的手性溶劑，且適于拆分的外消旋混合物的范圍相當狹窄，故實際工業(yè)生產(chǎn)的意義不大。接種結(jié)晶拆分法是機械拆分法的改進。在一個熱的外消旋體混合物的飽和溶液中，加入適量的某一對映體的晶種，適當冷卻，則相當量的這一旋光性的對映體從外消旋混合物中析出。交替加入兩種對映體晶種，可以獲得兩種對映體分子。對于不生成外消旋混合物的化合物，將其轉(zhuǎn)化成鹽，往往可以滿足要求，接種結(jié)晶拆分法工藝簡單，成本較低且效果較好，因此是比較理想的大規(guī)模拆分方法，目前該法已經(jīng)應用在大規(guī)模生產(chǎn)氯霉素、（-）-薄荷醇以及抗高血壓藥甲基多巴等手性藥物上。據(jù)統(tǒng)計，這種選擇性接種結(jié)晶法占規(guī)模等于或者大于1kg的生產(chǎn)總量的1/5［5］。但是在生產(chǎn)過程中為了使外消旋混合物飽和，必須采用間斷式結(jié)晶，這無疑延長了生產(chǎn)的周期，增加了生產(chǎn)成本?；瘜W拆分法2.1經(jīng)典成鹽拆分化學拆分法是通過化學反應的方法，用手性試劑將外消旋體中的兩種對映體轉(zhuǎn)化為非對映異構(gòu)體，然后利用非對映體之間物理性質(zhì)和化學性質(zhì)的不同將兩者分開。拆分成功的關鍵是選擇合適的拆分劑。合適的拆分劑應該易與對映體生成非對映體，且溶解度差別較大，經(jīng)拆分后，又易再生還原為原來的對映體。雖然這種方法一直被作為重要的拆分方法，但其局限性也很明顯：（1）拆分劑和溶劑的選擇較為盲目；（2）拆分的產(chǎn)率和產(chǎn)品的旋光純度不高；（3）適用于手性拆分的化合物的類型不多。近年來，隨著主-客體化學的深入研究而開發(fā)出來的包結(jié)拆分和組合拆分等新型手性拆分技術，在一定程度上解決了經(jīng)典成鹽拆分方法的不足。2.2包結(jié)拆分由日本化學家Toda教授發(fā)明的包結(jié)拆分［6］與經(jīng)典成鹽拆分相比，所拆分的化合物不再局限于有機酸或者有機堿。此法主要利用主-客體分子之間存在很強的分子識別作用，而使得手性化合物通過氫鍵及分子間次級鍵作用選擇性地與某一個對映異構(gòu)體形成穩(wěn)定的包結(jié)絡合物（inclusioncomplex）而析出，從而實現(xiàn)對映體的分離［7］。由于主-客體分子之間不發(fā)生任何化學反應，因而很容易通過溶劑交換過程以及逐級蒸餾等手段實現(xiàn)主體與客體的分離，使得溶劑可以重復使用。因此，包結(jié)拆分操作簡單、成本低廉、易于規(guī)模生產(chǎn)、具有很高的生產(chǎn)價值。光學純的聯(lián)二苯酚的制備一直是一個難題，但最近Merck公司的Cai等㈤采用乙氰為拆分溶劑，使用略過量的氯化N-芐基辛可尼定作為手性主體，與R-（+）-聯(lián)二苯酚形成包結(jié)晶體，留在胃液中的S-（-）-聯(lián)二苯酚的光學純度可以達到99%e.e，包結(jié)晶體通過甲醇萃取不但可交換得到手性主體，還可以進一步提高R-（+）-聯(lián)二苯酚的光學純度（＞99.8%e.e）。這種方法極易放大，具有良好的工業(yè)應用前景。2.3組合拆分隨著組合化學在藥物先導化合物篩選中的作用日益顯著，人們開始將組合方法引入手性拆分劑的設計和篩選之中。Wynberg［9］首次將組合方法應用于化學拆分中，他們設計了一系列芳香環(huán)取代的衍生物組成不同的拆分劑家族。研究表明這類拆分劑的組合幾乎能以高的收率和近于100%e.e與所有的實驗消旋體迅速地形成非對映體的結(jié)晶，這在拆分方法學上是一個重大的突破。動力學拆分法動力學拆分方法的原理是在手性試劑和催化劑的作用下，利用對映體反應速度的不同而達到手性化合物的分離目的［10］。盡管動力學拆分方法與結(jié)晶拆分方法相比有許多優(yōu)點，但是其自身也存在著不足之處。傳統(tǒng)的動力學拆分方法拆分得到的光學純產(chǎn)物的最大收率只有50%，另一半對映異構(gòu)體廢棄，造成原料的浪費，生產(chǎn)成本的提高，甚至對環(huán)境的污染。為了克服這些缺點，人們開發(fā)并研究了動態(tài)拆分法。該方法具有原子經(jīng)濟性、環(huán)境友好等優(yōu)點。動態(tài)拆分法是利用手性底物的消旋化或手性中間體的動態(tài)平衡，使其中一種手性底物或手性中間體轉(zhuǎn)化成另外一種對映異構(gòu)體，可以達到最大限度拆分得到單一手性化合物的目的。動態(tài)動力學拆分（DKR）是將經(jīng)典的動力學拆分和手性底物消旋化相結(jié)合［11-17］。在拆分過程中利用某一反應底物在化學條件或酶存在下不穩(wěn)定易發(fā)生消旋化的特點，在動力學拆分的同時，通過改變反應條件如？日、反應溫度等或加入能夠產(chǎn)生消旋化反應的催化劑，如過渡金屬絡合物或消旋化酶等，使沒有參加反應的底物異構(gòu)體進行消旋化反應（圖1）。圖1.動態(tài)動力學拆分原理精心整理色譜拆分法4.1氣相色譜（GC）氣相色譜是較早用來分離對映體的一種方法，具有分離速度快、分離效率高、選擇性好、樣品用量少和檢測靈敏度高且操作簡單、費用低等優(yōu)點［18］。GC法分離對映體的方法主要有間接拆分法和直接拆分法。間接拆分法又稱手性試劑衍生化法（Chiralderivatizationreagent，CDR）。這種方法先通過共價結(jié)合作用，在對映體分子中引入另一個手性中心，形成非對映體后，再用非手，性GC拆分。如章立等［19］采用柱前衍生化法測定了大鼠肝微粒體中安非他明對映體，以氯仿為提取溶劑，N-三氟乙?；?脯氨酰氯為手性衍生化試劑，三乙胺為催化劑，將安非他明轉(zhuǎn)變成相應的酰胺類非對映異構(gòu)體對，用常規(guī)非手性毛細管柱氣相色譜、程序升溫法分離了大鼠肝微粒體中R-和s-安非他明，在5一250四g/mL范圍內(nèi)線性良好，方法檢測限為12.5ng，定量限為125ng，重現(xiàn)性和精密度均良好。實驗表明，空白微粒體樣品對安非他明對映體及內(nèi)標無干擾。直接拆分法又稱手性固定相法（Chiralstationaryphases，CSP），這種方法通過使用一個具有光學活性的環(huán)境，稱之為手性固定相，來提供拆分所需要的手性中心。它與CDR法的區(qū)別是不需要柱前手性衍生化反應。常見的手性固定相有羰基一雙氨基酸酯類和環(huán)糊精及其衍生物類。如匡唐永等［20］采用手性毛細管氣相色譜法測定了人尿中美芬妥英對映體，儀器為常用的氣相色譜儀、數(shù)據(jù)處理機，配以氮磷檢測器（NPD），色譜柱為手性交聯(lián)石英毛細管色譜柱，涂漬OV-225-纈氨酸-t-丁基酰胺，以二氯甲烷為提取劑，最低檢測濃度小于50ng?mL-1，兩種對映體的線性關系良好，回收率和精密度也較好。4.2高效液相色譜法HPLC）HPLC分離藥物對映體的方法可分為間接法和直接法兩大類。間接拆分法又稱手性試劑衍生化法，雖需進行衍生化反應，但生成的非對映體異構(gòu)體，物化性質(zhì)不同，可用常規(guī)的正相或反相法分離，因此被不少學者采用。如Peccinini等［21］使用（-）-薄荷基氯甲酸酯作為衍生化試劑，建立了血漿和尿液中卡維諾爾的HPLC法。采用C18柱為固定相，熒光檢測器檢測。間接拆分法分離效果好，分離條件簡便，但需要使用高純度的手性衍生化試劑，且該試劑對兩種對映體的衍生化效率應相同，故應用范圍有限［22］。直接法應用范圍較廣，其優(yōu)點是在分離前不需要進行衍生化反應，而且對分離機制的解釋顯示出優(yōu)越性，因此得到迅速發(fā)展，成為手性拆分最有效的工具之一。直接法分離手性藥物對映體可分精心整理為手性流動相添加劑法（CMPA）和手性固定相法（CSP）兩法［23］。手性流動相添加劑法（CMPA）。CMPA是指在普通色譜流動相中加入手性添加劑（CA）,CA與對映體溶質(zhì)通過靜電引力和氫鍵等非共價鍵結(jié)合方式，形成可逆的不同穩(wěn)定性的非對映體配合物，從而實現(xiàn)對映異構(gòu)體分離的方法。常見的CA有金屬配合物、環(huán)糊精、蛋白質(zhì)、手性離子對試劑等。其中金屬配合物添加劑色譜法系通過溶解在流動相中的配合物而實現(xiàn)的。手性固定相法（CSP）。手性固定相色譜法是指固定相與對映體溶質(zhì)通過氫鍵、n-n鍵、偶一偶極、包合絡合物、配位交換、疏水和極性相互作用的偶合，形成可逆的不同穩(wěn)定性的非對映體配合物，從而實現(xiàn)對映異構(gòu)體分離的方法。常見的手性固定相有選擇基鍵合相（Pirkle手性固定相）、纖維素和多糖衍生物、環(huán)糊精、蛋白質(zhì)鍵合相和合成聚合物與分子烙印手性固定相。4.3毛細管電泳法（CE）毛細管電泳技術（CE）是80年代以來新興的手性分離技術，特點是高效，快速，簡便，適用于藥物，生物大分子醫(yī)學等領域事］。毛細管電泳技術以高壓電場為驅(qū)動力，以毛細管為分離通道，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離。用CE拆分藥物對映體需加入各種不同的手性選擇劑才能達到分離的目的［25］。目前常用手性選擇劑有:CD、冠醚、膽酸鹽、手性混合膠束、手性選擇性金屬絡合物、蛋白和糖等7種類型［26］。手性膜拆分法目前，高效液相色譜（HPLC）是拆分對映體的最有效方法，但由于成本高，此方法不適合大規(guī)模制備。膜分離是一種近幾年剛發(fā)展的節(jié)能技術。從連續(xù)性和能量有效的觀點出發(fā)，通過手性膜拆分對映體是非常吸引人的。關于外消旋體的膜分離已有某些報道，如采用手性冠醚膜、環(huán)糊精載體膜、分子印跡聚合物膜、多聚糖膜、中空纖維素膜、聚丙烯膜以及各種液膜等。5.1手性藥物拆分膜的基本特征膜手性拆分法由含有消旋混合物的流入相、膜及接收相組成，相與流入相及接收相不相溶。流入相中消旋藥物在滲透壓或其他外力如壓力、電壓、pH梯度的驅(qū)動下進入膜相，在膜相中載體選擇性作用下，其中一種對映體通過膜相進入接收相。根據(jù)膜分離和手性拆分的要求，用于手性藥物拆分的膜需具備以下的特征［27］:①較高對映體選擇性:②膜通量要大;③通量及選擇性應穩(wěn)定。藥物通過膜的滲透是由被拆分藥物在膜中的分配行為和它們在膜中的擴散速度來決定的。為了提高膜的對映體選擇性，需要優(yōu)化這兩個因素。旋光異構(gòu)體的分配行為很大程度上是受膜中手性識別位置的結(jié)構(gòu)和數(shù)目影響的，擴散速度卻難于控制，為旋光異構(gòu)體具有相同的分子大小。通過調(diào)節(jié)手性識別位置周圍的親水/疏水性質(zhì)，來增大固定在膜上的手性識別位的拆分能力，將具有手性識別能力的膜放在一個被控制的親水/疏水微環(huán)境中，根據(jù)它們的分配或滲透行為，得到對旋光性物質(zhì)更高的選擇性。5.2手性藥物拆分膜的種類對于消旋藥物的分離，膜操作的兩種基本類型得以區(qū)別：用手性選擇性膜直接分離，或非手性選擇性膜輔助手性拆分劑形成不對稱的復合膜操作仍］.通常對拆分膜的分類是以膜的狀態(tài)分為固體膜和液膜兩種。5.2.1液膜1979年,Newcomb等［29］首先報道了一種液體膜拆分的方法.在這種液膜體系中，手性分子（主體）與外消旋體（客體）結(jié)合，通過氯仿載體從一水溶液至另一水溶液中再釋放出來.這種W型裝置能夠同時連續(xù)地將外消旋體拆分為2個對映體，得到的旋光純度為70%—90%.1987年,Armstrong等啊。道了另一種液膜拆分對映體的方法，他們采用水基質(zhì)液體膜拆分有機分子,首次采用環(huán)糊精作為膜載體分子，分離疏水性的異構(gòu)體.對（土）-S-（1-二茂鐵基乙基）苯硫酚等外消旋體進行了拆分。液膜分離手性物質(zhì)的原理是在手性分離過程中,液膜對某一對映異構(gòu)體藥物有比其他對映體更強的親和力,基于選擇性萃取的原理達到對消旋體拆分的目的.傳遞的驅(qū)動力來自對映異構(gòu)體在膜兩側(cè)的濃度差.液膜可被分為支撐液膜、厚體液膜和乳化液膜.在各種手性拆分液膜中，選擇性比較好的是使用流動載體的液體膜方法,選擇的種類和程度取決于所使用的載體分子（手性選擇體,CS）的性質(zhì).載體分子通常為大分子配體化合物,如冠醚、穴狀配體等［31］支撐液膜（SLM）即用薄壁空心纖維管內(nèi)的毛細孔來支撐的液膜.一束這樣的管子集中起來就能形成許多液膜,使液膜具有很大的比表面積.一種含有外消旋體的流體被送進管程,而富集后的對映異構(gòu)體分離液則從殼程流出.流入液和分離液可以是相同的，但必須與空心纖維管的液膜不混容.在支撐液膜中，手性液通過毛細和表面張力固定在膜孔里，固定的薄膜能將易混合的液體分成兩部分［32］支撐液膜的裝置如圖2。圖2支撐液膜裝置厚體液膜（BLM）在傳統(tǒng)的厚體液膜裝置中，膜相是混合良好的體相而不是在孔內(nèi)或膜上的固定相.基本原理包含從流入相到接受相的手性選擇性萃取，結(jié)果載體釋放消旋體到接受相中.由于手性化合物在不同環(huán)境的形成和分解，形成了合適的吸附和解吸附作用.厚體液膜裝置一般均為如圖3所示的U型管單元.DanielaStella等［33］用BLM膜的U型管裝置來研究金雞納啶對D,L-苯基乙醇酸的精心整理手性分離性能,得到的產(chǎn)品旋光度為79%ee.圖3典型的U-型管厚體液膜乳化液膜(ELM)。乳化液膜系統(tǒng)的應用包括3個連續(xù)的步驟:①把不相溶的兩表面活性劑攪拌以形成乳狀液.②乳狀液與含有要分離物質(zhì)的液體混合.③產(chǎn)生相的分離,而乳化劑在去乳化步驟得以回收.圖4為乳化液膜的膜萃取單元。圖4乳化液膜裝置5.2.2固膜由于液膜的主要缺點是一個相當長時間的不穩(wěn)定性啊。近幾年來,手性藥物膜分離的另一個新發(fā)展是手性固體膜即手性選擇性高分子膜的發(fā)展。手性選擇性高分子膜通常是由一個表面帶有一手性選擇性薄層的非選擇性多孔支撐組成。這種高分子膜需要高的比表面積，低的物質(zhì)轉(zhuǎn)運阻力，好的機械強度和旋光性識別能力。分離機制涉及要分離的對映異構(gòu)體和膜表層的高分子矩陣的特定的選擇性相互作用。如果一步不能得到想要得的光學純度的物質(zhì)，膜單元的層疊很易于獲得想要純度的物質(zhì).滲透性和選擇性決定手性膜的性能。Lee等［35］則用聚谷氨酸酯衍生物對聚偏氟乙烯超濾膜改性，得到非對稱的手性拆分固膜。首先用蒸氣吸附方法讓Y-苯甲基-L-谷氨酸酯的N-羧酸酐單體發(fā)生開環(huán)反應，物理或化學吸附在聚偏氟乙烯膜上，從而得到PBLG膜,PBLG膜分別經(jīng)過取代苯環(huán)和酯交換反應得到聚L-谷氨酸(PLGA)和具有三縮(乙二醇)單乙醚側(cè)鏈的聚谷氨酸酯(PLTEG)非對稱固膜。對手性a-氨基酸(色氨酸、苯基丙氨酸和酪氨酸)和手性藥物(心得安、氨酰心安和布洛芬)進行了滲透實驗，對映體選擇率為1.04—1.47。實驗觀察到化學接枝的聚合物與物理吸附的多肽相比，手性選擇率有所增加，這可能是因為分子質(zhì)量和高分子鏈密度的增加促進手性混合物和表面束縛的多肽之間相互作用。由于選擇性與透過通量之間的反相關系，選擇擴散型手性固膜處理量一般都較小，通過擴大膜面積或者增加平衡級數(shù)來彌補，在工業(yè)規(guī)模應用不太經(jīng)濟;而與之相比選擇吸附型手性固膜則有更大的工業(yè)應用前景。Randon等［36］采用2種方法來拆分色氨酸等外消旋體混合物，即溶液系統(tǒng)中的用牛族血清白蛋白(BSA)作為自由手性選擇劑的超濾和用接枝BSA的尼龍膜滲析。Nakamura和Kiyohara等［37-38］采用BSA作為手性選擇劑固定在多孔的聚乙烯中空纖維孔內(nèi)的接枝高分子鏈上，從而得到手性拆分固膜。聚乙烯膜上BSA的固定量分別是150mg/g和190mg/g,相當于3層和4層BSA。2種膜的區(qū)別在于前者固定的是交鏈的BSA分子。實驗得出固定交鏈BSA的多孔纖維對D,L-色氨酸的分離因子為12,并且相當穩(wěn)定。近年來發(fā)展起來的分子印跡技術由于其卓越的分析識別能力，被應用于分子拆分領域。Izumi等［39］以Boc-L—色氨酸為印跡分子，將其引入到四肽衍生物中，然后經(jīng)過處理制備成手性分子印跡膜。這種膜對Boc-L-色氨酸具有較高的吸附選擇性。Yoshikawa等[40]將Z型谷氨酸保護劑(Z—D—Glu,Z-L-Glu)與乙酸纖維素(CA)結(jié)合制成了分子印跡選擇性識別膜。實驗結(jié)果表明，D—Glu優(yōu)先通過在Z—D—Glu分子印跡膜中，而在以Z—L—Glu為印跡分子的CA膜中，L—Glu則優(yōu)先通過。如上所述，很多研究組已經(jīng)正在致力于手性高分子膜拆分手性藥物的發(fā)展。盡管如此，手性拆分膜法制備手性藥物仍處于發(fā)展的初級階段，為了工業(yè)化的應用,必須在流量和手性選擇性上有所突破?？梢韵嘈旁诓痪玫膶?隨著對選擇性拆分膜的深入研究，無論是液膜還是固體膜,都有可能在選擇性和透過通量兩方面同時獲得改善,以滿足工業(yè)應用的需求。一旦克服了這些限制，手性拆分膜的使用將類似于反相滲透和超濾，允許有一個相對較快的使用,以滿足工業(yè)應用的需求。參考文獻任國賓，詹予忠,郭士嶺.[J].河南化工,2002,(1):1-3?PellissierH.Recentdevelopmentsindynamickineticresolution[J].Tetrahedron,2008,64(8):1563-1601.黃蓓,楊立榮,吳堅平.[J].化工進展,2002,21(6):375-380.CroenMB,chadenberg,Wynberg.[J].J.Org.Chem.,1971,36:2797Anon.arkettrendsinChiralSeparations.[C].UniversalPharmaTechnologiesLLCReport,A:NorthAndover,997TodaF[J].AdO.SuPranmol.Chem.1992,2:141FarinaA,eilleSV,MessinaMT,etal.[J].Angew.Chem.Int.Ed,1999,38:2433CaiD,ughesDL,VerhoevenTR,etal.[J].TetrahedronLett.1995,36:7991VriesT,Wynberg,VanEchtenE.[J].Angew.Chem.Int.Ed.1998,37:2349PellissierH.Recentdevelopmentsindynamickineticresolution[J].Tetrahedron,2008,64(8):1563-1601MarrAC,PollockCL,SaundersGC.Base-freedynamickineticresolutionofsecondaryalcoholsusing“Piano-Stool”complexesofN-heterocycliccarbenes[J].Organometallics,2007,26(4):3283-3285LauSY,MohamadHU,KamaruddinAH,etal.Lipase-catalyzeddynamickineticresolutionofracemicibuprofenesterviahollowfibermembranereactor:modelingandsimulation[J].JMem-braneSci,2010,357(1):109-121XieJ,KongW,WangX,etal.Chiralruthenium-SDPs/diaminecomplexes-catalyzedenantioselectivehydrogenationofa-alkylary-lacetonesviadynamickineticresolution[J].FrontChemChina,2009,4(3):299-306PaalTA,LiljebladA,KanervaLT.Directed(R)-or(S)-selec-tivedynamickineticenzymatichydrolysisof1,2,3,4-tetra-hydroisoquinoline-1-carboxylicesters[J].EurJMedChem,2008,31:5269-5276HaakRM,BerthiolF,JerphagnonT,etal.Dynamickineticreso-lutionofracemicp-haloalcohols:directaccesstoenantioenrichedepoxides[J].JAmChemSoc,2008,130(41):13508-13509WuG,ZhuJ,DingZ,etal.Dynamickineticresolutionofra-cemica-sulfonylaldehydesviaasymmetrictransferhydrogenation[J].TetrahedronLett,2009,50(4):427-429.LeeWK,ParkYS,BeakP.Dynamicthermodynamicresolution:advantagebyseparationofequilibrationandresolution[J].AccChemRes,2009,42(2):224-234.朱京科，石祖蕓.氣相色譜法定量分析3,4-二氯硝基苯[J].精細石油化工,2002(2):59-60.章立,姚彤煒，曾蘇?柱前手性衍生化-毛細管氣相色譜測定大鼠肝微粒體中安非他明對映體山.藥物分析雜志,1998,18(5):291.匡唐永，張家美,鄒安慶，等.手性毛細管色譜法測定人尿中美芬妥英光學異構(gòu)體含量的方法學研究[J].藥學學報,1993,28(4):307.MOTOKAZUIWATA,TERUKAZUTANAKA.Selectionofthesolventsystemforthepreparationofpoly(D，L-lactic-co-gly-colicacid)microspherescontainingtumornecrosisfactor-alpha[J].Inter-nationalJournalofPharmaceutics,1998,160(2):145-156.孫愛平.噴霧干燥法制備聚乳酸載藥微球及其藥物釋放行為研究[D].天津:天津大學材料科學與工程學院.MARYELLENS,DAVIDE,PANLAW.Effectofproteinmolecularweightonreleasefrommicron-sizedPIGAmicrospheres[J].ControlledRelease,2001,76(6):297-311.LamerhoferM.Chiralrecognitionbyenantioselectiveliquidchromatography:mechanismsandmodernchiralstationaryphases[J].JournalofChromatographyA,2010;12(17):814-856郭志峰，李芬芳,邢健敏.醇/鹽雙水相體系中a-環(huán)己基扁桃酸手性分子識別研究[J].高等學?；瘜W學報,2011;32(2):275-280SzekelyE,BansaghiG,ThoreyP,etal.Environmen-tallybenignchiralresolutionoftrans-1,2-cyclohex-ane-diolbytwo-stepsupercriticalfluidextraction[J].Industrial&EngineeringChemistryResearch,2010;49(19):349-354黃蓓，陳歡林.選擇性擴散和選擇性吸附手性拆分膜及其應用[J].功能高分子學報,2002,15:480-485.VankelecomIFJ,GrobetP,YoshikawaM,etal.Menbranesbasedonpoly(y-methyl-l-glutamate):synthesis,characterizationanduseinchiralseparations[J].JMembrSci,2001,186:153-163.NewcombM,TonerJL,HelgesonRC,etal.Chiralrecognitionintransportasamolec