血液分析儀的研究現(xiàn)狀及進(jìn)展2課件

血液分析儀的研究現(xiàn)狀及進(jìn)展1590年荷蘭人米德爾堡和詹森設(shè)計制造了類似顯微鏡的放大儀器。1610年伽利略加以改良，使其有了更佳的效果，之后列文霍克改進(jìn)成為原始的顯微鏡1658年意大利人馬爾皮基利用上述裝置首先觀察到了紅細(xì)胞。1852年就有人開始設(shè)計對紅細(xì)胞的計數(shù)辦法。1855年發(fā)明計數(shù)板，改良Neubauer計數(shù)板就是應(yīng)用最為廣泛和持續(xù)時間最長的一種。一、血細(xì)胞分析儀的發(fā)展簡史1953年WallanceH.Coulter設(shè)計和制造了可以計數(shù)血細(xì)胞的專用儀器。單參數(shù)測定儀器：CoulterA型庫爾特原理：根據(jù)血細(xì)胞的不良導(dǎo)電性和產(chǎn)生電阻抗原理來計數(shù)血液中的細(xì)胞，也就是電阻式計數(shù)原理。

稀釋技術(shù)的進(jìn)步分析參數(shù)的增加檢測速度的提高方法的改進(jìn)和進(jìn)展各種故障處理功能的進(jìn)展質(zhì)控程序的進(jìn)展儀器校正功能的進(jìn)展其他技術(shù)的應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀發(fā)展中的技術(shù)進(jìn)步1、稀釋技術(shù)的進(jìn)步：

人工稀釋：費(fèi)時費(fèi)力、精確性差。專用的稀釋器：減少了誤差、提高了效率，如SysmexF820型，配帶自動稀釋器

。自動稀釋技術(shù)：提高了稀釋的精確度和進(jìn)樣的速度、實(shí)現(xiàn)了自動化檢測。2、分析參數(shù)的增加：血球計數(shù)儀：WBC、RBC；如CoulterZF型血紅蛋白計：HBG全自動血細(xì)胞計數(shù)儀：WBC、RBC、HBG、MCV、HCT、MCH、MCHC；如1975日本東亞公司推出的CC-710和CC-720型血小板計數(shù)儀：PLT；如SysmexPA-701型和CONTRAVE1000型，此類儀器多配有專用PRP離心機(jī)。血小板分析儀：PLT、MPV、PDW；如Clay-Adams的Ultra-Flo100型以及80年代后出現(xiàn)在我國的BakerS-810型。

全自動血細(xì)胞分析儀：RDW、PCT、大血小板比率、白細(xì)胞三分群、白細(xì)胞五分類、RET、NBC、異常淋巴細(xì)胞、幼稚細(xì)胞、寄生蟲提示及淋巴細(xì)胞亞群的分析及體液細(xì)胞分析等各種參數(shù)和功能也不斷的添加到一些品牌的儀器上，目前有的儀器甚至可以提供40~50種測量或計算參數(shù)。4、方法的改進(jìn)和進(jìn)展：白細(xì)胞分類：Coutler采用了VCS技術(shù)，即體積測量、射頻高頻傳導(dǎo)性和激光散射技術(shù)；Sysmex則采用了直流電阻抗(DC)與射頻(RF)和特殊細(xì)胞染色技術(shù)；Bayer則采用激光散射和細(xì)胞化學(xué)(過氧化酶和嗜堿細(xì)胞染色)技術(shù)；而Abbott是采用多角度偏振光散射(MAPSS)技術(shù)對白細(xì)胞進(jìn)行分析。紅細(xì)胞和血小板：光學(xué)和電阻法結(jié)合，對紅細(xì)胞體積進(jìn)行三維空間分析(3D)，體積大小和色素含量的分析，如BAYERADVIA120血紅蛋白測定：比色法，激光散射法。

6、質(zhì)控程序的進(jìn)展：人工繪制質(zhì)控圖：繁瑣、費(fèi)時、計算易出錯。

多種質(zhì)控程序：浮動均值法、全血質(zhì)控物法等自動繪制質(zhì)控圖，可以從不同側(cè)面反映儀器、試劑和標(biāo)本狀態(tài)，結(jié)合使用，可以提高全血細(xì)胞分析的檢驗質(zhì)量。實(shí)時在線質(zhì)控：可使用戶在10分鐘內(nèi)得到與全球同型號儀器進(jìn)行比對的分析結(jié)果，一次測定同步完成室內(nèi)和室間質(zhì)控。8、其他技術(shù)的應(yīng)用：計算機(jī)控制系統(tǒng)、條碼技術(shù)等的應(yīng)用可以對血細(xì)胞分析項目進(jìn)行有規(guī)律的組合和選擇，給血細(xì)胞分析儀提供了更加方便的使用方式和良好的管理方式。現(xiàn)代的許多儀器還增加了包括對試劑的管理，試劑消耗、試劑有效期和溫度的管理。三、血細(xì)胞分析儀產(chǎn)品的流水線化

所謂流水線化即是將血液常規(guī)分析中的所有步驟和項目進(jìn)行系統(tǒng)性聯(lián)合，將全自動血液分析儀與自動血涂片制備系統(tǒng)裝在一起加上智能傳送裝置，即可從血液測定到涂片、染片，實(shí)現(xiàn)了全自動操作。例如Sysmex的HST型、CoulterLH700系列。

流水線系統(tǒng)的核心：計算機(jī)控制系統(tǒng)。因為整個流程是在它的控制下運(yùn)行的，而系統(tǒng)中的“規(guī)則”是非常重要的一個軟件環(huán)節(jié)。所謂規(guī)則就是來自儀器和專家經(jīng)驗的綜合，這些“規(guī)則”將被存儲在計算機(jī)內(nèi)，凡不符合規(guī)則的標(biāo)本將被篩選出來，自動進(jìn)行涂片、染色，例如白細(xì)胞計數(shù)高于或低于多少，直方圖或散點(diǎn)圖那個區(qū)域出現(xiàn)異常信號等。凡通過規(guī)則的標(biāo)本可以不需要顯微鏡檢查。在LABOMAN中SYSMEX推薦部分規(guī)則：：[WBC]<3OR[WBC]>30：[PLT]<70OR[PLT]>1000：[HGB]<70OR[HGB]>180：[MCV]<75OR[MCV]>105：[MCHC]>380：[MCHC]<300AND[MCV]>=80：[NEUT%]="-----"OR[LYMPH%]="-----"OR[MONO%]="-----"OR[EO%]="-----"OR[BASO%]="-----"：[NEUT#]<1OR[NEUT#]>20：[LYMPH#]>510．：[MONO#]>1.511．：[EO#]>212．：[BASO#]>0.513．：白細(xì)胞異常散點(diǎn)圖14．：[IG#]>0.1OR[IG%]>1OR未成熟顆粒？15．：異型淋巴細(xì)胞？|異常淋巴細(xì)胞/原始淋巴細(xì)胞？16．：原始細(xì)胞？17．：有核紅細(xì)胞？SysmexHST全自動血液分析流水線HST402全自動血液分析流水線組成（2）鞘流DC法（RBC、PLT、HCT）前鞘流：避免多顆粒同時通過寶石孔——少計數(shù)避免顆粒側(cè)流——多計數(shù)后鞘流：避免顆?；亓鳌嘤嫈?shù)

（3）SLS-血紅蛋白測定法:

在稀釋的血液中加入溶血素，紅細(xì)胞中的血紅蛋白被釋放出來。血紅蛋白在月桂洗硫酸鈉的作用下，二價鐵轉(zhuǎn)變成三價鐵，并與月桂洗硫酸鈉結(jié)合形成SLS-Hb，SLS-Hb進(jìn)入血紅蛋白檢測系統(tǒng)。測定SLS-Hb在555nm波長下的吸光度值，并通過與加入樣品前稀釋液的吸光度進(jìn)行對比進(jìn)行計算。（4）半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù)結(jié)合核酸熒光染色

半導(dǎo)體激光照射在通過鞘流技術(shù)處理的細(xì)胞上，可根據(jù)每個細(xì)胞所產(chǎn)生的三種信號來鑒別細(xì)胞類別。前向散射光(FSC)信號可反應(yīng)細(xì)胞體積大??；側(cè)向散射光(SSC)信號可反應(yīng)細(xì)胞的顆粒和細(xì)胞核等內(nèi)含物的信息；側(cè)向熒光(SFL)強(qiáng)度信號則用于分析細(xì)胞內(nèi)脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量。2、檢測通道DIFFBASORBC/PLTHGBRET/PLT-ONRBCIMI(1)DIFF通道STROMATOLYSER-4DL溶解紅細(xì)胞在白細(xì)胞膜上打孔與嗜酸性顆粒特異性結(jié)合STROMATOLYSER-4DSDNA/RNA染色表面活性劑作用大分子有機(jī)酸與嗜酸粒細(xì)胞中的堿性顆粒發(fā)生化學(xué)粘附嗜酸粒細(xì)胞大分子有機(jī)酸DIFF通道嗜酸粒細(xì)胞檢測SSC縱坐標(biāo)：SFL，反應(yīng)核酸含量橫坐標(biāo)：SSC，反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度DIFF通道檢測參數(shù)幼稚粒細(xì)胞異常淋巴嗜酸中性單核淋巴嗜堿(2)WBC/BASO通道STROMATOLYSER-FB嗜堿細(xì)胞保持原狀除嗜堿細(xì)胞以外的白細(xì)胞溶解為裸核完全溶解紅細(xì)胞、血小板嗜堿其他白細(xì)胞FSCSSC(3)幼稚粒細(xì)胞分析--IMI通道

RF/DC技術(shù)STROMATOLYSER-IM溶解紅細(xì)胞、血小板、成熟白細(xì)胞、淋巴系的幼稚細(xì)胞粒系的幼稚細(xì)胞保持原狀(3)幼稚粒細(xì)胞分析--IMI通道

縱坐標(biāo)：射頻（RF），反映細(xì)胞密度橫坐標(biāo)：直流電（DC），反映細(xì)胞大小中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核(4)NRBC通道

STROMATOLYSER–NR：白細(xì)胞保持完好，白細(xì)胞膜上打孔有核紅細(xì)胞溶解為裸核完全溶解紅細(xì)胞、血小板NR染液：對DNA/RNA染色縱坐標(biāo)：FSC，反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：SFL，反映核酸含量NRBCWBCSFLFSC(4)NRBC通道

(5)RET/PLT-O通道流式細(xì)胞計數(shù)法：RETSEARCH（I）稀釋劑，稀釋標(biāo)本RETSEARCH（II）染液，對核酸染色(6)

RBC/PLT-I通道RBC、PLT-I：鞘流DC法HCT：RBC累積脈沖高度檢測法MCV：由RBC和HCT算出MCH：由RBC和HGB算出MCHC：由HCT和HGB算出RDW-SD：根據(jù)紅細(xì)胞直方圖算出RDW-CV：根據(jù)紅細(xì)胞直方圖算出PDW：根據(jù)血小板直方圖算出MPV：根據(jù)血小板直方圖和PLT算出P-LCR：根據(jù)血小板直方圖算出PCT：根據(jù)血小板直方圖算出

(7)HGB通道SLS（十二烷基磺酸鈉）：無氰無毒附一：白細(xì)胞分析

BASO通道：FSC+SSC(常規(guī))DIFF通道：SFL+SSC（難溶RBC模式時）NRBC通道：FSC+SFL（NBC報警時）附二：紅細(xì)胞分析RBC：阻抗法紅細(xì)胞值（含WBC、PLT）部分/全部?RBC-O：指成熟的紅細(xì)胞加網(wǎng)織紅細(xì)胞,排除了白細(xì)胞的干擾。RBCLFRMFRHFRPLT附三：血小板分析PLT-I：阻抗法血小板值（含RBC、碎片）部分/全部?PLT-O：排除了上述干擾。附四：全自動體液檢測功能

一、樣本類型：胸水、腹水、腦脊液、關(guān)節(jié)液等由DIFF、RBC/PLT通道測定（二）SysmexSP-1000i全自動推片染色機(jī)

SP-1000i是SYSMEX研發(fā)的一種用于血液學(xué)分析的全自動涂片制備裝置。它能夠完成從樣本吸引到染色等全部動作。軌道輸送樣本：LABOMAN軟件控制下進(jìn)行取樣、推片、染色多種進(jìn)樣方式(全自動軌道式穿刺進(jìn)樣、單個閉蓋穿刺進(jìn)樣、微量血開蓋吸