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文檔簡介
2023學年高考生物模擬測試卷注意事項:1.答卷前,考生務必將自己的姓名、準考證號填寫在答題卡上。2.回答選擇題時,選出每小題答案后,用鉛筆把答題卡上對應題目的答案標號涂黑,如需改動,用橡皮擦干凈后,再選涂其它答案標號?;卮鸱沁x擇題時,將答案寫在答題卡上,寫在本試卷上無效。3.考試結(jié)束后,將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.人體細胞之間的通訊多數(shù)是通過信號分子傳遞的。有些信號分子作用于細胞表面的受體,有些則作用于胞內(nèi)受體。生物學上將細胞外與膜受體結(jié)合的信息分子稱為第一信使,由其轉(zhuǎn)換而來的細胞內(nèi)信號則稱為第二信使,如圖所示。下列有關敘述錯誤的是A.細胞表面膜受體的化學本質(zhì)為糖蛋白B.神經(jīng)遞質(zhì)和大多數(shù)激素屬于第一信使C.第二信使通過調(diào)控細胞核內(nèi)發(fā)生的基因的翻譯過程發(fā)揮作用D.第一信使與膜受體結(jié)合體現(xiàn)了細胞膜的信息交流功能2.下列關于胚胎工程的說法正確的是()A.沖卵是把雌性個體中的卵細胞沖出來B.用于同期發(fā)情和超數(shù)排卵過程的激素相同,處理的對象也相同C.幾乎所有動物的胚胎都應該在原腸胚階段之前進行移植D.核移植后進行早期胚胎培養(yǎng)屬于有性生殖3.下列關于有機物的鑒定實驗中,易導致實驗失敗的操作是()①蛋白質(zhì)鑒定時,將NaOH溶液和CuSO4溶液混合后再加入樣液②還原糖鑒定時,需要進行水浴加熱③淀粉鑒定時,直接將碘液滴加到樣液中④脂肪鑒定過程中,對裝片染色后需用清水漂洗后放在顯微鏡下鏡檢A.①④ B.②③ C.①③ D.③④4.下列有關“基本骨架”或“骨架”的敘述,錯誤的是A.DNA分子中的核糖和磷酸交替連接排在外側(cè)構(gòu)成基本骨架B.每一個單體都以若干個相連的碳原子構(gòu)成的碳鏈為基本骨架C.生物膜的流動鑲嵌模型認為磷脂雙分子層構(gòu)成了膜的基本骨架D.真核細胞中有維持細胞形態(tài)保持細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有序性的細胞骨架5.關于細胞代謝的敘述,錯誤的是A.無氧呼吸能產(chǎn)生ATP,但沒有[H]的生成過程B.有氧呼吸過程中生成的[H]可在線粒體內(nèi)氧化生成水C.某些微生物可利用氧化無機物產(chǎn)生的能量合成有機物D.光合作用光反應階段產(chǎn)生的[H]可在葉綠體基質(zhì)中作為還原劑6.下圖是細胞膜的亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖,①~③表示構(gòu)成細胞膜的結(jié)構(gòu),下列敘述錯誤的是()A.組成結(jié)構(gòu)③的物質(zhì)中含有甘油基團B.結(jié)構(gòu)②不可能起著生物催化劑的作用C.結(jié)構(gòu)③也具有選擇透性D.在效應細胞毒性T細胞中,結(jié)構(gòu)①可能會識別抗原-MHC復合體二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)回答下列有關光合作用的問題:(1)下圖是茶樹葉片光合作用部分過程示意圖,其中Ⅰ、Ⅱ表示光合作用的兩個階段,a、b表示相關物質(zhì),據(jù)圖回答。上圖中階段Ⅱ進行的場所是____________,外界光照強度主要通過影響階段____________(Ⅰ/Ⅱ)影響光合速率。在階段Ⅱ,C3的碳元素來自于____________。(2)研究人員通過人工誘變篩選出一株茶樹突變體,其葉綠素含量僅為普通茶樹的56%。一圖表示在25℃時不同光照強度下該突變體和普通茶樹的凈光合速率。另外兩圖表示某光強下該突變體與普通茶樹的氣孔導度(單位時間進入葉片單位面積的CO2量)和胞間CO2濃度。①根據(jù)上圖比較突變體與普通茶樹凈光合速率的大?。篲___________。②根據(jù)圖分析,____________(普通/突變體)茶樹在單位時間內(nèi)固定的CO2多,理由是________________________________________________________________________。8.(10分)布偶貓又稱布拉多爾貓,是貓中體形和體重較大的一種,多為三色貓或雙色貓,是非常理想的家養(yǎng)寵物。已知布偶貓的毛色受多對基因控制,請根據(jù)控制不同顏色基因的特點回答下列相關問題:(1)布偶貓中有純色個體,野生型為海豹色(B),后來培育出巧克力色(b)、藍色和丁香色等類型,藍色、丁香色分別是海豹色、巧克力色的稀釋色,受d基因控制,D基因無稀釋功能。從根本上,巧克力色基因來自_____________________,利用射線處理野生型海豹色個體的受精卵一定能直接獲得巧克力色的個體嗎?并說明原因:______________________________。若將兩只基因型為BbDd的貓進行交配,理論上F1個體的表現(xiàn)型及比例為________。如何確定一只藍色的布偶公貓是純合子還是雜合子?寫出實驗方法并預測實驗結(jié)果:_________________________________。(2)布偶貓中野生型基因(o)使白色呈現(xiàn)黑色,突變型基因(O)抑制棕色基因的表達,使白色呈現(xiàn)紅色。①若兩個基因同時存在則為黑紅交錯的雙色貓,且雙色貓均為母貓,不考慮從性遺傳,分析產(chǎn)生的原因是____________________。②當白斑基因(S)存在時,對毛發(fā)顏色的分布會造成影響,使雙色貓中同種顏色的毛發(fā)聚為一簇,稱為三花。三花個體也是最受歡迎的類型,三花個體的基因型為__________________,同種基因型的三花貓,同顏色的毛聚集的位置不同,形成的花色多種多樣,原因可能是___________________________。③極少數(shù)的雙色貓和三花貓為公貓,且天生沒有生育能力,產(chǎn)生的原因很可能是__________________。9.(10分)蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用,而且對人體沒有影響。我國科學家欲獲得高效表達蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥,做了相關研究。(1)研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒,得到重組質(zhì)粒,再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細胞懸液中,獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。(2)檢測發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低,研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好,因而設計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物(引物B和C中都替換了一個堿基),并按圖2方式依次進行4次PCR擴增,以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術。②圖2所示的4次PCR應該分別如何選擇圖1中所示的引物?請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”,若不選用該引物則劃“×”)。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4(3)研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導入大腸桿菌,提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì),用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物,判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產(chǎn)物的生物活性,研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時間后,比較_________的大小,以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。(4)作為微生物農(nóng)藥,使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌,其優(yōu)點是_________。10.(10分)2019年底爆發(fā)了新型冠狀肺炎,我國采取了積極有效的應對措施,疫情已得到有效的控制,并為世界各國應對疫情作出了巨大的貢獻?;卮鹣铝袉栴}:(1)新型冠狀病毒要侵入人體,首先需要穿過的身體屏障是______。在內(nèi)環(huán)境中,大多數(shù)病毒經(jīng)過____細胞的攝取和處理,暴露出抗原,并引發(fā)相應的免疫反應。(2)新冠肺炎的自愈者,在一段時間內(nèi)很難再次感染新型冠狀病毒,其主要原因是____________________________。(3)在人體中,被新型冠狀病毒感染的細胞的清除,是通過______(填“細胞凋亡”或“細胞壞死”)完成的。11.(15分)按照聯(lián)合國的標準,一個地區(qū)60歲以上老人達到總?cè)丝诘?0%,即被視為進入老齡化社會。201年我國人口年齡結(jié)構(gòu)和2007-2020年我國60歲以上人口數(shù)量及比重如圖所示。201年60周歲及以上人口數(shù)達24090萬,占總?cè)丝跀?shù)量的1.3%。為緩解老齡化帶來的一系列問題,從2015年開始,我國全面放開“二孩政策”。請回答下列問題:(1)種群(人口)的特征中_______________是種群最基本的數(shù)量特征。(2)201年我國60周歲及以上人口數(shù)達24090萬,占總?cè)丝跀?shù)量的1.3%。你認為我國老年人口比例還會繼續(xù)升高嗎?_______________。(3)據(jù)圖分析,201年我國人口的年齡組成為_________________型,由此可預測_______________。(4)若我國某地區(qū)人口的年齡組成為穩(wěn)定型,人口數(shù)量在一定時期內(nèi)一定能保持穩(wěn)定嗎?為什么?______________________________。(5)我國全面放開“二孩政策”,就人口的數(shù)量特征而言,會直接改變我國人口的____________。
2023學年模擬測試卷參考答案(含詳細解析)(含詳細解析)一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、C【答案解析】
(1)細胞膜主要由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,此外還有少量的糖類。蛋白質(zhì)在細胞膜形使功能時起重要作用。在細胞膜的外表,有一層細胞膜上的蛋白質(zhì)與糖類結(jié)合形成的糖蛋白叫糖被,它在細胞的生命活動中具有重要作用。(2)第一信使即細胞外信號,根據(jù)胞外信號的特點及作用方式,化學信號分子可分為激素、神經(jīng)遞質(zhì)和局部化學介質(zhì)這三種類型?!绢}目詳解】A、細胞膜上受體的化學本質(zhì)為糖蛋白,A正確;B、與膜受體結(jié)合進行信息傳遞的信息分子,主要包括三大類:一是可長途運輸?shù)募に胤肿?,二是短程傳遞的神經(jīng)遞質(zhì),三是作用于周圍細胞的局部介質(zhì),B正確;C、第二信使的受體位于細胞內(nèi),第二信使的作用,本質(zhì)上都是在核內(nèi)啟動基因的轉(zhuǎn)錄,最終提高細胞內(nèi)的某些蛋白質(zhì)尤其是某些酶的數(shù)量,來長時間實現(xiàn)對細胞代謝和功能的調(diào)節(jié),C錯誤;D、第一信使與膜受體結(jié)臺體現(xiàn)了細胞膜的信息交流功能,D正確;故選C。2、C【答案解析】
1、胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術,如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術。經(jīng)過處理后獲得的胚胎,還需移植到雌性動物體內(nèi)產(chǎn)生后代,以滿足人類的各種需求。理論基礎:哺乳動物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律。2、胚胎分割的特點:來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì),胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。3、胚胎移植的基本程序主要包括:①對供、受體的選擇和處理(選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體,有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進行同期發(fā)情處理,用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理);②配種或人工授精;③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存(對胚胎進行質(zhì)量檢查,此時的胚胎應發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段);④對胚胎進行移植;⑤移植后的檢查?!绢}目詳解】A、沖卵是把雌性個體中的早期胚胎沖出來,A錯誤;B、用于同期發(fā)情和超數(shù)排卵過程的激素不相同,同期發(fā)情是用孕激素,超數(shù)排卵是促性腺激素,B錯誤;C、幾乎所有動物的胚胎都應該在原腸胚階段之前進行移植,C正確;D、核移植后進行早期胚胎培養(yǎng)屬于無性生殖,D錯誤。故選C。3、A【答案解析】
生物組織中化合物的鑒定:(1)斐林試劑可用于鑒定還原糖,在水浴加熱的條件下,溶液的顏色變化為磚紅色(沉淀).斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖(如葡萄糖、麥芽糖、果糖)存在與否,而不能鑒定非還原性糖(如淀粉)。(2)蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應。(3)脂肪可用蘇丹Ⅲ染液(或蘇丹Ⅳ染液)鑒定,呈橘黃色(或紅色)。(4)甲基綠能使DNA呈綠色,吡羅紅能使RNA呈紅色?!绢}目詳解】①蛋白質(zhì)鑒定時,先加NaOH溶液,后加CuSO4溶液,①錯誤;②還原糖鑒定時,需要進行水浴加熱,②正確;③淀粉鑒定時,直接將碘液滴加到淀粉樣液中,③正確;④脂肪鑒定過程中,對裝片染色后需用酒精洗掉浮色后放在顯微鏡下鏡檢,④錯誤。故選A?!敬鸢更c睛】本題考查生物組織中化合物的鑒定,對于此類測試卷,需要考生注意的細節(jié)較多,如實驗的原理、實驗采用的試劑及試劑的使用方法、實驗現(xiàn)象等,需要考生在平時的學習過程中注意積累。4、A【答案解析】
DNA分子中磷酸和脫氧核糖交替排列構(gòu)成基本骨架;每一個單體都是以若干個相連的碳原子構(gòu)成的碳鏈為基本骨架,許多單體連接成多聚體;桑格和尼克森提出了生物膜的流動鑲嵌模型,認為磷脂雙分子層構(gòu)成了膜的基本支架;真核細胞中的細胞骨架是由蛋白質(zhì)纖維組成的,它對于有維持細胞形態(tài)、保持細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有序性,與細胞運動、能量轉(zhuǎn)換等生命活動密切相關?!绢}目詳解】A.DNA分子中的脫氧核糖和磷酸交替連接排在外側(cè)構(gòu)成基本骨架,A錯誤;B.每一個單體都以若干個相連的碳原子構(gòu)成的碳鏈為基本骨架,B正確;C.流動鑲嵌模型認為磷脂雙分子層構(gòu)成了膜的基本支架,C正確;D.真核細胞中有維持細胞形態(tài)、保持細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有序性的細胞骨架,D正確。
故選A。
5、A【答案解析】有氧呼吸和無氧呼吸有一個共同點:第一階段都能將葡萄糖分解成丙酮酸和[H],故A項錯。有氧呼吸第一和第二階段都能產(chǎn)生[H],2個階段產(chǎn)生的[H]都參與第三階段與氧的結(jié)合,而第二和第三階段均在線粒體中進行,故B對。對于C項,各位應記住一些特例,比如在講化能合成作用時,就講到了硝化細菌能利用氨氣氧化釋放的化學能將無機物合成有機物。D項也對,因為光合作用的光反應階段為其暗反應階段提供[H]和ATP,暗反應發(fā)生在葉綠體基質(zhì)。【考點定位】本題主要考查光合作用和呼吸作用的過程及化能合成作用等基礎知識,意在考查學生對重要基礎知識的掌握是否熟練,屬基礎題。6、B【答案解析】
據(jù)圖分析,圖示為細胞膜的亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖,其中結(jié)構(gòu)①表示糖蛋白,位于細胞膜的外側(cè);結(jié)構(gòu)②表示蛋白質(zhì),其種類和數(shù)量與細胞膜功能的復雜程度有關;結(jié)構(gòu)③表示磷脂雙分子層,是細胞膜的基本骨架。【題目詳解】A、結(jié)構(gòu)③是磷脂雙分子層,由兩層磷脂分子組成,而磷脂分子含有甘油基團,A正確;B、結(jié)構(gòu)②是膜蛋白,可能是酶,因此可能起著生物催化劑的作用,B錯誤;C、結(jié)構(gòu)③是磷脂雙分子層,也具有選擇透性,C正確;D、在效應細胞毒性T細胞中,結(jié)構(gòu)①糖蛋白可能會識別抗原-MHC復合體,D正確。故選B?!敬鸢更c睛】解答本題的關鍵是掌握細胞膜的結(jié)構(gòu)與功能,準確識別圖中各個數(shù)字代表的結(jié)構(gòu)的名稱,回憶各個結(jié)構(gòu)的功能,明確細胞膜上蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量越多,細胞膜的功能越復雜。二、綜合題:本大題共4小題7、葉綠體基質(zhì)ⅠCO2和五碳化合物光照強度小于a時,突變體的凈光合速率小于普通茶樹的凈光合速率;光照強度大于a時,突變體的凈光合速率逐漸大于普通茶樹的凈光合速率突變體突變體的氣孔導度大,進入葉片的CO2多,而其胞間CO2濃度與普通茶樹相近,說明突變體的光合速率較高,能較快地消耗CO2【答案解析】
由題圖可知,Ⅰ表示光反應階段,Ⅱ表示暗反應階段,a表示[H],b表示ATP。光照強度大于a時,突變體茶樹的凈光合速率大于普通茶樹。突變體茶樹的氣孔導度大于普通茶樹,而突變體茶樹和普通茶樹胞間CO2濃度相同,說明突變體茶樹利用CO2的能力高于普通茶樹?!绢}目詳解】(1)進行暗反應的場所是葉綠體基質(zhì)。外界光照強度主要通過影響光反應階段,進而影響光合速率。階段Ⅱ過程中,CO2和五碳化合物結(jié)合生成三碳化合物,因此C3的碳元素來自于CO2和五碳化合物。(2)由圖可知,光照強度小于a時,突變體的凈光合速率小于普通茶樹的凈光合速率;光照強度大于a時,突變體的凈光合速率大于普通茶樹的凈光合速率。由另外兩圖可知,突變體的氣孔導度大,進入葉片的CO2多,而其胞間CO2濃度與普通茶樹相近,說明突變體的光合速率較高,能較快地消耗CO2,因此突變體茶樹在單位時間內(nèi)固定的CO2多?!敬鸢更c睛】答題關鍵在于掌握光合作用的過程以及光合作用的影響因素,分析曲線圖和柱狀圖獲取信息。8、基因突變不一定,基因突變具有低頻性和不定向性海豹色∶巧克力色∶藍色∶丁香色=9∶3∶3∶1選擇多只丁香色的母貓與之雜交,觀察后代的表現(xiàn)型;若后代中均為藍色個體,則為純合子,若后代中出現(xiàn)丁香色個體,則為雜合子(合理即可)O、o基因存在于X染色體上,母貓有兩條X染色體,可使兩個基因同時出現(xiàn)SSXOXo、SsXOXo基因的表達受到影響(基因的選擇性表達)染色體變異(染色體數(shù)目變異或染色體結(jié)構(gòu)變異)【答案解析】
根據(jù)題干的信息海豹色基因型是B_D_,巧克力色的基因型是bbD_,藍色基因型B_dd,丁香色基因型bbdd?!绢}目詳解】(1)巧克力色是由海豹色經(jīng)過基因突變形成;由于基因突變具有低頻性和不定向性,所以利用射線處理野生型海豹色個體的受精卵不一定能直接獲得巧克力色的個體;BbDd的貓進行交配,子代表現(xiàn)型、基因型及比例海豹色(B_D_)∶藍色(B_dd)∶巧克力色(bbD_)∶丁香色(bbdd)=9∶3∶3∶1。藍色貓的純合子基因型是BBdd,雜合子是Bbdd,判斷動物的基因型通常選擇測交,所以選擇多只丁香色(bbdd)的母貓與之雜交,觀察后代的表現(xiàn)型;若后代中均為藍色個體(Bbdd),則為純合子,若后代中出現(xiàn)丁香色個體(bbdd),則為雜合子。(2)①若兩個基因同時存在則為黑紅交錯的雙色貓,且雙色貓均為母貓,可以推測雄性貓只含有一個基因型,所以O、o基因存在于X染色體上,母貓有兩條X染色體,可使兩個基因同時出現(xiàn),而公貓只有1條X染色體,所以只含有一個基因。②三花個體需要在黑紅交錯的雙色貓基礎上出現(xiàn)白斑,所以其基因型是SSXOXo、SsXOXo;同種基因型的三花貓,同顏色的毛聚集的位置不同,形成的花色多種多樣,原因可能是基因的表達受到影響或基因的選擇性表達。③正常公貓只含有1條X染色體,所以不可能是雙色毛,極少數(shù)的的雙色貓和三花貓為公貓,且天生沒有生育能力,可能的原因是發(fā)生了染色體變異(染色體數(shù)目變異或染色體結(jié)構(gòu)變異)?!敬鸢更c睛】本題需要考生分析題干中的信息得出各種表現(xiàn)型的基因型,在分析(2)時需要根據(jù)“雄性貓只含有一個基因型”推測出改基因位于X染色體上。9、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒(pET質(zhì)粒)抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全;不會造成基因污染;有效成分純度較高【答案解析】
(一)基因工程的基本工具1、“分子手術刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(1)來源:主要是從原核生物中分離純化出來的。(2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶(1)兩種DNA連接酶(E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶)的比較:①相同點:都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別:E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵.DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體(1)載體具備的條件:①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點,供外源DNA片段插入。③具有標記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外,并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動植物病毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的獲取1、目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成.人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學合成法。3、PCR技術擴增目的基因(1)原理:DNA雙鏈復制(2)過程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步:基因表達載體的構(gòu)建1、目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2、組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因(1)啟動子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的尾端。(3)標記基因的作用:是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來.常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步:將目的基因?qū)胧荏w細胞1、轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進入受體細胞內(nèi),并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛S玫姆椒ㄊ秋@微注射技術.此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少,最常用的原核細胞是大腸桿菌,其轉(zhuǎn)化方法是:先用Ca2+處理細胞,使其成為感受態(tài)細胞,再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。3、重組細胞導入受體細胞后,篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標記基因是否表達。第四步:目的基因的檢測和表達1、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交技術。2、其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,方法是采用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應的抗體進行抗原——抗體雜交。4、有時還需進行個體生物學水平的鑒定,如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。【題目詳解】(1)在基因工程中,利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒,得到重組質(zhì)粒;大腸桿菌作為受體細胞,需要用氯化鈣處理,以便重組質(zhì)粒的導入。(2)①根據(jù)題意和圖示分析,經(jīng)過4次PCR技術后獲得了新的基因,這是一種定點的基因突變技術。②與研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好,因而設計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物(引物B和C中都替換了一個堿基),因此4次PCR應該分別選擇如圖所示的引物如下表所示:引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√(3)根據(jù)實驗中的對照原則,若要比較新蛋白A的表達效率是否提高,則需設置三組實驗實驗變量的處理分別為:僅含新蛋白質(zhì)A的重組質(zhì)粒,僅含蛋白A的重組質(zhì)粒和空白對照(僅含空質(zhì)粒,以排除空質(zhì)??赡墚a(chǎn)生的影響)。因此,將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒(pET質(zhì)粒)分別導入大腸桿菌,提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì),用抗原——抗體雜交方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物,判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。由于蛋白A(或新蛋白A)具有抗菌作用,所以為檢測表達產(chǎn)物的生物活性,研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時間后,比較抑菌圈的大小,以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。(4)作為微生物農(nóng)藥,使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌,是因為蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全;不會造成基因污染;有效成分純度較高?!敬鸢更c睛】本題主要考查基因工程、PCR技術等相關知識,考生需要理解和記憶相關知識,并學會應用所學知識正確答題。10、皮膚、黏膜吞噬
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