影響血型鑒定常見的問題及處理方法

關于影響血型鑒定常見的問題及處理方法第一頁，共三十二頁，2022年，8月28日準確的血型鑒定是臨床安全有效輸血的重要保證，使輸血的成分能在受著體內(nèi)有效存活，無不良反應，即輸入的紅細胞在受著體內(nèi)必須不凝集不溶血，輸入的血漿成分不導致受者自身紅細胞顯著破壞，才能使受者獲得恢復健康所需的血液。第二頁，共三十二頁，2022年，8月28日ABO定型試驗中常見的問題：一、標本問題二、試劑問題三、實驗者操作技術的錯誤四、紅細胞標本問題五、血清標本的問題第三頁，共三十二頁，2022年，8月28日一、標本問題

血型鑒定血液標本的嚴格要求是安全輸血的關鍵性措施之一，首先對標本進行科學管理，確保標本一一對應防止“張冠李戴”。

1.所用標本要能夠恰當反映受血者目前的免疫學狀態(tài)。

2.受血者配血試驗的血標本必須是輸血前3天內(nèi)采集的。

3.如果受血者需要再次輸注紅細胞，尤其是受血者最后一次輸注紅細胞間隔了24小時，應重新采集一份血樣進行交叉配血試驗，防止新的不規(guī)則抗體產(chǎn)生。第四頁，共三十二頁，2022年，8月28日二、試劑問題

血型定型試劑是做好定型的基礎。現(xiàn)在單克隆試劑是通過雜交瘤技術生產(chǎn)的，其效價、特異性、親和力都較人血清有很大進步，但試劑的運輸、貯存等條件不適可導致試劑變質失效，造成鑒定錯誤。在實驗前進行試劑外觀、效價等項目質量控制。不同抗凝劑的血液制備的標準紅細胞質量也不同，各實驗室依據(jù)要求正確配制紅細胞濃度。第五頁，共三十二頁，2022年，8月28日

三、實驗者操作技術錯誤

1.造成假陰性結果原因：(1)未加入抗體或血清(2)未識別溶血(3)血清與紅細胞比例不當(4)離心速度、時間不夠(5)使用失效或錯誤試劑(6)實驗結果記錄、解釋錯誤第六頁，共三十二頁，2022年，8月28日2.造成假陽性結果原因：

(1)離心速度過大、時間過長

(2)使用了受到細菌污染的試劑

(3)試驗器皿不干凈

(4)實驗結果記錄、解釋錯誤第七頁，共三十二頁，2022年，8月28日四、紅細胞標本問題1.患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的紅細胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型紅細胞。2.某些ABO基因變異的個體或ABO亞型紅細胞，一些白血病或其他惡性疾病患者的紅細胞ABO抗原太弱，應用抗－A、抗－B試劑未能出現(xiàn)預期的凝集反應。第八頁，共三十二頁，2022年，8月28日3.紅細胞獲得性或遺傳性的異常，如獲得性B抗原紅細胞或Tn/T多凝集紅細胞，人血清抗－A、抗－B試劑可能與這些異常的紅細胞反應。4.使用未洗滌的紅細胞標本，其表面黏附的血漿或血清中含針對抗－A、抗－B試劑中染色劑或其他成分的抗體，出現(xiàn)假陽性反應。第九頁，共三十二頁，2022年，8月28日5.患者血清中有高活性、高濃度冷自身抗體嚴重致敏自身紅細胞，以至自發(fā)地發(fā)生凝集，而不是抗體試劑的特異性免疫反應所致。

6.紅細胞表面包被IgG類抗體

7.靜脈輸入高分子藥物如甘露醇、右旋糖酐等，可導致紅細胞成緍錢狀。

第十頁，共三十二頁，2022年，8月28日五、血清標本的問題1.纖維蛋白凝集的紅細胞凝塊被誤認為是血液凝集，如使用血漿標本或未完全去除纖維蛋白的血清標本時出現(xiàn)假陽性。2.免疫抑制疾病患者血清中ABO抗體減少或消失。老年人ABO抗體減弱。3.新生兒—6個月內(nèi)嬰兒血清中ABO抗體陰性或很弱，一般只測正定不測反定。第十一頁，共三十二頁，2022年，8月28日4.血清中不正常濃度和比例的蛋白質成分或高分子蛋白增多可引起非特異凝集，如緡錢狀紅細胞的非特異凝集。5.血清中含抗－A、抗－B以外的其他紅細胞抗體，如抗－M、抗－I等。6.患者接受了ABO血型不同的骨髓移植。第十二頁，共三十二頁，2022年，8月28日7.患者血清中含有針對紅細胞保護劑的抗體。8.ABO抗體被輸入的液體稀釋。第十三頁，共三十二頁，2022年，8月28日結果分析和處理的基本步驟1.重新采集標本，以避免采集、標記、污染等錯誤。2.查詢患者臨床診斷、既往病史、輸血史、用藥史、骨髓移植史。3.徹底洗滌標本或試劑紅細胞。4.應用抗－AB、抗－A1、或抗－H檢測紅細胞。第十四頁，共三十二頁，2022年，8月28日5.分析抗篩結果，確定結果是否受同種異型或自身冷抗體干擾。6.室溫孵育30min后，離心觀察結果，以檢測弱的抗原抗體反應。7.做自身紅細胞做對照，以確定自身抗體的干擾。第十五頁，共三十二頁，2022年，8月28日ABO正反定不符的分類一、抗原表達減弱或丟失所致的ABO正反定不符二、紅細胞額外反應所致的ABO正反定不符三、意外的血清學反應所致的ABO正反定不符第十六頁，共三十二頁，2022年，8月28日一、抗原表達減弱或丟失

所致的ABO正反定不符常見的原因：1.ABO亞型紅細胞2.白血病或其他惡性疾病患者的紅細胞ABO抗原太弱，應用抗－A、抗－B試劑未能出現(xiàn)預期的凝集反應3.急性大出血第十七頁，共三十二頁，2022年，8月28日處理的方法：1.將抗－A、抗－B和抗－A，B試劑與洗滌過的紅細胞在室溫或4℃孵育30min，以增強抗原、抗體的結合。2.用木瓜酶、菠蘿蛋白酶處理紅細胞，以增強抗原、抗體的結合。3.應用抗－AB、抗－A1、或抗－H檢測紅細胞。第十八頁，共三十二頁，2022年，8月28日4.用人血清抗－A、抗－B進行吸收放散試驗，檢測弱A、B抗原，且同時要做O型血吸收放散試驗作對照。第十九頁，共三十二頁，2022年，8月28日二、紅細胞額外反應

所致的ABO正反定不符常見的原因1.獲得性B紅細胞（類B）2.混合視野凝集(mf)3.紅細胞被致敏第二十頁，共三十二頁，2022年，8月28日

獲得性B紅細胞的特征

1.常出現(xiàn)在有腸道細菌進入血循環(huán)的疾病，也可發(fā)生在正常人；3.常伴有T和Tn多凝集紅細胞出現(xiàn)(細菌感染時)；4.自身抗-B不與自身獲得性B抗原反應(無自凝現(xiàn)象)第二十一頁，共三十二頁，2022年，8月28日獲得性B紅細胞的鑒定1.酸化血清抗-B試劑pH至6.0時，檢測無凝集，即不與獲得性B細胞反應2.乙酸酐處理能明顯減弱其反應，但正常B細胞不受影響3.臨床追蹤，感染控制后“類B”現(xiàn)象消失第二十二頁，共三十二頁，2022年，8月28日混合視野凝集1.非O型人近期輸用O型血；2.骨髓移植后做血型；3A3(B3)細胞與抗－A(抗-B)呈典型的混合視野凝集現(xiàn)象；4.雙精子受精（嵌合體）第二十三頁，共三十二頁，2022年，8月28日紅細胞被致敏1.患HDN嬰兒、存在自身免疫或同種異體免疫的成人，其紅細胞嚴重包被IgG抗體分子；2.與含一定蛋白質濃度的試劑（抗－D、抗－A、抗－B）產(chǎn)生凝集；3.處理方法：45℃放散后，抗體解離，即可準確定型；第二十四頁，共三十二頁，2022年，8月28日三、意外的血清學反應所致的ABO正反定不符

常見的原因及處理方法：1.抗體太弱或消失如﹤4-6個月幼兒，老年人、免疫抑制患者，應注意患者的年齡和臨床診斷2.非正常高濃度的抗－A、抗－B可引起前帶現(xiàn)象，導致假陰性，將血清稀釋或用EDTA（2.5％）處理可消除；第二十五頁，共三十二頁，2022年，8月28日3.A2、A2B或其他ABO亞型，人血清中可能有抗－A1，抗－A1只凝集A1型紅細胞而不凝集A2、O型紅細胞；4.患者靜脈輸用了大量大分子藥物等原因，可發(fā)生類似凝集現(xiàn)象，如緡錢狀凝集，將血清用生理鹽水稀釋3倍或用鹽水替換技術可消除；第二十六頁，共三十二頁，2022年，8月28日5.冷自身抗體①所有試劑及細胞37℃孵育,37℃下判讀結果;②將冷自身抗體在4℃吸收在做血型,③將血清用0.01mol/L二硫蘇糖醇(DTT)處理完再定型；第二十七頁，共三十二頁，2022年，8月28日6.自身免疫性溫型抗體正定被易被誤認為AB型，反定易被誤認為O型，用遞增溫度(22℃，37℃，45℃)洗滌紅細胞后再做血型鑒定7.血清蛋白過高試劑紅細胞多呈假凝集，如肝臟疾病、MM等，加鹽水稀釋后凝集散開第二十八頁，共三十二頁，2022年，8月28日

Rh血型

1.導致Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陽性的原因(1)直抗(DAT)陽性；(2)標本抗凝不當，受檢過程中出現(xiàn)凝血或出現(xiàn)纖維蛋白凝塊，誤判為陽性；(3)受檢細胞與抗血清孵育的時間過長；(4)定型血清中含有事先未被檢測的其他特異性抗體，造成假陽性定型結果；第二十九頁，共三十二頁，2022年，8月28日(5)多凝集細胞，造成定型的假陽性，如MM。(6)檢定用器材或抗體被污染，造成假陽性。2.導致Rh血型鑒定可