遺傳病的中醫(yī)治療培訓(xùn)課件

遺傳病的中醫(yī)治療[教學(xué)要求]1．掌握：遺傳病治療的基本方法；基因治療的基本概念、策略、途徑和方法。飲食治療、藥物治療的一般原則。2．了解：遺傳病的手術(shù)治療、藥物治療；基因治療目前存在的問(wèn)題和基因治療的臨床應(yīng)用。2遺傳病的中醫(yī)治療手術(shù)治療1藥物治療2飲食治療3基因治療43遺傳病的中醫(yī)治療第1節(jié)手術(shù)治療4遺傳病的中醫(yī)治療遺傳病組織器官已出現(xiàn)損傷，用外科手術(shù)對(duì)病損器官進(jìn)行修復(fù)、切除或組織器官移植，可以有效改善某些癥狀。一、手術(shù)修復(fù)二、手術(shù)去除三、組織器官移植5遺傳病的中醫(yī)治療Wilson病致病機(jī)制p104銅

銅藍(lán)蛋白

P型銅轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶

×

從膽汁排出

儲(chǔ)存于血漿、組織

銅肝細(xì)胞聚集

銅入血，沉積于腦、腎、角膜等組織致病

肝細(xì)胞壞死

6遺傳病的中醫(yī)治療第2節(jié)藥物治療7遺傳病的中醫(yī)治療對(duì)癥治療原則：補(bǔ)其所缺、去其所余1、補(bǔ)其所缺（補(bǔ)充療法）針對(duì)病因，補(bǔ)充其所缺乏的物質(zhì)。如：補(bǔ)充代謝物、輔助因子、激素、酶等。8遺傳病的中醫(yī)治療甲型血友病——抗血友病球蛋白垂體性侏儒癥者——生長(zhǎng)激素家族性甲狀腺腫——甲狀腺制劑免疫缺陷病人——免疫球蛋白先天性睪丸發(fā)育不全——睪酮先天性性腺不全患者——雌激素9遺傳病的中醫(yī)治療對(duì)癥治療原則：補(bǔ)其所缺、去其所余1、補(bǔ)其所缺（補(bǔ)充療法）針對(duì)病因，補(bǔ)充其所缺乏的物質(zhì)。如：補(bǔ)充代謝物、輔助因子、激素、酶等。2、去其所余（排除療法）針對(duì)病因，排除其所堆積的物質(zhì)。10遺傳病的中醫(yī)治療用理化方法將多余物質(zhì)清除或排除：如：用青霉胺或鋅劑加速銅離子的清除來(lái)改善肝豆?fàn)詈俗冃缘陌Y狀；血漿置換和血漿過(guò)濾治療家族性高膽固醇血癥。用代謝抑制劑降低代謝缺陷病的代謝率：如：別嘌呤醇可抑制黃嘌呤氧化酶，減少尿酸形成，治療原發(fā)性痛風(fēng)和自毀容貌綜合征。減少對(duì)所忌物質(zhì)的吸收：如：苯酮尿癥患者口服苯丙氨酸氨酶膠囊，使苯丙氨酸轉(zhuǎn)化成苯丙烯酸而減少吸收。

11遺傳病的中醫(yī)治療第3節(jié)飲食治療12遺傳病的中醫(yī)治療一、飲食控制的一般原則

禁其所忌（1）制定特殊食譜半乳糖血癥患兒（避免乳類(lèi)食品的攝入）家庭性高膽固醇血癥患者（低膽固醇飲食治療）苯丙酮尿癥患兒（低苯丙氨酸奶粉及飲食）（2）減少患者對(duì)所忌物質(zhì)的吸收家族性高膽固醇血癥患者（服用糠麩）13遺傳病的中醫(yī)治療二、把握時(shí)機(jī)

（一）飲食治療越早越好應(yīng)盡量在損害發(fā)生前進(jìn)行治療。（二）飲食治療適應(yīng)病情飲食治療應(yīng)隨病情的發(fā)展而有所改變以有效的控制疾病。14遺傳病的中醫(yī)治療第4節(jié)基因治療15遺傳病的中醫(yī)治療基因治療（genetherapy）：是運(yùn)用DNA重組技術(shù)修復(fù)患者細(xì)胞中有缺陷的基因，使細(xì)胞恢復(fù)正常功能而達(dá)到治療遺傳病的目的。16遺傳病的中醫(yī)治療一、基因治療的策略和途徑（一）基因治療的策略2基因置換

3基因增補(bǔ)4基因干預(yù)1基因修正17遺傳病的中醫(yī)治療一、基因治療的策略和途徑（二）基因治療的途徑1生殖細(xì)胞基因治療

2體細(xì)胞基因治療18遺傳病的中醫(yī)治療二、基因治療的方法直接體內(nèi)療法：將目的基因直接導(dǎo)入體內(nèi)有關(guān)的組織或器官，使其進(jìn)入相應(yīng)的細(xì)胞并進(jìn)行表達(dá)。（未廣泛運(yùn)用）間接體內(nèi)療法：將目的基因?qū)牒线m的靶細(xì)胞，經(jīng)過(guò)篩選并增殖，回輸給患者，使該基因在患者體內(nèi)有效表達(dá)相應(yīng)產(chǎn)物。（常用方式）19遺傳病的中醫(yī)治療間接體內(nèi)療法的基本過(guò)程（一）克隆正常基因

（二）靶細(xì)胞的選擇（三）目的基因的轉(zhuǎn)移

（四）基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選（五）基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的鑒定（六）回輸體內(nèi)

20遺傳病的中醫(yī)治療方法：人工合成、從基因組或通過(guò)RNA反轉(zhuǎn)錄等方法獲得。間接體內(nèi)療法（一）克隆正?；?/p>

21遺傳病的中醫(yī)治療靶細(xì)胞（targetcell）是指接受轉(zhuǎn)移基因的體細(xì)胞。靶細(xì)胞應(yīng)滿足下列條件：①易于取材；②具有增殖優(yōu)勢(shì)，生命周期長(zhǎng)，便于體外培養(yǎng)；③便于進(jìn)行遺傳技術(shù)操作，易受外源DNA轉(zhuǎn)化；④安全回輸；⑤靶向性。目前使用得較多的是造血干細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和肌細(xì)胞等。

（二）靶細(xì)胞的選擇間接體內(nèi)療法22遺傳病的中醫(yī)治療

基因轉(zhuǎn)移是指將外源基因?qū)氚屑?xì)胞內(nèi)。1、化學(xué)法應(yīng)用磷酸鈣沉淀法改變細(xì)胞膜通透性，以加強(qiáng)細(xì)胞從培養(yǎng)液中攝取DNA的能力。轉(zhuǎn)移效率低，成功率約為1/102～103。（三）目的基因的轉(zhuǎn)移間接體內(nèi)療法23遺傳病的中醫(yī)治療2、物理法（1）電穿孔法借助電流穿擊靶細(xì)胞膜使其對(duì)DNA通透性增加。有可能使細(xì)胞受到損傷。（2）顯微注射法用顯微技術(shù)向細(xì)胞核內(nèi)直接注射外源基因。主要應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉(zhuǎn)移

24遺傳病的中醫(yī)治療2、物理法（3）微粒子轟擊法利用亞微粒鎢或金吸附DNA，包裹形成微粒，利用基因槍技術(shù)使微粒高速進(jìn)入靶細(xì)胞。間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉(zhuǎn)移25遺傳病的中醫(yī)治療2、物理法（1）化學(xué)法（2）顯微注射法（3）微粒子轟擊法間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉(zhuǎn)移26遺傳病的中醫(yī)治療3、載體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移載體能將外源基因特異的轉(zhuǎn)移至靶細(xì)胞。分為：病毒載體非病毒載體間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉(zhuǎn)移27遺傳病的中醫(yī)治療病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時(shí)具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。

病毒介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移(virusmediatedgenetransfer)是指以病毒為載體，將外源性目的基因通過(guò)基因重組技術(shù)，組裝到病毒載體上，并使重組病毒感染受體宿主細(xì)胞，完成基因轉(zhuǎn)移。病毒載體間接體內(nèi)療法28遺傳病的中醫(yī)治療病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時(shí)具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。

病毒載體間接體內(nèi)療法種類(lèi)：（1）反轉(zhuǎn)錄病毒載體（2）腺病毒（3）腺病毒相關(guān)病毒（腺伴隨病毒）29遺傳病的中醫(yī)治療病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時(shí)具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。

病毒載體間接體內(nèi)療法優(yōu)點(diǎn)：轉(zhuǎn)染效率高缺點(diǎn)：存在疫原性、細(xì)胞毒作用、攜帶外源基因的大小受限、病毒滴度不易提高。30遺傳病的中醫(yī)治療非病毒載體間接體內(nèi)療法缺點(diǎn)：轉(zhuǎn)染效率較低優(yōu)點(diǎn)：安全、制備簡(jiǎn)單和攜帶外源基因較大。

種類(lèi)：（1）脂質(zhì)體（2）真核細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒載體（3）非生物性聚合載體（4）人工染色體31遺傳病的中醫(yī)治療間接體內(nèi)療法1、克隆正?；?/p>

2、靶細(xì)胞的選擇3、目的基因的轉(zhuǎn)移

4、基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選5、基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的鑒定6、回輸體內(nèi)

32遺傳病的中醫(yī)治療四、基因治療的臨床運(yùn)用1.腺苷脫氨酶缺乏嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷?。╝denosinedeaminase-deficientseverecombinedimmunodeficiency，

ADA-SCID）33遺傳病的中醫(yī)治療重癥聯(lián)合免疫缺陷（Severecombinedimmunodeficiencydisease，簡(jiǎn)稱(chēng)SCID），患者缺乏正常人體免疫功能，其染色體上編碼腺苷脫氨酶（簡(jiǎn)稱(chēng)ADA）的基因發(fā)生突變所致。由于ADA是嘌呤代謝中的一種酶，該基因缺陷將導(dǎo)致患者身體細(xì)胞中脫氧腺苷的累積，達(dá)到高濃度時(shí)脫氧腺苷將對(duì)免疫系統(tǒng)細(xì)胞（如T-細(xì)胞和B-細(xì)胞）產(chǎn)生毒性。AshantiDiSilva,thefirstpersontobetreatedbygenetherapy.

34遺傳病的中醫(yī)治療將正常ADA基因與反轉(zhuǎn)錄病毒載體相連，構(gòu)建重組病毒表達(dá)載體。從患體體內(nèi)分離有免疫缺陷的T淋巴細(xì)胞。用重組病毒感染體外培養(yǎng)的T淋巴細(xì)胞，使正常ADA基因插入到T淋巴細(xì)胞基因組中。培養(yǎng)細(xì)胞并確認(rèn)該基因正常表達(dá)。將含有正?；虻腡淋巴細(xì)胞回輸?shù)交颊叩墓撬杞M織中。經(jīng)5-6個(gè)月治療，患者體內(nèi)T淋巴細(xì)胞的數(shù)量恢復(fù)到正常水平，體內(nèi)ADA酶幾乎達(dá)到正常水平，免疫功能得到恢復(fù)。1990年，美國(guó)第一次對(duì)SCID病人作基因治療，其步驟為：35遺傳病的中醫(yī)治療四、基因治療的臨床運(yùn)用2、血友病B

血漿中缺乏凝血Ⅸ因子所致我國(guó)人體基因治療第一成功的個(gè)例子。1991,薛京倫(復(fù)旦大學(xué))攜帶人FⅨ因子cDNA

的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(HBSF-FⅨ)皮膚成纖維細(xì)胞FactorIX:5%36遺傳病的中醫(yī)治療細(xì)胞因子1984～1987年，淋巴激活的殺傷細(xì)胞(LAK)3、腫瘤的基因治療1986年，腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)結(jié)合IL-21991年，腫瘤壞死因子(TNF)治療黑色素瘤四、基因治療的臨床運(yùn)用37遺傳病的中醫(yī)治療細(xì)胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運(yùn)用1992年，單純庖疹病毒（HSV）-胸腺嘧啶激酶（TK）和GCV（Ganciclovir藥物）“自殺基因”38遺傳病的中醫(yī)治療細(xì)胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運(yùn)用“自殺基因”腫瘤抑制基因pRB,p53,p16,p21,p2739遺傳病的中醫(yī)治療細(xì)胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運(yùn)用“自殺基因”腫瘤抑制基因應(yīng)用納米顆粒傳遞基因阻斷腫瘤新生血管生成2002年，美國(guó)Hood等人應(yīng)用陽(yáng)離子納米顆粒轉(zhuǎn)導(dǎo)目的基因，阻斷腫瘤組織新生血管生成。40遺傳病的中醫(yī)治療123存在的問(wèn)題導(dǎo)入基因的持續(xù)表達(dá)導(dǎo)入基因的高效表達(dá)安全性問(wèn)題41遺傳病的中醫(yī)治療小結(jié)掌握：基因治療的定義、策略和途徑基因治療的基本方法：克隆正?；蚍椒ā⒒蜣D(zhuǎn)移方法和載體、靶細(xì)胞選擇。藥物治療和飲食治療的基本原則了解：目前基因治療存在的問(wèn)題42遺傳病的中醫(yī)治療復(fù)習(xí)思考題1、傳統(tǒng)的遺傳病治療包括哪幾個(gè)方面，各有什么優(yōu)缺點(diǎn)？2、何謂基因治療？目的基因轉(zhuǎn)移有哪幾種方法？各有何優(yōu)缺點(diǎn)？3、反轉(zhuǎn)錄病毒和腺病毒作為基因治療的載體各有何優(yōu)缺點(diǎn)？43遺傳病的中醫(yī)治療唇裂手術(shù)前手術(shù)后45遺傳病的中醫(yī)治療多指并指合并多指

46遺傳病的中醫(yī)治療基因修正（genecorrection）：指通過(guò)特定方法，將致病基因的突變堿基序列糾正,對(duì)突變DNA進(jìn)行原位修復(fù)。操作困難。47遺傳病的中醫(yī)治療基因置換：在原位定點(diǎn)導(dǎo)入外源正常基因，代替突變基因的直接療法。目的：糾正突變基因，進(jìn)行精確的原位修復(fù)而不涉及基因組其他任何的改變。是理想的基因治療策略，已用于的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，但尚未應(yīng)用于臨床，基因治療的遠(yuǎn)期目標(biāo)。

48遺傳病的中醫(yī)治療基因增補(bǔ)（基因添加）：非定點(diǎn)導(dǎo)入外源正常基因，而沒(méi)有真正去除或修復(fù)突變基因。外源正?；?qū)塍w內(nèi)后，可代替突變基因表達(dá)具有正常功能的蛋白而發(fā)揮治療作用，屬于間接治療。增：向靶細(xì)胞中導(dǎo)入其原本不表達(dá)的基因；補(bǔ)：導(dǎo)入突變基因的正?；?。目前應(yīng)用最為廣泛和深入的一種方法，并已付諸臨床實(shí)踐。

49遺傳病的中醫(yī)治療基因干預(yù)：用特定的方式抑制某個(gè)基因的表達(dá)或破壞某個(gè)基因使之不能表達(dá)，以達(dá)到治療疾病的目的。常用方法：應(yīng)用反義核苷酸、核酶或RNA干擾技術(shù)抑制體內(nèi)過(guò)度表達(dá)的基因。靶基因一般都是過(guò)度表達(dá)的癌基因或是病毒基因。50遺傳病的中醫(yī)治療生殖細(xì)胞基因治療(germcellgenetherapy)將正?；蜣D(zhuǎn)移到患者的精子、卵子或受精卵校正遺傳缺陷，使其發(fā)育成正常個(gè)體。特點(diǎn)：能將新的正常基因傳給下一代，從而使遺傳病得到根治，有害基因不再在人群中散布。

理想，但目前尚難在人類(lèi)實(shí)現(xiàn)。51遺傳病的中醫(yī)治療體細(xì)胞基因治療(somaticcellgenetherapy)將基因轉(zhuǎn)移到個(gè)體體細(xì)胞基因組上的隨機(jī)座位，使該基因有效表達(dá)其，達(dá)到治療的目的。特點(diǎn)：能使患者癥狀消失或緩解，但有害基因仍能傳給后代。

是目前人類(lèi)基因治療的基本方案52遺傳病的中醫(yī)治療脂質(zhì)體法用人工脂質(zhì)體包裝外源基因，通過(guò)脂質(zhì)體與靶細(xì)胞融合或直接注射到病灶區(qū)，將外源基因?qū)搿?yōu)點(diǎn)：①無(wú)毒性和免疫原性，②不在體內(nèi)堆積，③大小適合，④可適應(yīng)不同的細(xì)胞膜和生理要求。

缺點(diǎn)：轉(zhuǎn)染效率低，瞬時(shí)表達(dá)。53遺傳病的中醫(yī)治療真核細(xì)胞