儀器分析實驗設計

大黃中游離蒽醌含量測定【前言】RheumpalmatumRheumtanguticumMaxim.exRheumoficinale《本草綱目》：“下痢赤白，里急腹痛，小便淋瀝，實熱燥結，潮熱澹語，黃疽，諸火瘡”?？梢姡簏S有許多功效，臨床應用也十分廣泛。大黃的有效成分研究發(fā)現(xiàn)其主要有效成分為蒽醌衍生物,3%～5%,,部分游離,大部分與葡萄糖結合成蒽甙。游離型的蒽醌衍生物有大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素甲醚和大黃酚等,含量較少,為抗菌成分。結合性蒽醌衍生物為游離類的葡萄糖甙或雙蒽酮甙,為大黃的主要瀉下成分,其中雙蒽酮甙瀉下作用最強。雙蒽醌甙有番瀉甙ABCD,尚含有鞣質,5%,斂作用的有效成分。大黃的藥理活性現(xiàn)代藥理學研究表明，大黃有如下等方面的藥理活性：對血液和代謝系統(tǒng)的影響止血作用：大黃能降低毛細血管通透性，改善脆性，促進骨髓制造血小板，縮短凝血時間。1～4g范圍內，隨著劑量增大，有作用增強的趨勢。瀉下作用大黃是中醫(yī)中傳統(tǒng)的瀉劑之一,大黃素和番瀉苷等是致瀉的主要成分。大黃致瀉的主要作用部位在大腸,瀉下特點是不妨礙小腸對營養(yǎng)物質的吸收,其作用機制可能有腸壁神經(jīng)叢的參與,為結腸內注入大黃酸引起的瀉下可被預先注入4%利多卡因所抑制,也可能通過腸黏膜內CAMP含量增高而促進機體對腸道內水和電解質的分泌。清熱解毒抗菌消炎急性胰腺炎、痢疾、傷寒、癰腫、咽喉腫痛、口舌生瘡、牙痛、目赤等。這是保肝利膽作用。大黃能解除微循環(huán)障礙,恢復組織細胞的正常代謝和血液供應,促使肝細胞再生,而且還可通過瀉下作用使滯留在腸道的病原菌毒素以及腸源性有毒物質排泄加速,吸收減少,從而降低肝病時內毒素血癥對機體的損害。同時大黃還有利膽的作用,增加肝膽汁流量,促進排膽,松弛奧狄括約肌,結合大黃廣譜的抗菌、消炎、抗毒作用,可用于治療膽系感染、膽石癥?；钚猿煞譁y定方法AB的高效液相分析方法。此外研究較深入的還有中藥指紋圖譜法，包括高效液相指紋圖譜、毛細管區(qū)帶電泳指紋圖譜與質譜技術的聯(lián)用。-薄層色譜掃描法測定大黃中大G薄層上用正己烷-乙酸乙酯-甲酸5：0.25)展開劑對生大黃、熟大黃及其配方顆粒中的大黃素進行展開，并使用雙波長薄層掃描儀測定其含量紫外分光光度法色譜方法通常需要。紫外分光光度法：色譜方法通常需要較長的分離分析時間，與之相比光譜法具對藥材整體性考察的手段。毛細管電泳是近些年發(fā)展起來的一種常用于中草藥活性組分分離(MECC))55種蒽醌類化合物能夠完全分離。高效液相色譜法：高效液相色譜法具有靈敏度準確度和精密度高的特點，是近指紋圖譜法：與西藥不同，大部分中藥的化學成分不完全明確，其中已知的化2000UPLC至今，以其高分離度、高速度、高靈HPLCUPLC應用。光光度法操作簡便;近紅外漫反射模型建立的中藥質量控制體系以其快速無損;別提供了廣闊的應用前景;在中藥質量評價和控制方面得到了大量應用，其聯(lián)用方法也為特征峰的識別提供了關鍵技術;毛細管指紋圖譜較高效液相指紋圖譜特征性更高，前景廣闊;超會得到廣泛應用。【實驗材料】儀器LC-20AT，LC-2010CHT蒸發(fā)儀，5ml移液管，10ml容量瓶，100ml容量瓶，分液漏斗，錐形瓶等藥品藥材大黃藥材，大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素、大黃酚、大黃素甲醚標準品，甲醇溶液，0.1％磷酸溶液，8%鹽酸溶液，三氯甲烷【色譜條件】儀器：島津LC-20AT，LC-2010CHT色譜柱：DiamosilC18(5u,150×4.6mm)；流動相：甲醇-0.1％磷酸溶液(85:15)；流速：1ml/min；檢測波長：254nm理論板數(shù)按大黃素峰計算應不低于3000?！緦嶒灢襟E】對照品溶液的制備 精密稱取大黃素對照品大黃酸對照品蘆薈大黃素對照品大黃酚對照品各大黃素甲醚對照品分別加甲醇定容至分別精密量取上述對照品溶液各2ml，混勻，即(每1ml中含蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚各16μg，含大黃素甲醚8μg)。供試品溶液的制備取本品粉末(過四號篩)0.15g，精密稱定，置具塞錐25ml1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液5ml8%10ml210ml1小時，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘渣加甲醇使溶解，轉移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法10注入液相色譜儀，測定，即得。(C15H10O4)和大黃素甲醚（C16H12O5）的總量不1.5％?！居懻摗课覀?/p>