HPV與宮頸癌和HPV的基因芯片檢測(cè)

子宮頸癌與人乳頭瘤病毒（HPV）的研究進(jìn)展精選ppt一、宮頸癌的概述及其病因?qū)W研究進(jìn)展二、HPV的生物學(xué)研究三、宮頸癌的早期篩查四、宮頸病變的治療精選ppt一、宮頸癌的概述及其病因?qū)W研究進(jìn)展精選ppt宮頸癌－－最常見的婦科惡性腫瘤

據(jù)世界范圍內(nèi)統(tǒng)計(jì)，每年大約有50萬左右的宮頸癌新發(fā)病例，占所有癌癥新發(fā)病例的5%，其中80%的病例發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家。我國(guó)每年宮頸癌新發(fā)病例約13.15萬，占世界宮頸癌新發(fā)病例總數(shù)的28.8%，發(fā)病率僅次于乳腺癌位居第二。隨著篩查制度的建立，世界宮頸癌的發(fā)病率和死亡率已經(jīng)大幅下降。我國(guó)由70年代的10.28/10萬下降到90年代的3.25/10萬，但在高發(fā)病區(qū)，死亡率仍高居不下。地區(qū)死亡率(/10萬）世界8.00中國(guó)3.25北京2.54上海3.8山西陽城36.00精選ppt患病年齡更趨于年輕化（發(fā)病年齡提前到45歲），發(fā)病史縮短。如吉林省在80年代統(tǒng)計(jì)宮頸癌患者中小于35歲的婦女占4.8％，而2000年已經(jīng)占到34.1％精選ppt子宮頸癌的危險(xiǎn)因素：行為危險(xiǎn)因素：如性生活過早、多個(gè)性伴侶、多孕多產(chǎn)、社會(huì)經(jīng)濟(jì)地位低下、營(yíng)養(yǎng)不良及性混亂等；生物學(xué)因素：如細(xì)菌、病毒和衣原體等各種微生物的感染。目前僅有少量研究表明宮頸癌可能存在著家族聚集現(xiàn)象。精選ppt宮頸癌的生物學(xué)病因研究進(jìn)展：

*早在十九世紀(jì)四十年代，一位意大利醫(yī)生RegoniStern最早提出結(jié)婚與否與宮頸癌的發(fā)生可能有關(guān)；

*60－70年代，人們的主要研究對(duì)象是HSV,HCMV等病原體；

*1974年zurHausen首次提出HPV感染與宮頸腫瘤有密切關(guān)系；

*1977年Laverty在電鏡中觀察到宮頸癌活檢組織中存在人乳頭狀瘤病毒（Humanpapillomavirus，HPV）顆粒；

*1995年IARC專題討論會(huì)：高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌的主要病因。

---99.7％的宮頸癌患者都能發(fā)現(xiàn)高危型HPV感染。

精選ppt二、HPV的生物學(xué)研究精選ppt人乳頭瘤病毒（HumanPapillomaviruses,HPV）雙鏈DNA無包膜病毒環(huán)狀DNA，約8Kb；病毒顆粒直徑為50～55nm；依靠宿主細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯。

HPV病毒電鏡圖精選ppt

型別：已發(fā)現(xiàn)100多種不同的亞型（如果DNA序列同源性小于90％，則定為新的亞型）。其中超過35種可以感染人類的生殖器官，約30種與腫瘤有關(guān)。

1）低危型：宮頸上皮內(nèi)低度病變，引起外生殖器濕疣等良性性病（HPV6、11、42）；

2）高危型：宮頸上皮內(nèi)高度病變，與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)（HPV16、18、31、33、35、39

、45、51、52、53、56、58、59、66及68）；

3）中間型：不確定型。

分布：有些亞型和地區(qū)、宮頸癌的病理類型有關(guān)。

HPV45在非洲西部很常見，HPV39和59在美洲中部和南部常見，HPV52，58在中國(guó)常見。

在宮頸鱗狀上皮細(xì)胞癌中以HPV16（占51％），在腺癌和腺鱗癌中HPV18分別占56％和39％。型別與分布精選ppt表HPV型別與宮頸病變常見HPV型別宮頸病變6，11濕疣，CINI16CIN,18CIN30，40，58，69CIN31，33，35，39CIN45，51，52，56CINI42，43，44CINI53正常宮頸上皮54尖銳濕疣55鮑溫樣丘疹病59VIN61，62，64，67VaIN66鱗癌70外陰乳頭狀瘤精選pptHPV感染率最常見的低危型（HPV6、11）最常見的高危型（HPV16、18、31、33、45、58）HPV16HPV18HPV45HPV31HPV33Other宮頸癌患者中高危型HPV感染率精選ppt表不同HPV亞型的檢出頻率統(tǒng)計(jì)表

注：1.本表統(tǒng)計(jì)樣本數(shù)為1153例，其中陽性樣本數(shù)為119例；由于檢測(cè)樣本中存在復(fù)合感染，故亞型的檢出頻率＝（該亞型的檢出次數(shù)/所有亞型的檢出次數(shù)）×100％，所有亞型檢出次數(shù)為226。2.本表統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)由深圳市計(jì)生中心提供，HPV分型基因檢測(cè)試劑由亞能生物技術(shù)（深圳）有限公司提供。精選pptHPV基因結(jié)構(gòu)按功能可分為早期區(qū)(E區(qū))、晚期區(qū)(L區(qū))和非編碼區(qū)（LCR）三個(gè)區(qū)域。E區(qū)分為E1～E7開放閱讀框架，主要編碼與病毒復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、調(diào)控和細(xì)胞轉(zhuǎn)化有關(guān)的蛋白（HPV無E3）。L區(qū)分L1和L2，分別編碼主要衣殼蛋白和次要衣殼蛋白。LCR是E區(qū)與L區(qū)間-6.4～1.0Kb的DNA片段，可負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的調(diào)控精選pptHPV的致癌機(jī)理HPV以游離態(tài)感染上皮細(xì)胞后，可以持續(xù)存在于染色體外，不引起任何病變，或引起良性病變和低度病變，如尖銳濕疣或輕度不典型增生等。而癌變則與病毒DNA整合入宿主染色體密切相關(guān)。高危型HPVDNA鏈通常在E1或E2的開放讀碼框內(nèi)斷裂，使HPVDNA整合入染色體脆弱區(qū)。E6和E7具有促進(jìn)和維持整合狀態(tài)的功能。HPVE6蛋白間接抑制p53活性，阻礙細(xì)胞對(duì)DNA損傷的反應(yīng)。（負(fù)向調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化）HPVE7蛋白與pRb結(jié)合后使其功能失活，改變細(xì)胞周期的正常調(diào)控。精選pptHPV感染途徑及危險(xiǎn)因素感染途徑：主要為性傳播和直接皮膚接觸特別案例：母親分娩過程中傳播至嬰兒的口腔危險(xiǎn)因素：1、年齡因素：30歲以后HPV感染率下降；2、性行為的影響：初次性交年齡越小，性伴侶數(shù)量越多，感染率越高；3、避孕方法：尚無一致意見；4、免疫抑制狀態(tài)使HPV感染的危險(xiǎn)性增加：如HIV感染后、腎移植等。精選ppt三、宮頸癌的早期篩查精選ppt未見上皮內(nèi)病變－－鱗狀上皮細(xì)胞異常－－腺上皮細(xì)胞異常ASC（AtypicalSquamousCells)：非典型鱗狀上皮細(xì)胞ASC-US（ASCofUndeterminedSignification）:意義不明確的非典型鱗狀上皮細(xì)胞ASC-H（ASCcannotexcludeHSIL）：意義不明確的非典型鱗狀上皮細(xì)胞不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變L-SIL（Low－gradeSquamousIntraepithelialLesion）：低度鱗狀上皮內(nèi)病變－－－HPV感染、CINIH-SIL（High－gradeSIL）：高度鱗狀上皮內(nèi)病變－－－與CINII、CINIII或原位癌含義一致SCC（SquamousCellCarcinoma）：鱗狀細(xì)胞癌AGC（AtypicalGlandularCells)：非典型腺上皮細(xì)胞AIS（AdenocarcinomaInSitu)：腺原位癌ACA（Adenocarcinoma）：腺癌組織學(xué)檢查的分類：CIN（CervicalIntraepithelialNeoplasm)：宮頸上皮內(nèi)瘤變CINI：輕度不典型增生CINII：中度不典型增生CINIII：重度不典型增生、原位癌2001年版TBS（TheBethesdaSystem)報(bào)告分類中常見的細(xì)胞學(xué)診斷宮頸癌前病變的幾個(gè)術(shù)語解釋：精選ppt正常婦女HPV暴露主要是性傳播感染幾率：>40％HPV年齡<30歲一過性，80％平均8個(gè)月年齡>30歲平均8~24個(gè)月CINI（組織學(xué)）CINII/III（組織學(xué)）無細(xì)胞學(xué)改變/HPV消除子宮頸浸潤(rùn)癌機(jī)體免疫機(jī)制輔助致癌因素圖HPV感染與宮頸病變的自然過程潛伏感染期亞臨床感染期臨床癥狀期HPV相關(guān)腫瘤期5－10年平均8~12年精選ppt病變進(jìn)展（惡化）持續(xù)（穩(wěn)定）消退（逆轉(zhuǎn)）級(jí)別單純HPVCINICINIICINIII風(fēng)險(xiǎn)率(%)5153045持續(xù)率(%)15373556消退率(%)80574332表CIN級(jí)別發(fā)展為CC的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估說明：CIN級(jí)別越高，其消退和逆轉(zhuǎn)的機(jī)會(huì)越小。精選ppt

臨床提示，從HPV的持續(xù)感染到一般的宮頸癌前病變并最終發(fā)展為宮頸癌大約需要5-10年。因此，必須采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防和篩查措施，才能夠阻止宮頸癌的發(fā)生并有望最終根治。篩查是早診早治關(guān)鍵精選ppt篩查間隔時(shí)間（年）1233～55～10>10陽性病變風(fēng)險(xiǎn)系數(shù)122.5349備注：1～3年篩查間隔比較安全，隨著篩查間隔的增加，風(fēng)險(xiǎn)大幅度增加。表：篩查間隔時(shí)間與陽性病變風(fēng)險(xiǎn)系數(shù)表精選ppt表：不同的篩查頻率，可以降低的宮頸癌的累積發(fā)病率

篩查頻率累積發(fā)病率的降低（％）每年篩查一次90-93每?jī)赡旰Y查一次86-91每三年篩查一次75-88一生篩查5次61-74一生篩查3次35-55一生篩查2次29-42一生篩查一次17-32摘自：GoldieSJ,etal.2001.13；篩查策略所應(yīng)用方法包括：1-VIA檢查，2-HPV檢測(cè)，3-巴氏涂片。精選ppt篩查對(duì)象：三年以上性行為或21歲以上有性行為的婦女。起始年齡：經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)：25～30歲，經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)：35～40歲，高危人群起始年齡應(yīng)相應(yīng)提前。終止年齡：65歲以上危險(xiǎn)性極低。篩查間隔：每年一次，若連續(xù)兩次HPV和細(xì)胞學(xué)篩查均為正常，可延長(zhǎng)篩查間隔時(shí)間至5～8年。中國(guó)癌癥研究基金會(huì)（CCRF）宮頸癌篩查及早診早治指南精選ppt中國(guó)癌癥研究基金會(huì)（CCRF）

宮頸癌篩查及早診早治指南篩查方案：基本方案：肉眼觀察＋冰醋酸試驗(yàn)（碘液試驗(yàn)）一般方案：papsmear+HPV檢測(cè)最佳方案：TCT+HPV檢測(cè)隨訪對(duì)象：細(xì)胞學(xué)低度病變、CINI以上者、“特殊職業(yè)”婦女人群、年齡30歲以上的高危HPV感染者，每年定期隨訪檢查。注意事項(xiàng)：1、月經(jīng)來潮后10～18天為最佳檢查時(shí)間2、檢查前48h內(nèi)不要做陰道沖洗，不用使用陰道內(nèi)用藥物3、檢查前48h內(nèi)不要行性生活精選ppt精選ppt宮頸癌的常規(guī)臨床檢測(cè)方法臨床檢查：如肉眼觀察、陰道鏡等

操作簡(jiǎn)便，但準(zhǔn)確率和特異性有待提高（50-70％）細(xì)胞學(xué)檢測(cè)：觀察宮頸上皮細(xì)胞的變異，常見方法有：巴氏涂片、LCT、TCT等

1）長(zhǎng)期宮頸糜爛可導(dǎo)致宮頸上皮細(xì)胞形態(tài)變異，但非HPV引起的細(xì)胞形態(tài)異常與宮頸癌病變沒有直接聯(lián)系。2）在感染早期，細(xì)胞往往不會(huì)出現(xiàn)形態(tài)變化，但此時(shí)HPV對(duì)細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)的損傷可能已經(jīng)產(chǎn)生。

病毒學(xué)檢測(cè)：HPVDNA檢測(cè)（PCR方法），常見方法有：基因芯片分型檢測(cè)、熒光PCR等特異性強(qiáng)、靈敏度高，操作簡(jiǎn)便快捷(98%)精選pptHPV基因分型快速診斷試劑應(yīng)用膜雜交技術(shù)建立的敏感、特異、簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法，可同時(shí)對(duì)23種HPV亞型(18種高危型及5種低危型)進(jìn)行檢測(cè)。精選pptHPV基因分型快速診斷試劑操作流程采集樣本提取DNAPCR擴(kuò)增雜交顯色精選ppt結(jié)果判斷檢測(cè)結(jié)果：HPV16、HPV43檢測(cè)結(jié)果：HPV33、HPV35精選ppt

（一）宮頸病變的篩查1、HPV檢測(cè)的最大優(yōu)勢(shì)之一在于發(fā)現(xiàn)高危型HPV陽性而細(xì)胞學(xué)涂片正常的婦女，因?yàn)檫@一人群中10％會(huì)在四年內(nèi)發(fā)展成CINⅢ。2、篩查并濃縮高風(fēng)險(xiǎn)人群，便于進(jìn)行有效監(jiān)控，早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌。3、HPV檢測(cè)的陰性預(yù)測(cè)值為99％，可將篩查間隔延長(zhǎng)至3年一次，大大地降低了檢查成本。敏感性：88－100％特異性：98％陰性預(yù)測(cè)值：幾乎100％HPV檢測(cè)的臨床意義精選ppt圖：德、法、英三個(gè)國(guó)家研究數(shù)據(jù)總概HPV（＋）是宮頸病變的重要依據(jù)，持續(xù)的HPV感染是CINII/CINIII的重要條件。精選ppt（二）ASCUS和低度病變的分流1、HPV檢測(cè)通過排除可疑的或低度病變，從而提高診斷的可信度，降低漏診的風(fēng)險(xiǎn)。

2、把具有潛在宮頸癌風(fēng)險(xiǎn)的婦女從低風(fēng)險(xiǎn)的婦女中區(qū)分出來，