基因工程細(xì)胞工程胚胎工程復(fù)習(xí)

專(zhuān)題一基因工程1、基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)和鑒定（核心）（三個(gè)方法）（三種受體）（三個(gè)步驟P14）2、目的基因獲取方法從基因文庫(kù)中獲取利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因人工合成目的基因3、基因工程用到的工具酶限制酶和DNA連接酶E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶5、基因表達(dá)載體的組成啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因4、基因工程用到的運(yùn)載體質(zhì)粒（最常用）、λ噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒6、導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法(1)植物細(xì)胞雙子葉植物單子葉植物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法(2)動(dòng)物細(xì)胞顯微注射法受體細(xì)胞常用：受精卵(3)微生物細(xì)胞用Ca2+處理細(xì)胞，成為感受態(tài)細(xì)胞?；蚬こ碳?xì)胞工程（核移植技術(shù)）7、成功表達(dá)的結(jié)果：轉(zhuǎn)基因小牛合成人的血清白蛋白。專(zhuān)題二細(xì)胞工程一、植物細(xì)胞工程1、去壁：酶解法（纖維素酶和果膠酶）2、原生質(zhì)體融合：物理法：電激、振動(dòng)、離心化學(xué)法：聚乙二醇3、融合完成的標(biāo)志：產(chǎn)生新的細(xì)胞壁4、理論基礎(chǔ)：細(xì)胞膜的流動(dòng)性植物細(xì)胞的全能性5、意義：克服不同物種間的遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙。植物組織培養(yǎng)技術(shù)脫分化再分化若生產(chǎn)人工種子，則培養(yǎng)到

階段；若提取細(xì)胞產(chǎn)品（如紫草素），則一般培養(yǎng)到

階段；如培育新個(gè)體，則應(yīng)該培養(yǎng)到

階段。6、關(guān)于植物組織培養(yǎng)技術(shù)：植物組織培養(yǎng)的目的不同，培養(yǎng)階段也就不同：胚狀體愈傷組織試管苗下圖為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖。下列說(shuō)法不正確的是（

）A.植物體細(xì)胞雜交的最大優(yōu)點(diǎn)是可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B.雜種細(xì)胞經(jīng)過(guò)④和⑤過(guò)程可以培育成雜種植株說(shuō)明雜種細(xì)胞具有全能性C.盡管愈傷組織可以進(jìn)行光合作用，但其培養(yǎng)基中仍需要糖類(lèi)、氨基酸等有機(jī)營(yíng)養(yǎng)D.若A的基因型為Rr，B的基因型為Yy，則最終形成的雜種植株的基因型為RrYyC二、動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞核移植生產(chǎn)單克隆抗體（基礎(chǔ)）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1、取材：3、組織處理：4、原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、接觸抑制剪碎胰蛋白酶或膠原蛋白酶幼齡的動(dòng)物組織5、培養(yǎng)條件無(wú)菌無(wú)毒、動(dòng)物血清、CO22、理論基礎(chǔ)：細(xì)胞增殖動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)1、取材：卵母細(xì)胞原因：卵母細(xì)胞體積大，易于操作；含有促使細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì).2、去核方法：顯微操作去核法動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)3、理論基礎(chǔ)：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性4、生殖方式：無(wú)性生殖5、用核移植得到的動(dòng)物成為克隆動(dòng)物。1、該過(guò)程中使用到了哪些生物技術(shù)手段？2、通過(guò)該過(guò)程可得出什么結(jié)論？3、克隆羊的性別與哪只羊相同？為什么？4、克隆羊的性狀主要與哪只羊相同？5、在操作過(guò)程中為什么要用去核的卵細(xì)胞做受體細(xì)胞？6、克隆羊的繁殖過(guò)程應(yīng)屬于哪種方式?轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)（制備單克隆抗體）1、誘導(dǎo)方法：物理方法化學(xué)方法生物方法:與植物同滅活的病毒注射抗原B淋巴細(xì)胞2、理論基礎(chǔ)：細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖3、兩次篩選的目的第一次：篩選出雜交瘤細(xì)胞第二次：篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞4、雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)既能無(wú)限繁殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。5、的特點(diǎn)特異性強(qiáng)、靈敏度高，能大量生產(chǎn)（制備）。比較項(xiàng)目

植物細(xì)胞工程

動(dòng)物細(xì)胞工程

原理①植物組織培養(yǎng)──細(xì)胞全能性

②植物體細(xì)胞雜交──細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜流動(dòng)性①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)──細(xì)胞增殖

②體細(xì)胞核移植──動(dòng)物細(xì)胞核的全能性

③單克隆抗體的制備──細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖

④動(dòng)物細(xì)胞融合──細(xì)胞膜流動(dòng)性工具酶纖維素酶、果膠酶胰蛋白酶、膠原蛋白酶動(dòng)、植物細(xì)胞工程技術(shù)手段的原理和工具酶如圖表示單克隆抗體的制備過(guò)程，請(qǐng)回答下列

問(wèn)題：（1）細(xì)胞A具有產(chǎn)生

的功能。細(xì)胞B的突出特點(diǎn)是

。誘導(dǎo)細(xì)胞A和B融合的誘導(dǎo)劑通常是

或聚乙二醇。

（2）若細(xì)胞A的基因型為AA，細(xì)胞B的基因型為BB，生產(chǎn)的目標(biāo)應(yīng)該是基因型為

的細(xì)胞?？赏ㄟ^(guò)特定的

培養(yǎng)基將所需的融合細(xì)胞篩選出來(lái)。特異性抗體能夠無(wú)限增殖滅活的病毒AABB選擇（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有

。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5％CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是

。

（4）單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，具有

等特點(diǎn)。單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”，可明顯減少用藥量和副作用，原因是

。

動(dòng)物血清維持培養(yǎng)液的pH特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量生產(chǎn)單克隆抗體能夠和癌細(xì)胞特異性結(jié)合胚胎移植專(zhuān)題三胚胎工程1、卵母細(xì)胞的采集注射促性腺激素超數(shù)排卵屠宰場(chǎng)卵巢獲取借助儀器從活體卵巢直接吸取需要體外培養(yǎng)不需要體外培養(yǎng)減數(shù)第二次分裂中期2、供體和受體的處理供體兩次激素處理超數(shù)排卵處理