器官移植及其免疫學(xué)檢驗(yàn)

器官移植及其免疫學(xué)檢驗(yàn)第一頁，共一百零四頁，2022年，8月28日返回總目錄目錄

移植排斥反應(yīng)的類型和機(jī)制

1組織配型及配型方法2避免排斥反應(yīng)的免疫學(xué)檢驗(yàn)和意義

3移植后的免疫監(jiān)測(cè)4移植的結(jié)局及對(duì)策5第二頁，共一百零四頁，2022年，8月28日移植(transplantation):指用自體或異體的正常細(xì)胞、組織或器官置換病變的或功能缺損的細(xì)胞、組織與器官，以維持和重建機(jī)體生理功能的治療方法。供者（donor）受者（recipient）移植物（graft）移植排斥反應(yīng)（graftrejection）移植第三頁，共一百零四頁，2022年，8月28日自體移植異種移植同種異型移植同種同型移植移植的類型第四頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

目的：

救治末期器官衰竭、惡性血液病、腫瘤以及某些遺傳病。要求：

盡可能讓移植物能在受體體內(nèi)生存或暫存常時(shí)間。問題：排斥反應(yīng)。移植的目的和要求第五頁，共一百零四頁，2022年，8月28日早期有關(guān)器官移植的嘗試和研究第六頁，共一百零四頁，2022年，8月28日有關(guān)排斥反應(yīng)的研究第七頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

首次植皮第5天首次植皮第12天再次植皮第5天第八頁，共一百零四頁，2022年，8月28日AlexisCarrel(France)

NobelPrizeinPhysiologyorMedicine1912從事有關(guān)血管縫合以及臟器移植方面的研究與移植免疫發(fā)展有關(guān)的諾貝爾獲獎(jiǎng)?wù)叩诰彭摚惨话倭闼捻摚?022年，8月28日PeterBrianMedawa（UK）

NobelPrizeinPhysiologyorMedicine19601945年，Medawar提出移植排斥是免疫反應(yīng)

與移植免疫發(fā)展有關(guān)的諾貝爾獲獎(jiǎng)?wù)叩谑?，共一百零四頁?022年，8月28日特異性免疫耐受的形成第十一頁，共一百零四頁，2022年，8月28日J(rèn)eanDausset(France)NobelPrizeinPhysiologyorMedicine1980；鑒定人白細(xì)胞抗原(HLA)

系統(tǒng)

與移植免疫發(fā)展有關(guān)的諾貝爾獲獎(jiǎng)?wù)叩谑?，共一百零四頁?022年，8月28日組織相容性受遺傳基因控制；組織相容性基因（MHC）為多態(tài)性基因，其所編碼的同種異型抗原（主要組織相容性抗原）誘導(dǎo)移植排斥反應(yīng)；關(guān)于MHC基因及其編碼分子的研究揭開了免疫應(yīng)答理論的新篇章。第十三頁，共一百零四頁，2022年，8月28日GertrudeB.Elion(1/3),GeorgeH.Hitchings(1/3)

NobelPrizeinPhysiologyorMedicine1988Discoveriesofimportantprinciplesfordrug

treatment-免疫抑制劑的發(fā)現(xiàn)與移植免疫發(fā)展有關(guān)的諾貝爾獲獎(jiǎng)?wù)叩谑捻摚惨话倭闼捻摚?022年，8月28日J(rèn)osephE.Murray(1/2)NobelPrizeinPhysiologyorMedicine1990Discoveriesconcerningorgantransplantationinthetreatmentofhumandisease

與移植免疫發(fā)展有關(guān)的諾貝爾獲獎(jiǎng)?wù)叩谑屙摚惨话倭闼捻摚?022年，8月28日實(shí)施第一例人同卵孿生兄弟間的腎移植如果采用藥物抑制免疫系統(tǒng)，在非親緣關(guān)系的人之間進(jìn)行器官移植是可能的第十六頁，共一百零四頁，2022年，8月28日異種之間的移植無一例外地要失?。煌环N系內(nèi)不相關(guān)的個(gè)體之間的移植常常要失??；自體移植總是能成功；同種異體的受體對(duì)首次移植物排斥時(shí)間較長(zhǎng)，但再次接受同一供體的移植物，則迅速被排斥；受體與供體間的血緣關(guān)系愈近，移植愈可能成功。

移植排斥反應(yīng)的規(guī)律第十七頁，共一百零四頁，2022年，8月28日宿主抗移植物反應(yīng)(host-versus-graftReaction,HVGR)，見于一般器官移植，包括超急性、急性、慢性排斥反應(yīng)移植物抗宿主反應(yīng)(hraft-versus-hostReaction,GVHR)，主要發(fā)生在骨髓移植和其他免疫細(xì)胞移植第一節(jié)移植排斥反應(yīng)的類型和機(jī)制一、同種異型移植排斥的分類及效應(yīng)機(jī)制第十八頁，共一百零四頁，2022年，8月28日超急性排斥反應(yīng)（hyperacuterejection）指移植器官與受者的血管接通后立即或1～2天內(nèi)發(fā)生的排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)間

移植器官與受者血管接通后數(shù)分鐘至1～2天內(nèi)發(fā)生1.超急性排斥反應(yīng)第十九頁，共一百零四頁，2022年，8月28日病理變化

血管內(nèi)凝血缺血、變性和壞死發(fā)生機(jī)制

以體液免疫為主，受者體內(nèi)預(yù)存供者的抗體抗ABO血型抗原的抗體抗HLA抗原的抗體抗VEC抗原的抗體第二十頁，共一百零四頁，2022年，8月28日急性排斥反應(yīng)（acuterejection）指在移植后數(shù)天至兩周左右出現(xiàn)的免疫排斥反應(yīng)，一旦發(fā)生進(jìn)展迅速

發(fā)生時(shí)間

移植后數(shù)天至2周左右出現(xiàn)，80%～90%發(fā)生于移植后一個(gè)月內(nèi)2.急性排斥反應(yīng)第二十一頁，共一百零四頁，2022年，8月28日病理變化

①急性體液性排斥反應(yīng)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷為主要表現(xiàn)的急性血管炎②急性細(xì)胞性排斥反應(yīng)實(shí)質(zhì)細(xì)胞的壞死并伴有大量淋巴細(xì)胞、MΦ浸潤(rùn)第二十二頁，共一百零四頁，2022年，8月28日發(fā)生機(jī)制：以細(xì)胞免疫為主①移植物血管損傷針對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面同種異型抗原的IgG抗體補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用②實(shí)質(zhì)細(xì)胞損害CD4+Th1介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)CD8+Tc直接殺傷表達(dá)同種異型抗原的移植物細(xì)胞第二十三頁，共一百零四頁，2022年，8月28日慢性排斥反應(yīng)（chronicrejection）指發(fā)生于移植后數(shù)周、數(shù)月、甚至數(shù)年的免疫排斥反應(yīng)

發(fā)生時(shí)間

移植后數(shù)周、數(shù)月、甚至數(shù)年發(fā)生病理變化

間質(zhì)纖維化，移植物內(nèi)血管平滑肌細(xì)胞增生，血管硬化3.慢性排斥反應(yīng)第二十四頁，共一百零四頁，2022年，8月28日發(fā)生機(jī)制：體液免疫和細(xì)胞免疫共同作用（具體尚不完全清楚）①急性排斥反應(yīng)細(xì)胞壞死的延續(xù)和結(jié)果②炎癥性CD4+T細(xì)胞/MΦ相關(guān)的慢性炎癥③非免疫學(xué)因素誘發(fā)組織器官的退行性變第二十五頁，共一百零四頁，2022年，8月28日移植排斥反應(yīng)的分類和特點(diǎn)類型反應(yīng)時(shí)間反應(yīng)機(jī)制超急性術(shù)后數(shù)分鐘至幾小時(shí)受者體內(nèi)事先存在的天然抗體加急性1~5天T淋巴細(xì)胞急性7~14天T淋巴細(xì)胞慢性數(shù)月至數(shù)年抗體、補(bǔ)體、內(nèi)皮細(xì)胞增生第二十六頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

移植物抗宿主反應(yīng)（Graft-versus-hostreaction，GVHR）是由移植物中的抗原特異性淋巴細(xì)胞識(shí)別宿主組織抗原而發(fā)生的一種排斥反應(yīng)發(fā)生條件①宿主與移植物之間組織相容性不合②移植物中含有足夠數(shù)量的免疫細(xì)胞③宿主處于免疫無能或免疫功能嚴(yán)重缺陷狀態(tài)移植物抗宿主病4.移植物抗宿主反應(yīng)第二十七頁，共一百零四頁，2022年，8月28日移植物抗宿主病第二十八頁，共一百零四頁，2022年，8月28日移植物抗宿主病第二十九頁，共一百零四頁，2022年，8月28日GVHR發(fā)生情況一旦發(fā)生一般難以逆轉(zhuǎn)，導(dǎo)致移植失敗，嚴(yán)重?fù)p傷患者，甚至死亡

主要見于：骨髓移植（主要）、胸腺移植、脾移植、新生兒接受大量輸血多數(shù)情況下由次要組織相容性抗原引發(fā)第三十頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

MHC(HLA)配型與移植排斥反應(yīng)02040608010012006122436術(shù)后時(shí)間存活率供者與受者相差一個(gè)HLA基因供者與受者相差兩個(gè)HLA基因返回章目錄第三十一頁，共一百零四頁，2022年，8月28日第二節(jié)組織配型及配型方法

引起移植排斥的抗原為移植抗原（transplantationantigen），即組織相容性抗原，是移植排斥的分子基礎(chǔ)。組織相容性（移植）抗原（histocompatibility(transplantation)antigens）:

兩個(gè)遺傳不同的個(gè)體之間進(jìn)行移植（grafted）時(shí)，存在于組織或細(xì)胞上的決定排斥反應(yīng)（rejection）的抗原。第三十二頁，共一百零四頁，2022年，8月28日主要組織相容性抗原

（majorhistocompatibility(MHC)antigens）：能夠引起急性移植排斥反應(yīng)的同種異型抗原稱為主要組織相容性抗原，在排斥反應(yīng)中是最重要的。主要組織相容性復(fù)合體

（MHCcomplex）：?jiǎn)我蝗旧w上編碼MHC抗原的一組基因（groupofgenesonasinglechromosomeencodingtheMHCantigens）。第三十三頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

人白細(xì)胞抗原

HLA

(humanleukocyteantigens)：人的MHC

抗原（MHCantigensofman）

首先上在白細(xì)胞表面檢測(cè)到

(firstdetectedonleukocytes)。

H-2

抗原

（H-2antigens）：小鼠的MHC抗原（MHC

antigensofmouse）。第三十四頁，共一百零四頁，2022年，8月28日一、HLA分型第三十五頁，共一百零四頁，2022年，8月28日HLA抗原命名（第12屆國(guó)際會(huì)議）HLA-AHLA-BHLA-CHLA-DRHLA-DQHLA-DPA1B5B78Cw1DR1DQ1DPw1A2B7B47Cw2DR103DQ2DPw2A203B703B48Cw3DR2DQ3DPw3A210B8B49(21)Cw4DR3DQ4DPw4A3B12B50(21)Cw5DR4DQ5(1)DPw5A9B13B51(5)Cw6DR5DQ6(1)DPw6A10B14B5102Cw7DR6DQ7(3)A11B15B5103Cw8DR7DQ8(3)A19B16B52(5)Cw9(w3)DR8DQ9(3)A23(9)B17B53Cw10(w3)DR9A24(9)B18B54(22)DR10A2403B21B55(22)DR11(5)A25(10)B22B56(22)DR12(5)A26(10)B27B57(17)DR13(6)A28B2708B58(17)DR14(6)A29(19)B35B59DR1403A30(19)B37B60(40)DR1404A31(19)B38(16)B61(40)DR15(2)A32(19)B39(16)B62(15)DR16(2)A33(19)B3901B63(15)DR17(3)A34(10)B3902B64(14)DR18(3)A36B40B65(14)DR51A43B4005B67DR52A66(10)B41B70DR53A68(28)B42B71(70)A69(28)B44(12)B72(70)A74(19)B45(12)B73A80B46B75(15)B76(15)B81B77(15)Bw4Bw6

注：括號(hào)中為寬型抗原第三十六頁，共一百零四頁，2022年，8月28日歷年發(fā)現(xiàn)HLA抗原和基因的情況第三十七頁，共一百零四頁，2022年，8月28日HLA命名第三十八頁，共一百零四頁，2022年，8月28日MHC的一些性質(zhì)性質(zhì)Ⅰ類抗原

Ⅱ類抗原同種移植物排斥作用大小++++++誘發(fā)產(chǎn)生體液抗體++++++++MLR的刺激作用+++++GVHD++++++CML的靶細(xì)胞+++++Ir基因功能+++++靶細(xì)胞溶解的限制作用+++++抗原遞呈的限制作用+++++組織中的分布所有體細(xì)胞B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等人類HLA基因A、B、CDR、DP、DQ物種間的交叉反應(yīng)常見少見注：MLR為混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)；GVHD為移植物抗宿主反應(yīng)；CML為細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞溶解；Ir為免疫反應(yīng)。第三十九頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

多態(tài)性現(xiàn)象（polymorphism)是指一隨機(jī)婚配的群體中，染色體同一基因座有兩種以上基因型，即可編碼二種以上的產(chǎn)物。HLA復(fù)合體是迄今已知人體最復(fù)雜的基因復(fù)合體，有高度的多態(tài)性。（一）多態(tài)性第四十頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

位于一對(duì)同源染色體上對(duì)應(yīng)位置的一對(duì)基因稱為

等位基因（allele）；由于群體中的突變，同一座的基因系列稱為復(fù)等位基因。HLA復(fù)合體的每一座存在為數(shù)眾多的復(fù)等位基因，由于各個(gè)座位基因是隨機(jī)組合的，故人群中的基因型可達(dá)108之多。A5A10B40B16A1A2B8B35甲（6#）乙（6#）A5，A10，B40，B16復(fù)等位基因第四十一頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

一對(duì)等位基因同為顯性稱為共顯性。HLA復(fù)合體中每一個(gè)等位基因均為共顯性，從而大大增加了人群中的HLA表型的多樣性，達(dá)到107數(shù)量級(jí)。因此除了同卵雙生者外，無關(guān)個(gè)體間HLA型別完全相同的可能性極小。A2A10B40B16A1A2B8B35HLAmolecule：A1，A2，B8，B35

甲甲乙乙HLAmolecule：A2，A10，B40，B16

共顯性表達(dá)第四十二頁，共一百零四頁，2022年，8月28日HLA的單元型遺傳第四十三頁，共一百零四頁，2022年，8月28日①PCR-RFLP（restrictionfragmentlengthpolymorphism）②PCR-SSO（sequencespecificoligonucleotideprobes）③PCR-SSP（sequencespecificprimers）④PCR-SSCP（single-strandconformationpolymorphism

）（二）HLADNA分型技術(shù)第四十四頁，共一百零四頁，2022年，8月28日基本原理：根據(jù)HLA核苷酸堿基序列的多態(tài)性和已知的DNA序列，設(shè)計(jì)一系列等位基因型別特異性順序引物。引物的3’-端堿基根據(jù)多態(tài)性序列與其嚴(yán)格互補(bǔ)。因此，每一型別都具有特定的引物對(duì)相對(duì)應(yīng)。通過特定的PCR反應(yīng)體系擴(kuò)增各等位基因的型別特異性DNA片段，產(chǎn)生相對(duì)應(yīng)的特異性擴(kuò)增產(chǎn)物條帶。PCR-SSP分型法第四十五頁，共一百零四頁，2022年，8月28日HLA-DRB1等位基因PCR-SSP分型引物序列

Table1.SenseprimersquenceofHLA-DRB1allelestypingbyPCR-SSP

HLA-DRB1

Allele

Primersequence5’end

Primersequence3’end

0101

TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT

CTGCACTGTGAAGCTCTCAC

1501

TCCTGTGGCAGCCTAAGAG

CCGCGCCTGCTCCAGGAT

1601

TCCTGTGGCAGCCTAAGAG

AGGTGTCCACCGCGGCG

0301

TACTTCCATAACCAGGAGGAGA

TGCAGTAGTTGTCCACCCG

0405

GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA

CTGCACTGTGAAGCTCTCAC

1101

GTTTCTTGGAGTACTCTACGTC

CTGGCTGTTCCAGTACTCCT

1202

AGTACTCTACGGGTGAGTGTT

CACTGTGAAGCTCTCCACAG

1301

TACTTCCATAACCAGGAGGAGA

CCCGCTCGTCTTCCAGGAT

1401

GTTTCTTGGAGTACTCTACGTC

TCTGCAATAGGTGTCCACCT

0706

CCTGTGGCAGGGTAAGTATA

CCCGTAGTTGTGTCTGCACAC

0803

AGTACTCTACGGGTGAGTGTT

CTGCAGTAGGTCTCCACCAG

第四十六頁，共一百零四頁，2022年，8月28日PCR-SSP分型法操作步驟

1．基因DNA提取

2．引物混合物的組成

3．TaqDNA聚合酶

4．?dāng)U增條件的選擇

5．電泳

6．結(jié)果判斷第四十七頁，共一百零四頁，2022年，8月28日1：陰性對(duì)照；2：為DR3；3：為DR11；4：為DR4；5:為DR1；6：為DR12；7：為DR15；8：為DR12；9：為Mark。

圖：HLA-DR1、DR15陽性的雜合子電泳圖譜第四十八頁，共一百零四頁，2022年，8月28日PCR-SSO分型法PCR基因片段擴(kuò)增后利用已知的序列特異性寡核苷酸探針，通過雜交的方法進(jìn)行擴(kuò)增片段的分析鑒定。探針與PCR產(chǎn)物在一定條件下雜交具有高度的特異性，嚴(yán)格遵循堿基互補(bǔ)的原則。探針可用放射性同位素標(biāo)記，通過放射自顯影的方法檢測(cè)，也可用非放射性標(biāo)記如地高辛、生物素、過氧化物酶等進(jìn)行相應(yīng)的標(biāo)記檢測(cè)。

基本原理第四十九頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

PCR-SSO技術(shù)分辨率高，特異性強(qiáng)，可區(qū)分只差一個(gè)核苷酸的序列，其檢出范圍寬，是HLA基因分型技術(shù)中最好的一種。

方法評(píng)價(jià)第五十頁，共一百零四頁，2022年，8月28日多熒光微珠免疫分析

是將標(biāo)記有生物素的序列特異性引物分別擴(kuò)增HLA-A、B、DRB1等基因座位的特異性片段,擴(kuò)增產(chǎn)物與事先包被在不同顏色的磁珠上的已知的寡核苷酸探針進(jìn)行雜交,經(jīng)沖洗將沒有雜交上的DNA洗脫,與探針結(jié)合的標(biāo)記有生物素的DNA片段與熒光素標(biāo)記的親和素結(jié)合，多熒光微珠在Luminex100流式細(xì)胞儀上進(jìn)行判讀結(jié)果。基本原理第五十一頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

同其他技術(shù)相比較，其最獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)是可在幾秒內(nèi)同時(shí)檢測(cè)上千個(gè)分子,對(duì)HLA多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行低、中、高分辨率的分型。方法評(píng)價(jià)第五十二頁，共一百零四頁，2022年，8月28日二、紅細(xì)胞血型抗原人紅細(xì)胞血型抗原是重要的組織相容性抗原，移植前應(yīng)檢測(cè)供者與受者的血型是否相符，最佳選擇是二者血型相同，或至少符合輸血原則。輸血原則：O型受者只接受O型移植物；A型受者接受A型或O型；B型受者接受B型或O型；AB型受者接受范圍較廣。Rh抗原應(yīng)相配。第五十三頁，共一百零四頁，2022年，8月28日三、交叉配型將受者和供者淋巴細(xì)胞進(jìn)行混合培養(yǎng)（mixedlymphocyteculture,MLC），由于淋巴細(xì)胞表面富有HLA-I和HLA-II分子，若供、受者HLA抗原差異較大，彼此間將產(chǎn)生較大的刺激，淋巴細(xì)胞產(chǎn)生較強(qiáng)的增殖反應(yīng)，細(xì)胞增殖反應(yīng)的水平與供、受者間組織相容性程度呈負(fù)相關(guān)。第五十四頁，共一百零四頁，2022年，8月28日混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)(體外移植模型)返回章目錄第五十五頁，共一百零四頁，2022年，8月28日第三節(jié)避免排斥反應(yīng)的免疫學(xué)檢驗(yàn)及意義一、HLA抗原配型

已知移植器官長(zhǎng)期存活與供受者HLA抗原密切相關(guān)。器官的質(zhì)量和免疫抑制劑等主要影響移植器官的短期成活（1年），而組織配型在移植物長(zhǎng)期存活中起關(guān)鍵作用。第五十六頁，共一百零四頁，2022年，8月28日“骨髓庫”構(gòu)建原理第五十七頁，共一百零四頁，2022年，8月28日ABO血型系統(tǒng)也是主要組織相容性抗原。當(dāng)供者與受者的ABO血型不符時(shí)，移植物的血循環(huán)重建后會(huì)即刻導(dǎo)致嚴(yán)重的排斥反應(yīng)而使移植失敗。

其它紅細(xì)胞血型抗原系統(tǒng)（如Rh抗原）也能影響移植物的存活時(shí)間。mH抗原主要是由Y染色體基因編碼的產(chǎn)物，屬于次要組織相容性抗原。二、其它組織相容抗原配型第五十八頁，共一百零四頁，2022年，8月28日三、新的組織配型策略1.器官移植的供者和受者如重要的HLA基因座的等位基因完全匹配，還有其它的HLA基因座的等位基因未匹配，并不能因此完全避免排斥反應(yīng)。第五十九頁，共一百零四頁，2022年，8月28日2.構(gòu)成同種異體移植免疫排斥反應(yīng)的靶分子的氨基酸殘基由數(shù)量較少的HLA亞型決定，其有可能成為組織器官移植配型的新的生物學(xué)標(biāo)志。

3.不同器官、不同部位、不同個(gè)體HLA抗原在排斥反應(yīng)中所起的作用都不一樣。第六十頁，共一百零四頁，2022年，8月28日四、受者體內(nèi)抗HLA抗體篩選第六十一頁，共一百零四頁，2022年，8月28日如果受者體內(nèi)有抗供者的抗體，說明受者的免疫系統(tǒng)已被供者致敏，有產(chǎn)生超急性排斥反應(yīng)的可能，典型的方法是采用微量淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)。第六十二頁，共一百零四頁，2022年，8月28日試管法淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)操作步驟測(cè)定管陽性對(duì)照管陰性對(duì)照管受者血清（滴）1抗淋巴細(xì)胞血清（滴）1生理鹽水（滴）1供者淋巴細(xì)胞（滴）11137℃30分鐘補(bǔ)體（滴）55537℃60分鐘2%臺(tái)盼藍(lán)（滴）11137℃10分鐘第六十三頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

根據(jù)細(xì)胞死亡的百分比判斷抗原抗體反應(yīng)。曙紅染色，在相差倒置顯微鏡下：活細(xì)胞鏡下明亮，死細(xì)胞呈深暗色。應(yīng)用熒光法，在熒光相差倒置顯微鏡下：活細(xì)胞鏡下呈綠色，死細(xì)胞呈紅色，目前國(guó)際上通用NIH方法計(jì)分。結(jié)果判斷第六十四頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

分?jǐn)?shù)死亡率（%）定義10～10陰性211～20陰性421～50弱陽性651～80陽性881～100強(qiáng)陽性0無法判斷NIH計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)第六十五頁，共一百零四頁，2022年，8月28日NIH計(jì)分示意圖第六十六頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

將已知抗原的淋巴細(xì)胞與患者血清及補(bǔ)體孵育，判斷患者HLA抗體的特異性。特定細(xì)胞群反應(yīng)抗體（pannelreactionantibody,PRA）原理第六十七頁，共一百零四頁，2022年，8月28日1.PRA陽性（>10%）患者存活率明顯低于<10%。

2.首次移植的排斥，移植前輸血及妊娠是造成致敏的主要原因。

3.HLA配型可克服致敏對(duì)腎移植存活率的影響。

4.由于HLA抗體的波動(dòng)及輸血等因素的影響，腎移植前的患者應(yīng)定期檢測(cè)其血清HLA抗體，一般每個(gè)月至少一次。

5.PRA>10%患者，腎移植前一定要做交叉配型。

6.對(duì)于患者所具有的HLA抗體，應(yīng)避免用相應(yīng)抗原的供者器官。

7.通常移植后兩周，患者血清可產(chǎn)生HLA抗體。臨床意義第六十八頁，共一百零四頁，2022年，8月28日移植前必須做HLA配型：血清學(xué)或DNA。骨髓、腎移植對(duì)HLA配型較嚴(yán)格，心、肝等則不然。經(jīng)產(chǎn)婦、多次輸血或移植失敗者定期檢查HLA抗體，每月一次。術(shù)后兩周內(nèi)每日監(jiān)測(cè)。器官骨髓移植檢查項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用返回章目錄第六十九頁，共一百零四頁，2022年，8月28日第四節(jié)移植后的免疫監(jiān)測(cè)

淋巴細(xì)胞亞群的百分比和功能測(cè)定殺傷細(xì)胞活性測(cè)定免疫分子水平測(cè)定第七十頁，共一百零四頁，2022年，8月28日①用單克隆抗體免疫熒光法或流式細(xì)胞儀測(cè)定Ｔ細(xì)胞及其亞群。②淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)測(cè)定Ｔ細(xì)胞的功能狀態(tài)。（一）淋巴細(xì)胞亞群的百分比和功能測(cè)定方法第七十一頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

在急性排斥的臨床癥狀出現(xiàn)前1～5天，Ｔ細(xì)胞總數(shù)和CD4/CD8比值升高，一般認(rèn)為當(dāng)比值大于1.2時(shí)，預(yù)示急性排斥即將發(fā)生意義第七十二頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

取供者淋巴細(xì)胞滅活后作為刺激細(xì)胞，分離患者淋巴細(xì)胞作反應(yīng)細(xì)胞，將兩種細(xì)胞混合直接做單向混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)，測(cè)得的結(jié)果實(shí)際是特異性淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)，是Tc細(xì)胞和NK細(xì)胞共同作用的結(jié)果，進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)的意義更大。（二）殺傷細(xì)胞活性測(cè)定原理第七十三頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

包括血清中細(xì)胞因子、抗體、補(bǔ)體、可溶性HLA分子水平，細(xì)胞表面粘附分子、細(xì)胞因子受體表達(dá)等。（三）免疫分子水平測(cè)定血清抗體的檢測(cè)細(xì)胞因子測(cè)定其它指標(biāo)

第七十四頁，共一百零四頁，2022年，8月28日1

包括抗供者HLA抗體和血型抗體檢測(cè)；抗供者HLA抗體采用補(bǔ)體依賴微量淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)測(cè)定；血型抗體采用定量凝集試驗(yàn)完成。血清抗體檢測(cè)第七十五頁，共一百零四頁，2022年，8月28日2TNF-α、IL-1、IL-4、IL-6、IFN-γ等細(xì)胞因子水平在排斥反應(yīng)早期均有升高；急性排斥時(shí)IL-2R的血清含量升高；環(huán)孢崐霉素A腎毒性所致的腎功能減退時(shí)血清肌酐值增高，而IL-2R明顯降低。細(xì)胞因子測(cè)定第七十六頁，共一百零四頁，2022年，8月28日3

血清補(bǔ)體水平在排斥反應(yīng)早期升高，后期下降；溶菌酶活性升高；

C反應(yīng)蛋白增高。返回章目錄其它指標(biāo)第七十七頁，共一百零四頁，2022年，8月28日移植成功的關(guān)鍵標(biāo)準(zhǔn)是移植物能基本代替原有器官或組織的功能，從而恢復(fù)人體的正常處理狀態(tài)；

移植成功與否有4個(gè)決定因素：器官保存、外科技術(shù)、移植物選擇和免疫抑制。第五節(jié)移植的結(jié)局和對(duì)策第七十八頁，共一百零四頁，2022年，8月28日移植抗原檢測(cè)與配型免疫抑制劑的使用移植耐受的誘導(dǎo)排斥反應(yīng)的防治措施第七十九頁，共一百零四頁，2022年，8月28日HLA的檢測(cè)：基因檢測(cè)預(yù)存抗體檢測(cè)交叉配型移植抗原檢測(cè)與配型第八十頁，共一百零四頁，2022年，8月28日藥物：CsA、Fk506

單克隆抗體：抗CD3單抗免疫抑制劑的使用第八十一頁，共一百零四頁，2022年，8月28日體液免疫水平檢測(cè)細(xì)胞免疫水平檢測(cè)補(bǔ)體水平的檢測(cè)急性時(shí)相反應(yīng)物質(zhì)的檢測(cè)免疫抑制劑體內(nèi)藥物濃度檢測(cè)的臨床意義排斥反應(yīng)的免疫檢測(cè)第八十二頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

T細(xì)胞計(jì)數(shù)、自身淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化

CD4+/CD8+比值、sIL-2R

非特異性免疫監(jiān)測(cè)指標(biāo)特異性免疫監(jiān)測(cè)指標(biāo)MLR、CTL、ADCC

微細(xì)穿刺病理活檢第八十三頁，共一百零四頁，2022年，8月28日①去除移植物中的過路細(xì)胞；②血漿置換術(shù)去除受者針對(duì)血型抗原的抗體；③受者脾臟切除或放射線照射或免疫抑制劑。移植物和受者預(yù)處理第八十四頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

糖皮質(zhì)激素、環(huán)孢素A（cyclosporinA，CsA）、環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide，CP）、FK506和細(xì)胞毒性藥物等免疫抑制藥。生物制劑：ALG、ATG、抗CD3、抗CD4、抗CD8、抗TCR等。受者免疫抑制狀態(tài)的建立與維持第八十五頁，共一百零四頁，2022年，8月28日免疫耐受誘導(dǎo)和建立異卵雙生小牛（血型鑲嵌現(xiàn)象）第八十六頁，共一百零四頁，2022年，8月28日人工誘導(dǎo)免疫耐受實(shí)驗(yàn)第八十七頁，共一百零四頁，2022年，8月28日豬------人類移植組織和器官的最佳來源異種移植第八十八頁，共一百零四頁，2022年，8月28日異種移植排斥反應(yīng)類型

超急性排斥反應(yīng)遲發(fā)型異種排斥反應(yīng)慢性異種排斥反應(yīng)第八十九頁，共一百零四頁，2022年，8月28日

超急性排斥反應(yīng)（HARinxenotransplantation）

HAR是異種移植的首要障礙，是人體內(nèi)一些天然抗體（naturalantibody）所介導(dǎo)的。超急性排斥反應(yīng)第九十頁，共一百零四頁，2022年，8月28日這些天