化妝品中10種著色劑的檢測(cè)方法

化妝品中10種著色劑的檢測(cè)方法1適用范圍本方法規(guī)定了化妝品中CI16185、CI16255、CI16035、CI14700、CI45380、CI15510、CI59040、橙黃I、CI15985、CI10316著色劑含量的高效液相色譜測(cè)定方法和橙黃I的陽(yáng)性結(jié)果確證方法。本方法適用于胭脂、口紅、粉底、指甲油、睫毛膏、眼影等修飾類化妝品中CI16185、CI16255、CI16035、CI14700、CI45380、CI15510、CI59040、橙黃I、CI15985、CI10316含量的測(cè)定。2方法提要試樣經(jīng)甲醇超聲提取后，過(guò)0.45gm濾膜，采用高效液相色譜系統(tǒng)分離，二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，外標(biāo)法定量。本方法的檢出限、定量下限和取樣品5.0g時(shí)的檢出濃度、定量濃度見表1。表1各種著色劑的檢出限和檢出濃度著色劑著色劑索引CAS號(hào)檢出限定量下限檢出濃度定量濃度索引號(hào)通用中文名（gg）（gg）（gg/g）（gg/g）CI16185食品紅9915-67-30.31.00.060.20CI16255食品紅71390-65-40.31.00.060.20CI16035食品紅1725956-17-60.31.00.060.20CI14700食品紅14548-53-20.31.00.060.20CI45380酸性紅87548-26-50.31.00.060.20CI15510酸性橙7633-96-50.31.00.060.20CI59040溶劑綠76358-69-65.016.51.03.3——橙黃I523-44-45.016.51.03.3CI15985食品黃32783-94-015.050.03.010.0CI10316酸性黃1846-70-815.050.03.010.03試劑和材料除另有規(guī)定外，所用試劑均為色譜純，水為一級(jí)水。甲醇。四氫呋喃。乙酸銨：分析純。乙酸銨溶液（0.02mol/L）：稱取1.54g乙酸銨，加水至1000mL,溶解，經(jīng)0.45gm濾膜過(guò)濾。著色劑：CI16185、CI16255、CI16035、CI14700、CI45380、CI15510、CI59040、橙黃I、CI15985、CI10316,含量純度均大于等于90%。著色劑混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1.0mg/mL）：分別稱取著色劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（3.5）0.1g（精確至0.1mg）于100mL容量瓶中，甲醇（3.1）稀釋定容。著色劑混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液：分別移取一定量的著色劑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（3.6）,用甲醇配制成濃度為5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0、100.0gg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。4儀器與設(shè)備高效液相色譜儀：配二極管陣列檢測(cè)器。液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀：配電噴霧離子源。分析天平：感量分別為0.1mg和1.0mg。超聲波清洗器。渦旋混勻器。有機(jī)微孔濾膜：0.45gm。5分析步驟樣品預(yù)處理準(zhǔn)確稱取試樣5.0g（精確至1mg）于25mL比色管中，加入1.0ml四氫呋喃（3.2）,加入20.0mL甲醇（3.1）,在渦旋混勻器上高速振蕩5min,在超聲提取30min后，放置至室溫，用甲醇（3.1）定容，搖勻，過(guò)0.45gm濾膜，待測(cè)。色譜參考條件色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，250mmx4.6mm（內(nèi)徑），5gm；或相當(dāng)者；流動(dòng)相：A相（甲醇）+B相（0.02mol/L乙酸銨（用乙酸調(diào)節(jié)pH=4.0））,梯度洗脫程序見表2；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10匹；檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)：CI59040為245nm；CI16185、CI16255、CI16035、CI14700、CI45380為520nm；CI15985、CI10316、橙黃I、CI15510為480nm。表2梯度洗脫程序時(shí)間，min流動(dòng)相A(%)流動(dòng)相B(%)05957.5307015307025802030802030.159536595測(cè)定本方法采用外標(biāo)校準(zhǔn)曲線法定量測(cè)定。以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，作標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸方程，以試樣的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。計(jì)算試樣中各種著色劑的含量⑺g/g)，按式(1)計(jì)算：CxVw=m式中：w試樣中著色劑的含量，gg/g；C——試樣溶液中著色劑的含量，gg/mL;V——提取溶液體積，mL；m樣品質(zhì)量，g?；厥章屎途芏榷嗉覍?shí)驗(yàn)室驗(yàn)證的平均回收率為84.7%?104.6%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于6%(n=6)。8質(zhì)譜確證如檢出橙黃I陽(yáng)性樣品，需經(jīng)液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜法進(jìn)行陽(yáng)性確證。前處理過(guò)程見5.1色譜參考條件色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，100mmx2.1mm（內(nèi)徑），1.7|im,或相當(dāng)者;流動(dòng)相：A相：乙腈+B相20mmol/L乙酸銨水溶液（用氨水調(diào)節(jié)pH=8.0）；梯度洗脫程序見表3；表3梯度洗脫程序時(shí)間，min流動(dòng)相A（%）流動(dòng)相B（%）05953595630706.015958595流速：0.3mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：2匹。質(zhì)譜參考條件離子源：電噴霧離子源（ESI）;掃描方式：負(fù)離子掃描；監(jiān)測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）;干燥氣：n2；碰撞氣：Ar；霧化器溫度：250℃；霧化器氣流：3.0L/min；干燥氣氣流：15L/min；離子化電壓：3.5kv；脫溶劑氣溫度：250℃；加熱塊溫度：400℃；碰撞氣電壓：230KPa。

表4母離子、特征碎片離子、裂解電壓及碰撞能待測(cè)物/母離子（m/z）碎片離子（m/z）碰撞能（V）碎片離子豐度比17121橙黃I/3271563227.8%定性用液相色譜－三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行樣品定性測(cè)定，進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，如果樣品中橙黃I的色譜峰保留時(shí)間與濃度相近標(biāo)準(zhǔn)工作溶液相一致（變化范圍在±2.5%之內(nèi)），并且在扣除背景后樣品的質(zhì)譜圖中，所選擇的檢測(cè)離子均出現(xiàn)，而且樣品中所選擇的的離子對(duì)相對(duì)豐度與標(biāo)準(zhǔn)樣品的離子對(duì)相對(duì)豐度相一致（離子相對(duì)豐度比見表4），相對(duì)豐度偏差符合表5要求，則可以判斷樣品中存在橙黃I。表5相對(duì)離子豐度的最大允許偏差相對(duì)離子豐度>50%20%?50%10%?20%<10%允許相對(duì)偏差±20%±25%±30%±50%檢出限本方法對(duì)橙黃I的檢出濃度為1.0%/g。9色譜圖

o'ah"圖21o'ah"圖21(CI16185)：9.222min；2(CI16255)：12.364min；3(CI16035):21.280min；4(CI14700):24.863min；5(CI45380)：26.674min圖3混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在480nm下的高效液相色譜圖1(C110316)：13.610min；2(C115985):16.066min；3(橙黃I)：25.217min；4(CI15510)：5.02.50.00.51.01.52.02.53.03.54.04.55.05.02.50