有助于維持改善健康的血脂狀況功能評價方法

有助于維持/改善健康的血脂狀況功能試驗(yàn)項(xiàng)目、試驗(yàn)原則及結(jié)果判定降低血清中膽固醇被認(rèn)為是降低成人動脈粥樣硬化性心血管疾?。ˋSCVD）ASCVD試驗(yàn)項(xiàng)目根據(jù)受試樣品的作用機(jī)制，分成三種情況有助于維持正常血脂功能：降低血清總膽固醇和血清甘油三酯有助于維持正常血清膽固醇功能：單純降低血清膽固醇有助于維持正常血清甘油三酯功能：單純降低血清甘油三酯動物實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)體重血清總膽固醇血清甘油三酯血清高密度脂蛋白膽固醇血清低密度脂蛋白膽固醇人體試食試驗(yàn)觀察指標(biāo)血清總膽固醇血清甘油三酯血清高密度脂蛋白膽固醇1.3.4.血清低密度脂蛋白膽固醇試驗(yàn)原則動物實(shí)驗(yàn)和人體試食試驗(yàn)所列指標(biāo)均為必測項(xiàng)目。根據(jù)受試樣品的作用機(jī)制，可在動物實(shí)驗(yàn)的三個動物模型中任選一項(xiàng)。擇的項(xiàng)目應(yīng)與動物實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一致。60在進(jìn)行人體試食試驗(yàn)時，應(yīng)對受試樣品的食用安全性作進(jìn)一步的觀察。結(jié)果判定動物實(shí)驗(yàn)：混合型高脂血癥動物模型高膽固醇血癥動物模型高甘油三酯血癥動物模型有效：TC或非高密度脂蛋白膽固醇（Non-HDL-C，Non-HDL-C＝TC-HDL-C）降低>5％。無效：未達(dá)到有效標(biāo)準(zhǔn)者。61有助于維持正常血脂功能結(jié)果判定TC有助于維持正常血清膽固醇功能結(jié)果判定TC功能人體試食試驗(yàn)結(jié)果陽性。有助于維持正常血清甘油三酯功能結(jié)果判定助降低甘油三酯功能人體試食試驗(yàn)結(jié)果陽性。62輔助降低血脂功能評價方法分類的動物試驗(yàn)和人體試食試驗(yàn)。動物試驗(yàn)：分成三種情況：混合型高脂血癥動物模型高膽固醇血癥動物模型高甘油三酯血癥動物模型人體試食試驗(yàn)：根據(jù)試驗(yàn)的結(jié)果，分三種情況分別進(jìn)行判定：有助于維持正常血脂功能有助于維持正常血清膽固醇功能有助于維持正常血清甘油三酯功能動物實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)方法動物模型原理定受試樣品對脂質(zhì)的吸收、脂蛋白的形成、脂質(zhì)的降解或排泄產(chǎn)生的影響。儀器及試劑解剖器械、分光光度計，自動生化分析儀，膽固醇、膽酸鈉、血清總膽固醇TC、甘油三酯（TG、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C，高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）測定試劑盒。動物選擇及飼料健康成年雄性大鼠，適應(yīng)期結(jié)束時，體重200±20g，首選SD每組8－12只。63模型飼料混合型高脂血癥動物模型飼料在維持飼料中添加20.0％蔗糖、15％飽和脂肪酸、1.2％膽固醇、0.2％膽酸鈉，適量的酪蛋白、磷酸氫鈣、石粉等。除了粗脂肪外，模型飼料的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、鈣、磷、鈣：磷均要達(dá)到維持飼料的國家標(biāo)準(zhǔn)。高膽固醇血癥動物模型飼料在維持飼料中添加1.2％膽固醇、0.2％膽酸鈉，適量的酪蛋白、磷酸氫鈣、石粉等。除了粗脂肪外，模型飼料的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、鈣、磷、鈣：磷均要達(dá)到維持飼料的國家標(biāo)準(zhǔn)。高甘油三酯血癥動物模型在維持飼料中添加20.0％蔗糖、15％飽和脂肪酸、0.2％膽酸鈉，適量的酪蛋白、磷酸氫鈣、石粉等。除了粗脂肪外，模型飼料的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、鈣、磷、鈣：磷均要達(dá)到維持飼料的國家標(biāo)準(zhǔn)。劑量分組及受試樣品給予時間實(shí)驗(yàn)設(shè)三個劑量組、空白對照組和模型對照組，以人體推薦量的5倍為其中天，必要時可延長至45天。實(shí)驗(yàn)步驟適應(yīng)期：于屏障系統(tǒng)下大鼠喂飼維持飼料觀察5－7天。造模期按體重隨機(jī)分成2組，10只大鼠給予維持飼料作為空白對照組，40只給予模型飼料作為模型對照組。每周稱量體重1次。模型對照組給予模型飼料1－2周后（高甘油三酯血癥動物模型建議2-3周后（眼內(nèi)眥或尾部TCTG模型組隨機(jī)分成4組，即模型對照組和三個劑量組；分組后模型對照組與三個劑量組比較TC、TG、LDL-C、HDL-C差異均無顯著性。受試樣品給予64分組后，三個劑量組每天經(jīng)-口給予受試樣品，空白對照組和模型對照組同快分離血清，測定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。觀察指標(biāo)：TC、TG、LDL-C、HDL-C數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計算F值，36F<F0.05，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；F≥F0.05，P≤0.05，動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定：有助于維持正常血脂功能：于模型對照組，可判定該受試樣品輔助降低血脂功能動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。有助于維持正常血清膽固醇功能：有助于維持正常血清甘油三酯功能：65注意事項(xiàng)高甘油三酯血癥動物模型造模時間明顯長與其他模型。模型飼料的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、鈣、磷、鈣：磷均要達(dá)到維持飼料的國家標(biāo)準(zhǔn)。平會逐漸恢復(fù)正常水平，故模型飼料給予時間不能超過8周。敘利亞金黃地鼠，適應(yīng)期結(jié)束時，體重100±10g，每組8－12只。在維持飼料中添加0.2％膽固醇，其余同大鼠模型。人體試食試驗(yàn)檢驗(yàn)方法受試者納入標(biāo)準(zhǔn)在正常飲食情況下，嚴(yán)格禁食12-14小時后，檢測血脂水平，半年內(nèi)至少有兩次血脂檢測，血清總膽固醇在3.63-6.21mmol/L（或LDL-C在2.6-4.14mmol/，并且血清甘油三酯在≥1.70mmol/L，可作為有助于維持正常血脂水平LDL-C≦2.6mmol/L或mmol/L可作為有助于維持正常血清甘油三酯功能備選對象；血清總膽固醇在3.63-6.21mmol/L，并且血清甘油三酯＜1.70mmol/L，可作為有助于維持正常血象。原發(fā)性高脂血癥。獲得知情同意書，自愿參加試驗(yàn)者。排除受試者標(biāo)準(zhǔn)年齡在18歲以下或65歲以上者。妊娠或哺乳期婦女，過敏體質(zhì)或?qū)Ρ臼茉嚇悠愤^敏者。合并有心、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病，精神病患者。近兩周曾服用調(diào)脂藥物，影響到對結(jié)果的判斷者。住院的高血脂癥者。66未按規(guī)定食用受試樣品，或資料不全，影響功效或安全性判斷者。受試樣品的劑量和使用方法根據(jù)受試樣品推薦量和推薦方法確定。試驗(yàn)設(shè)計及分組要求飲食等，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)，以保證組間的可比性。每組受試者不少于50例。試45觀察指標(biāo)安全性指標(biāo)一般狀況（包括精神、睡眠、飲食、大小便、血壓等）血、尿、便常規(guī)檢查肝、腎功能檢查胸透、心電圖、腹部B超檢查（僅在試驗(yàn)開始前進(jìn)行）功效性指標(biāo)試驗(yàn)前后血清：總膽固醇（TC，低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C蛋白膽固醇HDL-C，甘油三酯（TG。有效性判定標(biāo)準(zhǔn)：有效：TG、TC或低密度脂蛋白膽固醇，降低率>5％。無效：未達(dá)到有效標(biāo)準(zhǔn)者。數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定凡自身對照資料可以采用配對tttCV>50％）的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。有效率及總有效率采用X2檢驗(yàn)進(jìn)行檢驗(yàn)。四格表總例數(shù)小于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1輔助降低混合型高血脂功能結(jié)果判定：67試食組自身