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特殊法提取軟骨組織中蛋白技術(shù)參數(shù)序號技術(shù)和性能參數(shù)名稱
招標參數(shù)和性能要求 備注本次課題項目的要求是提取正常膝關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)炎膝關(guān)節(jié)的軟骨中相關(guān)蛋白進行對比檢測分析;能夠借助低溫,使組織凍結(jié)達到一定的硬度適用范圍及用途 并通過冰起支撐作用進行切片,速凍可減小冰晶直徑,避免軟骨組織細胞損傷,能夠直接提取少,劑去除軟骨組織細胞外基質(zhì)的影響 為隊成員須由生物醫(yī)藥學科背景成員組成。生物研發(fā)相關(guān)檢測服務(wù),如細胞藥篩、體內(nèi)藥研發(fā)能力 效學評價、毒理藥效學檢測、病理學檢測、高通量//腺病毒載體開發(fā)、PDX模型藥效學評價等;研發(fā)檢測服務(wù);樣本處理4洗,去除軟骨板表面附著的骨組織和椎間盤纖維組織。所有過程在冰塊上低溫操作。5mmX5mm小方塊,4CpH,將軟骨組織塊稱重后置于冷凍切片機上-30C10^m蛋白質(zhì)提取按照比例添加蛋白提取液60min,6000Xg8min,于上清液中按加入實驗方法 西吡氯銨(CPC)通過CPC對糖蛋白的沉淀作用,可以有效去除溶液中的糖蛋白成分。合,10C條件16000Xg30min,取上、下二層透明液體之間的乳白色沉淀物,加入四倍體積的甲醇,再10C16000Xg30min蛋白質(zhì)含量鑒定品溶解,Bradford法測定蛋白質(zhì)濃度。11)并通過冰起支撐作用來進行切片,速凍可減小冰晶直徑,避免軟骨組織細胞損傷,能夠直接提取4技術(shù)參數(shù)50mg以下的軟骨組織內(nèi)蛋白;2)通過一些研究出的特殊技術(shù)手段和試劑去除軟骨組織細胞外基質(zhì)的影響,得到高純度的軟骨蛋白。1)5研究平臺2)冰凍切片機、電泳槽、液氮罐等常規(guī)實
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