《微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)》試題庫

《微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)》試題庫題組11.含C、H、O、N的大分子有機(jī)化合物可以作為()A.異養(yǎng)微生物的氮源、能源B.異養(yǎng)微生物的碳源、能源C.自養(yǎng)微生物的碳源、氮源、能源D.異養(yǎng)微生物的碳源、氮源、能源解析:含C、H、O、N的大分子有機(jī)化合物一般是蛋白質(zhì),因此可給異養(yǎng)微生物提供碳源、氮源、能源。答案:D2.培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是()①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線消毒⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤解析:培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌;培養(yǎng)皿能耐高溫,用干熱滅菌;接種環(huán)可通過灼燒滅菌達(dá)到迅速、徹底的滅菌效果;實(shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒,如用酒精擦拭雙手;空氣可用紫外線消毒;牛奶可采用巴氏消毒法,使?fàn)I養(yǎng)成分不被破壞。答案:A3.下列說法正確的是()A.為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)基質(zhì)的是固體培養(yǎng)基B.培養(yǎng)基只有兩類:液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí),可以形成肉眼可見的菌落解析:培養(yǎng)基是微生物生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì),根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)不同,可將培養(yǎng)基分成固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基;液體培養(yǎng)基不加凝固劑。答案:D4.三個(gè)培養(yǎng)皿中分別加入10mL不同的培養(yǎng)基,然后接種相同的大腸桿菌樣液。培養(yǎng)36h后,計(jì)算菌落數(shù),結(jié)果如表所示。下列選項(xiàng)錯(cuò)誤的是()培養(yǎng)皿培養(yǎng)基成分菌落數(shù)Ⅰ瓊脂、葡萄糖35Ⅱ瓊脂、葡萄糖、生長因子250Ⅲ瓊脂、生長因子0A.該實(shí)驗(yàn)采用的是固體培養(yǎng)基B.該實(shí)驗(yàn)可采用稀釋涂布平板法接種C.Ⅰ和Ⅲ對(duì)照,說明大腸桿菌的生長不需要生長因子D.Ⅱ和Ⅲ對(duì)照,說明大腸桿菌的生長需要糖類解析:培養(yǎng)基中均加入了瓊脂,故為固體培養(yǎng)基;微生物接種的方法很多,最常用的是平板劃線法或稀釋涂布平板法;Ⅰ組和Ⅲ組存在兩個(gè)變量,不能說明大腸桿菌的生長是否需要生長因子;Ⅱ組和Ⅲ組對(duì)照,自變量是葡萄糖的有無,說明大腸桿菌的生長需要糖類。答案:C5.細(xì)菌培養(yǎng)基常在121℃壓力鍋中滅菌。如果只是在100℃溫度下將細(xì)菌培養(yǎng)基滅菌,下列生物仍會(huì)存活的是()A.大腸桿菌B.一種青霉菌C.枯草芽孢桿菌的芽孢D.沙門氏菌解析:芽孢是為了抵御外界不良環(huán)境而形成的一種休眠體,100℃的溫度不能將其殺死。答案:C6.產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A.一個(gè)細(xì)菌、液體培養(yǎng)基B.許多細(xì)菌、液體培養(yǎng)基C.一個(gè)細(xì)菌、固體培養(yǎng)基D.許多細(xì)菌、固體培養(yǎng)基解析:菌落是一個(gè)細(xì)菌或幾個(gè)細(xì)菌的子細(xì)胞群體,形成于固體培養(yǎng)基上,有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu),肉眼可見。由一個(gè)細(xì)菌形成的菌落,形態(tài)結(jié)構(gòu)是相同的。如果有許多細(xì)菌形成的菌落,就可能不會(huì)有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài)。答案:C7.下列操作屬于滅菌的是()A.接種前用火焰灼燒接種環(huán)B.接種前用酒精擦拭雙手C.將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.接種在酒精燈的火焰旁完成解析:要正確區(qū)分滅菌、消毒和防止雜菌污染的措施。A屬于滅菌,B屬于消毒,C、D都是實(shí)驗(yàn)操作過程中防止雜菌污染的措施,與滅菌無關(guān)。答案:A8.利用稀釋涂布平板法純化的大腸桿菌,經(jīng)培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)了多種菌落,不可能的原因是()A.培養(yǎng)基制備過程中被雜菌污染B.接種過程中,無菌操作不符合要求C.系列稀釋時(shí),無菌操作不符合要求D.由大腸桿菌的種類不同造成的解析:大腸桿菌培養(yǎng)基中出現(xiàn)了多種菌落,說明污染了雜菌,雜菌可能來自培養(yǎng)基,也可能是因?yàn)椴僮鬟^程中無菌操作不符合要求。答案:D9.某同學(xué)為了純化大腸桿菌,配制了如下培養(yǎng)基,下列相關(guān)敘述不正確的是()牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方牛肉膏g蛋白胨gNaClg將上述物質(zhì)溶解后,添加蒸餾水,定容至1000mLA.該培養(yǎng)基配方成分中缺少凝固劑B.由該培養(yǎng)基配方可確認(rèn)所培養(yǎng)微生物的同化類型C.培養(yǎng)大腸桿菌,需進(jìn)行接種,接種環(huán)境須做到無菌D.進(jìn)行接種時(shí),接種環(huán)須進(jìn)行酒精消毒解析:本題考查大腸桿菌需要的營養(yǎng)及功能、如何配制固體培養(yǎng)基、接種的環(huán)境及最常用的方法。牛肉膏、蛋白胨含有C、H、O、N等元素,所以它們既是有機(jī)碳源又是有機(jī)氮源,大腸桿菌同化類型為異養(yǎng)型。接種時(shí)應(yīng)進(jìn)行無菌操作,防止雜菌污染。用于接種的接種環(huán)須進(jìn)行灼燒滅菌而不是“酒精消毒”。答案:D10.右圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列操作方法正確的是()A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B.劃線操作必須在火焰上進(jìn)行C.最可能得到所需菌落的區(qū)域是1D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌解析:操作前要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌;劃線操作必須在火焰旁進(jìn)行,而不是火焰上;最可能得到所需菌落的區(qū)域是5。答案:D11.下列依次表示倒平板、接種的位置,以及劃線法接種的路徑示意圖,其中錯(cuò)誤的是()解析:在劃線法接種時(shí),第二次劃線應(yīng)從第一次劃線的線末開始。D圖第二次劃線與第一次劃線、第三次劃線與第二次劃線都有間隙。答案:D12.稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中常用的一種接種方法。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋B.需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面C.不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落D.操作過程中對(duì)培養(yǎng)基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理解析:若菌液濃度過大,形成的菌落連在一起,則得不到單個(gè)的菌落。答案:C13.為了保持菌種的純凈,需要進(jìn)行菌種的保藏,下列有關(guān)敘述不正確的是()A.對(duì)于頻繁使用的菌種,可以采用臨時(shí)保藏的方法B.臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養(yǎng)基上C.臨時(shí)保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D.對(duì)于需要長期保存的菌種,可以采用低溫-4℃保藏的方法解析:對(duì)于需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法,保存于-20℃的冷凍箱中。答案:D14.根據(jù)所學(xué)的微生物知識(shí)回答下列相關(guān)的問題。(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮、和滲透壓等條件。由于該種細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、、等優(yōu)點(diǎn),因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行(填“消毒”或“滅菌”);操作者的雙手需進(jìn)行清洗和;靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能。(3)通?？梢砸罁?jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的。(4)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí),在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是。(5)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn),使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。解析:大腸桿菌體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短,常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。微生物培養(yǎng)的操作過程要保證在無菌條件中進(jìn)行。答案:(1)溫度pH易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)鑒定(或分類)(4)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(5)滅菌15.下面是有關(guān)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用的問題,請(qǐng)分析作答。(1)圖中是利用法進(jìn)行微生物接種,把聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面。為達(dá)到這一目的,操作上應(yīng)注意

(答出一點(diǎn)即可)。(2)菌落形成的根本原因是。將乳酸菌接種到徹底滅菌的固體培養(yǎng)基上,要使其正常生長必須給予的條件是。(3)下表是一種培養(yǎng)基配方,請(qǐng)回答下列問題。成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂含量/g①該培養(yǎng)基的葡萄糖為微生物的生長繁殖主要提供。②如果要對(duì)培養(yǎng)基的菌落進(jìn)行純化,在培養(yǎng)基上劃線操作中,操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán),目的是對(duì)接種環(huán)進(jìn)行。解析:(1)根據(jù)圖示可知,圖中利用的是平板劃線法接種。每次劃線前要灼燒接種環(huán);冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃;首尾區(qū)不重疊等。(2)乳酸菌是厭氧菌,要在無氧條件下培養(yǎng)。(3)葡萄糖是微生物的能源物質(zhì),還提供碳源。接種環(huán)進(jìn)行灼燒,目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基。答案:(1)平板劃線稀釋①每次劃線前要灼燒接種環(huán);②冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃線;③首尾區(qū)不重疊(答出其中一點(diǎn)即可)(2)子細(xì)胞成為群體隔絕空氣(3)①碳源和能源②滅菌16.檢驗(yàn)飲用水中細(xì)菌、病毒的含量是有效監(jiān)控部分疾病發(fā)生的必要措施。請(qǐng)回答下列與檢驗(yàn)飲用水中大腸桿菌有關(guān)的問題。(1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí),通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),記錄菌落數(shù)量,這種方法稱為。下圖所示的四種菌落分布圖中,圖不是由該方法得到的,而是利用得到的。(2)有三種材料或用具需要消毒或滅菌:培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿(A);玻璃棒、試管、燒瓶和吸管(B);實(shí)驗(yàn)操作者的雙手(C)。其中需要消毒的是,需要滅菌的是。(填代號(hào))(3)下表是一種培養(yǎng)基的配方,該培養(yǎng)基中的碳源是,氮源是。瓊脂(填“提供”或“不提供”)營養(yǎng)成分。

成分含量蛋白胨g乳糖g蔗糖gK2HPO4g顯色劑g瓊脂g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000mL解析:(1)圖中A、B、C為稀釋涂布平板法得到的結(jié)果,D為平板劃線法得到的結(jié)果。(2)實(shí)驗(yàn)者的手要進(jìn)行消毒,實(shí)驗(yàn)用具都要進(jìn)行滅菌。(3)含碳物質(zhì)是碳源,含氮物質(zhì)是氮源。瓊脂是凝固劑,不提供營養(yǎng)成分。答案:(1)稀釋涂布平板法D平板劃線法(2)CA、B(3)乳糖、蔗糖和蛋白胨蛋白胨不提供題組21．固體培養(yǎng)基中需要加入瓊脂的目的是()A．為菌體提供碳源 B．為菌體提供氮源C．使培養(yǎng)基保持水分 D．使培養(yǎng)基凝固[答案]D[解析]加入瓊脂的主要目的是使培養(yǎng)基凝固。2．對(duì)下列有關(guān)平板劃線接種法的操作錯(cuò)誤的是()A．將接種環(huán)放在火焰上灼燒B．將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液C．蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行D．劃線時(shí)要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連[答案]D3．下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是()A．防止雜菌污染B．消滅雜菌C．培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌D．滅菌必須在接種前[答案]B4．下列關(guān)于滅菌的說法中，錯(cuò)誤的是()A．滅菌是指殺死一定環(huán)境中所有微生物的細(xì)胞，不包括芽孢和孢子B．對(duì)不同的生物材料，應(yīng)當(dāng)采取不同的滅菌方法C．培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌法D．高壓蒸汽滅菌法最終使菌體蛋白質(zhì)凝固變性[答案]A[解析]滅菌是一種嚴(yán)格的使所有微生物(包括胞體、孢子、芽孢等)均死亡的措施。5．制備各種牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，關(guān)于倒平板的具體描述正確的是()①待培養(yǎng)基冷卻至40℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板②將滅過菌的培養(yǎng)皿放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰④用左手的拇指和食指完全打開皿蓋⑤右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋⑥等待平板冷卻5～10s，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上A．①③④⑤ B．④⑤⑥C．③⑤ D．①②④⑥[答案]C[解析]瓊脂是一種多糖，在98℃以上可溶解于水，在45℃以下凝固，倒平板時(shí)高于50℃則會(huì)燙手，低于50℃時(shí)若不能及時(shí)操作，瓊脂會(huì)凝固。無菌操作應(yīng)貫穿于操作的全過程，皿蓋全打開則空氣中的微生物會(huì)進(jìn)入培養(yǎng)基。6．煮沸消毒法與巴氏消毒法的主要區(qū)別是()A．溫度不同B．時(shí)間不同C．前者適用于固體消毒，后者適用于液體消毒D．沒有區(qū)別[答案]A[解析]煮沸消毒法所需溫度為100℃，巴氏消毒法需70～75℃煮30min或80℃煮15min。7．平板冷凝后要將平板倒置，其意義是()A．利于大腸桿菌的接種B．防止雜菌污染C．利于培養(yǎng)基的冷卻D．防止皿蓋冷卻水倒流入培養(yǎng)基[答案]D[解析]平板倒置可避免凝集在皿蓋上的水流入培養(yǎng)基。8．利用稀釋涂布平板法純化的大腸桿菌，經(jīng)培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)了多種菌落，不可能的原因是()A．培養(yǎng)基制備過程中被雜菌污染B．接種過程中，無菌操作不符合要求C．系列稀釋時(shí)，無菌操作不符合要求D．大腸桿菌的種類不同[答案]D[解析]大腸桿菌培養(yǎng)基中出現(xiàn)了多種菌落，說明污染了雜菌，雜菌可能來自培養(yǎng)基，也可能是因?yàn)椴僮鬟^程中無菌操作不符合要求。9．人們常用瓊脂培養(yǎng)基來培養(yǎng)微生物，它在加熱后呈溶膠狀態(tài)，在室溫下又呈半透明的凝膠狀態(tài)。在凝膠狀態(tài)下，其表面及內(nèi)部不同部位可生長大量的不同代謝類型的肉眼可見的細(xì)菌菌落。請(qǐng)用提供的材料和用具，設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)來探究某種細(xì)菌是需氧型、厭氧型還是兼性厭氧型。材料用具：某種細(xì)菌的菌種、含瓊脂培養(yǎng)基的試管2支、無菌接種設(shè)備、恒溫箱、水浴鍋。實(shí)驗(yàn)步驟：(1)將2支含瓊脂培養(yǎng)基的試管水浴鍋中加熱熔化；(2)在培養(yǎng)基冷卻而凝固之前，__________________；(3)將2支試管置于恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，每天觀察培養(yǎng)基中的菌落情況并做好記錄。預(yù)測實(shí)驗(yàn)可能會(huì)出現(xiàn)的結(jié)果，并得出相應(yīng)的結(jié)論。Ⅰ._______________________________________________________________________________________________________________________________Ⅱ._______________________________________________________________________________________________________________________________Ⅲ._______________________________________________________________________________________________________________________________[答案](2)用無菌接種設(shè)備將某種細(xì)菌菌種接種到一支試管中，振蕩試管，使細(xì)菌均勻混于培養(yǎng)基中，另一只試管不接種作為對(duì)照。(3)Ⅰ.若只在培養(yǎng)基的表面生長有這種細(xì)菌的菌落，則說明它是需氧型。Ⅱ.若只在培養(yǎng)基的底部生長有這種細(xì)菌的菌落，則說明它是厭氧型。Ⅲ.若在培養(yǎng)基的各個(gè)部位都有細(xì)菌菌落，則說明它是兼性厭氧型。1．下表是關(guān)于四種生物能源、碳源、氮源、新陳代謝類型的描述。描述正確的一組生物是()硝化細(xì)菌乳酸菌根瘤菌衣藻能源氧氣、NH3分解乳酸固定N2利用光能碳源CO2糖類糖類CO2氮源NH3N2N2NOeq\o\al(－,3)代謝類型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型異養(yǎng)需氧型自養(yǎng)需氧型A.硝化細(xì)菌與乳酸菌B．乳酸菌與根瘤菌C．根瘤菌與衣藻D．硝化細(xì)菌與衣藻[答案]D2．培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶采用的滅菌、消毒方法依次是()①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤[答案]A3．外科手術(shù)器械和罐頭食品的消毒，都要以能夠殺死什么為標(biāo)準(zhǔn)()A．球菌 B．桿菌C．螺旋菌 D．芽孢[答案]D[解析]消毒一般以殺死芽孢、孢子為標(biāo)準(zhǔn)。4．在平板劃線時(shí)，若需多次取菌劃線，應(yīng)在哪次劃線時(shí)灼燒接種環(huán)()A．每次都應(yīng)灼燒 B．只第一次C．每次均不需灼燒 D．第一次和最后一次[答案]A[解析]平板劃線時(shí)，每次劃線都要灼燒接種環(huán)。5．不同的微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)的描述中，不正確的是()A．氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素B．碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C．無機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D．水是該微生物的營養(yǎng)要素之一[答案]B[解析]自養(yǎng)微生物的能源物質(zhì)為光能或化學(xué)能。6．下列物質(zhì)中，不能用作酵母菌碳源的是()A．含碳有機(jī)物 B．蛋白胨C．含碳無機(jī)物 D．花生粉餅等天然物質(zhì)[答案]C[解析]酵母菌為異養(yǎng)生物，無法利用無機(jī)碳。7．高溫滅菌的原理是()A．每種微生物生長的最適溫度是一定的B．微生物對(duì)高溫環(huán)境不適應(yīng)C．高溫破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸，影響其生命活動(dòng)D．高溫降低了環(huán)境中氧的濃度[答案]C[解析]相對(duì)于動(dòng)植物來說，微生物的耐高溫能力是很強(qiáng)的。滅菌即殺死各種微生物及其他生命形態(tài)(如芽孢)，所以要采用更高溫度以破壞微生物體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸的分子活性，以使其永遠(yuǎn)喪失生活能力。8．產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A．一個(gè)細(xì)菌、液體培養(yǎng)基B．許多細(xì)菌、液體培養(yǎng)基C．一個(gè)細(xì)菌、固體培養(yǎng)基D．許多細(xì)菌、固體培養(yǎng)基[答案]C[解析]菌落是一個(gè)細(xì)菌或幾個(gè)細(xì)菌的子細(xì)胞群體，形成于固體培養(yǎng)基上，有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu)，肉眼可見。同種細(xì)菌形成的菌落，形態(tài)結(jié)構(gòu)是相同的。如果有許多細(xì)菌形成的菌落，就不可能有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài)。二、非選擇題9．(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮________、________和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、________、________等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行________(消毒、滅菌)；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和________；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能________。(3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的________。(4)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的________。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_______________________________________________________________________________________________________。(6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。[答案](1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例合適(4)鑒別(或分類)(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌題組31.下列可以作為自養(yǎng)微生物氮源的是()。、尿素B.牛肉膏、蛋白胨C.尿素、酵母粉D.銨鹽、硝酸鹽解析:自養(yǎng)微生物需要吸收的是自然界中的無機(jī)物,包括無機(jī)碳源和無機(jī)氮源。尿素、牛肉膏、蛋白胨、酵母粉均不能作為自養(yǎng)微生物的氮源,銨鹽、硝酸鹽可以作為自養(yǎng)微生物的氮源。答案:D2.下列敘述正確的是()。A.培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B.培養(yǎng)基只有兩類:液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí),可以形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌解析:培養(yǎng)基是微生物生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。按培養(yǎng)基的形態(tài)分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基中加入凝固劑后制成的,加水不能再變成液體培養(yǎng)基。單個(gè)細(xì)菌用肉眼看不見,肉眼可見的是培養(yǎng)基上形成的菌落。答案:A3.下列操作與消毒、滅菌無關(guān)的是()。A.接種前用火焰灼燒接種環(huán)B.接種前用酒精擦拭雙手C.將平板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.接種要在酒精燈的火焰旁完成解析:灼燒接種環(huán)、酒精擦拭雙手及接種時(shí)在火焰旁完成都是為了消毒、滅菌、避免雜菌污染。將平板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),則與消毒、滅菌無關(guān)。答案:C4.下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述,正確的是()。A.在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌B.在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長C.向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長D.在半固體培養(yǎng)基中接種細(xì)菌培養(yǎng)后可以觀察其運(yùn)動(dòng)解析:A項(xiàng),在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個(gè)菌落是由一種細(xì)菌增殖而來的;B項(xiàng),青霉素能破壞細(xì)菌等原核生物的細(xì)胞壁而抑制細(xì)菌的增殖,對(duì)真菌沒有明顯作用;C項(xiàng),破傷風(fēng)桿菌是厭氧菌,通入氧氣會(huì)抑制其生長;D項(xiàng),半固體培養(yǎng)基中可以觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)。答案:D5.下列有關(guān)平板劃線法的操作,錯(cuò)誤的是()。A.將接種環(huán)放在火焰上灼燒B.將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中沾取一環(huán)菌液C.沾取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行D.接種環(huán)劃線要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連解析:為了避免雜菌污染,沾取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行。每次劃線之前都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌,劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)。灼燒接種環(huán)之后,要冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高,殺死菌種。進(jìn)行平板劃線時(shí)不能將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連。答案:D6.微生物培養(yǎng)過程中,肉眼鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據(jù)是()。A.細(xì)菌的大小、形狀、顏色 B.菌落的大小、形狀、顏色C.有無鞭毛 D.培養(yǎng)基的不同解析:微生物的鑒別和分離,一般要用固體培養(yǎng)基,由于不同微生物在固體培養(yǎng)基上長出菌落的形狀、顏色等各不相同,所以可以作為鑒別的標(biāo)準(zhǔn)。而一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞很小,肉眼無法看到其顏色、形狀等。答案:B7.用培養(yǎng)液培養(yǎng)三種細(xì)菌,讓它們?cè)谌Р煌脑嚬苤猩L,右圖顯示了細(xì)菌的生長層,如果此時(shí)往三支試管中通入氧氣,則細(xì)菌的繁殖速度將是()。A.甲不變,乙減慢,丙加快B.甲加快,乙加快,丙減慢C.甲減慢,乙減慢,丙加快D.甲減慢,乙加快,丙減慢解析:甲試管內(nèi)的細(xì)菌在試管上部,為好氧菌,乙試管內(nèi)的細(xì)菌均勻分布,為兼性厭氧菌,丙試管內(nèi)的細(xì)菌在試管底部,為厭氧菌。向試管內(nèi)通入氧氣,能夠促進(jìn)兼性厭氧菌和好氧菌的繁殖,抑制厭氧菌的繁殖。答案:B8.外科手術(shù)器械和罐頭食品的滅菌,都要以能夠殺死什么為標(biāo)準(zhǔn)?()A.球菌 B.桿菌C.螺旋菌 D.芽孢解析:滅菌是采用強(qiáng)烈的理化因素殺死所有的微生物,包括芽孢和孢子。答案:D9.下列有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述,錯(cuò)誤的是()。A.首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C.適宜條件下培養(yǎng)D.結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落解析:稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。用不同稀釋度的菌液接種,只有在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物被分散成單個(gè)細(xì)胞,才能夠在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落,而不是所有培養(yǎng)基上均可出現(xiàn)單個(gè)菌落。答案:D10.高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,在接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是()。A.將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中B.將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C.將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上D.將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上解析:植物組織培養(yǎng)中的外植體必須在嚴(yán)格的無菌環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng),而且操作的各環(huán)節(jié)都要注意嚴(yán)格滅菌,必須無菌操作,C項(xiàng)正確。葡萄酒的制作原理是利用酵母菌無氧發(fā)酵產(chǎn)生酒精,在無氧條件下大部分微生物都不能生存,隨著發(fā)酵的進(jìn)行,酒精濃度增大,也有殺菌作用;制作腐乳時(shí),主要是將毛霉等微生物接種在豆腐上,此過程的加鹽、加鹵湯等操作均有一定的殺菌作用;選擇培養(yǎng)基只能允許目的菌生長,會(huì)抑制其他雜菌生長。因此不進(jìn)行嚴(yán)格無菌操作時(shí),A、B、D選項(xiàng)的情況比C選項(xiàng)的情況受影響要小。答案:C11.下列關(guān)于細(xì)菌的敘述中,正確的是()。A.不同種類細(xì)菌的生長均需要相同碳源B.常用液體培養(yǎng)基分離獲得細(xì)菌單菌落C.在加入青霉素的培養(yǎng)基中,細(xì)菌仍可大量繁殖D.培養(yǎng)基中含有高濃度NaCl有利于金黃色葡萄球菌的篩選解析:自養(yǎng)型細(xì)菌可以利用無機(jī)碳源,異養(yǎng)型細(xì)菌只能利用有機(jī)碳源,A項(xiàng)錯(cuò)誤。分離細(xì)菌并獲得單菌落需要固體培養(yǎng)基,B項(xiàng)錯(cuò)誤。青霉素能殺死細(xì)菌,在加入青霉素的培養(yǎng)基中,細(xì)菌不會(huì)大量繁殖,C項(xiàng)錯(cuò)誤。金黃色葡萄球菌有耐高濃度食鹽的特點(diǎn),可以用含高濃度NaCl的培養(yǎng)基篩選金黃色葡萄球菌,D項(xiàng)正確。答案:D12.為了獲得純度高的大腸桿菌,需要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。(1)培養(yǎng)大腸桿菌,配制固體培養(yǎng)基的基本步驟:計(jì)算→稱量→→→倒平板。(2)稱量時(shí),由于牛肉膏比較黏稠,可以用挑取,放在上稱量。由于牛肉膏和蛋白胨,稱量時(shí)動(dòng)作要迅速,稱量后要及時(shí)蓋上瓶蓋。(3)在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上的大腸桿菌能生長,說明培養(yǎng)基含有等大腸桿菌生長所需的營養(yǎng)要素。(4)微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法如和等,使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè),從而獲得純菌株。解析:考查微生物純化培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識(shí)。配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的基本步驟:計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。稱量時(shí),可用玻璃棒挑取,放在稱量紙上稱量,稱量時(shí)動(dòng)作要迅速。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中含有大腸桿菌所需要的碳源、氮源、無機(jī)鹽、水等營養(yǎng)要素,所以常用來培養(yǎng)大腸桿菌。微生物純化培養(yǎng)的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法,可使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)菌落,從而獲得純菌株。答案:(1)溶化滅菌(2)玻璃棒稱量紙容易吸潮(3)碳源、氮源、無機(jī)鹽、水(4)平板劃線法稀釋涂布平板法菌落13.下表為某微生物培養(yǎng)基的配方,請(qǐng)回答下列問題。成分含量成分含量NaNO33gK2HPO41gKClgMgSO4·7H2OgFeSO4g(CH2O)30g青霉素萬單位H2O1000mL(1)該培養(yǎng)基未加入凝固劑,依據(jù)物理性質(zhì),該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(2)該培養(yǎng)基中的碳源是,因?yàn)樵撐镔|(zhì)是有機(jī)物,因此也可給培養(yǎng)的微生物提供。(3)根據(jù)該培養(yǎng)基的配方,所培養(yǎng)的微生物的代謝類型是。(4)該培養(yǎng)基不適合培養(yǎng)細(xì)菌,因?yàn)榍嗝顾乜梢砸种萍?xì)菌的生長,但真菌可以在上面生存,因此由其功能上看該培養(yǎng)基可看作是一種培養(yǎng)基。解析:(1)依物理性質(zhì)劃分,培養(yǎng)基分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基沒有加凝固劑瓊脂且水的含量很多,所以應(yīng)是液體培養(yǎng)基。(2)(CH2O)是糖類,既可作碳源,也可提供能源。(4)青霉素對(duì)培養(yǎng)的微生物有限制和選擇作用,所以該培養(yǎng)基可看作是一種選擇培養(yǎng)基。答案:(1)瓊脂液體(2)(CH2O)能源(3)異養(yǎng)型(4)選擇14.有些細(xì)菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染,某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮鹣铝袉栴}。(1)在篩選過程中,應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,從功能上講,該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(2)純化菌種時(shí),為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即和。(3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解能力。(4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中,實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、和。無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈附近進(jìn)行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。解析:(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖呛Y選出可以降解原油的高效菌株,因此在篩選的時(shí)候應(yīng)該用以原油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,這樣只有能夠分解原油的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長,從而篩選出降解原油的微生物。(2)純化分離微生物的方法有兩種:平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)微生物降解原油后會(huì)形成透明圈,分解圈越大說明該菌株的降解能力越強(qiáng)。(4)常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。答案:(1)原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法(3)強(qiáng)(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰15.(2014四川理綜,10)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過程如圖甲、乙所示。圖甲圖乙(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、四類,該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是。(2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和,這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時(shí),通常使用的劃線工具是。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有。(4)為探究苯磺隆的降解機(jī)制,將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心,取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是,該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理?為什么?。解析:(1)微生物生長繁殖所需營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽四類。該實(shí)驗(yàn)是要分離能降解苯磺隆的菌株,所以以苯磺隆作為唯一碳源。(2)植物組織培養(yǎng)所用的植物激素是生長素和細(xì)胞分裂素,應(yīng)先將這兩種植物激素單獨(dú)配制成母液保存?zhèn)溆谩?3)進(jìn)行菌株純化時(shí),常用的劃線工具是接種環(huán)。用接種環(huán)進(jìn)行第二區(qū)域劃線前需灼燒滅菌,滅菌后的接種環(huán)溫度過高,若不經(jīng)冷卻立即進(jìn)行劃線操作,會(huì)使第一條線上無活菌存在。另外,若劃線未從第一區(qū)域末端開始,也會(huì)導(dǎo)致題述的劃線無菌落現(xiàn)象。(4)據(jù)圖可知,該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)為該微生物產(chǎn)生的分解苯磺隆的物質(zhì)是蛋白質(zhì),該實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)不合理,因?yàn)槿鄙倏瞻讓?duì)照實(shí)驗(yàn)。答案:(1)氮源和無機(jī)鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖(2)細(xì)胞分裂素母液(3)接種環(huán)①接種環(huán)灼燒后未冷卻;②劃線未從第一區(qū)域末端開始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理,缺少空白對(duì)照題組41．以下關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作順序正確的是 ()A．計(jì)算→稱量→倒平板→溶化→滅菌B．計(jì)算→稱量→溶化→倒平板→滅菌C．計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板D．計(jì)算→稱量→滅菌→溶化→倒平板2．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程中，關(guān)于倒平板的具體描述正確的是 ()①等培養(yǎng)基冷卻至40℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板②將滅過菌的培養(yǎng)皿放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰④用左手的拇指和食指打開皿蓋⑤右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上皿蓋⑥等待平板冷卻5～10s，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上A．①②③④ B．④⑤⑥C．③⑤ D．①②④⑥3．下列有關(guān)倒平板操作錯(cuò)誤的是 ()A．將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上B．使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰C．將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上D．等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置知識(shí)點(diǎn)二純化大腸桿菌4．用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)時(shí)，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中的活菌數(shù)。原因是 ()A．平板上的一個(gè)菌落就是一個(gè)細(xì)菌B．菌落中的細(xì)菌數(shù)是固定的C．此時(shí)的一個(gè)菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌D．此方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)一定與活菌的實(shí)際數(shù)相同5．能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是 ()A．稀釋涂布平板法 B．重量法C．直接計(jì)數(shù)法 D．比濁法6．在接種操作的過程中，不正確的是 ()A．要將接種環(huán)灼燒滅菌B．取下棉塞后要將試管口灼燒滅菌C．將接種環(huán)伸入試管內(nèi)，先接觸長菌多的部位D．接種后還要將管口滅菌加塞7．有關(guān)稀釋涂布平板法的說法中，錯(cuò)誤的是 ()A．用移液管把菌液從一支試管轉(zhuǎn)移到下一支試管后，要用手指輕壓移液管的橡皮頭，吹吸三次，目的是使菌液與水充分混勻B．移液管需經(jīng)過滅菌C．試管口與移液管應(yīng)在離火焰1～2cm處D．涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)涂布器，使菌液涂布均勻8．為了保持菌種的純凈，需要進(jìn)行菌種的保藏，下列有關(guān)敘述不正確的是 ()A．對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法B．臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養(yǎng)基上C．臨時(shí)保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D．對(duì)于需要長期保存的菌種，可以采用低溫－4℃保藏的方法9．在平板劃線操作中，錯(cuò)誤的是 ()A．將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅B．將燒紅的接種環(huán)在火焰旁邊冷卻C．接種環(huán)在平板上的劃線位置是隨機(jī)的D．在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過火焰10．微生物培養(yǎng)過程中，肉眼鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據(jù)是 ()A．細(xì)菌的大小、形狀、顏色 B．菌落的大小、形狀、顏色C．有無鞭毛 D．培養(yǎng)基的不同11．在培養(yǎng)基的配制過程中，具有如下步驟，其正確順序?yàn)?()①溶化②調(diào)pH③加棉塞④包扎⑤分裝 ⑥稱量A．①②⑥⑤③④ B．⑥①②⑤③④C．⑥①②⑤④③ D．①②⑤④⑥③12．微生物培養(yǎng)是微生物工程中的基礎(chǔ)技術(shù)。下列相關(guān)敘述正確的一項(xiàng)是 ()A．病毒和細(xì)菌的培養(yǎng)基成分相同B．平板劃線法中的劃線是連續(xù)進(jìn)行的C．微生物培養(yǎng)基中并不都必需添加碳源或氮源D．在培養(yǎng)的過程中，細(xì)胞種類、數(shù)目都不斷地增加13．若某一稀釋度下，平板上生長的平均菌落數(shù)為80，涂布平板時(shí)所用的稀釋液體積為mL，稀釋液的稀釋倍數(shù)為106，則每克樣品中的活菌數(shù)約為()A．8×108 B．8×107 C．8×105 D．8×10614．下表是用于從土壤中分離純化土壤細(xì)菌的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方。請(qǐng)回答：試劑用量牛肉膏g蛋白胨gNaClg瓊脂g水1000mL(1)培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。上述培養(yǎng)基配方中能充當(dāng)碳源的成分是________和________。培養(yǎng)基配制完成以后，一般還要調(diào)節(jié)pH并對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行__________處理。(2)分離純化微生物最常使用的接種方法是____________和______________兩種。在接種過程中，接種針或涂布器的滅菌方法是_______________________________________。(3)假設(shè)某同學(xué)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上細(xì)菌數(shù)目過多地連成一片，可能的原因是什么？______________________________________________________________________________________________________________________。15．為了獲得純度高的大腸桿菌，需要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛肉膏—蛋白胨—瓊脂培養(yǎng)基。(1)培養(yǎng)大腸桿菌，配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是：計(jì)算→稱量(2)稱量時(shí)，牛肉膏由于比較黏稠，可以用________挑取，放在________上稱量。牛肉膏和蛋白胨由于________，稱量時(shí)動(dòng)作要迅速，稱后要及時(shí)蓋上瓶蓋。(3)在牛肉膏—蛋白陳—瓊脂培養(yǎng)基上大腸桿菌生長，說明培養(yǎng)基含有_______________等大腸桿菌生長所需的營養(yǎng)要素。(4)微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法如______________和________________等，使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)________，從而獲得純菌株。16．下表為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的成分列表，據(jù)此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量g1gg100mL(1)蛋白胨在培養(yǎng)基中的作用是________________________________。(2)要用此原料配制觀察細(xì)菌菌落狀況的培養(yǎng)基，還需添加的成分是______________。(3)表中各成分含量確定的原則是________________________________________________________________。(4)培養(yǎng)基配制好后，分裝前應(yīng)進(jìn)行的工作是_____________________________________________________________。(5)從配制培養(yǎng)基直到培養(yǎng)完成，所采用的預(yù)防雜菌污染的方法是____________________________________________________________________________________________________________________________。(6)在培養(yǎng)基凝固前要擱置斜面，其目的是_____________________________________________________________。題組51.下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述不正確的是（）A．用于篩選雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基B．誘導(dǎo)外植體脫分化需要用含有蔗糖的培養(yǎng)基避光培養(yǎng)C．平板劃線法和稀釋涂布平板法均可用于分離純化菌種D．用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌實(shí)際數(shù)目低2.下表是關(guān)于對(duì)四種生物能源、碳源、氮源、新陳代謝類型的描述，其中正確的一組是（）硝化細(xì)菌乳酸菌根瘤菌衣藻能源利用化學(xué)能分解乳酸固定N2利用光能碳源CO2糖類糖類CO2氮源NH3N2N2NO3－代謝類型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型異養(yǎng)需氧型自養(yǎng)需氧型A.硝化細(xì)菌與乳酸菌B．乳酸菌與根瘤菌C．根瘤菌與衣藻D．硝化細(xì)菌與衣藻3.微生物培養(yǎng)是微生物工程中的基礎(chǔ)技術(shù)．下列相關(guān)敘述正確的是（）A．培養(yǎng)基中并不都必需添加碳源或氮源B．平板劃線法常用于微生物的分離與計(jì)數(shù)C．病毒和細(xì)菌的培養(yǎng)基成分基本相同D．配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基滅菌后還需調(diào)pH4.以下部位不含有微生物的是()A.洗干凈的臉上B.洗完澡后的皮膚C.刷完牙后的口腔D.灼燒之后的接種環(huán)5.為了解土壤微生物是否能分解農(nóng)藥，并盡快得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論，有人用“敵草隆”（一種除草劑）進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，取等量砂土分裝于相同的兩容器中，a組高壓滅菌，b組不滅菌，下列有關(guān)事項(xiàng)肯定錯(cuò)誤的是（）A．a(chǎn)組為實(shí)驗(yàn)組，b組為對(duì)照組B．向a、b中噴入等量敵草隆，再置于同一溫箱中培養(yǎng)相同時(shí)間C．檢測敵草隆消失的情況，預(yù)計(jì)a組敵草隆含量不變，b組敵草隆全部分解。D．只用砂土，實(shí)驗(yàn)效果不如幾種典型土壤混合后的好6.用平板劃線法或稀釋涂布平板法都可以純化大腸桿菌。二者的共同點(diǎn)有（）①可以用相同的培養(yǎng)基②都要使用接種針進(jìn)行接種⑧都需要在火焰旁進(jìn)行接種④都可以用來計(jì)數(shù)活菌A．①②B．③④C．①③D．②④7.煮沸消毒法與巴氏消毒法的主要區(qū)別是()A.溫度不同B.時(shí)間不同C.前者適用于固體消毒,后者適用于液體消毒D.沒有區(qū)別8.下列說法正確的是（）A.細(xì)胞內(nèi)的誘導(dǎo)酶一旦產(chǎn)生，其活性將一直保持下去B.組成酶不是微生物細(xì)胞中一直存在的，而是微生物生長到一定階段后才產(chǎn)生C.誘導(dǎo)酶的合成除取決于誘導(dǎo)物外，還取決于細(xì)胞內(nèi)所含的基因D.大腸桿菌分解葡萄糖的酶是誘導(dǎo)酶，分解乳糖的酶是組成酶9.下列有關(guān)大腸桿菌的培養(yǎng)的敘述不正確的是（）A．在大腸桿菌的培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮pH、溫度和滲透壓等條件B．在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行消毒C．若要測定培養(yǎng)液中大腸桿菌的數(shù)量，除應(yīng)多次重復(fù)外還應(yīng)保證待測樣品的稀釋度D．使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄10.抗生素可由微生物產(chǎn)生，具有抑菌作用，能在瓊脂培養(yǎng)基中擴(kuò)散。在篩選產(chǎn)生抗生素的菌種時(shí)，先在瓊脂培養(yǎng)基平板上劃線接種一種從土壤中獲得的甲菌，在27℃下培養(yǎng)3天，形成菌落。然后接種乙、丙、丁三種致病菌(圖a)，繼續(xù)在同樣條件下培養(yǎng)3天，結(jié)果如圖b。分析結(jié)果，得出的結(jié)論是()A.乙菌產(chǎn)生了抗生素B.丁菌的生長被丙菌產(chǎn)生的抗生素抑制C.乙菌的生長被甲菌產(chǎn)生的抗生素抑制D.丙菌產(chǎn)生的抗生素抑制了乙菌的生長11.如下圖為谷氨酸發(fā)酵裝置圖。(1）圖中3、6處是發(fā)酵罐夾層中水的進(jìn)出口，水在發(fā)酵罐夾層流動(dòng)的作用是。(2）谷氨酸發(fā)酵液的pH應(yīng)控制在7～8范圍內(nèi)，隨著代謝產(chǎn)物的積累，發(fā)酵液pH變化趨勢是,控制辦法是。發(fā)酵過程中，若谷氨酸積累過量，會(huì)抑制的活性，導(dǎo)致合成途徑中斷，這種代謝調(diào)節(jié)方式稱為調(diào)節(jié)。(3）如果在4處通人空氣，谷氮酸產(chǎn)量會(huì)，原因是。12.微生物的抗性突變是自發(fā)產(chǎn)生的？還是與相應(yīng)的環(huán)境因素有關(guān)？有人設(shè)計(jì)下列實(shí)驗(yàn)，以研究探討該問題．實(shí)驗(yàn)選用對(duì)鏈霉素敏感的大腸桿菌K12．培養(yǎng)基3、7、11中含有鏈霉素，其它培養(yǎng)基中不含鏈霉素．請(qǐng)據(jù)實(shí)驗(yàn)回答：（1）將原始對(duì)鏈霉素敏感大腸桿菌K12菌種涂布在培養(yǎng)皿1的表面培養(yǎng)，接著通過如圖“印章”將培養(yǎng)皿1中的菌群“印”在培養(yǎng)皿2、3上培養(yǎng)．“印章”位置保持不變．培養(yǎng)皿2、3根據(jù)其功能，分別稱為培養(yǎng)基、培養(yǎng)基．“印章”使用前需作處理．（2）培養(yǎng)基2中的菌落是，培養(yǎng)基3中的菌落是．（3）培養(yǎng)基3的A點(diǎn)處有菌落生長，將培養(yǎng)基2中相應(yīng)的A點(diǎn)位置的菌落上挑出少量移入培養(yǎng)基4中．如圖反復(fù)幾次實(shí)驗(yàn)．請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象解釋“微生物的突變是自發(fā)的還是環(huán)境因素導(dǎo)致的”：，原因是．（4）培養(yǎng)液4、8中的菌液越來越少，但培養(yǎng)皿7、11中的菌落越來越多．你的解釋是：．（5）要分離出單個(gè)菌落，除了本實(shí)驗(yàn)中的涂布法外，還可以用法．（6）上述不含鏈霉素培養(yǎng)基通常使用的是，下表是另一種培養(yǎng)基配方，該培養(yǎng)基具有作用．成分KH2PO4Na2PO4MgSO4？7H2O葡萄糖尿素瓊脂含量（7）現(xiàn)有5種營養(yǎng)缺陷型菌株1、2、3、4、5，它們不能合成生長所必需的物質(zhì)G，已知A、B、C、D、E都是合成G物質(zhì)的必需中間產(chǎn)物，但不知這些物質(zhì)合成的順序，于是在培養(yǎng)基中分別加入這幾種物質(zhì)并分析了這幾種物質(zhì)對(duì)各種營養(yǎng)缺陷型菌株生長的影響，結(jié)果如表所示．根據(jù)以上結(jié)果，推測這幾種物質(zhì)的合成順序應(yīng)是．物質(zhì)突變體培養(yǎng)基中加入的物質(zhì)ABCDEG1---+-+2-+-+-+3-----+4-+++-+5++++-+題組61．不同的微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)的描述中，不正確的是()。A．氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素B．碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C．無機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D．水是該微生物的營養(yǎng)要素之一解析該微生物以CO2為唯一碳源，但CO2不能為微生物提供能量，不屬于能源物質(zhì)。答案B2．下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是()。A．操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板D．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置解析制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，不能顛倒。牛肉膏容易吸潮，所以當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙。待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手，并且培養(yǎng)基處于溶化狀態(tài)時(shí)進(jìn)行倒平板。平板冷卻凝固約5～10min后還需倒置。答案A3．平板冷凝后，要將平板倒置，其原因是 ()。A．接種時(shí)再拿起來方便B．在皿底上標(biāo)記日期等方便C．正著放置容易破碎D．防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染解析平板倒置主要是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。答案D4．下列有關(guān)稀釋涂布平板法，敘述錯(cuò)誤的是()。A．首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B．然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C．適宜條件下培養(yǎng)D．結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落解析稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。用不同稀釋度的菌液接種，只有在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成單個(gè)細(xì)胞，才能夠在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落，而不是所有培養(yǎng)基上均可出現(xiàn)單個(gè)菌落。答案D5．為了保持菌種的純凈，需要進(jìn)行菌種的保藏，下列有關(guān)敘述不正確的是()。A．對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法B．臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養(yǎng)基上C．臨時(shí)保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D．對(duì)于需要長期保存的菌種，可以采用低溫－4℃保藏的方法解析對(duì)于需要長期保存的菌種，可采用甘油管藏法，即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后滅菌，將1mL菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20℃的冷凍箱中保存。答案D6．(10分)大腸桿菌通常容易居于人的結(jié)腸中，對(duì)人體無害，但某些菌株能造成尿路感染和腹瀉。請(qǐng)回答下列問題。(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮______、______和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、______、______等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行______(消毒、滅菌)；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和______(消毒、滅菌)；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能________________。(3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的______。(4)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的____________________________________。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_______________________。(6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。解析本題主要考查微生物培養(yǎng)的綜合知識(shí)。消毒一般只是消滅體表的微生物，而滅菌是殺滅所有的微生物及孢子等。觀察細(xì)菌等微生物的有無通常是通過培養(yǎng)來觀察菌落的形狀、顏色等。答案(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例合適(4)鑒定(或分類)(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌7．(10分)從自然菌樣篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定。(1)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)噬鹽菌的菌樣應(yīng)從______環(huán)境采集。(2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對(duì)產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇______的培養(yǎng)基，并在______條件下培養(yǎng)。(3)下面兩圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，請(qǐng)分析接種的具體方法。獲得圖A效果的接種方法是______，獲得圖B效果的接種方法是______。(4)配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行______，接種前要進(jìn)行______，在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在______條件下進(jìn)行。解析噬鹽菌的菌樣應(yīng)從高鹽環(huán)境采集。微生物產(chǎn)生淀粉酶說明其碳源是淀粉，應(yīng)選擇以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基，并在高溫條件下培養(yǎng)。圖A菌落分布較均勻，接種方法是稀釋涂布平板法，圖B菌落集中呈線狀，接種方法是平板劃線法。配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行調(diào)整pH，接種前要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，在實(shí)驗(yàn)中要注意在無菌條件下進(jìn)行。答案(1)海灘等高鹽(2)以淀粉為唯一碳源高溫(3)稀釋涂布平板法平板劃線法(4)pH調(diào)整高壓蒸汽滅菌無菌8．(10分)(2011·上海高考)分析有關(guān)微生物的資料，回答下面相關(guān)的問題。1982年澳大利亞學(xué)者從胃活檢組織中分離出幽門螺桿菌。(1)幽門螺桿菌的遺傳物質(zhì)集中分布的區(qū)域稱為______。(2)圖中4支試管分別代表4種微生物在半固體培養(yǎng)基(瓊脂含量g/L)中的生長狀態(tài)，其中②號(hào)試管代表幽門螺桿菌的生長狀態(tài)，由圖判斷，該菌在______條件下不能生長。產(chǎn)甲烷桿菌的生長狀態(tài)最能由試管______代表。(3)下表是某培養(yǎng)基的配方。成分葡萄糖KH2PO4MgSO4NaClCaSO4CaCO3瓊脂蒸餾水含量10ggggg5gg1L將幽門螺桿菌接種到pH適宜的該培養(yǎng)基中，置于37℃下培養(yǎng)一段時(shí)間后，在該培養(yǎng)基中幽門螺桿菌的數(shù)目比剛接種時(shí)______，主要原因是_________________________________________________________。(4)幽門螺桿菌形態(tài)如圖所示，該菌在人體中可引起胃潰瘍等胃部疾病。幽門螺桿菌生長的最適pH為6～7，人體胃腔內(nèi)pH在1～2之間，但胃黏膜的黏液層靠近上皮細(xì)胞側(cè)pH為左右。若幽門螺桿菌隨食物進(jìn)入胃腔，結(jié)合其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)以及能導(dǎo)致胃潰瘍的特性，推測該菌在胃內(nèi)如何存活？解析(1)幽門螺桿菌為原核生物，沒有核膜包圍的細(xì)胞核，遺傳物質(zhì)集中在擬核。(2)幽門螺桿菌生活在半固體培養(yǎng)基的中部，說明它不能生活在氧氣濃度過高或過低的地方；產(chǎn)甲烷桿菌為厭氧型細(xì)菌，應(yīng)生活在半固體培養(yǎng)基的底部。(3)培養(yǎng)基中缺乏氮源，幽門螺桿菌不能正常生活，數(shù)量會(huì)減少。(4)幽門螺桿菌進(jìn)入胃腔后，可以先依靠鞭毛運(yùn)動(dòng)至pH較高處緩沖，然后分泌蛋白中和胃酸，提高pH，以便繼續(xù)生存和繁殖。答案(1)擬核(核區(qū))(2)氧氣濃度過高或過低③(3)少缺少氮源(缺少氮源和生長因子)(4)幽門螺桿菌進(jìn)入胃腔后，首先依靠鞭毛運(yùn)動(dòng)至pH較高處緩沖，然后分泌蛋白中和胃酸，提高pH，以便繼續(xù)生存和繁殖。題組71.下列可以作為自養(yǎng)微生物氮源的是()、尿素B.牛肉膏、蛋白胨C.尿素、酵母粉D.銨鹽、硝酸鹽2.有關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是()A.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽D.無機(jī)氮源也能提供能量3.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是()A.將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌B.接種純種細(xì)菌C.適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D.防止外來微生物的入侵4.以下部位不含有微生物的是()A.洗干凈的臉上B.洗完澡后的皮膚C.刷完牙后的口腔D.灼燒之后的接種環(huán)5.煮沸消毒法與巴氏消毒法的主要區(qū)別是()A.溫度不同B.時(shí)間不同C.前者適用于固體消毒,后者適用于液體消毒D.沒有區(qū)別6.為了保持菌種的純凈需要進(jìn)行菌種的保藏,下列有關(guān)敘述不正確的是()A.對(duì)于頻繁使用的菌種,可以采用臨時(shí)保藏的方法B.臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上C.臨時(shí)保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D.對(duì)于需要長期保存的菌種,可以采用-4℃低溫保藏的方法7.(2013·江蘇高考)某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是()A.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌B.轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線C.接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次8.某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白質(zhì)、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了和。除此之外,培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是和。(2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,應(yīng)該采用的方法是。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠,還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(4)培養(yǎng)20小時(shí)后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,這說明湖水樣品中有種細(xì)菌。一般說來,菌落總數(shù)越多,湖水遭受細(xì)菌污染的程度越。1.不同培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含()A.碳源、磷酸鹽和維生素B.氮源和維生素C.水、碳源、氮源和無機(jī)鹽D.碳元素、氧元素、氫元素、氮元素2.高溫滅菌的原理是()A.每種微生物生長的最適溫度是一定的B.微生物對(duì)于高溫環(huán)境不適應(yīng)C.高溫破壞了細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸的結(jié)構(gòu),影響其生命活動(dòng)D.高溫降低了環(huán)境中氧的濃度3.關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的說法,敘述錯(cuò)誤的是()A.操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板D.待平板冷卻凝固約5min～10min后將平板倒過來放置4.(2013·宜春高二檢測)如圖是微生物平板劃線示意圖,劃線的順序?yàn)?→2→3→4→5。下列操作方法正確的是()A.操作前不用做任何處理B.劃線操作必須在火焰上進(jìn)行C.在每個(gè)區(qū)域中都可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌5.下列操作與消毒或滅菌有關(guān)的是(多選)()A.接種前用火焰灼燒接種環(huán)B.接種前用酒精擦拭雙手C.將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.接種在酒精燈的火焰旁完成6.苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì),自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株,篩選的主要步驟如圖所示,①為土壤樣品。請(qǐng)回答下列問題:(1)②中培養(yǎng)目的菌株的培養(yǎng)基中應(yīng)加入作為碳源,②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基(A.影響;B.不影響)細(xì)菌的數(shù)量,如果要測定②中活細(xì)菌數(shù)量,常采用法。(2)④為對(duì)照,微生物在④中不生長,在⑤中生長,④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于;使用法可以在⑥上獲得單菌落;采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)?。(3)如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小?。(4)實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其他微生物的污染?。7.(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮、和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、、等優(yōu)點(diǎn),因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行(消毒、滅菌);操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和;靜止于空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能。(3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù),要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值,除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外,還應(yīng)保證待測樣品稀釋的。(4)通常,對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí),在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是。(6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn),使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。答案解析1.【解題關(guān)鍵】自養(yǎng)微生物所要的氮源為無機(jī)氮。最常用的氮源為銨鹽、硝酸鹽?！窘馕觥窟xD。自養(yǎng)微生物需要吸收的是自然界中的無機(jī)物,包括無機(jī)碳源和無機(jī)氮源。雖然N2可以被固氮菌直接利用,但是固氮微生物不屬于自養(yǎng)型微生物。2.【解析】選D。不同的微生物所需營養(yǎng)物質(zhì)有較大差別,要針對(duì)微生物的具體情況分析。對(duì)于A、B選項(xiàng),它的表達(dá)是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同時(shí)是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同時(shí)是能源,如葡萄糖;有的碳源同時(shí)是氮源,也是能源,如蛋白胨。對(duì)于C選項(xiàng),除水以外的無機(jī)物種類繁多,功能也多樣,如二氧化碳,可作為自養(yǎng)型微生物的碳源,NaHCO3可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無機(jī)鹽,而NaCl則只能提供無機(jī)鹽。對(duì)于D選項(xiàng),無機(jī)氮源提供能量的情況是存在的,如NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源。3.【解析】選D。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來微生物入侵,即在各步操作中都應(yīng)做到無菌操作。4.【解析】選D。用清水洗臉、洗澡、刷牙只是起清潔作用,達(dá)不到滅菌效果,只有灼燒過的接種環(huán)才是真正無菌的。5.【解析】選A。煮沸消毒法是指在100℃條件下煮沸5min～6min,而巴氏消毒法則是在70℃～75℃條件下煮30min或在80℃條件下煮15min,二者的關(guān)鍵區(qū)別是溫度不同。6.【解析】選D。對(duì)于需要長期保存的菌種,需要在-20℃的冷凍箱中保存。7.【解題關(guān)鍵】解答本題，需要注意以下兩點(diǎn)：(1)明確處理有機(jī)廢水的微生物類型是異養(yǎng)型，不需要進(jìn)行光合作用。(2)明確培養(yǎng)皿是在倒平板的時(shí)候使用?！窘馕觥窟xB。本題考查微生物的分離和培養(yǎng)。A項(xiàng)中，培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿前進(jìn)行滅菌，故錯(cuò)誤。B項(xiàng)中，從前一區(qū)域劃線的末端開始往后一區(qū)域內(nèi)劃線之前，需要灼燒接種環(huán)，故正確。C項(xiàng)中，有機(jī)廢水中的微生物只能利用現(xiàn)成的有機(jī)物，不能進(jìn)行光合作用，沒有必要放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，故錯(cuò)誤。D項(xiàng)中，微生物的繁殖速度很快，應(yīng)培養(yǎng)24h后觀察和記錄結(jié)果，故錯(cuò)誤。8.【解析】(1)蛋白質(zhì)中含有C、N元素,為細(xì)菌培養(yǎng)提供氮源和碳源,淀粉只能提供碳源。(2)培養(yǎng)基采用高壓蒸汽進(jìn)行滅菌效果好。(4)不同微生物形成的菌落不同,有多種菌落即有多種細(xì)菌;菌落總數(shù)越多,污染程度越重。答案：(1)氮源(碳源不作要求)碳源無機(jī)鹽水(2)高壓蒸汽滅菌(3)恒溫培養(yǎng)箱無菌水(4)多高1.【解析】選C。培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽,此外還應(yīng)考慮pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)及O2等條件。2.【解析】選C。蛋白質(zhì)和核酸是細(xì)胞表現(xiàn)生命活動(dòng)的最重要物質(zhì),它們都是大分子化合物,具有復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu),高溫能使它們的空間結(jié)構(gòu)受到破壞而失去活性。3.【解題關(guān)鍵】解答本題需明確培養(yǎng)基的具體配制步驟、為避免雜菌污染和防止接種的微生物受損傷在倒平板時(shí)的注意事項(xiàng);同時(shí)還應(yīng)注意培養(yǎng)基中各組分的量要準(zhǔn)確,盡量減少實(shí)驗(yàn)誤差。【解析】選A。制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板,不能顛倒。牛肉膏容易受潮,當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分離后,用玻璃棒取出稱量紙。待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí),用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手,并且培養(yǎng)基處于溶化狀態(tài)時(shí)進(jìn)行倒平板。平板冷卻凝固(大約需5min～10min)后還需要倒置。4.【解析】選D。每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目減少,以便得到菌落。劃線后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。【規(guī)律方法】平板劃線法和稀釋涂布平板法對(duì)大腸桿菌的純化的比較(1)平板劃線法中,由于劃線時(shí)每次從上一次劃線的末端開始,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。(2)稀釋涂布平板法中,由于將菌液進(jìn)行了一系列的梯度稀釋和涂布培養(yǎng),聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,形成單個(gè)菌落。5.【解析】選A、B、D。接種用具、器皿、空氣中都充滿了微生物,都有污染的可能,必須嚴(yán)格消毒、滅菌。A、B、D都是實(shí)驗(yàn)操作過程中消毒、滅菌或防止雜菌污染的措施。將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)是為了防止雜菌污染,不屬于消毒和滅菌。6.【解析】(1)研究人員從土壤中篩選只能利用苯酚的細(xì)菌菌株,因此,在選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源,不同濃度的苯酚會(huì)影響細(xì)菌的數(shù)量。測定細(xì)菌數(shù)量,常采用稀釋涂布平板法。(2)由于該細(xì)菌菌株只能利用苯酚,④中無苯酚,⑤中含有苯酚,⑤可培養(yǎng)獲得分解苯酚的菌株,④則不能。使用稀釋涂布平板法或平板劃線法可以在⑥上獲得單菌落。(3)自變量為不同菌株,因此,本實(shí)驗(yàn)用同樣濃度的苯酚培養(yǎng)不同菌株,一定時(shí)間后,測定培養(yǎng)液中苯酚含量的變化情況。若苯酚濃度下降較多,說明此菌株分解苯酚能力較強(qiáng)。(4)實(shí)驗(yàn)過程中防止微生物污染的措施有多種,用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒滅菌,接種過程在酒精燈上方形成的無菌區(qū)域進(jìn)行。答案：(1)苯酚A稀釋涂布平板(2)④含除苯酚外的其他碳源,⑤以苯酚作為唯一碳源稀釋涂布平板法或平板劃線避免培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(3)用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株,一定時(shí)間后,測定培養(yǎng)液中苯酚的含量(4)培養(yǎng)基滅菌,接種環(huán)滅菌,接種過程無菌操作【規(guī)律方法】正確判斷培養(yǎng)基制作與接種操作是否合格的方法(1)從培養(yǎng)基制作是否合格上判斷:如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1d～2d后無菌落生長,說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。(2)從接種操作是否符合無菌要求上判斷:如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致,并符合接種菌菌落的特點(diǎn),則說明接種操作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說明接種過程中,無菌操作還未達(dá)到要求,需要分析原因,重新操作。7.【解析】(1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn),培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)滅菌:是用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌。消毒:是用較為溫和的物理或化學(xué)方法,僅能殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物,操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒。紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng),應(yīng)保證樣品稀釋的比例合適。(4)對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。答案：(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例合適(4)鑒定(或分類)(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌題組81．有關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是()A．是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源B．凡是碳源均提供能量C．除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽D．無機(jī)氮源也能提供能量解析對(duì)于異養(yǎng)微生物而言，含C、H、O、N的有機(jī)化合物既是碳源又是氮源；CO2是自養(yǎng)細(xì)菌的碳源但并不提供能量；CO2和N2是無機(jī)物可作為微生物的碳源和氮源；硝化細(xì)菌的氮源是氨，同時(shí)氨氧化也是硝化細(xì)菌的能量來源。答案D2．不同微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)描述中不正確的是()A．氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素B．碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C．無機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D．水是該微生物的營養(yǎng)要素之一解析自養(yǎng)微生物碳源為無機(jī)物，不能作為能源，能源應(yīng)是光能(如光合細(xì)菌)或氧化無機(jī)物釋放的化學(xué)能(如硝化細(xì)菌)。答案B3．下列操作與滅菌無關(guān)的是()A．接種前用火焰灼燒接種環(huán)B．接種前用酒精擦拭雙手C．培養(yǎng)基在50℃時(shí)擱置斜面D．接種在酒精燈的火焰旁完成解析接種用具、器皿、空氣、及操作者手上、衣服等都帶有微生物，都有污染的可能，都要進(jìn)行消毒與滅菌。培養(yǎng)基在50℃時(shí)擱置斜面，目的是擴(kuò)大接種面積，與滅菌無關(guān)。答案C4．對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是()①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤解析培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速徹底的滅菌效果；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線消毒；為不破壞其營養(yǎng)成分，對(duì)牛奶可采用巴氏消毒法。答案A5．獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是()A．