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文檔簡介
傳染病實驗室檢查傳染病實驗室檢查傳染病實驗室檢查分為甲類(2)、乙類(25)、丙類(10)我國法定傳染病的種類傳染性非典型肺炎、人感染高致病性禽流感乙類傳染病原有23種,新增2種分為甲類(2)、乙類(25)、丙類(10)我國法定傳染病的種類傳染性非典型肺炎、人感染高致病性禽流感乙類傳染病原有23種,新增2種①流行病學資料②臨床資料③實驗室資料:對傳染病診斷具有特殊意義傳染病的診斷具備三要素:疑似病例,確診病例有病原學方面資料可明確診斷⒈一般檢查:三大常規(guī)、生化檢查⒉病原學方面資料:①病原體的檢出:直接檢出,分離培養(yǎng)②分子生物學檢測特異核酸:分子雜交、聚合酶鏈反應()實驗室檢查③免疫學檢測:特異性抗體檢測特異性抗原檢測細胞免疫功能檢查免疫球蛋白測定3.其他:內鏡檢查、影像檢查、活檢實驗室檢查1.一般檢查:(4項)↑:流腦、猩紅熱等細菌性傳染病出血熱、乙腦↓:病毒感染、原蟲感染傷寒、布氏桿菌病嗜酸粒細胞↑:蠕蟲感染嗜酸粒細胞↓:傷寒、流腦異型淋巴細胞:見于出血熱、傳單①血常規(guī)蛋白尿、、管型、少量:鉤體病蛋白尿、膜狀物、管型、、融合細胞:出血熱1.一般檢查:(4項)②尿常規(guī)③大便常規(guī):菌痢、腸阿米巴?。ㄉ倭浚┧畼颖?,粘液便:病毒性或大多數(shù)細菌性腸道感染④生化病毒性肝炎等2.病原學檢查②病原體分離培養(yǎng)檢材:血、尿、腦脊液、骨髓、皮疹吸取液等采集標本注意病程階段、是否應用抗生素標本保存與運送時間人工培養(yǎng)基分離培養(yǎng):細菌、螺旋體、真菌動物接種、組織培養(yǎng):立克次體、病毒①病原體直接檢出血液、骨髓涂片:檢瘧原蟲(顯微鏡、肉眼)大便涂片:寄生蟲卵、阿米巴等注意點方法3.分子生物學檢測①分子雜交:利用探針檢出特異性病毒核酸②聚合酶鏈反應():可將擴增100萬倍以上逆轉錄():檢測病毒核酸③原位聚合酶鏈反應:用于組織細胞中原位檢出低拷貝、序列。4.免疫學檢查①特異性抗體檢測急性期、恢復期雙份血清4倍以上升高意義4倍以下升高提示回憶反應近期感染:型抗體陽性
凝集反應(肥達氏反應)補體結合:病毒感染免疫熒光:快速診斷酶鏈免疫吸附測定:靈敏度高,操作簡便方法用已知檢測血清或體液中的相應②特異性抗原檢測診斷意義較抗體可靠;方法多樣。③細胞免疫功能T細胞亞群檢測:4,8等:艾滋?、苊庖咔虻鞍诇y定降低者見于先天性免疫缺損升高者見于慢性肝炎、黑熱病、艾滋病等①內鏡:纖維支氣管鏡:艾滋病肺孢子蟲病結腸鏡:菌痢、阿米巴②影像學檢查:X光、超聲、、③活檢5.其它檢查病毒性肝炎病毒性肝炎在我國危害極大我國乙肝病毒感染者逾1.3億10%乙型肝炎患者近3千萬每年近30萬人死于肝炎或肝癌病毒性肝炎在我國各類傳染病中發(fā)病率最高感染率約80%感染率約7%感染率在感染者中約10%感染率約18%黃熱病毒()病毒()巨細胞病毒()單純皰疹病毒()風疹病毒()能引起肝功能損害的病毒有很多:它們均非嗜肝病毒可通過特異的來檢測目前已知的嗜肝病毒有五種:(甲)、(乙)、(丙)、(丁)、(戊)庚型肝炎病毒()輸血傳播病毒()病毒性肝炎特指由嗜肝病毒感染所引起的肝臟炎癥和壞死病變的一組傳染病。5種嗜肝病毒的病原學特點一、甲型病毒性肝炎甲肝●為單股正鏈病毒●病毒分型和抗原抗體系統(tǒng):僅有一個血清型和一個抗原抗體系統(tǒng)抗:急性感染指標,一般持續(xù)8-12周,少數(shù)6月抗:是保護性抗體,可長期存在二、乙型病毒性肝炎乙肝屬嗜肝病毒科1.形態(tài)結構A:大球形顆粒(顆粒)B:絲狀顆粒C:小球形顆粒顆粒-病毒復制的主體
(外膜蛋白)2.基因組結構12SPCX3.2乙肝11蛋白22蛋白S
CPX編碼21乙肝3.血清標志物及其臨床意義(1)●出現(xiàn)時間:感染后1周~12周●持續(xù)時間:急性肝炎:1-6周,6個月內可消失慢性肝炎或攜帶者:可持續(xù)陽性曾用名:、澳大利亞抗原●有抗原性而無傳染性S基因整合肝細胞持續(xù)表達乙肝●的亞型長江以北長江以南新疆、西藏、內蒙等乙肝(2)抗●出現(xiàn)時間:急性感染后期或消失后窗口期:已消失,抗未出現(xiàn),只檢出抗和抗●抗為保護性抗體其出現(xiàn)標志著感染進入恢復期●抗對相同亞型的再感染有免疫力,但對不同亞型的保護力不完全。乙肝(3)從前C基因開始編碼的蛋白質經(jīng)加工分泌到細胞外即為C基因前C區(qū)C區(qū)前C/C蛋白表達切割、加工分泌到細胞外只存在于血清中乙肝●是病毒復制和傳染性的標志血清陽性者中,陽性率為92%左右●在慢性乙肝中是重要的免疫耐受因子乙肝(4)抗●出現(xiàn)時間:消失后,常伴陰轉,正?!窨沟某霈F(xiàn)標志著病毒復制減少、傳染性降低在部分抗陽性者中,仍陽性,異常,陰性前C基因變異(G1896A)易加重病情、易演變?yōu)楦斡不?干擾素療效差陰性的慢乙肝(5)乙肝一般血清學方法檢測不到肝組織免疫組化技術:可檢查肝細胞內(6)抗抗:是急性或慢性感染者病毒活動標志抗:凡“有過”感染者均可陽性,高滴度亦提示病毒活動可終身陽性(6)是病毒復制和傳染性的最直接證據(jù)檢測方法:斑點雜交法、法(7)(多聚酶):是逆轉錄酶是直接反應病毒復制的指標之一乙肝(8):具有反向激活作用,可調控病毒基因轉錄水平,并對宿主癌基因可能有激活作用。乙肝●介紹三個概念:①“兩對半”②血清轉換:消失,出現(xiàn)消失,出現(xiàn)
③“轉陰”常用指標:血清轉換金牌血清轉換銀牌陰轉銅牌
三、丙型病毒性肝炎丙肝丙肝是經(jīng)濟發(fā)達國家病毒性肝炎的主要類型為單股正鏈病毒,1991年歸為黃病毒科丙型肝炎病毒屬1.形態(tài)5’3’CE1E2123452.基因組結構兩側為5’和3’非編碼區(qū),中間為。依次為:C(核心蛋白區(qū),高度保守)1-E2∕1(包膜蛋白區(qū),極易變異)2345(非結構蛋白區(qū))3蛋白具有強免疫原性,可刺激機體產(chǎn)生抗體全長約10基因型:>10個,我國以1b型為主
丙肝3.的抗原抗體系統(tǒng)血清中含量低,目前尚無法檢測??篂榉潜Wo性抗體,陽性為病毒感染標志:是病毒復制及傳染的直接標志,但體內病毒含量較低,需反復檢測四、丁型病毒性肝炎丁肝為缺陷病毒,必須依賴的輔助才能復制。1.形態(tài):又稱δ因子,為單股負鏈病毒。在細胞核內無需輔助而能自行復制,在血液中表面包裹丁肝2.和抗最早出現(xiàn),是感染的直接標志抗:早期感染標志抗:既往感染的標志不是保護性抗體是診斷感染最直接依據(jù)僅有一個血清型和一個抗原抗體系統(tǒng)戊肝五、戊型病毒性肝炎●為單股正鏈病毒,有2個以上的基因型?!窨梗嚎梗菏墙趦雀腥镜臉酥?,有早期診斷價值抗:感染后可長期存在,可用于流行病學調查主要定位于細胞漿,血清中檢測不到。是感染最直接依據(jù),但持續(xù)時間不長病毒性肝炎的實驗室檢查一、血象急性肝炎:正?;蛏缘?,淋巴細胞相對慢性肝炎、肝硬化:和↓二、血清生化檢查1.血清酶測定(1)丙氨酸轉氨酶()●分布:肝>腎>心>肌肉●意義:反映肝功能的最常用指標●血清升高程度與肝損傷程度不平行(2)門冬氨酸轉氨酶()●明顯升高者提示肝細胞損傷較嚴重胞漿內線粒體(80%)和胞漿(20%)內(3)γ和()●兩者均是反應膽汁淤積的指標γ肝炎活動期,梗阻性黃疸時可顯著升高同上,兒童亦可明顯升高。腫瘤時兩者亦可出現(xiàn)顯著升高2.血清膽紅素測定●血清總膽紅素升高水平可反應肝細胞損傷程度●直接膽紅素占總膽紅素的比例對判斷黃疸性質有一定幫助:肝細胞性黃疸:與同比例升高梗阻性黃疸或膽汁淤積時:603.甲胎蛋白()●慢性肝炎及肝硬化:可升高●重型肝炎:可升高,病情好轉后降低●診斷:>500,4周以上200~500,8周以上4.白蛋白、球蛋白●白蛋白下降多見于肝硬化和重型肝炎●球蛋白升高多見于慢性肝炎病毒的感染5.凝血酶原時間()和凝血酶原活動度()★和可以敏感地反應肝臟損害的嚴重程度K依賴性凝血因子:Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ主要由肝臟合成的凝血因子:Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、ⅩⅦ因子半衰期最短主要檢測外源性凝血系統(tǒng)中Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ等活性●正常值:12~16秒=303—8.7×100%(80%~100%)<20%時可自發(fā)性出血,<10%時預后惡劣淤膽維生素K糾正試驗與肝細胞壞死嚴重性相關的實驗室指標●血清膽紅素:升高程度與肝細胞壞死程度正相關●:降低程度與肝細胞壞死程度正相關●血清白蛋白:降低程度與壞死程度正相關慢性肝炎實驗室檢查異常程度參考指標
項目輕度中度重度或/或()≤正常3倍>正常3倍>正常3倍膽紅素()(μ)≤34.234.3-85.5>85.5白蛋白(A)()≥35<35->32≤32≥1.4<1.4-1.0≤1.0電泳r球蛋白()(%)≤21>21-<26≥26凝血酶原活動度()(%)>71<71->6060-40*膽堿酯酶()(〗>5400≤5400->4500≤4500注:*有條件開展檢測的單位,可參考本項指標。三、病毒感染血清標志物的臨床檢測及意義★(一)甲肝●抗是診斷急性甲肝最可靠方法?!窨箼z測:主要用于人群感染率的調查(二)乙肝1.乙肝五項意義判定“兩對半”分析舉例抗抗抗+++++++++++++++抗抗抗+++++++++++++++大三陽小三陽“兩對半”分析舉例抗抗抗+++++++++++++++抗抗抗+++++++++++++++急性肝炎早期,傳染性強“兩對半”分析舉例抗抗抗+++++++++++++++抗抗抗+++++++++++++++急性或慢性現(xiàn)癥感染,傳染性強?!按笕枴薄皟蓪Π搿狈治雠e例抗抗抗+++++++++++++++抗抗抗+++++++++++++++有無傳染性應結合檢測結果“小三陽”“兩對半”分析舉例抗抗抗+++++++++++++++抗抗抗+++++++++++++++有過感染,目前有無傳染性應結合結果“兩對半”分析舉例抗抗抗+++++++++++++++抗抗抗+++++++++++++++感染的恢復期,有免疫力,無傳染性“兩對半”分析舉例抗抗抗+++++++++++++++抗抗抗+++++++++++++++①注射疫苗后;②遙遠的過去有過感染“兩對半”分析舉例抗抗抗+++++++++++++++抗抗抗++++++++++
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