定量分析方法性能確認(rèn)

定量分析方法性能確認(rèn)第一頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日學(xué)習(xí)和討論內(nèi)容管理機(jī)構(gòu)的要求方法確認(rèn)的支持性文件方法的評(píng)價(jià)的主要內(nèi)容1第二頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日ALB試劑說(shuō)明書第三頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日ALB試劑說(shuō)明書第四頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日管理機(jī)構(gòu)的要求

2003年1月24日,美國(guó)醫(yī)醫(yī)療服務(wù)中心(CMS、theFinalCLIARule)公布.陳述：“實(shí)驗(yàn)室的分析方法（non-waived）必須要確認(rèn)其性能.”

第五頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日管理機(jī)構(gòu)的要求

使用美國(guó)食品及藥物管理局認(rèn)可的但未更改的方法，實(shí)驗(yàn)室要證實(shí)其方法的性能與生產(chǎn)廠家所建立方法的性能進(jìn)行比較。第六頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日管理機(jī)構(gòu)的要求CLIA是根據(jù)分析方法的復(fù)雜性，方法分為三大類:1.Waivedtests(豁免試驗(yàn))2.Non-waivedunmodifiedtests–moderateandhighcomplexitytests(中度或高度試驗(yàn))3.Non-waived,modified(orin-housedeveloped)tests.(更改中度或高度試驗(yàn)或開(kāi)發(fā)的試驗(yàn))第七頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日管理機(jī)構(gòu)的要求

Non-waived,未更改的中等和高度復(fù)雜性

化學(xué)、血液學(xué)etc.要求進(jìn)行四個(gè)方面的方法確認(rèn)1.重復(fù)性實(shí)驗(yàn)Replicationexperiment(estimateimprecision)2.方法學(xué)的比較Comparisonofmethods(estimateinaccuracy)3.線性實(shí)驗(yàn)Linearityexperiment(reportablerange)4.參考值的確認(rèn)Establishreferenceintervals.

第八頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日管理機(jī)構(gòu)的要求

Non-waivedtests更改的中等和高度復(fù)雜性或?qū)嶒?yàn)室開(kāi)發(fā)的試驗(yàn)，要求進(jìn)行六個(gè)方面的方法確認(rèn)1.Precision精密度2.Accuracy準(zhǔn)確度3.Reportablerange可報(bào)告范圍4.ReferenceIntervals參考值范圍

5.Analyticalsensitivity(detectionlimit)分析靈敏度（最低檢測(cè)值）6.Analyticalspecificity(interferingsubstances)分析的特異性（干擾物質(zhì)）

第九頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日管理機(jī)構(gòu)的要求

《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》檢查細(xì)則（通用要求）醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)保證檢測(cè)系統(tǒng)的完整性和有效性，對(duì)需要校準(zhǔn)的檢驗(yàn)儀器、檢驗(yàn)項(xiàng)目和對(duì)臨床檢驗(yàn)結(jié)果有影響的輔助設(shè)備定期進(jìn)行校準(zhǔn)。第十頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日CAP-LAP的要求COM.40300AnalyticAccuracy/PrecisionPhaseIIThelaboratoryverifiesorestablishesanalyticaccuracyandprecisionforeachtest.COM.40400AnalyticSensitivityPhaseIIThelaboratoryverifiesorestablishestheanalyticsensitivity(lowerdetectionlimit)ofeachassay,asapplicable.COM.40500AnalyticInterferencesPhaseIIThelaboratoryverifiesorestablishesanalyticinterferencesforeachtest

COM.40600ReportableRangePhaseIIThereportablerange(analyticmeasurementrange)isverified/establishedforeachanalyticprocedurebeforeimplementationCOM.50000ReferenceIntervalsPhaseIIThelaboratoryestablishesorverifiesitsreferenceintervals(normalvalues).第十一頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日方法確認(rèn)的支持性文件定量實(shí)驗(yàn)室方法的初步評(píng)價(jià)（CLSIEP10）臨床化學(xué)設(shè)備操作精密度評(píng)價(jià)（CLSIEP5）用患者標(biāo)本進(jìn)行方法學(xué)比較和偏倚評(píng)估（CLSIEP9）定量分析方法的線性（CLSIEP6）臨床化學(xué)干擾試驗(yàn)（CLSIEP7）基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)（CLSIEP14）精密度和準(zhǔn)確度性能的用戶證實(shí)(EP15-A)CLSIClinicalandLaboratoryStandardsInstitute第十二頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日方法的評(píng)價(jià)的主要內(nèi)容方法確認(rèn)=評(píng)價(jià)誤差總誤差=系統(tǒng)誤差+隨機(jī)誤差.方法確認(rèn)的基本內(nèi)容:–評(píng)價(jià)不精密度(隨機(jī)誤差)–評(píng)價(jià)不準(zhǔn)確度(系統(tǒng)誤差)–可報(bào)告范圍的確認(rèn)(線性)–參考值的確認(rèn)(正常值范圍)

第十三頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日方法的評(píng)價(jià)的主要內(nèi)容對(duì)于更改的中等和高度復(fù)雜性或?qū)嶒?yàn)室開(kāi)發(fā)的試驗(yàn)，要增加二項(xiàng)內(nèi)容：–分析方法的靈敏度Analyticalsensitivity(limitofdetection)–分析方法的特異性Analyticalspecificity(interferingsubstance)第十四頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日不精密度

指同一樣本在一定條件下多次重復(fù)測(cè)定得到的一系列單次測(cè)定值之間的接近程度，是表示測(cè)定結(jié)果中隨機(jī)誤差大小程度的指標(biāo)。用標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)描述不精密度的大小第十五頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日不精密度

1.計(jì)算批內(nèi)（間）不精密度(CV或SD),并將與廠家批內(nèi)（間）不精密度比較

2.計(jì)算總不精密度(CV或SD)，并將與廠家總不精密度比較

3.不精密度分析目標(biāo)進(jìn)行比較第十六頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日不精密度第十七頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日CLIA88推薦最大測(cè)量不精密度第十八頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日不正確度大批檢測(cè)結(jié)果的均值與真值的一致程度與系統(tǒng)誤差有關(guān)，常用偏倚表示不正確度第十九頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日Page

20測(cè)量不正確度與檢測(cè)系統(tǒng)的關(guān)系檢測(cè)系統(tǒng)校準(zhǔn)品試劑分析儀第二十頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日不正確度

評(píng)價(jià)準(zhǔn)確度的常用試驗(yàn)方法比較試驗(yàn)回收試驗(yàn)干擾試驗(yàn)第二十一頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日不正確度方法比較試驗(yàn)（comparisonofmethodsexperiment）將試驗(yàn)方法（待評(píng)價(jià)或待驗(yàn)證的方法）與比較方法（參考方法或準(zhǔn)確度已知的方法）進(jìn)行比較用于評(píng)價(jià)試驗(yàn)方法的恒定和比例系統(tǒng)誤差。第二十二頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日不正確度方法要點(diǎn)：

–比較方法理想的比較方法=referencemethod–樣本個(gè)數(shù)：40份患者樣本

1/3低濃度1/3中濃度

1/3高濃度（可報(bào)告范圍）第二十三頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日不正確度統(tǒng)計(jì)學(xué)包括：

圖形分析Graphanalysis回歸分析Regressionanalysis偏差分析Biasanalysis可接受的標(biāo)準(zhǔn)Acceptablecriterion第二十四頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日不正確度圖形分析–差異圖:Y軸:試驗(yàn)方法與比較方法之差

X軸:比較方法的測(cè)定值

第二十五頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日不正確度–對(duì)比圖:Y軸:試驗(yàn)方法測(cè)定值

X軸:比較方法的測(cè)定值第二十六頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日回歸分析回歸方程Y=a+bXa為回歸線截矩，反映恒定系統(tǒng)誤差的大小,a=0時(shí)，表示無(wú)恒定系統(tǒng)誤差b為回歸線斜率，反應(yīng)比例系統(tǒng)誤差的大小，

b=1時(shí)，表示無(wú)比例系統(tǒng)誤差不正確度第二十七頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日相關(guān)系數(shù)（r）可幫助判斷測(cè)定的濃度范圍對(duì)于斜率和截矩的評(píng)估是否合適，而不能用于判斷方法是否可受。r>0.99,應(yīng)用線性回歸統(tǒng)計(jì)r<0.99,應(yīng)用配對(duì)t-test不正確度第二十八頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日

判斷差異能否被接受，應(yīng)在醫(yī)學(xué)決定水平與總可允許誤差比較。應(yīng)用方法比較的回歸方程,計(jì)算醫(yī)學(xué)決定水平的預(yù)期偏差.丨a+bXc）-Xc丨〈1/2TEa（CLIA88）不正確度第二十九頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日Page

30衡量質(zhì)量的兩個(gè)重要指標(biāo)測(cè)量的固有不精密度測(cè)量的不正確度總誤差允許總誤差TEA第三十頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日總誤差（TE）

總誤差（TE）的估計(jì)TE=SE+RETE=bias+nSD

TE<<TEa（CLIA88）(n=2、3、4)第三十一頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日Page

32允許總誤差指標(biāo)與其他國(guó)家總誤差指標(biāo)檢驗(yàn)項(xiàng)目本標(biāo)準(zhǔn)TE(%)美國(guó)TE丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶16.0±20%

天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶15.0±20%

γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶11.0±20%

堿性磷酸酶18.0±30%

肌酸激酶15.0±30%

淀粉酶15.0±30%

乳酸脫氫酶11.0±20%

總蛋白5.0±10%

白蛋白6.0±10%

總膽紅素15.0±20%±6.84mmol/L血糖7.0±10%±0.33mmol/L肌酐12.0±15%±26.5μmol/L尿酸12.0±17%

尿素8.0±9%±0.71mmol/L總膽固醇9.0±10%

甘油三酯14.0±25%

氯離子4.0±5%

第三十二頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日測(cè)量不精密度和不正確度對(duì)質(zhì)量的影響第三十三頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日可報(bào)告范圍可報(bào)告范圍（reportablerange）指可以報(bào)告的所有結(jié)果范圍，包含兩種類型的范圍分析測(cè)量范圍（analyticalmeasurementrange，AMR）臨床可報(bào)告范圍（clinicalreportablerange，CRR）。第三十四頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日評(píng)價(jià)分析方法能報(bào)告的可信的最低、最高的濃度范圍值。確認(rèn)廠家所提供該分析系統(tǒng)的可報(bào)告范圍是否一致。目的:可報(bào)告范圍第三十五頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日目測(cè)線性法最小二剩法線性評(píng)價(jià)NCCLS制訂并推出的評(píng)價(jià)方案（EP-6）多項(xiàng)式線性評(píng)價(jià)方案（2002）可報(bào)告范圍第三十六頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日紅色：S形蘭色：拋物線黑色：直線可報(bào)告范圍第三十七頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日可報(bào)告范圍樣本數(shù)量：驗(yàn)證線性：5-7個(gè)濃度水平，重復(fù)2次測(cè)定。建立線性：7-11個(gè)濃度水平，測(cè)定2-4次第三十八頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日目測(cè)線性法可報(bào)告范圍第三十九頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日可報(bào)告范圍第四十頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日最小二剩法線性評(píng)價(jià)方案擬合的直線方程

Y=Ax+B

可報(bào)告范圍第四十一頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日1、b（在1.000.03范圍內(nèi))，a近于0，則可直接判斷該測(cè)定方法可報(bào)告范圍在實(shí)驗(yàn)已涉及濃度。2、

若b不接近1，a較大；若b0.97，或1.03，已有可能b和1之間有統(tǒng)計(jì)上顯著性差異。試著舍去某組數(shù)據(jù)，另作回歸統(tǒng)計(jì)。若縮小分析范圍后，回歸式有明顯改善，b近于1，a趨于0。此時(shí)，縮小的分析范圍是真實(shí)的可報(bào)告范圍。

進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)判斷和評(píng)價(jià):可報(bào)告范圍第四十二頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日干擾試驗(yàn)是通過(guò)定量檢測(cè)樣本中的物質(zhì)所引起試驗(yàn)方法的系統(tǒng)誤差，以評(píng)價(jià)方法的準(zhǔn)確度。由干擾物質(zhì)引起的誤差通常是恒定系統(tǒng)誤差，與分析物的濃度無(wú)關(guān)系。干擾試驗(yàn)第四十三頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月28日

檢測(cè)限（limitofdetection）指檢測(cè)系統(tǒng)可檢測(cè)出的最低分析物濃度。包括檢測(cè)低限、生物監(jiān)測(cè)限和功能靈敏度。檢測(cè)限第四十四頁(yè)，共四十九頁(yè)，2022年，8月2