微生物的生長

第六章微生物的生長與環(huán)境條件第一節(jié)微生物的生長

微生物在適宜的環(huán)境條件下，不斷地吸收營養(yǎng)物質(zhì)，并按照自己的代謝方式進行代謝活動，如果同化作用大于異化作用，則細胞質(zhì)的量不斷增加，體積得以加大，于是表現(xiàn)為生長。各種細胞組分按恰當比例增長到一定程度后就會引起個體數(shù)目的增加，這就是繁殖。一、微生物的生長微生物在自然界中不僅分布很廣，而且都是混雜地生活在一起。要想研究或利用某一微生物，必須把混雜的微生物類群分離開來，以得到只含一種微生物的培養(yǎng)。微生物學(xué)中將在實驗室條件下從一個細胞或一種細胞群繁殖得到的后代稱為純培養(yǎng)。最常用的方法有稀釋平板法、劃線法、單細胞挑取法及利用選擇培養(yǎng)基分離法等。二、微生物的純培養(yǎng)

這是最常用的純種分離法，先將待分離的材料作一系列的稀釋(如1:10、1:100、1:1000……)，然后分別取不同稀釋液少許，與已熔化并冷卻至45℃的瓊脂培養(yǎng)基相混合，搖勻后，傾入滅過菌的培養(yǎng)皿中，待瓊脂凝固后，保溫培養(yǎng)一定時間即可出現(xiàn)菌落。如果稀釋得當，平皿上就可出現(xiàn)分散的單個菌落，這個菌落可能就是由一個細菌繁殖形成的。隨后挑取該單個菌落，或重復(fù)以上操作數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)。稀釋平板法

將已熔化的培養(yǎng)基倒入無菌平皿，冷卻凝固后，用接種環(huán)沾取少許待分離的材料，在培養(yǎng)基表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物將隨著劃線次數(shù)的增加而分散，經(jīng)保溫培養(yǎng)形成菌落。劃線開始的部分細菌分散度小，形成的菌落往往連在一起。由于連續(xù)劃線，微生物逐漸減少，劃到最后，?？尚纬蓡蝹€孤立的菌落。這種單個菌落可能由一個細胞繁殖而來，故可獲得純培養(yǎng)。劃線法這種方法是從待分離的材料中挑取一個細胞來培養(yǎng)，從而獲得純培養(yǎng)。具體方法是將顯微鏡挑取器（單胞分離器）裝置在顯微鏡上，把一滴細菌懸液置于載玻片上，用顯微鏡挑取器的極細的毛細吸管，吸取視野中的一個單細胞，再接種培養(yǎng)基上培養(yǎng)。單細胞挑取法不同微生物需要不同的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件。各種微生物對不同的化學(xué)試劑如消毒劑、染料、抗生素及其他物質(zhì)等具有不同的抵抗能力?！巴镀渌?、取其所抗”，便可配制成適合于某種微生物生長而限制其他微生物生長的各種選擇性培養(yǎng)基，以達到純種分離的目的。另外，也可以將待分離的樣品先進行適當處理，以消除不希望分離到的微生物。選擇培養(yǎng)基分離法稀釋平板法－－既可定性，又可定量，用途廣泛

平板劃線法－－方法簡便，多用于分離細菌

單細胞挑取法－－局限于高度專業(yè)化的科學(xué)研究

選擇培養(yǎng)基分離法－－適用于分離某些生理類型較特殊的微生物微生物純培養(yǎng)分離方法的比較微生物特別是單細胞微生物，體積很小，個體的生長很難測定，而且也沒有什么實際應(yīng)用價值。因此，測定它們的生長不是依據(jù)細胞個體的大小，而是測定群體的增加量，即群體的生長。細菌的數(shù)目就表示了它的生長量。三、微生物生長的測定單細胞微生物數(shù)量的測定1.全數(shù)測定（1）計數(shù)器測定法

用特制的細菌計數(shù)器或血球計數(shù)器進行計數(shù)。取一定容積稀釋的單細胞微生物懸液置于計數(shù)器載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室內(nèi)。由于計數(shù)室的容積是己知的(總面積為1平方毫米，高0.1毫米)，并有一定刻度。因此，可根據(jù)計數(shù)器刻度內(nèi)的細菌數(shù)，計算出樣品中的含菌數(shù)。（每個小格的容積為1/4000000mL）

每毫升原菌液含菌數(shù)=小格的平均菌數(shù)×4×106×稀釋倍數(shù)（2）染色涂片計數(shù)法

將已知體積的待測材料，均勻地涂布在載玻片的已知面積上，經(jīng)固定染色后，在顯微鏡下計算染色涂片上的細菌數(shù)。原理是懸液中細胞濃度與混濁度成正比，與透光度成反比。測定菌懸液的光密度或透光度可以反映細胞的濃度。將未知細胞數(shù)的懸液與已知細胞數(shù)的懸液相比，可以從已知懸液的稀釋倍數(shù)，求出未知懸液所含的細胞數(shù)。此法比較簡便。注意：樣品顏色不宜太深；樣品中不要混雜其他物質(zhì)，否則不能使用；同時菌懸液濃度必須在107/毫升以上才能顯示可信的混濁度。(3)比濁法

（1）稀釋平板法

像稀釋平板分離法一樣，先將待測菌液作一系列10倍稀釋，使平皿上長出的菌落數(shù)在30-300個之間。然后將最后三個稀釋度的稀釋液各取一定量(一般為1毫升)與融化并冷至45℃左右的瓊脂培養(yǎng)基一起，傾入無菌平皿中搖勻，靜置，待凝固后進行保溫培養(yǎng)，通過平皿上出現(xiàn)的菌落數(shù)，便可推算出原菌液含菌數(shù)。計算公式：總活菌數(shù)/毫升=同一稀釋度三次重復(fù)的菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù)

2.活菌測數(shù)（2）液體稀釋培養(yǎng)法取待測菌液進行一系列的稀釋，然后分別取其1mL稀釋液做3－5次重復(fù)的試管培養(yǎng)，觀察菌體生長情況，如有菌生長，培養(yǎng)液發(fā)生混濁，由于菌液經(jīng)多次稀釋，所以，菌數(shù)隨稀釋度的增高而減少，在稀釋度很高的菌液中菌數(shù)極少或無。這樣可根據(jù)統(tǒng)計學(xué)上“或然率”理論計算出細胞的近似數(shù)。多細胞微生物的生長，如絲狀霉菌的生長通常是以其菌絲生長的長度或菌絲增加的重量作為生長指標。最簡單的方法是將霉菌接種在培養(yǎng)皿內(nèi)固體培養(yǎng)基的中央，在一定時間內(nèi)測定菌落的直徑或面積。缺點是僅能測菌落的直徑或面積，不能包括菌落的厚度和生長在培養(yǎng)基內(nèi)的菌絲，因此不能反映菌絲生長的總量。多細胞微生物生長的測定1.干重法取一定量的培養(yǎng)液，然后用離心或過濾的方法將菌體從培養(yǎng)基內(nèi)分離出來，經(jīng)洗凈、烘干、稱重，求得培養(yǎng)物中細胞的重量，以此作為生長量的指標。一般來說，細菌的干重約為濕重的20-25%。此法較為直接而又可靠，主要用于調(diào)查研究。但只適用于菌體濃度較高的樣品，而且要求樣品中不含非菌體的干物質(zhì)。細胞物質(zhì)量的測定

蛋白質(zhì)是細胞的主要物質(zhì)，含量比較穩(wěn)定，而氮又是蛋白質(zhì)的重要組成。因此測定細胞內(nèi)含氮量可以表示其生長情況。方法要點：從一定量培養(yǎng)物中分離出細菌，洗滌，以除去培養(yǎng)基帶入的含氮物質(zhì)。再用凱氏定氮法測定總含氮量。一般細菌的含氮量約為原生質(zhì)干重的14%。而總氮量與細胞蛋白質(zhì)總含量的關(guān)系可用下式計算：蛋白質(zhì)總量=含氮量%×6.25此法只適用于細胞濃度較高的樣品，同時操作過程也較麻煩，故主要用于科學(xué)研究。2.含氮量法每種方法都各有優(yōu)點和局限性。只有在考慮了這些因素同要著手解決的問題之間的關(guān)系以后，才能對具體的方法進行選擇。將少量單細胞純培養(yǎng)接種到一恒定容積的新鮮液體培養(yǎng)基中，在適宜的條件下培養(yǎng)，定時取樣測定細菌含量，可以看到以下現(xiàn)象：開始有一短暫時間，細菌數(shù)量并不增加，隨之細菌數(shù)目增加很快，繼而細菌數(shù)又趨穩(wěn)定，最后逐漸下降。如果以培養(yǎng)時間為橫坐標，以細菌數(shù)目的對數(shù)或生長速度為縱坐標作圖，可以得到一條曲線，稱為生長曲線。四、生長曲線根據(jù)細菌生長繁殖速率的不同，可將生長曲線大致分為延遲期、對數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期。細菌的生長曲線圖

生長階段特征延滯期分裂遲緩、代謝活躍。生長速度近于零。延遲期的長短與菌種、種齡、接種量和培養(yǎng)基成分有關(guān)。對數(shù)期又稱指數(shù)期。突出特點是細菌數(shù)以幾何級數(shù)增加，代時穩(wěn)定，細菌數(shù)目的增加與原生質(zhì)總量的增加。穩(wěn)定期新增殖的細胞數(shù)與老細胞的死亡數(shù)幾乎相等，整個培養(yǎng)物中二者處于動態(tài)平衡，此時生長速度又逐漸趨向零。菌體產(chǎn)量達到最高，細胞開始儲藏糖原、脂肪等儲藏物，產(chǎn)芽孢的開始形成芽孢，開始合成次生代謝產(chǎn)物。衰亡期死亡細胞數(shù)目超過新生細胞，細胞形態(tài)多樣，細胞開始自溶，開始釋放次生代謝產(chǎn)物。整個生長過程可以分為4個階段，各階段的特點見表代時即單個細胞完成一次分裂所需的時間，也叫增代時間。單細胞微生物，在對數(shù)期細胞數(shù)按幾何級數(shù)增加，1→2→4→8→……，若以次方的形式表示，即20→21→22→23→2n。很清楚，這里的指數(shù)“n”就是細菌分裂的次數(shù)或增殖的代數(shù)。如果在時間t0時菌數(shù)為x，經(jīng)過一段時間，到t1時，繁殖“n”代后，菌數(shù)為y，則代時(G)可以下式表示：G＝（t1－

t0）／n，Y＝X﹡2nn＝3.3㏒（y／x）例如：設(shè)大腸桿菌在接種時的細胞濃度為100個/ml，經(jīng)400分鐘的培養(yǎng)，細胞濃度增至10億個/ml，求該菌的世代時間和繁殖代數(shù)。根據(jù)公式G=（t1-t0）/3.3(lgy-lgx)t0為接種的時間x=100t1為培養(yǎng)時間(400分鐘)

y=1，000，000，000n=3.3(lg109-lg102)=3.3×7=23.1代入上式G=400-0/23.1=17.3即在上述培養(yǎng)物中，大腸桿菌的代時為17.3分鐘，400分鐘內(nèi)共繁殖了23.1代。將微生物置于一定容積的培養(yǎng)基中，經(jīng)過培養(yǎng)生長，最后一次收獲，此稱分批培養(yǎng)(batchculture)。通過對細菌純培養(yǎng)的生長曲線的分析可知，在分批培養(yǎng)中，培養(yǎng)基一次加入，不予補充，細菌的對數(shù)生長期不可能長時間維持。如果在培養(yǎng)器中不斷補充新鮮營養(yǎng)物質(zhì)，并及時不斷地以同樣速度排出培養(yǎng)物(包括菌體及代謝產(chǎn)物)，理論上講，對數(shù)生長期就可無限延長。這種方法就叫連續(xù)培養(yǎng)法。四、連續(xù)培養(yǎng)(一)恒濁連續(xù)培養(yǎng)不斷調(diào)節(jié)流速而使細菌培養(yǎng)液濁度保持恒定的連續(xù)培養(yǎng)方法叫恒濁連續(xù)培養(yǎng)。在恒濁連續(xù)培養(yǎng)中裝有濁度計，借光電池檢測培養(yǎng)室中的濁度(即菌液濃度)，并由光電效應(yīng)產(chǎn)生的電信號強弱變化，來自動調(diào)節(jié)新鮮培養(yǎng)基流入和培養(yǎng)物流出培養(yǎng)室的流速。(二)恒化連續(xù)培養(yǎng)控制恒定的流速，使由于細菌生長而耗去的營養(yǎng)物及時得到補充，培養(yǎng)室中營養(yǎng)物濃度基本恒定，從而保持細菌的恒定生長速率，故稱恒化連續(xù)培養(yǎng)，又叫恒組成連續(xù)培養(yǎng)。第二節(jié)環(huán)境條件對微生物影響生長是微生物與外界環(huán)境因素共同作用的結(jié)果。環(huán)境條件的改變，在一定限度內(nèi)，可能上能引起微生物形態(tài)，生理、生長、繁殖等特征的改變，當環(huán)境條件的變化超過一定極限，則導(dǎo)致微生物的死亡。研究環(huán)境條件與微生物之間的相互關(guān)系，有助于了解微生物在自然界的分布與作用，也使人們有可能制訂增進或降低、甚至完全破壞微生物生命活動的有效措施。介紹幾個有關(guān)的術(shù)語防腐

是一種抑菌作用。用某些理化因子，使物體內(nèi)外的微生物暫時處于不生長、繁殖但又未死亡的狀態(tài)。消毒

是指殺死或消除病原微生物的措施，可達到防止傳染病傳播的目的。滅菌是指用物理或化學(xué)因子，使非于物體中的所有生活微生物，永久性地喪失其生活力，包括最耐熱的細菌芽孢。這是一種徹底的殺菌措施。化療

是指利用某些具有選擇毒性的化學(xué)藥物(如磺胺)或抗生素，來抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長繁殖，對生物體進行治療，可以有效地消除宿主體內(nèi)的病原體，但對宿主卻沒有或基本上沒有損害。一、溫度溫度是影響有機體生長與存活的最重要的因素之一。微生物生長的溫度范圍較廣，已知的微生物在零下12-100℃均可生長。而每一種微生物只能在一定的溫度范圍內(nèi)生長。各種微生物都有其生長繁殖的最低溫度、最適溫度、最高溫度和致死溫度。最低生長溫度：是指微生物進行繁殖的最低溫度界限，如果低于此溫度，則生長完全停止。最適生長溫度：能夠使微生物迅速生長繁殖的溫度叫做最適生長溫度，在此溫度下，微生物群體生長繁殖速度最快，代時最短。不同微生物的最適生長溫度是不一樣的。應(yīng)該著重指出：最適合生長溫度不一定是一切代謝活動的最好溫度。最高生長溫度：是指微生物生長繁殖的最高溫度界限。致死溫度：最高生長溫度若進一步升高，便可殺死微生物，這種致死微生物的最低溫度界限即為致死溫度，致死溫度與處理時間有關(guān)。微生物的最適溫度類型(1)低溫型適宜在10-15℃范圍內(nèi)生長，它們常分布在地球兩極地區(qū)的水域和土壤中。(2)中溫型絕大多數(shù)微生物屬于這一類。最適溫度在25-37℃之間。(3)高溫型它們適于在45-50℃以上的溫度中生長，常見于溫泉、日照充足的土壤表面、堆肥堆、發(fā)酵飼料等腐爛有機物中。(1)干熱滅菌①焚燒滅菌法此法滅菌徹底，迅速簡便，但使用范圍有限。常用于接種工具、污染物品以及實驗動物尸體等廢棄物的處理。②干熱滅菌法主要在干燥箱中利用熱空氣進行滅菌。通常160℃處理1-2小時便可達到滅菌的目的。如果被處理物傳熱性差、體積較大或堆積過擠時，需適當延長時間。此法只適用于玻璃器皿、金屬用具等耐熱物品的滅菌。其優(yōu)點是可保持物品干燥。高溫對微生物的影響和利用高溫滅菌的方法(2)濕熱滅菌①煮沸消毒法物品在水中煮沸(100℃)15分鐘以上，可殺死細菌的所有營養(yǎng)細胞和部分芽孢。這種方法適用于解剖用具等的消毒。②間歇滅菌法將待滅菌物品置于蒸鍋及其他滅菌器中，常壓下100℃處理15-30分鐘，以殺死其中的營養(yǎng)細胞。冷卻后，置于一定溫度(28-37℃)保溫過夜，使其中殘存的芽孢萌發(fā)營養(yǎng)細胞，再以同樣方法加熱處理。如此反復(fù)三次，可殺滅所有芽孢和營養(yǎng)細胞。此法的缺點是滅菌較費時，一般只用于不耐熱的藥品、營養(yǎng)物等的滅菌。高溫滅菌的方法③巴斯德消毒法即用較低的溫度處理牛奶、酒類等飲料，以殺死其中的病原菌如結(jié)核桿菌、傷寒桿菌等，但又不損害營養(yǎng)與風味。如用62-63℃則處理30分鐘，若以71℃，只需15秒鐘。這種方法只能殺死大多數(shù)腐生菌的營養(yǎng)體而對芽孢無損害。此法是基于結(jié)核桿菌的致死溫度62℃15分鐘而規(guī)定的。這種消毒法系巴斯德發(fā)明，故稱巴斯德消毒法。④高壓蒸汽滅菌法

高壓蒸汽滅菌法是實驗室及生產(chǎn)中常用的滅菌方法。適用于各種耐熱物品的滅菌。常采用1千克/厘米2(15磅/英寸2)的蒸汽壓，121℃的溫度下處理15-30分鐘，即可達到滅菌的目的。滅菌所需時間和溫度取決于被滅菌物品的性質(zhì)、體積與容器類型等。對體積大、熱傳導(dǎo)性較差的物品，加熱時間應(yīng)適當延長。

蒸汽熱穿透力強，可迅速引起蛋白質(zhì)凝固變性。所以高壓蒸汽滅菌在濕熱滅菌法中效果最佳、應(yīng)用較廣。當溫度低于最低溫度范圍，微生物代謝活動降低，接近于停止狀態(tài)，但原生質(zhì)結(jié)構(gòu)通常并未破壞，不至于很快死亡，它可在一個較長的時間內(nèi)保存其生活力，當溫度提高后，仍可恢復(fù)其正常生命活動。低溫保存菌種的方法，就是利用這個原理。一般說來，微生物在干燥和真空的條件下可保持較長期的存活力。低溫對微生物的影響二、氧氣好氧菌兼性厭氧菌厭氧菌耐氧菌微好氧菌三、pHpH值表示某水溶液中氫離子濃度的負對數(shù)值。不同種類微生物有其最適生長pH外，即使同一種微生物在其不同生長階段和不同的生理、生化過程，也有不同的最適pH。微生物的生命活動過程中會能動的改變外界環(huán)境的pH，這是培養(yǎng)基的原始pH在培養(yǎng)微生物的過程中會時時發(fā)生改變的原因。四、濕度水分是微生物生命活動中的基本物質(zhì)之一。干燥能引起微生物細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的變性和鹽類濃度的增高，這是抑制微生物生長或促進其死亡的主要原因。食品工業(yè)中用干燥法將食品制成干制食品，可以達到保藏的目的。微生物的細胞表面有一層半滲透膜，它使細胞具有一定的滲透壓力，能調(diào)節(jié)細胞內(nèi)外的滲透壓，使其平衡。高滲透壓下，細胞質(zhì)壁分離低滲透壓下，細胞吸收膨脹等滲透壓下，細胞代謝正常五、滲透壓輻射是指通過空氣或外層空間以波動方式從一個地方傳播或傳遞到另一地方的能源。它們或是離子或是電磁波。電磁輻射包括可見光、紅外線、紫外線、X射線和γ射線等。光量子所含能量隨不同波長而改變，一般波長愈長，則所含能量愈低，反之則高。六、輻射(1)紫外輻射

紫外線是非電離輻射，以波長265-266納米的殺菌力最強。紫外輻射對微生物有明顯的致死作用，是強殺菌劑。由于紫外線穿透能力差，不易透過不透明的物質(zhì)，故紫外殺菌燈只適用于空氣及物體表面消毒。紫外輻射的殺菌機制是復(fù)雜的，現(xiàn)知主要是由于它對DNA的作用，最明顯的是形成胸腺嘧啶二聚體。經(jīng)紫外輻射處理后，受損傷的微生物細胞若再暴露于可見光中，一部分可恢復(fù)正常，稱光復(fù)活現(xiàn)象。

X射線與α射線、β射線和Υ射線均為電離輻射。在足夠劑量時，對各種細菌均有致死作用。它們的波長很短，有足夠的能量從分子中逐出電子而使之電離。換句說，電離輻射的殺菌作用不是靠輻射直接對細胞作用，而是間接地通過射線引起環(huán)境中水分子和細胞中水分子在吸收能量后導(dǎo)致電離所產(chǎn)生的自由基起作用。這些游離基團能與細胞中的敏感大分子反應(yīng)并使之失活。電離輻射效應(yīng)無專一性。常用于一次性塑料制品的消毒，也用于食品的消毒。(2)電離輻射超聲波(頻率在20000赫茲以上)具有強烈的生物學(xué)作用。超聲波的作用是使細胞破裂，所以幾乎所有的微生物都能受其破壞，其效果與頻率、處理時間、微生物種類、細胞大小、形狀及數(shù)量等均有關(guān)系。一般來說，高頻率比低頻率殺菌效果好，球菌較桿菌抗性強。細胞芽孢具更強的抗性，大多數(shù)情況下不受超聲波影響。七、超聲波超聲波致死微生物是引起細胞破裂，內(nèi)含物外溢，因此，科研中常用此法破碎細胞，以研究其化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)，發(fā)細胞結(jié)構(gòu)、抗原結(jié)構(gòu)和酶的活性等。八.某些化學(xué)物質(zhì)1、重金屬及其化合物大多數(shù)重金屬及其化合物都是有效的殺菌劑或防腐劑。其作用最強的是Hg、Ag和Cu。它們的殺菌作用，有的易與細胞蛋白質(zhì)結(jié)合而使之變性；有的在進入細胞后與酶上的-SH基結(jié)合而使酶失去活性。從而抑制微生物的生長或?qū)е滤劳觥?/p>

汞汞化合物有二氯化汞(HgCl2)、氯化亞汞(Hg2Cl)、氯化汞(HgCl)和有機汞。二氯化汞又名升汞，是殺菌力極強的消毒劑之一，1∶500-1∶2000的升汞溶液對大多數(shù)細菌有致死作用，實驗室中曾用0.1%的HgCl2消毒非金屬器皿。由于汞鹽對金屬有腐蝕作用，而且對人及動物有劇毒，其應(yīng)用受到較大的限制。現(xiàn)已合成了許多汞有機化物，如硫柳汞等。毒性較低。紅汞(汞溴紅)也是最常用的消毒劑之一。銀

長期來作為一種溫和防腐劑而被使用。0.1-1%硝酸銀(AgNO3)用于皮膚消毒。新生嬰兒常用1%硝酸銀滴入眼內(nèi)以預(yù)防傳染性眼炎。蛋白質(zhì)與銀或氧化銀制成的膠體銀化物，刺激性較小，也可作為消毒劑或防腐劑。銅

硫酸銅是主要的銅化物殺菌劑，對真菌及藻類效果較好。在農(nóng)業(yè)上為了殺傷真菌、螨以至防治某些植物病害，常用硫酸銅與石灰以適當比例配制成波爾多液使用。酚又名石炭酸。它們對細菌的有害作用可能主要是使蛋白變性，同時又有表面活性劑的作用，破壞細菌膜的透性，使細胞內(nèi)含物外溢。當濃度高時是致死因子，反之則起抑菌作用。例如：0.5-1%的水溶液可用于皮膚消毒，但具刺激性；2-5%的溶液可用于消毒痰、糞便與用具；3-5%的溶液有很好的殺菌效果；5%的則用作噴霧以消毒空氣。芽孢與病毒比細菌營養(yǎng)細胞的抗性強，細菌的芽孢在5%的石炭酸溶液中仍可存活幾小時。2、酚及其衍生物甲酚酚的衍生物，殺菌力比酚強幾倍。甲酚在水中的溶解度較低，但在皂液與堿性溶液中易形成乳濁液。市售的消毒劑煤酚皂液(來蘇爾)就是甲酚與肥皂的混合液，常用3-5%的溶液來消毒皮膚、桌面及用具等。它是脫水劑、蛋白質(zhì)變性劑，也是脂溶劑，可使蛋白質(zhì)脫水、變性，損害細胞而具殺菌能力。50-75%的乙醇便可殺死營養(yǎng)細胞；75%的乙醇殺菌效果最好，超過75%以至無水酒精效果較差。無水乙醇可能與菌體接觸后迅速脫水，表面蛋白質(zhì)凝固，形成了保護膜，阻止了乙醇分子進一步滲入。使用時應(yīng)根據(jù)消毒物品干燥與否來確定使用濃度。乙醇是普遍使用的消毒劑，常用于實驗室內(nèi)的玻棒、玻片及其他用具的消毒。3、醇甲醇的殺菌力較乙醇差，而且對人，尤其是對眼睛有害，不適于作消毒劑。醇類物質(zhì)，隨著分子量的增大，殺菌力增強。例如戊醇＞丁醇＞丙醇＞乙醇＞甲醇。那些高級醇雖殺菌力強于乙醇，由于丙醇以上的醇不易與水相混，故一般不用作消毒劑。甲醛也是一種常用的殺細菌與殺真菌劑，效果良好。純甲醛為氣體狀，可溶于水，市售的福爾馬林溶液就是37-40%的甲醛水溶液。由于甲醛具有腐蝕性而且刺激性很大，不宜人體使用，一般用10%的溶液進行熏蒸以消毒廠房、無菌室或者傳染病患者的家具、房屋等。甲醛既有殺菌作用又有抑菌作用，也不受有機物質(zhì)的影響。4、甲醛碘

是強殺菌劑。3-7%碘溶于70-83%的乙醇中配制成碘酊，是皮膚及小傷口有效的消毒劑。碘一般都作外用藥。據(jù)試驗，1%的碘酒或1%碘甘油溶液，10分鐘內(nèi)可殺死一般的細菌和真菌，并使病毒滅活。關(guān)于碘的殺菌機制還不清楚，有人認為，它的作用可能是碘不可逆地與菌體蛋白質(zhì)(或酶)中的酪氨酸