人教版高中生物選修一專題二《微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用》知識點(diǎn)歸納

·培育基：人們依據(jù)微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長生殖的養(yǎng)分基質(zhì)，是進(jìn)展微生物培育的物質(zhì)根底?！づ嘤罁?jù)物理性質(zhì)可分為液體培育基半固體培育基和固體培育基。在液體培育基中參加凝固劑瓊脂〔后，制成瓊脂固液體培育基固體培育基應(yīng)用于微生物的分別和鑒定，半固體培育基則常用于觀看微生物的運(yùn)動及菌種保藏等?！ひ罁?jù)成分培育基可分為人工合成培育基和自然培育基。合成培育基是用成分的化學(xué)自然培育基是用化學(xué)成分不明的自然物質(zhì)配制而成，常用于實(shí)際工業(yè)生產(chǎn)。·依據(jù)培育基的用途，可將培育基分為選擇培育基和鑒定培育基。選擇培育基是指在培育鑒別培育基同類別的微生物?！にo機(jī)鹽、碳源、氮源、生長因子等?！ONaHCO等無機(jī)碳源；糖類、石油、2 3花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源?！さ矗耗転槲⑸锏拇x供給氮元素的物質(zhì)。如NNHNO-、NH+〔無機(jī)氮源〕蛋白質(zhì)、2 3 3 4氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨〔有機(jī)氮源〕等。N。2·培育基還要滿足微生物生長對pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培育乳酸桿菌時(shí)需要在培育基中添加維生素，培育霉菌時(shí)須將培育基的pH調(diào)至酸性，培育細(xì)菌是需要將pH中性或微堿性，培育厭氧型微生物是則需要供給無氧的條件·無菌技術(shù)·獲得純潔培育物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，要留意以下幾個(gè)方面：①對試驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)展清潔和消毒。②將用于微生物培育的器皿、接種用具和培育基等器具進(jìn)展滅菌。③為避開四周環(huán)境中微生物的污染，試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰四周進(jìn)展。④試驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避開已經(jīng)滅菌處理的材料用具與四周的物品相接觸。無菌技術(shù)除了用來防止試驗(yàn)室的培育物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？答：無菌技術(shù)還能有效避開操作者自身被微生物感染?！は九c滅菌的區(qū)分消毒指使用較為溫存的物理或化學(xué)方法僅殺死物體外表或內(nèi)部一局部對人體有害的微生物〔不包括芽孢和孢子〕煮沸消毒法，巴氏消毒法〔對于一些不耐高溫的液體〕還有化學(xué)藥劑〔如酒精、氯氣、石炭酸等〕消毒、紫外線消毒。滅菌法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法：①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；③培育基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④外表滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈。比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度

消滅微生物的數(shù)量

芽孢和孢子能否被消滅消毒 較為溫存滅菌 猛烈

局部生活狀態(tài)的微生物 不能全部微生物 能制作牛肉膏蛋白胨固體培育基方法步驟：計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。倒平板操作的步驟：①將滅過菌的培育皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培育基的錐形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶，將瓶口快速通過火焰。〔約10～20mL〕倒入培育皿，左手馬上蓋上培育皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固，大約需5～10min。然后，將平板倒過來放置，使培育皿蓋在下、皿底在上?！さ蛊桨宀僮鞯臓庌q培育基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么方法來估量培育基的溫度？可以進(jìn)展倒平板了。為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培育基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：平板冷凝后，皿蓋上會分散水珠，凝固后的培育基外表的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培育基外表的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培育基，造成污染。4培育微生物嗎？為什么？微生物。純化大腸桿菌微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培育基外表連續(xù)劃線的操作。將聚攏的菌種逐步稀釋的子細(xì)胞群體，這就是菌落。稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)展一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培育基的外表，進(jìn)展培育。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使聚攏在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培育基外表形成單個(gè)的菌落，以便于純化菌種。平板劃線法操作步驟：①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并翻開棉塞。③將試管口通過火焰。④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。⑤將試管通過火焰，并塞上棉塞。⑥左手將皿蓋翻開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。留意不要?jiǎng)澠婆嘤蟆＂咦茻臃N環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開頭往其次區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。留意不要將最終一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。⑧將平板倒置放入培育箱中培育?！て桨鍎澗€操作的爭辯為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作完畢時(shí)，仍舊需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？漸漸削減，以便得到菌落。劃線完畢后灼燒接種環(huán)，能準(zhǔn)時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)展劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。在作其次次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開頭劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開頭細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步削減，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌生殖而來的菌落。涂布平板操作的步驟：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。②取少量菌液，滴加到培育基外表。③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8～10s。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培育基外表。涂布平板操作的爭辯涂布平板的全部操作都應(yīng)在火焰四周進(jìn)展。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，2頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰四周；等等。菌種的保存對于頻繁使用的菌種，可以承受臨時(shí)保藏的方法。①臨時(shí)保藏方法放入4℃的冰箱中保藏。以后每3～6個(gè)月，都要重將菌種從舊的培育基上轉(zhuǎn)移到穎的培育基上。②缺點(diǎn)：這種方法保存的時(shí)間不長，菌種簡潔被污染或產(chǎn)生變異。對于需要長期保存的菌種，可以承受甘油管藏的方法。3mL1mL1mL充分混勻后，放在－20℃的冷凍箱中保存。疑難解答生物的養(yǎng)分養(yǎng)分是指生物攝取、利用養(yǎng)分物質(zhì)的過程。養(yǎng)分物質(zhì)是指維持機(jī)體生命活動，保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì)。人及動物的養(yǎng)分物質(zhì)：水、無機(jī)鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類。植物的養(yǎng)分物質(zhì)：礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類。微生物的養(yǎng)分物質(zhì)：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特別養(yǎng)分物質(zhì)五類。確定培育基制作是否合格的方法1～2否則需要重制備。素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是由于他們能合成脲酶。尿素最初是從人的尿液中覺察的篩選菌株試驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理人為供給有利于目的菌株生長的條件〔包括養(yǎng)分、溫度、pH等〕，同時(shí)抑制或阻擋其他微生物生長。選擇性培育基培育基，稱作選擇培育基。配制選擇培育基的依據(jù)不參加有機(jī)物可以選擇培育自養(yǎng)微生物；培育基中不參加氮元素，可以選擇培育能固氮的微生物；參加高濃度的食鹽可選擇培育金黃色葡萄球菌等。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理3～5個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)，并取平均值。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。承受此方法的留意事項(xiàng)：130~3002.為了防止菌落集中，影響計(jì)數(shù)，可在培育基中參加TTC3.本法僅限于形成菌落的微生物設(shè)置比照設(shè)置比照的主要目的是排解試驗(yàn)組中非測試因素對試驗(yàn)結(jié)果的影響排解任何其他可能緣由的干擾，證明確實(shí)是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。試驗(yàn)設(shè)計(jì)等的綜合考慮和安排。土壤取樣：同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物，數(shù)量最大，種類最多。在富含有pH≈7的土壤中取樣。鏟去3～8cm的土壤層取樣。樣品的稀釋：樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實(shí)際操作中，通常選用肯定稀釋范圍的樣品液進(jìn)展培育，以保證獲得菌落數(shù)在30300平板。測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104105 106測定放線菌的數(shù)量，一般選用103 104105測定真菌的數(shù)量，一般選用102 103 104微生物的培育與觀看不同種類的微生物，往往需要不同的培育溫度和培育時(shí)間。細(xì)菌30~37℃1~225~28℃5~725~28℃3~424因培育時(shí)間缺乏而導(dǎo)致一樓菌落的數(shù)目。一般來說，在肯定的培育條件下〔一樣的培育基、唯獨(dú)及培育時(shí)間〕，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。外形、大小、隆起程度、顏色。疑難解答〔1〕如何從平板上的菌落數(shù)推想出每克樣品中的菌落數(shù)？3克樣品中的菌落數(shù)=〔C/V〕*M其中，CV〔ml〕，M纖維素，一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素與纖維素酶棉花是自然界中纖維素含量最高的自然產(chǎn)物，木材、作物秸稈等也富含纖維素。C酶、C酶和葡萄糖苷酶，1 X成葡萄糖，為微生物的生長供給養(yǎng)分。纖維素分解菌的篩選篩選方法：剛果紅染色法。能夠通過顏色反響直接對微生物進(jìn)展篩選。剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反響。當(dāng)我們在含有纖維素的培育基中參加剛果紅時(shí)，剛通過是否產(chǎn)生透亮圈來篩選纖維素分解菌。分別分解纖維素的微生物的試驗(yàn)流程〔〕→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上→選擇產(chǎn)生透亮圈的菌落土壤采集選擇富含纖維素的環(huán)境。剛果紅染色法分別纖維素分解菌的步驟 倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板剛果紅染色法種類課題