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微生物日常檢驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)微生物日常檢驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)培養(yǎng)基的滅菌及使用每次配制時(shí),要注意其生產(chǎn)日期是否在保質(zhì)期內(nèi),查看其開瓶日期及瓶口密封性,保證其未變質(zhì),并且未吸潮。培養(yǎng)基配制時(shí),稱量要準(zhǔn)確,包括鹽水的分裝要準(zhǔn)確。一定要保證現(xiàn)配制現(xiàn)滅菌,未滅菌的配好培養(yǎng)基不能長時(shí)間放置,更不可隔夜。滅菌時(shí)要保證恒溫、恒壓,同時(shí)要保證有效的滅菌時(shí)間。滅菌過的培養(yǎng)基要冰箱保存,可保存一周,一般不超過3天。而且要遵循“先入先出”原則,先配制的要先使用。在使用時(shí),要根據(jù)當(dāng)班次的使用量,用水浴鍋先將培養(yǎng)基溶化為液態(tài),然后及時(shí)調(diào)低水浴溫度(先化好的可從水浴取出,放在水浴鍋鍋蓋上)待用,千萬不可長時(shí)間使培養(yǎng)基處于高溫狀態(tài)。做產(chǎn)品微生物檢測時(shí),傾倒培養(yǎng)基溫度在45°C左右,不可過燙,避免將菌燙死;也不可過涼,化好的培養(yǎng)基又結(jié)塊凝固,不便于觀察結(jié)果。每瓶培養(yǎng)基均要做空白。盡量集中做樣,避免頻繁打開同一瓶培養(yǎng)基瓶塞,增大培養(yǎng)基的.污染幾率,出現(xiàn)誤差結(jié)果。培養(yǎng)基剩余過少時(shí),可先將其傾倒成空白用板。檢測環(huán)境的維持一、大環(huán)境(檢測室)檢測時(shí),窗戶和空調(diào)要關(guān)閉,或用酒精對(duì)房間進(jìn)行噴霧消毒,避免房間內(nèi)空氣流通影響超凈臺(tái)內(nèi)部環(huán)境(最好在有通排風(fēng)系統(tǒng)的恒溫恒濕無菌間進(jìn)行操作)。如果在原來的原料微生物檢測室進(jìn)行檢測,要定期開啟紫外燈對(duì)房間進(jìn)行殺菌。二、小環(huán)境(超凈工作臺(tái))定期清潔初效過濾器,要及時(shí)更換。檢測前,將超凈臺(tái)內(nèi)部進(jìn)行清潔,用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒,并提前半小時(shí)將超凈臺(tái)紫外燈打開,對(duì)超凈臺(tái)內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行殺菌。關(guān)紫外燈,開風(fēng)機(jī),調(diào)整合適進(jìn)風(fēng)量,風(fēng)量不可過低。每次檢測后,要對(duì)超凈臺(tái)內(nèi)部進(jìn)行清理、清潔,并用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒。紫外燈根據(jù)其使用壽命要及時(shí)更換。檢測同時(shí),要做上相應(yīng)菌落檢測的環(huán)境空白。檢測區(qū)域的選擇:a、 一般在距離超凈臺(tái)外沿的1/3-2/3區(qū)域進(jìn)行無菌操作;b、 要在酒精燈火焰的外焰保護(hù)區(qū)域進(jìn)行操作。工器具的潔凈度玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌。檢測用剪刀、勺子等物品要做到檢測專用,不可與其它操作器具混用,使用時(shí),先用75%酒精消毒,再采用灼燒方式進(jìn)行滅菌。接種針(環(huán))采用灼燒方式進(jìn)行滅菌,但要注意檢測時(shí)要先將接種針(環(huán))進(jìn)行冷卻。樣品的采集及檢測一、保證采樣器具的無菌性玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌,保證恒溫、時(shí)間足夠(但不可時(shí)間過長,容易導(dǎo)致玻璃器皿易裂紋而報(bào)廢)。取樣筐:使用前要用75%酒精進(jìn)行噴灑消毒。取樣勺:要保證其清潔消毒,清潔后用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒取樣袋:可先用酒精進(jìn)行擦拭消毒,再在超凈臺(tái)用紫外燈照射消毒,(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。電子稱表面用75%酒精消毒。二、人員操作保證手部的清洗、消毒:取樣前及檢測前都要先洗手再消毒。取樣要具有代表性(隨機(jī)樣、目的樣、綜合樣)且要標(biāo)示清楚。取樣完畢,不可在車間逗留,要及時(shí)將樣品放入超凈臺(tái),對(duì)其外表面進(jìn)行紫外燈照射消毒。在要求的檢測區(qū)域進(jìn)行操作。檢測前,要用75%酒精棉球?qū)悠反诓窟M(jìn)行擦拭消毒,再開口。往鹽水瓶加樣品時(shí),要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。樣品計(jì)量要準(zhǔn)確,稀釋倍數(shù)也要準(zhǔn)確(ImL吸管不允許將管口敲掉),進(jìn)行100倍稀釋時(shí),ImL吸管要伸入鹽水中,不可以將樣品從管壁流下去,同時(shí)要避免將管底部捅破。鹽水溫度以40°C左右為宜,不能過熱,會(huì)將部分微生物燙死;也不能溫度太低,不能將樣品溶解完全。進(jìn)行稀釋時(shí),要搖勻,保證溶液的均一性。傾倒平皿時(shí),要注意培養(yǎng)基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養(yǎng)基要適量,不可以太少,在培養(yǎng)過程中易干掉,微生物亦死亡,以15mL左右為宜。做大腸菌群樣時(shí),要提前將乳糖膽鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)管按需要量備好,放入超凈臺(tái)對(duì)外表面進(jìn)行紫外線滅菌。接二步時(shí),要注意先將接種針(環(huán))進(jìn)行冷卻,避免出現(xiàn)接不上菌落的情況,導(dǎo)致無法判斷、確認(rèn)。檢測完畢,及時(shí)放入相應(yīng)培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),并清理清潔超
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