藥物分析第(9)章

第九章

二氫吡啶類(lèi)鈣通道阻滯藥物的分析1第一節(jié)二氫吡啶類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)2一常見(jiàn)藥物的結(jié)構(gòu)與物理性質(zhì)苯基-1,4-二氫吡啶3硝苯地平

尼群地平尼莫地平

一常見(jiàn)藥物的結(jié)構(gòu)與物理性質(zhì)4二、主要理化性質(zhì)1.二氫吡啶環(huán)的還原性：二氫吡啶環(huán)具有還原性，可用氧化還原反應(yīng)鑒別或氧化還原滴定法進(jìn)行含量測(cè)定。2.硝基的氧化性：硝基被還原為芳伯氨基，顯重氮化-偶合反應(yīng)。3.二氫吡啶環(huán)氨基質(zhì)子解離性：與堿作用，環(huán)上1,4-位氫發(fā)生解離，形成p-π共軛而發(fā)生顏色變化。5二、主要理化性質(zhì)4.穩(wěn)定性：遇光極不穩(wěn)定，發(fā)生光化學(xué)歧化作用，因此應(yīng)避光操作。5.旋光性：C4手性碳原子，具旋光性，但臨床所有大多為消旋體。6.吸收光譜特性：芳環(huán)，紫外區(qū)有特征吸收。6第二節(jié)鑒別試驗(yàn)7一、化學(xué)鑒別法（一）

與亞鐵鹽反應(yīng)

苯環(huán)上硝基具有氧化性，可將氫氧化亞鐵氧化為紅棕色氫氧化鐵沉淀。尼莫地平的鑒別：取本品約20mg，加乙醇溶解后，加新制的5%硫酸亞鐵銨溶液2ml，硫酸溶液1滴與氫氧化鉀溶液1ml，強(qiáng)烈振搖，1分鐘內(nèi)沉淀由灰綠色變?yōu)榧t棕色。8一、化學(xué)鑒別法（二）

與氫氧化鈉試液反應(yīng)

二氫吡啶類(lèi)藥物的丙酮溶液與氫氧化鈉試液反應(yīng)顯橙紅色。硝苯地平、尼群地平、尼索地平硝苯地平的鑒別：取本品約25mg，加丙酮1ml溶解，加20%氫氧化鈉溶液3~5滴振搖，溶液顯橙紅色。9一、化學(xué)鑒別法

（二）

與氫氧化鈉試液反應(yīng)尼群地平:

取本品約50mg，加丙酮1ml，加20％氫氧化鈉試液3～5滴，溶液顯橙紅色。尼索地平：

取本品約30mg，加丙酮2ml溶解，加20％氫氧化鈉試液3～5滴，振搖，溶液顯橙紅色。10一、化學(xué)鑒別法（三）

沉淀反應(yīng)

1,4-二氫吡啶的結(jié)構(gòu)，可與重金屬鹽類(lèi)形成沉淀。尼莫地平與氯化汞反應(yīng)生成白色沉淀。尼群地平與碘化鉍鉀反應(yīng)生成橙紅色沉淀。

11一、化學(xué)鑒別法（四）

重氮化偶合反應(yīng)二氫吡啶類(lèi)藥物苯環(huán)硝基具有氧化性，在酸性下被鋅粉還原為芳伯氨基。

BP2010、JP15鑒別硝苯地平12二、分光光度法峰位（cm-1）歸屬1700~1680υC=O1530/1350υN=O1230~1000υC-O860~600Ar-C-HIR——硝苯地平1.UV2.IR13硝苯地平

(2)取本品適量，加三氯甲烷2ml使溶解，加無(wú)水乙醇制成每1ml約含15μg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法(附錄Ⅳ

A)測(cè)定，在237nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，在320～355nm的波長(zhǎng)處有較大的寬幅吸收。

(3)本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜(光譜集469圖)一致。14尼群地平

(2)避光操作。取本品，加無(wú)水乙醇制成每1ml中約含20μg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法(附錄Ⅳ

A)測(cè)定，在236nm與353nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，在303nm的波長(zhǎng)處有最小吸收。在353nm與303nm的波長(zhǎng)處的吸光度比值應(yīng)為2.1～2.3。

(3)本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜(光譜集600圖)一致。

15尼莫地平

(2)取本品適量，加乙醇制成每1ml含10μg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定(附錄Ⅳ

A)，在237nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。

(3)本品的紅外光吸收?qǐng)D譜與對(duì)照的圖譜(光譜集599圖)一致。16尼索地平

(2)避光操作。取本品，加無(wú)水乙醇制成每1ml中約含10μg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法(附錄Ⅳ

A)測(cè)定，在237nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。

(3)本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜(光譜集1127圖)一致。17非洛地平

(2)取本品，加乙醇制成每1ml中含20μg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法(附錄Ⅳ

A)測(cè)定，在238nm與361nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。

(3)本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜(光譜集794圖)一致。18三、色譜法1.HPLC2.TLC19

第三節(jié)有關(guān)物質(zhì)的檢查20二氫吡啶類(lèi)藥物遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光化學(xué)歧化作用，引入雜質(zhì)，各國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)中均規(guī)定在避光條件下進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查，大多采用HPLC法。21硝苯地平【檢查】有關(guān)物質(zhì)避光操作。取本品，作為供試品溶液；另取2，6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3，5-吡啶二甲酸二甲酯(雜質(zhì)Ⅰ)對(duì)照品與2，6-二甲基-4-(2-亞硝基苯基)-3，5-吡啶二甲酸二甲酯(雜質(zhì)Ⅱ)對(duì)照品，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中各約含10μg的混合溶液，作為對(duì)照品貯備液；用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(60:40)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm。供試品溶液的色譜圖中如有與雜質(zhì)Ⅰ峰、雜質(zhì)Ⅱ峰保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，均不得過(guò)0.1％；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液中硝苯地平峰面積(0.2％)；雜質(zhì)總量不得過(guò)0.5％。22尼群地平有關(guān)物質(zhì)避光操作。取本品用乙腈-水(20:56)混合溶液稀釋作為供試品溶液；另取2，6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-3，5-吡啶二甲酸甲酯乙酯(雜質(zhì)Ⅰ)對(duì)照品，精密加入供試品溶液1ml，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-四氫呋喃-水(20:24:56)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm。理論板數(shù)按尼群地平峰計(jì)算不低于3000，供試品溶液的色譜圖中如有與雜質(zhì)Ⅰ峰保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得大于0.1％；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液中尼群地平峰面積(1.0％)，其他雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液中尼群地平峰面積的2倍(2.0％)。23尼莫地平【檢查】有關(guān)物質(zhì)避光操作。取本品，流動(dòng)相溶解并定量稀釋作為供試品溶液；另取2，6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-3，5-吡啶二甲酸-2-甲氧乙酯異丙酯(雜質(zhì)Ⅰ)對(duì)照品，用流動(dòng)相溶解并定量稀釋?zhuān)鳛閷?duì)照溶液。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水(35:38:27)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm。供試品溶液的色譜圖中如有與雜質(zhì)Ⅰ峰保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過(guò)0.1％；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液中尼莫地平峰面積的0.5倍(0.5％)，各雜質(zhì)峰面積(雜質(zhì)Ⅰ峰面積乘以1.78)的和不得大于對(duì)照溶液中尼莫地平峰面積(1.0％)。供試品溶液中任何小于對(duì)照溶液主峰面積0.02倍的色譜峰可忽略不計(jì)。24尼索地平【檢查】有關(guān)物質(zhì)避光操作。取本品，精密稱(chēng)定，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.4mg的溶液，作為供試品溶液；另取2，6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3，5-吡啶二羧酸甲酸甲酯異丁酯(雜質(zhì)Ⅰ)對(duì)照品與2，6-二甲基-4-(2-亞硝基苯基)-3，5-吡啶二羧酸甲酸甲酯異丁酯(雜質(zhì)Ⅱ)對(duì)照品，精密加入供試品溶液1ml，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水(50:15:35)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm。供試品溶液的色譜圖中如有與雜質(zhì)Ⅰ峰、雜質(zhì)Ⅱ峰保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，均不得過(guò)0.2％；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液中尼索地平峰面積的0.5倍(0.5％)；雜質(zhì)總量不得過(guò)1.5％。

25非洛地平有關(guān)物質(zhì)避光操作。取本品，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，作為供試品溶液；另取2，6-二甲基-4-(2，3-二氯苯基)-3，5-吡啶二甲酸甲酯乙酯(雜質(zhì)Ⅰ)，精密加入供試品溶液1ml，用流動(dòng)相稀釋至刻度。搖勻，作為對(duì)照溶液。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水(50:15:35)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為238nm。供試品溶液色譜圖中如有與雜質(zhì)Ⅰ保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過(guò)0.1％；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液中非洛地平峰面積(0.5％)；雜質(zhì)總量不得過(guò)1.0％。26第四節(jié)含量測(cè)定27

硝苯地平的測(cè)定本品→無(wú)水乙醇溫?zé)崛芙?/p>

→加高氯酸溶液

→鄰二氮菲指示劑

→立即用硫酸鈰（0.1mol/L）滴定至近終點(diǎn)

→水浴加熱至50℃左右

→繼續(xù)滴定至橙紅色消失一、鈰量法28反應(yīng)原理：一、鈰量法29討論:1.化學(xué)計(jì)量關(guān)系1：2

每1ml硫酸鈰（0.1mol/L）相當(dāng)于17.32mg的C17H18N2O62.終點(diǎn)指示：

一、鈰量法30討論:3.在強(qiáng)酸性條件進(jìn)行：酸性較低時(shí)Ce4+易水解。4.Ce4+具黃色，Ce3+無(wú)色，故Ce4+自身可做指示劑，但不夠靈敏。5.Ce(SO4)2標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定，長(zhǎng)時(shí)間放置、曝光、加熱不會(huì)引起濃度的變化，且Ce4+還原為Ce3+是單電子轉(zhuǎn)移，不生成中間價(jià)態(tài)的產(chǎn)物，反應(yīng)簡(jiǎn)單，副反應(yīng)少。一、鈰量法31討論:6.大部分有機(jī)物不與Ce(SO4)2作用，不干擾測(cè)定。7.適合于糖漿劑、片劑等制劑的測(cè)定。

一、鈰量法32硝苯地平【含量測(cè)定】取本品約0.4g，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇50ml，微溫使溶解，加高氯酸溶液(取70％高氯酸8.5ml，加水至100ml)50ml、鄰二氮菲指示液3滴，立即用硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，在水浴中加熱至50℃左右，繼續(xù)緩緩滴定至橙紅色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于17.32mg的C17H18N2O6。33尼群地平【含量測(cè)定】取本品約0.13g，精密稱(chēng)定，加冰醋酸20ml及稀硫酸10ml，微溫使溶解，放冷；加鄰二氮菲指示液2～3滴，用硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)緩緩滴定至紅色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于18.02mg的C18H20N2O6。34尼莫地平【含量測(cè)定】取本品約0.18g，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇25ml，微溫使溶解，加高氯酸溶液(取70％高氯酸溶液8.5ml，加水至100ml)25ml，加鄰二氮菲指示液4滴，用硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液由橙紅色變?yōu)闇\黃綠色，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于20.92mg的C21H26N2O7。35尼索地平【含量測(cè)定】取本品約0.25g，精密稱(chēng)定，加冰醋酸20ml及稀硫酸10ml，微溫使溶解，放冷，加鄰二氮菲指示液2滴，用硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)滴定至近終點(diǎn)時(shí)，在水浴中加熱至50℃，繼續(xù)緩緩滴定至橙紅色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于19.42mg的C20H24N2O6。36非洛地平【含量測(cè)定】取本品0.3g，精密稱(chēng)定，加冰醋酸40ml溶解后，加稀硫酸20ml與鄰二氮菲指示液2滴，用硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)滴定至橙色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于19.21mg的C18H19Cl2NO4。37尼群地平軟膠囊含量測(cè)定避光操作在353nm處測(cè)定無(wú)水乙醇溶液吸光度采用對(duì)照品比較法二、紫外-可見(jiàn)分光光度法38尼群地平軟膠囊【含量測(cè)定】避光操作，取本品10粒置小燒杯中，用剪刀剪破囊殼，加無(wú)水乙醇少量，振搖使溶解后，將內(nèi)容物與囊殼全部轉(zhuǎn)移至具塞錐形瓶中，用無(wú)水乙醇反復(fù)沖洗剪刀及小燒杯，洗液并入錐形瓶中，將錐形瓶密塞，置40℃水浴中加熱15分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，將內(nèi)容物移入100ml量瓶中，用無(wú)水乙醇反復(fù)沖洗囊殼和錐形瓶，洗液并入量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置100ml量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見(jiàn)分光光度法(附錄Ⅳ

A)在353nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；另取尼群地平對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，用無(wú)水乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含20μg的溶液，同法測(cè)定，計(jì)算，即得。39三、HPLC法

高效液相色譜法可消除有關(guān)物質(zhì)及制劑中輔料的干擾，準(zhǔn)確測(cè)定藥物含量。尼莫地平分散片的測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠流動(dòng)相：甲醇-乙腈-水（35:38:27）檢測(cè)波長(zhǎng)：235nm理論板數(shù)按尼莫地平峰計(jì)算不低于8000R符合要求40硝苯地平片【含量測(cè)定】照高效液相色譜法(附錄Ⅴ

D)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(60:40)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為