實(shí)驗(yàn)性腎衰竭

實(shí)驗(yàn)性急性腎功能不全武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病生教研室

急性腎功能不全（AcuteRenalinsufficiency,ARI）

各種病因引起雙側(cè)腎臟在短期內(nèi)泌尿功能急劇降低，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)環(huán)境出現(xiàn)嚴(yán)重紊亂的病理生理過(guò)程。了解實(shí)驗(yàn)性腎功能不全動(dòng)物模型復(fù)制方法觀察升汞中毒家兔的一般狀態(tài)，尿的變化、血漿尿素氮水平以及腎臟大體形態(tài)改變根據(jù)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，分析討論急性腎功能不全的病理生理變化實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)動(dòng)物及模型復(fù)制的原理原理腎毒物HgCl2

引起家兔腎小管變性、壞死，導(dǎo)致嚴(yán)重的腎臟功能不全。觀察指標(biāo)

臨床變化對(duì)象手術(shù)操作指標(biāo)GFR下降、尿量下降尿液膀胱插管尿量尿成分改變蛋白尿、血尿和管型氮質(zhì)血癥血液頸動(dòng)脈插管血漿尿素氮水平腎臟形態(tài)改變腎臟兔尸體解剖腎臟色澤、體積、皮質(zhì)條紋等與對(duì)照家兔做比較：實(shí)驗(yàn)步驟1.復(fù)制模型（已完成）實(shí)驗(yàn)組

HgCl2肌肉注射1.2ml/Kg24h

對(duì)照組

NaCl

肌肉注射1.2ml/Kg24h

(1)稱(chēng)重麻醉:腹腔注射20%烏拉坦，5ml/kg2.手術(shù)及操作劍突恥骨聯(lián)合部位：左下腹近腹中線1cm方法：與腹壁呈45°進(jìn)針，進(jìn)入腹腔有落空感，回抽無(wú)血、腸內(nèi)容物，緩慢推注效果判斷：肌肉松弛，自然臥倒，眼瞼反射遲鈍，鉗夾皮膚無(wú)反應(yīng)等（2）固定備皮：固定：備皮：頸部正中：甲狀軟骨-胸骨上緣下腹正中：恥骨聯(lián)合上1～5cm（3）膀胱插管收集尿液下腹部切口，分離組織，暴露膀胱注射器抽膀胱內(nèi)尿3ml(備用)荷包縫合（膀胱無(wú)血管區(qū)）膀胱插管C左頸總動(dòng)脈迷走神經(jīng)頸內(nèi)靜脈胸骨舌骨肌胸鎖乳突?。?）左頸總動(dòng)脈插管分離抗凝耳緣靜脈肝素(1ml/kg)插管左頸總動(dòng)脈插管3.遠(yuǎn)心端，45o剪口，約為管徑的1/24.朝心臟方向插管2~3cm并固定頸總動(dòng)脈1.結(jié)扎遠(yuǎn)心端12.夾閉近心端2近心端心臟遠(yuǎn)心端頭部（5）尿液鏡檢，計(jì)錄管型數(shù)和細(xì)胞數(shù)（10個(gè)視野）管型（低倍鏡）細(xì)胞（高倍鏡）（6）尿蛋白定性檢查取尿液3ml于試管中酒精燈上加熱至沸騰若混濁，加入5%醋酸3-5滴再煮沸尿變清，尿內(nèi)有尿酸鹽

混濁加重，尿中有蛋白

程度等級(jí)蛋白含量（g%）清晰－<0.01輕度白色渾濁＋0.01~0.05乳樣渾濁＋＋0.05~0.2渾濁或少量碎片＋＋＋0.2~0.5絮狀渾濁＋＋＋＋>0.5（6）尿蛋白定性檢查（7）血漿尿素氮測(cè)定原理：血液中尿素在強(qiáng)酸條件下與二乙酰-肟和氨硫脲（DAM-TSC）共煮沸，生成紅色復(fù)合物，顏色深淺與尿素氮含量成正比例關(guān)系，用分光光度計(jì)測(cè)定OD值，可計(jì)算出尿素氮含量。方法①每組自頸總動(dòng)脈取血10ml到離心管,離心,3000rpm10min,吸出上層血漿置于干凈試管中備用；②按下表加入試劑：試劑（ml）空白管標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管(ABCD)血漿

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-0.02水0.50.10.5尿素氮標(biāo)準(zhǔn)液Ⅱ-0.4-DAM-TSC0.50.50.5酸混合液4.04.04.0③各管加好混勻后置沸水鍋中煮沸10min，流水中冷卻3min后測(cè)OD值（520nm波長(zhǎng)）,先以空白管調(diào)零，再讀取測(cè)定管值；④計(jì)算：測(cè)定管光密度(Du)標(biāo)準(zhǔn)管光密度(Ds)×0.002×1000.02=DuDs×10血漿尿素氮(mg%)=（8）形態(tài)學(xué)觀察①將家兔處死（耳緣靜脈注入空氣5~10ml）,取出腎臟；②觀察并比較兩組家兔腎臟的大體形態(tài)，如體積大小，表面色澤，皮質(zhì)條紋及色澤等。實(shí)驗(yàn)流程概括1.復(fù)制模型（已完成）(1)稱(chēng)重麻醉:腹腔注射20%烏拉坦，5ml/kg2.手術(shù)操作及檢測(cè)指標(biāo)(2)固定備皮：(3)膀胱插管收集尿液(4)左頸總動(dòng)脈插管(5)尿液鏡檢，計(jì)錄管型數(shù)和細(xì)胞數(shù)（10個(gè)視野）(6)尿蛋白定性檢查(7)血漿尿素氮測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)步驟（簡(jiǎn)明扼要）實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

中毒家兔對(duì)照家兔