第十章微生物的分布與消毒、滅菌

第十章消毒滅菌2023/2/41看書(shū)找答案1、什么是正常菌群？2、什么是滅菌、消毒、防腐、無(wú)菌及無(wú)菌操作？想想消毒、滅菌和防腐有什么區(qū)別？2023/2/42第一節(jié)微生物的分布一、微生物在自然界的分布（一）土壤中的微生物（二）水中的微生物（三）空氣中的微生物2023/2/43二、微生物在人體的分布（一）正常菌群的定義

－分布在人類(lèi)的體表及其與外界相通的腔道中，在機(jī)體免疫機(jī)能正常時(shí)是無(wú)害的微生物群體。2023/2/44（二）人體微生物的分布2023/2/45

（三）正常菌群的作用1、生物拮抗作用——屏障

2、免疫作用—免疫刺激3、營(yíng)養(yǎng)與代謝作用——合成維生素4、抑制腫瘤的作用

2023/2/46占位性生物屏障作用2023/2/47細(xì)菌方面機(jī)體方面正常菌群/非致病菌條件致病菌？寄生部位改變菌群失調(diào)免疫功能下降（四）、條件致病菌和菌群失調(diào)2023/2/48第二節(jié)消毒與滅菌消毒滅菌概念物理方法化學(xué)方法生物學(xué)方法2023/2/49消毒:殺死物體或介質(zhì)中的病原微生物的方法（芽胞及非病原微生物不一定能殺死）。滅菌:殺死物體或介質(zhì)中所有微生物的

方法（包括所有細(xì)菌繁殖體及芽

胞）。判斷標(biāo)準(zhǔn)？消毒滅菌有關(guān)概念防腐（抑菌）:防止或抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法。（微生物不一定死亡）2023/2/410無(wú)菌操作:防止細(xì)菌進(jìn)入機(jī)體或?qū)ο蟮募夹g(shù)，稱(chēng)無(wú)菌操作。無(wú)菌:在一定范圍內(nèi)沒(méi)有活的微生物存在。2023/2/411無(wú)菌操作2023/2/412一、物理方法常用方法（一）熱力法（干熱、濕熱）（二）輻射（紫外線、電離幅射、微波）（三）濾過(guò)除菌（除菌濾器、適用物品）（四）超聲波（機(jī)制：裂解細(xì)菌，主要用于粉碎細(xì)胞、提取抗原）（五）干燥（六）低溫

2023/2/413（一）熱力滅菌法原理：使微生物蛋白質(zhì)變性凝固，酶失活；核糖體解體破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)；微生物體內(nèi)的DNA斷裂。熱力滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法2023/2/414

焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼----直接用火焰滅菌方法如接種環(huán)、試管口、三角瓶口干烤----加熱160-170℃2h

藥粉、玻璃器皿、陶瓷1、干熱滅菌法紅外線----熱效應(yīng)，與干烤類(lèi)似滅菌效果：可殺死營(yíng)養(yǎng)體和芽胞2023/2/415灼燒滅菌法紅外線接種環(huán)滅菌器2023/2/416干烤滅菌法電熱烘箱真空干燥滅菌箱實(shí)驗(yàn)室常用設(shè)備2023/2/417濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效果好原因1、濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱強(qiáng)3、濕熱的蒸汽有潛熱2023/2/4182、濕熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法最有效的濕熱滅菌法121℃15-20mim（殺芽胞)煮沸消毒法水煮100℃5mim(殺繁殖體)-5h(殺芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇滅菌法水蒸汽100℃15-30mim(殺繁殖體)反復(fù)多次流動(dòng)蒸汽間歇加熱滅菌(殺芽胞）較低的溫度61℃30mim/71℃30s（殺致病菌）2023/2/419方法：水中煮沸15min滅菌效果：可殺死所有營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽胞適用對(duì)象：玻璃注射器和外科器械的消毒。Cncnc-micro（1）煮沸法2023/2/420方法：100℃蒸汽持續(xù)15－30min效果：殺繁殖體適用范圍：外科手術(shù)器械、注射器、膠管或食具等（2）流通蒸汽消毒法2023/2/421奶瓶消毒器2023/2/422方法：常壓蒸汽反復(fù)幾次進(jìn)行滅菌。適用對(duì)象：不宜高壓滅菌的培養(yǎng)基，

不耐熱的藥物和營(yíng)養(yǎng)物、發(fā)酵車(chē)間的管道等。滅菌效果：可殺死芽胞。（3）間歇滅菌法2023/2/423適用對(duì)象：牛奶、奶酪、果汁、酒類(lèi)、糖漿等食品消毒。方法：61.7－62.8oＣ處理30min或71.6oＣ度處理15秒或82℃處理4秒效果：消毒（4）巴氏消毒法（低溫消毒法）2023/2/4242023/2/425UHT技術(shù)（超高溫滅菌瞬時(shí)滅菌）135℃~152℃2023/2/4262023/2/427

滅菌效果：殺芽孢適用范圍：耐高溫的物體，如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、玻璃器皿、敷料、手術(shù)器械、某些注射液、手術(shù)衣等。濕熱滅菌法中效果最好的方法（5）高壓蒸氣滅菌2023/2/428①高壓蒸汽滅菌法溫度/℃壓力/kPa(kg/cm2)時(shí)間/min11040.52(0.4)4011570.91(0.7)30120101.3(1.0)20125141.82(1.4)15130182.34(1,8)10滅菌條件最常用是：121℃，103.1kPa，15-20min2023/2/429高壓蒸汽滅菌鍋2023/2/430常用設(shè)備：手提式熱壓滅菌器2023/2/431①高壓蒸汽滅菌法常用設(shè)備：臥式熱壓滅菌柜2023/2/432高壓蒸氣滅菌注意點(diǎn):檢查壓力表是否靈敏，壓力與溫度是否對(duì)應(yīng)滅菌初期先排凈鍋內(nèi)冷空氣;滅菌時(shí)間計(jì)算：達(dá)到規(guī)定壓力和溫度開(kāi)始計(jì)。鍋內(nèi)水分要充足;滅菌物品裝量不宜太滿;滅菌結(jié)束需緩慢減壓；滅菌結(jié)束，趁熱取出物品。2023/2/433（二）輻射1、日光與紫外光

紫外線殺菌機(jī)理：波長(zhǎng)265nm的殺菌作用最強(qiáng)干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄

穿透力較弱表面消毒：不耐熱物品特點(diǎn)：適用范圍：空氣消毒：手術(shù)室、傳染病房、車(chē)間、微生物實(shí)驗(yàn)室

滅菌效果:殺營(yíng)養(yǎng)體使用時(shí)注意防護(hù)！2023/2/434殺菌機(jī)理：適用范圍：2、電離輻射包括高速電子、X射線和γ射線產(chǎn)生游離基,破壞DNA。一次性醫(yī)用塑料制品的消毒食品的消毒-不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分

2023/2/435（三）濾過(guò)除菌法物理阻留方法：

除去液體或空氣中的細(xì)菌濾菌器濾膜孔徑0.22－0.45μm,

不能除病毒、支原體

適用范圍血清、毒素、輸液、生物制品、抗生素以及空氣等的除菌2023/2/436過(guò)濾滅菌2023/2/4372023/2/4382023/2/4392023/2/4402023/2/441（四）超聲與超聲波：使微生物細(xì)胞裂解破碎。2023/2/442（五）干燥：脫水和鹽類(lèi)濃度增高。2023/2/443（六）低溫：抑制生長(zhǎng)繁殖。4－10℃存活數(shù)月；－273℃可長(zhǎng)期保存菌種。2023/2/4442023/2/445

常用的物理消毒滅菌方法種類(lèi)方法效果適用范圍干熱滅菌法焚燒法直接燃燒滅菌廢棄污染物、或焚燒爐有傳染性的內(nèi)燃燒動(dòng)物尸體等

燒灼法直接用火焰燒滅菌接種環(huán)、試管口或瓶口干烤法干烤箱內(nèi)滅菌耐高溫物品160～170℃2-3h滅菌玻璃物品、瓷器等

2023/2/446種類(lèi)方法效果適用范圍濕熱滅菌法

巴氏消毒法62.1-62.8℃30min

消毒牛奶、酒類(lèi)、

或71.1℃15～30s

糖漿、果汁

煮沸法l00℃5-10min

殺死繁殖體外科手術(shù)器械、

注射器、

膠管或

食具等流通蒸氣消毒法阿諾氏滅菌器消毒同上或普通蒸籠進(jìn)行間歇滅菌法反復(fù)多次的滅菌不耐熱物流通蒸氣品或特殊條

件下的滅菌

2023/2/447種類(lèi)方法效果適用范圍高壓蒸氣滅菌法高壓蒸汽滅菌耐高溫高

滅菌器內(nèi)

壓手術(shù)器

15磅121.3℃15～20min

械、手術(shù)

衣、敷料等

一般培養(yǎng)基

10磅115℃15～30min含糖培養(yǎng)基

或注射劑2023/2/448種類(lèi)方法效果適用范圍紫外線消毒法紫外線燈照射消毒空氣或物體30—60min

表面消毒品過(guò)濾除菌法細(xì)菌濾器血清、抗毒素、

生物制品、維生素、蛋白質(zhì)

2023/2/449二、化學(xué)方法利用化學(xué)藥物破壞微生物的化學(xué)組成、物理結(jié)構(gòu)和生理活動(dòng)，達(dá)到防腐滅菌目的。2023/2/450類(lèi)型名稱(chēng)及使用方法作用原理應(yīng)用范圍醇類(lèi)70%—75%乙醇脫水、蛋白質(zhì)變性皮膚、器皿醛類(lèi)0.5%—10%甲醛2%戊二醛（pH=8）蛋白質(zhì)變性房間、物品消毒（不適合食品廠）酚類(lèi)3%—5%石炭酸2%來(lái)蘇兒3%—5%來(lái)蘇兒破壞細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)變性地面、器具皮膚地面、器具氧化劑0.1%高錳酸鉀3%過(guò)氧化氫0.2%—0.5%過(guò)氧乙酸氧化蛋白質(zhì)活性基團(tuán)，酶失活皮膚、水果、蔬菜皮膚、物品表面水果、蔬菜、塑料等（一）化學(xué)消毒劑

1、化學(xué)消毒劑的種類(lèi)2023/2/451類(lèi)型名稱(chēng)及使用方法作用原理應(yīng)用范圍重金屬鹽類(lèi)0.05%—0.1%升汞2%紅汞0.1%—1%硝酸銀0.1%—0.5%硫酸銅蛋白質(zhì)變性、酶失活變性