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實(shí)驗(yàn)一、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)規(guī)則及基本知識(shí)一、實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)與操作規(guī)則二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康娜?、?shí)驗(yàn)室規(guī)則四、實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告五、實(shí)驗(yàn)成績(jī)?cè)u(píng)分辦法量器的認(rèn)識(shí)和使用一、移液管的使用
移液管是一種量出式儀器,只用來(lái)測(cè)量它所放出溶液的體積。它是一根中間有一膨大部分的細(xì)長(zhǎng)玻璃管。其下端為尖嘴狀,上端管頸處刻有一條標(biāo)線(xiàn),是所移取的準(zhǔn)確體積的標(biāo)志。常用的移液管有5,10,25,和50mL等規(guī)格。通常又把具有刻度的直形玻璃管稱(chēng)為吸量管。常用的吸量管有1,2,5,和10mL等規(guī)格。移液管和吸量管所移取的體積通常可準(zhǔn)確到0.01mL。
一、實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)與操作規(guī)則量器的認(rèn)識(shí)和使用移液管的使用方法移取溶液時(shí),用右手的大拇指和小指捏著移液管頸的上方,將其末端插入溶液中,左手拿洗耳球,先把球中空氣壓出,再將球的尖嘴接在移液管上口,慢慢松開(kāi)壓扁的洗耳球使溶液吸入管內(nèi)。當(dāng)液面升高到刻線(xiàn)以上時(shí),移去洗耳球,立即用右手食指堵住上口。將移液管提出液面,使其保持垂直,同時(shí)末端靠在容器的內(nèi)壁上,為此可使容器略?xún)A斜。然后略為放松食指,并輕輕捻動(dòng)管身,使液面緩慢下降,當(dāng)溶液的彎月面下沿恰與刻線(xiàn)相切時(shí),立即用食指壓緊上口,使溶液不再流出。將移液管取出并插入承接容器中。為保持其垂直并使末端靠在容器內(nèi)壁,可使承接容器略?xún)A斜。松開(kāi)食指,讓管內(nèi)溶液自然地全部沿容器壁流下。全部溶液流完后需等15s后再拿出移液管,以便使附著在管壁的部分溶液得以流出。如果移液管未標(biāo)明“吹”字,則殘留在管尖末端內(nèi)的溶液不可吹出,因?yàn)橐埔汗芩鶚?biāo)定的量出容積中并未包括這部分殘留溶液。量器的認(rèn)識(shí)和使用移液管的洗滌使用移液管前,應(yīng)先用鉻酸洗液潤(rùn)洗,以除去管內(nèi)壁的油污。然后用自來(lái)水沖洗殘留的洗液,再用蒸餾水洗凈。洗凈后的移液管內(nèi)壁應(yīng)不掛水珠。移取溶液前,應(yīng)先用濾紙將移液管末端內(nèi)外的水吸干,然后用欲移取的溶液涮洗管壁2至3次,以確保所移取溶液的濃度不變。
二、微量加樣器的使用微量加樣器又稱(chēng)微量移液器、微量進(jìn)樣器。其下端為可裝卸、可更換的尖管形移液嘴(吸頭),上方是控制采樣的推進(jìn)按鈕。
有固定式和可調(diào)式兩種類(lèi)型,規(guī)格有μl級(jí)、ml級(jí)。隨著生物技術(shù)的發(fā)展,微量移液器已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的重要工具。這類(lèi)移液器有準(zhǔn)確、可連續(xù)操作和方便等特點(diǎn)。量器的認(rèn)識(shí)和使用工作原理微量加樣器利用排代原理由活塞的定程運(yùn)動(dòng)形成負(fù)壓吸入定量的液體,其吸液量由活塞在活塞套內(nèi)移動(dòng)的距離來(lái)確定,再按下按鈕使活塞向下移動(dòng),排出活塞腔內(nèi)的氣體而將吸頭內(nèi)的液體排出。1.選擇在移液范圍內(nèi)的加樣器,若為可調(diào)式則先將容量調(diào)節(jié)到所需的容量上。2.將吸頭套在加樣器的下端,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)后牢固地套上,確保密封。3.正式使用前需連續(xù)按動(dòng)數(shù)次(不吸液體),以保持腔內(nèi)外氣壓一致。4.用手垂直握住加樣器,拇指將按鈕壓至第一停點(diǎn)(第一檔位),并將吸頭浸入到液面下1~3mm,再緩慢地放松按鈕使之復(fù)位,等待1~2s后從液體中取出時(shí)拖靠掉吸頭外部殘液于被取出的容器內(nèi)壁中。注意避免吸頭與其他任何東西碰撞。5.將吸頭移到加樣容器內(nèi)壁上,輕輕地將按鈕壓至第一停點(diǎn)將液體排出,等待1~2s,再把按鈕壓至第二停點(diǎn)(第二檔位),排盡全部液體后,吸頭應(yīng)沿容器壁向上滑動(dòng)取出,此時(shí)拖靠吸頭內(nèi)部殘液于加樣容器內(nèi)壁中。再放松按鈕使之復(fù)位,卸下吸頭,完成一次操作過(guò)程。操作方法量器的認(rèn)識(shí)和使用微量移液器的使用注意事項(xiàng)⑴吸取液體時(shí),只推至第1檔,釋放液體時(shí),推至第1檔后停1~2秒后推至第2檔。⑵使用完之后,一定要把移液器調(diào)回最大量程,以免壓縮彈簧導(dǎo)致彈簧不能回復(fù)。⑶移液器必須卸掉槍頭后才能放到移液器架上。常用玻璃儀器的洗滌與干燥1.初用玻璃儀器的清洗新購(gòu)買(mǎi)的玻璃儀器表面常附著有堿性物質(zhì),可先用洗滌靈稀釋液,肥皂水或去污粉等洗刷,再用自來(lái)水洗凈,然后浸泡在1%-2%鹽酸溶液中過(guò)夜,再用自來(lái)水沖洗,最后用蒸餾水沖洗3次,80℃烤干備用。
常用玻璃儀器的洗滌與干燥2.使用過(guò)的玻璃儀器的清洗
(1)一般玻璃儀器如試管,燒杯,錐形瓶等,先用自來(lái)水洗刷去凈污物,再用毛刷沾取洗衣粉,洗滌靈稀釋液或去污粉刷洗器皿內(nèi)外壁,自來(lái)水多次沖洗去除洗滌劑,并洗至容器內(nèi)壁不掛水珠,最后用蒸餾水洗3次,烤干或倒置控干備用。
(2)量器如吸量管,量瓶等,使用后立即用自來(lái)水沖洗,直至不掛水珠,再用蒸餾水沖洗3次,風(fēng)干備用。若沖洗后的器皿仍?huà)焖椋瑒t將其晾干后,泡在鉻酸洗液中4-6小時(shí),再用自來(lái)水沖洗,最后用蒸餾水洗3次控干。
一、722型分光光度計(jì)的使用①通電預(yù)熱約20分鐘,打開(kāi)比色皿暗廂蓋。②選擇波長(zhǎng)。③清洗比色皿(拿粗糙面,一次拿一個(gè)……)④測(cè)裝試液:約2/3–4/5。⑤擦凈比色皿外部;粗糙面無(wú)明“水”,光面無(wú)水跡,無(wú)指紋,無(wú)紙纖維。⑥調(diào)零測(cè)試操作及讀數(shù)正確。⑦測(cè)完清洗比色皿,放回原處。⑧儀器恢復(fù)原樣。常用儀器的操作要點(diǎn)二、低速離心機(jī)的使用①檢查離心機(jī)的基本狀態(tài)(調(diào)速旋鈕等處于零位,離心室內(nèi)無(wú)異物等)。②將離心樣品倒入離心管,液面離管口不少于1cm。③對(duì)稱(chēng)平衡(天平稱(chēng)重)放置,蓋妥離心室蓋。④通電,慢慢加速至所需速度。⑤離心時(shí)間到后切斷電源,待轉(zhuǎn)頭自動(dòng)停止轉(zhuǎn)動(dòng)。取出離心管。⑥清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,(洗滌離心管,必要時(shí)擦凈離心室內(nèi)外等)。常用儀器的操作要點(diǎn)三、電子天平的使用要點(diǎn)①根據(jù)稱(chēng)量物多少及精確度選擇適宜的天平,并作必要的調(diào)校。②稱(chēng)量紙去皮。③將稱(chēng)量物品放在托盤(pán)的稱(chēng)量紙上。④讀數(shù)正確。⑤恢復(fù)天平原狀(關(guān)閉天平,清潔稱(chēng)重盤(pán),等)。常用儀器的操作要點(diǎn)
四、恒溫水浴鍋的使用要點(diǎn):①通電之前先確認(rèn)水箱有水且浸沒(méi)加熱管。②懂得溫控旋鈕的使用及恒溫設(shè)置方法。③用后切斷電源,放空水箱中的水并擦干凈。常用儀器的操作要點(diǎn)二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆丈锘瘜W(xué)的基本知識(shí)、基本理論及基本實(shí)驗(yàn)技能,訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)的動(dòng)手能力,學(xué)會(huì)熟練地使用各種生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器;學(xué)會(huì)準(zhǔn)確詳實(shí)地記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和數(shù)據(jù)的技能,提高實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫(xiě)作能力;培養(yǎng)分析和解決問(wèn)題能力以及嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的科學(xué)作風(fēng)、創(chuàng)新能力等綜合素質(zhì)。
1.實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作實(shí)驗(yàn)前,要明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?。必須認(rèn)真預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)的原理、操作步驟及注意事項(xiàng),做到實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿鞔_:操作步驟及注意事項(xiàng)清楚。2.實(shí)驗(yàn)中注重培養(yǎng)科學(xué)的思維方法、牢固的質(zhì)量觀念和良好的工作習(xí)慣,學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須穿工作服。實(shí)驗(yàn)操作時(shí),不能大聲喧嘩,來(lái)回走動(dòng),如有問(wèn)題,舉手請(qǐng)示老師解決。實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程應(yīng)有條不紊,實(shí)驗(yàn)器具、試劑應(yīng)擺放整齊有序。三、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則認(rèn)真對(duì)待實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的每一項(xiàng)基本技能訓(xùn)練:樣品的制備及取樣,試劑的定量移取及加注,溶液的混勻、沉淀、過(guò)濾、離心、保溫、加熱、冷卻,各種儀器的正確:操作等,均應(yīng)在實(shí)驗(yàn)中反復(fù)多次訓(xùn)練,體會(huì)和掌握操作要點(diǎn),力求做到熟練、準(zhǔn)確、規(guī)范。愛(ài)護(hù)公物,不管是易損的試管、吸管,還是精密分析儀器,均要按操作規(guī)程,細(xì)心、認(rèn)真操作。要注意節(jié)約,避免不必要的人為浪費(fèi)。3.實(shí)驗(yàn)后的結(jié)束工作實(shí)驗(yàn)完畢后,對(duì)實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果和數(shù)據(jù),進(jìn)行整理、分析和計(jì)算。重視總結(jié)實(shí)驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)、教訓(xùn)。認(rèn)真完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告,使用過(guò)的器皿應(yīng)清洗干凈,放回原處,并安排勞動(dòng)值日生打掃實(shí)驗(yàn)室。注意實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生、整潔。廢棄液體應(yīng)倒入水槽,放水沖走,實(shí)驗(yàn)用過(guò)的棉花、廢紙、沉淀廢渣及其他廢棄物品等均應(yīng)放入指定容器,不得隨意亂扔或丟進(jìn)水槽。值日生職責(zé):規(guī)整物品,打掃桌面和地面,并將垃圾倒掉;離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前檢查水、電、門(mén)窗是否關(guān)好,經(jīng)老師同意后方能離開(kāi)。四、實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)記錄實(shí)驗(yàn)前寫(xiě)好實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)中應(yīng)及時(shí)準(zhǔn)確地記錄所觀察到的現(xiàn)象和測(cè)量的數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)記錄要注意有效數(shù)字,如吸光度值應(yīng)為“0.050”,而不能記成“0.05”。每個(gè)結(jié)果都要盡可能重復(fù)觀測(cè)二次以上,即使觀測(cè)的數(shù)據(jù)相同或偏差很大,也都應(yīng)如實(shí)記錄,不得涂改。實(shí)驗(yàn)中要詳細(xì)記錄實(shí)驗(yàn)條件,如使用的儀器型號(hào)、編號(hào)、生產(chǎn)廠等;生物材料的來(lái)源、試劑的規(guī)格、試劑的濃度等。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式應(yīng)為:⑴實(shí)驗(yàn)?zāi)康?;⑵?shí)驗(yàn)原理;⑶儀器、
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