芳胺類藥物的分析

關于芳胺類藥物的分析第一頁，共六十二頁，2022年，8月28日基本要求

一、掌握芳胺類、苯乙胺類藥物的鑒別和含量測定的基本原理與方法。第二頁，共六十二頁，2022年，8月28日第一節(jié)芳胺類藥物的分析芳胺類藥物分為兩類芳伯氨基未被取代芳伯氨基被酰化一、對氨基苯甲酸酯類藥物的基本結構與主要化學性質(zhì)（一）基本結構與典型藥物第三頁，共六十二頁，2022年，8月28日苯佐卡因鹽酸普魯卡因第四頁，共六十二頁，2022年，8月28日鹽酸丁卡因鹽酸普魯卡因胺第五頁，共六十二頁，2022年，8月28日1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反應；芳醛縮合成Schiff堿；易氧化變色等。鹽酸丁卡因無此特性。（二）主要理化性質(zhì)水解特性：分子結構中的酯鍵或酰胺鍵易水解，除鹽酸丁卡因外水產(chǎn)物為對丁基氨基苯甲酸外，上述均為對氨基苯甲酸。弱堿性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的側鏈，故具有弱堿性。4.其它特性：因結構中有芳伯氨基或同時具有脂烴胺側鏈，其游離堿多為堿型油狀液體或低熔點固體，難溶于水，可溶于有機溶劑。其鹽酸鹽則易溶于水。第六頁，共六十二頁，2022年，8月28日二、酰胺類藥物的基本結構與主要化學性質(zhì)（一）基本結構與典型藥物第七頁，共六十二頁，2022年，8月28日對乙酰氨基酚（撲熱息痛）第八頁，共六十二頁，2022年，8月28日鹽酸布比卡因鹽酸利多卡因第九頁，共六十二頁，2022年，8月28日

1.水解后顯芳伯氨基特性：分子結構中含有芳酰氨基，酸水解后顯芳伯氨基的特性反應。注意空間位阻的影響。

2.水解產(chǎn)物易酯化：對乙酰氨基酚，酸水解生成醋酸，在硫酸中與乙醇反應，發(fā)出醋酸乙酯香味。

（二）主要化學性質(zhì)第十頁，共六十二頁，2022年，8月28日3.酚羥基特性：對乙?；佑杏坞x酚羥基，可與FeCl3

發(fā)生顯色反應。4.弱堿性：利多卡因和布比卡因烴胺側鏈有叔胺氮，顯堿性，可與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應，可相互區(qū)別。5.與金屬離子發(fā)生沉淀反應：利多卡因和布比卡因酰氨基上氮可與Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。第十一頁，共六十二頁，2022年，8月28日三、鑒別試驗（一）重氮化-偶合反應

分子結構中含有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生此反應。Ar-NH2HClNaNO2重氮鹽OH--萘酚橙黃~猩紅色第十二頁，共六十二頁，2022年，8月28日

直接反應：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺間接反應：對乙酰氨基酚利多卡因和布比卡因由于空間位阻很難發(fā)生此反應。

丁卡因雖無芳伯氨基，但可與NaNO2反應生成N－亞硝基化合物的乳白色沉淀。

第十三頁，共六十二頁，2022年，8月28日第十四頁，共六十二頁，2022年，8月28日第十五頁，共六十二頁，2022年，8月28日（二）與三氯化鐵反應對乙酰氨基酚+FeCl3藍紫色化合物第十六頁，共六十二頁，2022年，8月28日

1.與銅和鈷離子反應：

利多卡因與硫酸銅生成藍紫色配位化合物；與氯化鈷生成亮綠色沉淀。（三）與金屬離子反應第十七頁，共六十二頁，2022年，8月28日第十八頁，共六十二頁，2022年，8月28日2.羥肟酸鐵鹽反應

基于普魯卡因胺分子中的芳酰胺結構。第十九頁，共六十二頁，2022年，8月28日3.與汞離子反應鹽酸利多卡因+H2NO3+Hg(NO3)2黃色對氨基苯甲酸酯＋H2NO3+Hg(NO3)2紅色或橙黃色第二十頁，共六十二頁，2022年，8月28日1.鹽酸普魯卡因的鑒別

(四)水解產(chǎn)物反應鹽酸普魯卡因+NaOH普魯卡因油狀物對氨基苯甲酸鈉+二乙氨基乙醇（使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變蘭色）對氨基苯甲酸鈉+HCl對氨基苯甲酸（白色）第二十一頁，共六十二頁，2022年，8月28日第二十二頁，共六十二頁，2022年，8月28日2.苯佐卡因的鑒別

苯佐卡因+NaOH乙醇乙醇+I2

+NaOHCHI3（碘仿臭氣，黃色沉淀）第二十三頁，共六十二頁，2022年，8月28日(五)紫外特征吸收光譜法

1.在λmax處測定供試液的百分吸收系數(shù)。

例如：對乙?；釉?.4%NaOH中于λmax=240nm;E1%1cm=715在HCl(0.1nol/L)-甲醇于λmax=249nm;E1%1cm=8802.在規(guī)定的濃度測定λmax

例如：鹽酸普魯卡因胺5μg/ml;λmax=280nm(六)紅外吸收光譜法（略）第二十四頁，共六十二頁，2022年，8月28日（一）對乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查

1.乙醇溶液的澄清度與顏色：因其生產(chǎn)工藝用鐵粉作還原劑，可能帶入，致使乙醇溶液產(chǎn)生混濁，中間體對氨基酚易氧化產(chǎn)生有色化物，在乙醇溶液中顯橙紅色或棕色。

四、特殊雜質(zhì)檢查第二十五頁，共六十二頁，2022年，8月28日檢查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液應澄清，無色；如顯混濁，與1號濁度標準液比較，不得更濃；如顯色，與棕紅色2號或橙紅色2號標準液比較，不得更深。2.有關物質(zhì)檢查：Ch.P是以對氯苯乙酰胺為對照品，采用TLC法中的雜質(zhì)對照品法。3.對氨基酚檢查：利用對氨基酚在堿性條件下可與亞硝基鐵氰化鈉生成藍色配位化合物，采用比色法。1.乙醇溶液的澄清度與顏色：第二十六頁，共六十二頁，2022年，8月28日(二)鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查為什么要檢查？怎樣檢查？原中國藥典采用TLC法中的雜質(zhì)對照品法進行檢查。（現(xiàn)行中國藥典采用HPLC法檢查）第二十七頁，共六十二頁，2022年，8月28日（一）亞硝酸鈉滴定法

Ar-NH2;Ar-NHCOR;Ar-NO2均可采用此法

Ch.P中的苯佐卡因；鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺及其制劑可直接采用本法。五、含量測定第二十八頁，共六十二頁，2022年，8月28日第二十九頁，共六十二頁，2022年，8月28日1.原理：Ar-NHCOR+H2OAr-NH2+RCOOHH+Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2O第三十頁，共六十二頁，2022年，8月28日測定主要條件：(1)加KBr增加反應速度重氮化的反應歷程為：NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2OKHCl第三十一頁，共六十二頁，2022年，8月28日第三十二頁，共六十二頁，2022年，8月28日KBr+HClHBr+KClHNO2+HBrNOBr+H2OKHBr∵

KHBr比KHCl大300倍∴生成NOBr量大得多∴加快反應速度第三十三頁，共六十二頁，2022年，8月28日

(2)加過量HCl加速反應：

①重氮化速度加快；

②重氮鹽在酸性介質(zhì)中穩(wěn)定；

③防止生成氨基偶氮化合物。

Ar-N2+Cl-+H2N-Ar

Ar-N=N-NH-Ar+HCl

一般摩爾比為Ar-NH2:HCl=1:2.5~6。第三十四頁，共六十二頁，2022年，8月28日(3)室溫條件下滴定:溫度高反應速度快；每升高10℃加快2.5倍太高,可使Ar-N2+Cl-+H2OAr-OH+N2+HCl(4)滴定管尖端插入液面下滴定第三十五頁，共六十二頁，2022年，8月28日

3.指示終點的方法

(1)永停滴定法

溶液檢流計

終點前：

無過量無電流

HNO2

終點時：有過量有電流（使指針偏離零

HNO2永停在某一位置）

(2)外指示劑法

用KI-淀粉指示劑指示終點的原理：

2NaNO2+2KI+4HCl

2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2OGVVR1R2+V第三十六頁，共六十二頁，2022年，8月28日(二）非水溶液滴定法(略)第三十七頁，共六十二頁，2022年，8月28日

1.對乙?；釉系暮繙y定在0.4%NaOH介質(zhì)中；257nm

D%＝［E1%1cm]樣／［E1%1cm]標×100％；E1%1cm＝715

2.對乙?；悠艹龆葴y定（測定條件同上）1片＋稀HCl24ml+H2O1000ml精密量取5ml+0.4%NaOH10ml+H2O100mlλ257nm測定A。W×1／1000×5／100×100＝C（g/100ml)

W(g)=200×C;C=A/715∴溶出度＝W／標示量×100％＞80％為合格（三）分光光度法第三十八頁，共六十二頁，2022年，8月28日此法主要用于鹽酸普魯卡因注射液的測定。因該注射液中常含有降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸；可以苯甲酸為內(nèi)標同時測定兩者的含量，該法簡單準確。

色譜條件：色譜柱為μBondapakC18300mm×4mm

流動相為甲醇－1％HAc(40:60);UV檢測器250nm.

（四）HPLC法第三十九頁，共六十二頁，2022年，8月28日第二節(jié)苯乙胺類藥物的分析一、苯乙胺類藥物的基本結構與主要化學性質(zhì)（一）基本結構與典型藥物*第四十頁，共六十二頁，2022年，8月28日常見的苯乙胺類藥物第四十一頁，共六十二頁，2022年，8月28日第四十二頁，共六十二頁，2022年，8月28日第四十三頁，共六十二頁，2022年，8月28日第四十四頁，共六十二頁，2022年，8月28日

（二）主要化學性質(zhì)

1.弱堿性本類藥物結構中有烴氨基側鏈，為仲胺氮顯弱堿性。

2.酚羥基特性本類藥物結構中有酚羥基，可與FeCl3;發(fā)生氧化。

3.光學活性多數(shù)藥物結構中有手性碳原子，具有旋光性。第四十五頁，共六十二頁，2022年，8月28日二、鑒別試驗(一)與三氯化鐵反應Ar-OH＋FeCl3絡合顯色＋堿液紫紅色第四十六頁，共六十二頁，2022年，8月28日。

(二）甲醛－硫酸反應

在此試劑中形成醌式結構而顯色。

藥物

三氯化鐵

甲醛－硫酸

腎上腺素0.1mol/LHCl顯綠色,甲氨試液顯紅－紫紅紅色重酒石酸去甲腎上腺素綠色,加NaCO3試液顯紫色－紅色淡紅色鹽酸去氧腎上腺素紫色玫瑰紅橙紅棕紅鹽酸異丙腎上腺素深綠色,加5％NaCO3試液顯藍紫色－紅色棕色暗紫色第四十七頁，共六十二頁，2022年，8月28日(三）氧化反應

本類藥物具有Ar-OH，易被氧化劑I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而顯色，例如：腎上腺素在中性或酸性條件下，被I2,H2O2

氧化后，生成腎上腺素紅；鹽酸異丙腎上腺素在酸性條件下，被I2氧化，生成異丙腎上腺素紅。第四十八頁，共六十二頁，2022年，8月28日(四）紫外特征吸收與紅外吸收光譜例如：

鹽酸異丙腎上腺素0.05mg/mlλmax=280nmA=0.50這一類藥物均可采用紅外吸收光譜進行鑒別第四十九頁，共六十二頁，2022年，8月28日

(一)酮體檢查

本類藥物在生產(chǎn)過程中多采用酮體氫化制得，若氫化不完全，易引入酮體雜質(zhì)。

采用UV法檢查：

利用酮體在310nm有吸收，本類藥物無吸收。例如：腎上腺素本項檢查配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.05

鹽酸去氧腎上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.02鹽酸異丙腎上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.15

三、特殊雜質(zhì)檢查第五十頁，共六十二頁，2022年，8月28日220260300nm腎上腺酮及腎上腺素的紫外吸收曲線λmax310nm第五十一頁，共六十二頁，2022年，8月28日(二)有關物質(zhì)的檢查

采用TLC法（或HPLC）中的高低濃度對比法進行檢查。

(三)鹽酸苯乙雙胍中有關雙胍的檢查

采用PC法中的雜質(zhì)對照法進行檢查。第五十二頁，共六十二頁，2022年，8月28日

(一)非水溶液滴定法

本類藥物的原料藥多采用此法。本法重點將在第八章討論。

1.重酒石酸去甲腎上腺素的測定

相當于［B］的有機酸鹽可直接滴定。

2.鹽酸克侖特羅的測定

相當于［B］的HX酸鹽不能直接滴定，需加Hg(Ac)2處理后滴定。

3.硫酸沙丁醇的測定

相當于［B］的H2SO4鹽可直接滴定,也可處理后滴定。四、含量測定第五十三頁，共六十二頁，2022年，8月28日(二)溴量法本類藥物重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素及其注射液用此法?；驹恚旱谖迨捻摚擦?，2022年，8月28日(三)比色法

利用藥物分子結構中的Ar-OH與Fe3＋絡合顯色，進行比色測定；也可利用藥物分子結構中的Ar-NH2重氮化偶合顯色，進行比色。第五十五頁，共六十二頁，2022年，8月28日例如：鹽酸克倫特羅栓的含量測定第五十六頁，共六十二頁，2022年，8月28日(四)HPLC法

例一、重酒石酸去甲腎上腺素注射液的測定采用RPIP-HPLC-UV法；用外標一點法進行定量測定。

例二、血漿中兒茶酚胺類（腎上腺素類）藥物的測定采用RPIP-HPLC-EChD法；用標準曲線法進行定量測定。第五十七頁，共六十二頁，2022年，8月28日練習與思考[A型題]1．鹽酸普魯卡因注射液中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛B.間氨基酚