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強(qiáng)噪聲暴露所致耳蝸帶狀體突觸損失與修復(fù)周丹丹、梁金子、德吉措姆、央吉、黃鄭麗實(shí)驗(yàn)?zāi)康拇_定強(qiáng)噪聲暴露對(duì)耳蝸結(jié)構(gòu)和功能的影響;探究強(qiáng)噪聲暴露對(duì)的耳蝸IHC-SGN之間帶狀體突觸結(jié)構(gòu)損傷的程度與聽(tīng)覺(jué)功能建立的關(guān)系;實(shí)驗(yàn)對(duì)象成年豚鼠,給予120dBSPL白噪聲暴露2h。自由飲食進(jìn)水,飼養(yǎng)室恒溫(18-24℃)恒濕(55%)。噪聲后1天,1天,1周,1個(gè)月測(cè)試聽(tīng)覺(jué)功能,觀察與對(duì)照組之間的差別。功能測(cè)試結(jié)束后,取耳蝸進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。實(shí)驗(yàn)步驟一、各組將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物豚鼠在噪聲下暴露一天,一周,一個(gè)月。二、對(duì)照組進(jìn)行ABR測(cè)量。三、各組在噪聲暴露后對(duì)豚鼠進(jìn)行ABR/CAP的測(cè)量。1.豚鼠腹腔注射巴比妥鈉麻醉。2.在豚鼠的兩耳后及頭頂正中連上電極,打開音源。3.測(cè)量豚鼠的ABR。四、將老鼠處死。五、取出老鼠兩耳蝸,進(jìn)行固定。六、形態(tài)學(xué)觀察,對(duì)各組動(dòng)物進(jìn)行ribbon計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果噪聲前后各組動(dòng)物平均ABR閾值
1000 2000 4000 8000 16000 32000
噪聲前
26.67 27.67 28.67 29.67 30.67 31.67噪聲后1天 70.83 65 65 67.5 75 72.5噪聲后1周 60 61.43 63.57 60.71 52.86 70.71噪聲后1月 52.5 47.5 54.17 51.47 40 65.83實(shí)驗(yàn)分析聽(tīng)覺(jué)閾值的升高(閾移)是判斷聽(tīng)覺(jué)損傷和制定噪聲安全標(biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù)聽(tīng)覺(jué)閾值不同程度的升高對(duì)應(yīng)聽(tīng)覺(jué)相應(yīng)程度的損傷。本實(shí)驗(yàn)中由圖表一可知,噪聲后一天,一周,一個(gè)月豚鼠ABR閾值較噪聲前均有不同程度的增高,表示有不同程度損傷。噪聲后一天ABR閾值增高最為明顯,提示噪聲一天后豚鼠聽(tīng)力損傷最為嚴(yán)重。噪聲后一周,一個(gè)月ABR閾值依次比噪聲后一天的ABR閾值低,說(shuō)明噪聲后時(shí)間越久損傷的程度越輕。噪聲前后各組ribbon計(jì)數(shù)結(jié)果CtBP2染色 0 0.1KHz 0.25KHz 0.5KHz 1KHz 2KHz 4KHz 8KHz 16KHz 24KHz 32KHz噪聲前 14.355 15.88768398 17.19659091 16.20545455 16.30833333 15.425 17.29444444 18.91363636 17.10777778 16.89285714噪聲后1天 9.459469697 10.16363636 11.90341742 12.74318182 12.05934343 13.08919414 7.75 10.07272727 9.427777778 9.761363636噪聲后1周 10.72666667 10.49 12.12 12.4525 13.3525 10.0175 9.7 10.95666667 10.89 10.29噪聲后4周 10.60673401 10.1030303 13.52171717 12.21538462 13.61282051 11.29183007 10.06666667 9.605263158 9.684848485 9.751515152 平均數(shù) 11.28696759 11.66108766 13.68543138 13.40413024 13.83324932 12.45588105 11.20277778 12.38707337 11.77760101 11.67393398不引起永久性聽(tīng)覺(jué)閾移的低強(qiáng)度噪聲,在成年動(dòng)物損傷耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞和I型螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(SGN)之間的突觸(ribbonsynapse)和SGN退行性死亡。本實(shí)驗(yàn)中通過(guò)ribbon計(jì)數(shù)來(lái)表示損傷的恢復(fù)程度,兩者成正比關(guān)系。由圖表二可知,在相同頻率的噪聲下,噪聲后一天,一周,一個(gè)月的ribbon計(jì)數(shù)較噪聲前均有不同程度的下降,說(shuō)明耳蝸帶狀體突觸均受到損傷。但一個(gè)月后的ribbon計(jì)數(shù)相比噪聲后一天、噪聲后一周的ribbon計(jì)數(shù)略有回升,說(shuō)明隨著時(shí)間推移耳蝸帶狀體突觸
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