第六章芳酸及其酯類(lèi)藥物的分析2010

第六章芳酸及其酯類(lèi)藥物的分析AnalysisofAromaticcarboxylicacids&esters分析與藥分教研室：蘇麗娜苯甲酸類(lèi)水楊酸類(lèi)其它§1典型藥物分類(lèi)與性質(zhì)苯甲酸丙磺舒甲芬那酸1、苯甲酸類(lèi)一、分類(lèi)甲芬那酸

mefenamicacid丙磺舒

probenecid苯甲酸

benzoicacidandsodiumbenzoate2、水楊酸類(lèi)水楊酸

阿司匹林對(duì)氨基水楊酸鈉雙水楊酯貝諾酯二氟尼柳水楊酸

salicylicacid阿司匹林aspirin

對(duì)氨基水楊酸鈉sodiumaminosalicylate

雙水楊酯salsalate貝諾酯benorilate二氟尼柳diflunisal12氯貝丁酯clofibrate布洛芬ibuprofen3、其他芳酸類(lèi)氯貝丁酯clofibrate布洛芬ibuprofen1、結(jié)構(gòu)分析包括：芳酸、芳酸酯、芳酸鹽共同點(diǎn)：苯環(huán)、羧基

不同點(diǎn)：不同的取代基（如酚羥基、芳伯氨基等）

二、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)2、性質(zhì)（一）物理性質(zhì)

（1）固體具有一定的熔點(diǎn)

（2）溶解性

游離芳酸類(lèi)藥物幾乎不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；芳酸堿金屬鹽及其它鹽易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。

（二）化學(xué)性質(zhì)

1.芳酸具游離羧基，呈酸性，其pKa在3～6之間，屬中等強(qiáng)度的酸或弱酸；

pKa=2.95pKa=3.49pKa=4.26取代基為吸電子基團(tuán)，酸性↑取代基為斥電子基團(tuán)，酸性↓—X、—NO2、—OH等—CH3、—NH2等鄰位取代>間位、對(duì)位取代，尤其是鄰位取代了酚羥基，由于形成分子內(nèi)氫健，酸性大為增強(qiáng)

2.芳酸堿金屬鹽易溶于水，水解，溶液呈堿性，但堿性太弱，所以其含量測(cè)定方法為雙相滴定法或非水堿量法。

3.芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性質(zhì)可進(jìn)行鑒別；利用芳酸酯水解定量消耗氫氧化鈉的性質(zhì)，可用水解后剩余滴定法測(cè)定含量；芳酸酯類(lèi)藥物還應(yīng)檢查因水解而引入的特殊雜質(zhì)。

4.UV

5.IR

6.取代芳酸類(lèi)藥物可利用其取代基的性質(zhì)進(jìn)行鑒別和含量測(cè)定。如具有酚羥基的藥物可用FeCl3反應(yīng)鑒別；具芳伯氨基的藥物可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。

7.色譜法—制劑分析§2鑒別試驗(yàn)（一）與鐵鹽的反應(yīng)

具酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基的藥物1.水楊酸類(lèi)藥物（三氯化鐵反應(yīng)）水楊酸類(lèi)藥物PH4-6紫色配合物+FeCl3藥物實(shí)驗(yàn)方法結(jié)果

水楊酸水溶液與三氯化鐵試液反應(yīng)紫堇色

阿司匹林加熱水解后與三氯化鐵試液反應(yīng)紫堇色加乙醇溶解后與三氯化鐵試液反應(yīng)深紫色對(duì)氨基水楊酸鈉加稀鹽酸呈酸性后與三氯化鐵試液反應(yīng)紫紅色

貝諾酯加氫氧化鈉試液煮沸水解后加鹽酸呈微酸性后反應(yīng)紫堇色雙水楊酯稀溶液與三氯化鐵反應(yīng)紫色

二氟尼柳2.苯甲酸鹽赭色↓+FeCl3

中性或堿性3.丙磺舒+FeCl3PH5.0-6.0米黃色↓4.布洛芬[JP(15)]5.氯貝丁酯（異羥肟酸鐵反應(yīng)）芳香第一胺類(lèi)鑒別反應(yīng)具芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物

（二）重氮化偶合反應(yīng)潛在芳伯氨基鹽酸或硫酸加熱水解游離的芳伯胺基

NaNO2/HCl重氮鹽橙紅色沉淀堿性β-萘酚貝諾酯benorilate甲芬那酸＋H2SO4△黃色并產(chǎn)生綠色熒光（三）氧化反應(yīng)棕綠色深藍(lán)色（四）水解反應(yīng)溶于醋酸銨，100-105℃干燥，熔點(diǎn)156-161℃1、苯甲酸鹽（五）分解產(chǎn)物的反應(yīng)2、含硫的藥物（丙磺舒）白色顯硫酸鹽反應(yīng)（六）UV特征吸收（七）IR吸收光譜（八）薄層色譜法

二氟尼柳膠囊

（Ch.P2005）（九）高效液相色譜法阿司匹林腸溶膠囊與泡騰片Aspirin副產(chǎn)物生產(chǎn)工藝§3特殊雜質(zhì)檢查

一、阿司匹林水楊酸熾灼殘?jiān)滋蓟锶芤旱某吻宥?/p>

重金屬Aspirin一般雜質(zhì)特殊雜質(zhì)阿司匹林中游離水楊酸的檢查

（1）雜質(zhì)來(lái)源原料殘存（生產(chǎn)過(guò)程中乙?；煌耆?、水解產(chǎn)生（貯存過(guò)程中水解產(chǎn)生）（2）檢查方法對(duì)照法

反應(yīng)原理

三氯化鐵反應(yīng)毒

限量

原料：0.1%（比色法）；阿司匹林片：0.3%

（比色法）；阿司匹林腸溶片：1.5%

（比色法）

；阿司匹林腸溶膠囊、泡騰片、栓劑：3.0%（HPLC法）二、對(duì)氨基水楊酸鈉中間氨基酚的檢查

1.雜質(zhì)來(lái)源原料殘存、脫羧產(chǎn)生

2.檢查方法（1）ChP（2005）含量測(cè)定法（雙相滴定法）。利用對(duì)氨基水楊酸鈉不溶于乙醚，間氨基酚溶于乙醚的性質(zhì)，使二者分離后，在乙醚中加水適量，用鹽酸滴定，控制鹽酸滴定液體積以控制間氨基酚限量。

樣品3.0g用乙醚提取，加入H2O，用HCl滴定液（0.02mol/L)滴定，生成雜質(zhì)·HCl（轉(zhuǎn)溶入H2O相，甲基橙指示劑）。滴定液不得過(guò)0.30ml（2）

USP（29）離子對(duì)HPLC法（內(nèi)標(biāo)法）

固定相C18

流動(dòng)相NaH2PO4(0.05mol/L)-Na2HPO4(0.05mol/L)-CH3OH(含氫氧化四丁基銨1.9g)(425：425：150)檢測(cè)波長(zhǎng)254nm

內(nèi)標(biāo)磺胺

離子對(duì)色譜：在色譜體系中加入一種與原樣品離子電荷相反的離子對(duì)試劑；由于形成離子對(duì)，存在動(dòng)態(tài)離子交換或離子相互作用二種化學(xué)平衡，從而改變樣品在兩相中的分配，使離子性溶質(zhì)保留行為和分離選擇性發(fā)生顯著變化。A、離子對(duì)試劑的選擇：離子對(duì)試劑所帶電荷應(yīng)與試樣離子的電荷相反酸類(lèi)或帶負(fù)電荷的物質(zhì)常用季銨鹽作離子對(duì)堿類(lèi)或帶正電的物質(zhì)常用烷基磺酸鹽或硫酸鹽作離子對(duì)B、流動(dòng)相PH的選擇：調(diào)節(jié)PH使試樣組分和離子對(duì)試劑全部離子化，將有利于離子對(duì)的形成；改善弱酸或弱堿試樣的保留值和分離選擇性。。強(qiáng)酸（磺酸染料）2－7.5強(qiáng)堿（季銨堿、生物堿）2－8弱酸（氨基酸、羧酸、水溶性維生素、磺胺類(lèi)）5－7.5弱堿（兒茶酚胺、煙酰胺、有機(jī)胺）2－5C、流動(dòng)相中所含有機(jī)溶劑的比例越高，組分的K值越??；被測(cè)組分或離子對(duì)試劑的疏水性越強(qiáng)，需有機(jī)溶劑的比例越高。三、二氟尼柳中有關(guān)物質(zhì)的檢查

ChP（2005）正相TLC

以供試品自身對(duì)照法進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查－－－高低濃度對(duì)比法（1）有關(guān)物質(zhì)A方法：供試品對(duì)照品判斷：②供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不得深于對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)（或熒光強(qiáng)度）①控制雜質(zhì)斑點(diǎn)個(gè)數(shù)，控制雜質(zhì)種類(lèi)優(yōu)點(diǎn)：以供試品的稀溶液作為對(duì)照液，不需要雜質(zhì)對(duì)照品，簡(jiǎn)單、價(jià)廉，還可配成幾種限量的對(duì)照溶液；缺點(diǎn)：不同物質(zhì)，不同Rf值比較，準(zhǔn)確度差、直觀性差。（2）有關(guān)物質(zhì)BChP（2005）反相HPLC以供試品自身對(duì)照法進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查－－－高低濃度對(duì)比法各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積四、甲芬那酸中特殊雜質(zhì)的檢查五、氯貝丁酯中對(duì)氯酚及揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查GC對(duì)氯酚（0.0025%）揮發(fā)性雜質(zhì)（0.5%）GC法5%SE-302m160℃，N2FID

§4含量測(cè)定一、酸堿滴定法1.直接滴定法

pKa3～6苯甲酸、丙磺舒、水楊酸、二氟尼柳、雙水楊酯、布洛芬阿司匹林

取本品約0.4g，精密稱(chēng)定，加中性乙醇（對(duì)酚酞指示液顯中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4。（1）測(cè)定方法及計(jì)算

Ka=3.27×10-4

反應(yīng)摩爾比為1∶1

（2）討論①中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯鍵水解?！爸行浴笔菍?duì)酚酞指示液顯中性，可消除滴定誤差。

②優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速

缺點(diǎn)：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定）酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸）③適用范圍：不能用于含水楊酸過(guò)高或制劑分析，只能用于合格原料藥的含量測(cè)定2.水解后剩余滴定法酯的一般含量測(cè)定方法阿司匹林USP（29）、JP（14）方法：取本品約1.5g，精密稱(chēng)定,加入氫氧化鈉滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，緩緩煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氫氧化鈉，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的氫氧化鈉滴定液（0.5mol/l）相當(dāng)于45.04mg的C9H8O4。2NaOH（過(guò)量）＋H2SO4Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：

反應(yīng)摩爾比為1∶2

優(yōu)點(diǎn)：消除了酯鍵水解的干擾缺點(diǎn)：酸性雜質(zhì)干擾

3.兩步滴定法阿司匹林片、阿司匹林腸溶片氯貝丁酯

如阿司匹林片的測(cè)定：取本品10片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于阿司匹林0.3g），置錐形瓶中，加中性乙醇（對(duì)酚酞指示液顯中性）溶解后，振搖使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）至溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加熱15分鐘并時(shí)時(shí)振搖，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每lml的氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4。

第一步中和第二步水解后剩余滴定水解：2NaOH（過(guò)量）＋H2SO4Na2SO4＋2H2O

反應(yīng)摩爾比為1∶1

本法消除了酸性雜質(zhì)的干擾，降低了酯鍵水解的干擾剩余滴定：片劑含量測(cè)定結(jié)果的計(jì)算

剩余滴定法

取本品30片，研細(xì)，用中性乙醇30ml，分?jǐn)?shù)次研磨，并移入50ml量瓶中，充分振搖，再用水適量洗滌研缽數(shù)次，洗液合并于50ml量瓶中，再用水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液15ml（相當(dāng)于阿司匹林0.3g），置錐形瓶中，加中性乙醇（對(duì)酚酞指示液顯中性）20ml，振搖，使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)至溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加熱15分鐘并時(shí)時(shí)振搖，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于18.02mgC9H8O10。藥分實(shí)驗(yàn)：

氯貝丁酯（兩步滴定法）消除供試品中共存的酸性雜質(zhì)二、亞硝酸鈉滴定法（對(duì)氨基水楊酸鈉）具芳伯氨基或潛在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基還原）的藥物+HCl+NaCl三、雙相滴定法芳酸堿金屬鹽

如苯甲酸鈉

ChP(2005)微溶于水酸性

苯甲酸鈉為芳酸堿金屬鹽，易溶