2017-2021全國高考真題生物匯編：發(fā)酵工程

17/172017-2021全國高考真題生物匯編發(fā)酵工程一、單選題1．（2018·北京·高考真題）用XhoI和SalI兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別處理同一DNA片段，酶切位點及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述不正確的是（）A．如圖中兩種酶識別的核苷酸序列不同B．如圖中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNAC．泳道①中是用SalI處理得到的酶切產(chǎn)物D．圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA2．（2017·上?！じ呖颊骖}）硝化細菌廣泛存在于通氣性較好的土壤中，其部分代謝反應(yīng)如圖所示，下列關(guān)于硝化細菌的培養(yǎng)條件的描述正確的是（）A．碳源為葡萄糖 B．培養(yǎng)時需隔絕空氣C．氮源是氨氣 D．培養(yǎng)時需冷藏3．（2019·北京·高考真題）篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實驗結(jié)果見下表。菌種菌落直徑：C（mm）透明圈直徑：H（mm）H/C細菌Ⅰ5.111.22.2細菌Ⅱ8.113.01.6有關(guān)本實驗的敘述，錯誤的是（）A．培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)B．篩選分解淀粉的細菌時，菌液應(yīng)稀釋后涂布C．以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外D．H/C值反映了兩種細菌分解淀粉能力的差異4．（2021·浙江·高考真題）下列關(guān)于原生質(zhì)體和細胞計數(shù)的敘述，錯誤的是（）A．測定植物原生質(zhì)體的密度時，可用血細胞計數(shù)板B．紅墨水不能進入活細胞，可用于檢測細胞的存活狀態(tài)并計數(shù)C．涂布分離法和劃線分離法均能得到單菌落，都可用于細胞計數(shù)D．酵母菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后，可用比濁計測定其密度5．（2021·浙江·高考真題）用白蘿卜制作泡菜的過程中，采用適當(dāng)方法可縮短腌制時間。下列方法中錯誤的是（）A．將白蘿卜切成小塊 B．向容器中通入無菌空氣C．添加已經(jīng)腌制過的泡菜汁 D．用沸水短時處理白蘿卜塊6．（2021·北京·高考真題）人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學(xué)擬從中分離出葡萄球菌。下述操作不正確的是（）A．對配制的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌B．使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣C．用取樣后的棉拭子在固體培養(yǎng)基上涂布D．觀察菌落的形態(tài)和顏色等進行初步判斷7．（2021·北京·高考真題）野生草本植物多具有根系發(fā)達、生長較快、抗逆性強的特點，除用于生態(tài)治理外，其中一些可替代木材栽培食用菌，收獲后剩余的菌渣可作肥料或飼料。相關(guān)敘述錯誤的是（）A．種植此類草本植物可以減少水土流失B．菌渣作為農(nóng)作物的肥料可實現(xiàn)能量的循環(huán)利用C．用作培養(yǎng)基的草本植物給食用菌提供碳源和氮源D．菌渣作飼料實現(xiàn)了物質(zhì)在植物、真菌和動物間的轉(zhuǎn)移8．（2021·天津·高考真題）下列操作能達到滅菌目的的是（

）A．用免洗酒精凝膠擦手 B．制作泡菜前用開水燙洗容器C．在火焰上灼燒接種環(huán) D．防疫期間用石炭酸噴灑教室二、實驗題

9．（2017·全國·高考真題）豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵，并在32h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}：（1）該實驗的自變量是____________________、__________________________。（2）如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是______________________。（3）如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是__________________________。（4）從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開_________________，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開_________________________。10．（2018·全國·高考真題）回答下列問題：（1）博耶（H.Boyer）和科恩（S.Coben）將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細胞中進行了表達。該研究除證明了質(zhì)粒可以作為載體外，還證明了___________（答出兩點即可）。（2）體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2+參與的___________方法導(dǎo)入大腸桿菌細胞，而體外重組的噬菌體DNA通常需與___________組裝成完整的噬菌體后，才能通過侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細胞，在細菌、心肌細胞、葉肉細胞中，可作為重組噬菌體宿主細胞的是___________。（3）真核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細胞內(nèi)表達時，表達出的蛋白質(zhì)可能會被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在實驗中應(yīng)選用______________________的大腸桿菌作為受體細胞，在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加___________的抑制劑。11．（2019·全國·高考真題）物質(zhì)W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌（目標菌）。回答下列問題。（1）要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_________。（2）在從土壤中分離目標菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標菌，應(yīng)該選擇________菌落進一步純化，選擇的依據(jù)是________。（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設(shè)計實驗進一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即_______。（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_________，三處滴加量相同。②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明___________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明___________。12．（2018·全國·高考真題）在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}：（1）在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具________（填“可以”或“不可以”）放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是________。（3）密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能________，在照射前，適量噴灑_________，可強化消毒效果。（4）水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________（填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”）消毒的。（5）某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度，最可能的原因是__________________________。三、綜合題13．（2017·全國·高考真題）某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列問題：（1）有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生________________________。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是________________________，但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是________________________（答出兩點即可）。（2）為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)選擇____________________（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是________________________。（3）用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________________________（答出兩點即可）。14．（2018·全國·高考真題）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}：（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制___________的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。（2）M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有___________（答出兩點即可）。氮源進入細菌后，可參與合成的生物大分子有___________（答出兩點即可）。（3）若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)生淀粉酶的微生物，加入的顯色劑是___________，該方法能篩選出產(chǎn)生淀粉酶微生物的原理___________。（4）甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133。乙同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是：_____________________。15．（2018·天津·高考真題）甲型流感病毒為RNA病毒，易引起流感大規(guī)模流行。我國科學(xué)家在2017年發(fā)明了一種制備該病毒活疫苗的新方法，主要環(huán)節(jié)如下。（1）改造病毒的部分基因，使其失去在正常宿主細胞內(nèi)的增殖能力。以病毒RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄成對應(yīng)DNA后，利用___________技術(shù)擴增，并將其中某些基因（不包括表面抗原基因）內(nèi)個別編碼氨基酸的序列替換成編碼終止密碼子的序列。與改造前的基因相比，改造后的基因表達時不能合成完整長度的___________，因此不能產(chǎn)生子代病毒。將該改造基因、表面抗原等其他基因分別構(gòu)建重組質(zhì)粒，并保存。（2）構(gòu)建適合改造病毒增殖的轉(zhuǎn)基因宿主細胞。設(shè)計合成一種特殊tRNA的基因，其產(chǎn)物的反密碼子能與（1）中的終止密碼子配對結(jié)合，并可攜帶一個非天然氨基酸（Uaa）。將該基因與___________連接后導(dǎo)入宿主細胞。提取宿主細胞的__________進行分子雜交鑒定，篩選獲得成功表達上述tRNA的轉(zhuǎn)基因宿主細胞。（3）利用轉(zhuǎn)基因宿主細胞制備疫苗。將（1）中的重組質(zhì)粒導(dǎo)入（2）中的轉(zhuǎn)基因宿主細胞，并在補加__________的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，則該宿主細胞能利用上述特殊tRNA，翻譯出改造病毒基因的完整蛋白，產(chǎn)生大量子代病毒，用于制備疫苗。特殊tRNA基因轉(zhuǎn)錄時，識別其啟動子的酶是_________。A．病毒的DNA聚合酶B．宿主的DNA聚合酶C．病毒的RNA聚合酶D．宿主的RNA聚合酶（4）上述子代病毒不能在正常宿主細胞中增殖，沒有致病性，因此不經(jīng)滅活或減毒即可制成疫苗。與不具侵染性的流感病毒滅活疫苗相比，該病毒活疫苗的優(yōu)勢之一是可引起_________免疫，增強免疫保護效果。16．（2018·全國·高考真題）某種熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測細胞中目的基因的表達。某科研團隊將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5′末端，獲得了L1-GFP融合基因（簡稱為甲），并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達載體P1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點的示意圖如下，圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同?；卮鹣铝袉栴}：（1）據(jù)圖推斷，該團隊在將甲插入質(zhì)粒P0時，使用了兩種限制酶，這兩種酶是_________。使用這兩種酶進行酶切是為了保證_______________，也是為了保證__________________。（2）將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細胞后，若在該細胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了________和_________過程。（3）為了獲得含有甲的牛，該團隊需要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細胞的_____________移入牛的____________中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。（4）為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細胞中，某同學(xué)用PCR方法進行鑒定。在鑒定時應(yīng)分別以該牛不同組織細胞中的____________（填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”）作為PCR模板。17．（2018·上海·高考真題）利用纖維素解決能源問題的關(guān)鍵是高性能纖維素酶的獲取。請完善實驗方案，并回答相關(guān)問題?！緦嶒?zāi)康摹勘容^三種微生物所產(chǎn)生的纖維素酶的活性?！緦嶒炘怼坷w維素酶催化纖維素分解為葡萄糖，用葡萄糖的產(chǎn)生速率表示酶活性大??；用呈色反應(yīng)表示葡萄糖的生成量?！緦嶒灢牧稀咳N微生物（A～C）培養(yǎng)物的纖維素酶提取液，提取液中酶蛋白濃度相同。【實驗步驟】（1）取四支試管，分別編號。（2）在下表各列的一個適當(dāng)位置，填寫相應(yīng)試劑的體積量，并按表內(nèi)要求完成相關(guān)操作。__________（3）將上述四支試管放入37℃的水浴，保溫1小時。（4）在上述四支試管中分別加入_______試劑，搖勻后，進行_____________處理。（5）觀察比較實驗組的三支試管與對照組試管的顏色及其深淺。【實驗結(jié)果】微生物A提取物微生物B提取物微生物C提取物顏色深淺程度＋＋＋＋＋＋【分析討論】（1）該實驗中的對照組是______號試管。（2）實驗組試管均呈現(xiàn)的顏色是____________，但深淺不同。（3）上述結(jié)果表明：不同來源的纖維素酶，雖然酶蛋白濃度相同，但活性不同。若不考慮酶的最適pH和最適溫度的差異，其可能原因是____________________________________。（4）你認為上述三種微生物中，最具有應(yīng)用開發(fā)價值的是________。（5）從解決能源問題的角度，開發(fā)這種纖維素酶的意義在于_____________________。18．（2019·全國·高考真題）已知一種有機物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌（目標菌）。Ⅰ號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X（5g/L）。Ⅱ號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機鹽（適量），X（15g/L）。Ⅲ號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機鹽（適量）。X（45g/L）?；卮鹣铝袉栴}。（1）在Ⅰ號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是___________。Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基為微生物提供碳源的有機物是_________。（2）若將土壤懸浮液種在Ⅱ號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌比例會_________，其原因是_________。（3）Ⅱ號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標菌并對菌落進行計數(shù)，接種時，應(yīng)采用的方法是______________。（4）假設(shè)從Ⅲ號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供_________和_________。19．（2019·全國·高考真題）回答下列與細菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是_____________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是________。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上______（填“能夠”或“不能”）生長，原因是____________。（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板____________（填“倒置”或“正置”）。（3）單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是____________。（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過____________處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。20．（2021·全國·高考真題）工業(yè)上所說的發(fā)酵是指微生物在有氧或無氧條件下通過分解與合成代謝將某些原料物質(zhì)轉(zhuǎn)化為特定產(chǎn)品的過程。利用微生物發(fā)酵制作醬油在我國具有悠久的歷史。某企業(yè)通過發(fā)酵制作醬油的流程示意圖如下?；卮鹣铝袉栴}：（1）米曲霉發(fā)酵過程中，加入大豆、小麥和麥麩可以為米曲霉的生長提供營養(yǎng)物質(zhì)，大豆中的___________可為米曲霉的生長提供氮源，小麥中的淀粉可為米曲霉的生長提供___________。（2）米曲霉發(fā)酵過程的主要目的是使米曲霉充分生長繁殖，大量分泌制作醬油過程所需的酶類，這些酶中的_____、______能分別將發(fā)酵池中的蛋白質(zhì)和脂肪分解成易于吸收、風(fēng)味獨特的成分，如將蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和__________。米曲霉發(fā)酵過程需要提供營養(yǎng)物質(zhì)、通入空氣并攪拌，由此可以判斷米曲霉屬于___________（填“自養(yǎng)厭氧”“異養(yǎng)厭氧”或“異養(yǎng)好氧”）微生物。（3）在發(fā)酵池發(fā)酵階段添加的乳酸菌屬于___________（填“真核生物”或“原核生物”）；添加的酵母菌在無氧條件下分解葡萄糖的產(chǎn)物是___________。在該階段抑制雜菌污染和繁殖是保證醬油質(zhì)量的重要因素，據(jù)圖分析該階段中可以抑制雜菌生長的物質(zhì)是___________（答出1點即可）。21．（2018·全國·高考真題）回答下列與酵母菌有關(guān)的問題：（1）分離培養(yǎng)酵母菌通常使用____________（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后會觀察到菌落，菌落的含義是_______________。（2）酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，可促進______________（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）；若進行厭氧培養(yǎng)，可促進_________（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）。（3）制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是______________________。

參考答案1．D【分析】該題考查DNA的結(jié)構(gòu)、限制酶的特點和功能等。DNA一般是雙螺旋結(jié)構(gòu)；限制酶可以識別特定的脫氧核苷酸序列，并在每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割。【詳解】限制酶識別特定的脫氧核苷酸序列，不同的限制酶能識別不同的核苷酸序列，由電泳圖可知XhoI和SalI兩種酶分別切割時，識別的序列不同，A正確；同種限制酶切割出的DNA片段，具有相同的粘性末端，再用DNA連接酶進行連接，可以構(gòu)成重組DNA，B正確；Sal

I將DNA片段切成4段，Xho

I將DNA片段切成3段，根據(jù)電泳結(jié)果可知泳道①為Sal

I，泳道②為Xho

I，C正確；限制酶切割雙鏈DNA，酶切后的DNA片段仍然是雙鏈DNA，D錯誤，所以選D。【點睛】注意圖1兩種限制酶的識別位點數(shù)量，Sal

I有3個識別位點，能將DNA片段切成4段，Xho

I有2個識別位點，能將DNA片段切成3段。2．C【分析】培養(yǎng)基中需要具備碳源、氮源、無機鹽、水等，另外在考慮溫度、PH等條件。土壤中的硝化細菌能進行化能合成作用，硝化細菌能利用氨氣氧化釋放的能量把二氧化碳和水合成有機物，屬于自養(yǎng)生物，因此選擇提供無機碳源、無機氮源?！驹斀狻緼、土壤中的硝化細菌能進行化能合成作用，培養(yǎng)基中不需要有機碳源，其碳源為二氧化碳，A錯誤；B、硝化細菌能利用NH3氧化釋放的能量把二氧化碳和水合成有機物，所以培養(yǎng)時不能隔絕空氣，B錯誤；C、硝化細菌的培養(yǎng)過程中氮源是氨氣，C正確；D、硝化細菌能利用NH3氧化釋放的能量把二氧化碳和水合成有機物，需要酶的催化作用，所以培養(yǎng)時需要適宜的溫度，D錯誤。故選C。本題主要考查硝化細菌的培養(yǎng)條件，需要明確硝化細菌的化能合成作用原理。3．C【分析】該選擇培養(yǎng)基上的唯一碳源是淀粉，只有能利用淀粉的微生物才能存活，微生物分解淀粉后，會產(chǎn)生透明圈?！驹斀狻颗囵B(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時，需要對菌液進行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，B正確；由題意可知，以上兩種菌均會產(chǎn)生透明圈，說明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分泌到細胞外分解淀粉，C錯誤；淀粉分解菌的H/C越大，說明其產(chǎn)生的淀粉酶分解的淀粉相對越多，可說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強，D正確。因此，本題答案選C。4．C【分析】微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。其中稀釋涂布平板法可以用來進行微生物的計數(shù)，而平板劃線法不能?！驹斀狻緼、可用血細胞計數(shù)板對原生質(zhì)體進行計數(shù)，一般計數(shù)總數(shù)不少于300個細胞，A正確；B、活細胞的細胞膜具有選擇透過性，紅墨水中的色素分子不能透過細胞膜，當(dāng)細胞死亡后，細胞膜失去選擇透過性，紅墨水中的色素分子能進入細胞，所以可用紅墨水檢測細胞的存活狀態(tài)并計數(shù)，B正確；C、劃線分離法不能用于細胞計數(shù)，C錯誤；D、酵母細胞的密度與渾濁度指標存在一定的數(shù)量關(guān)系，所以酵母菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后，可用比濁計測定其密度，D正確。故選C。5．B【解析】1、泡菜腌制過程中起作用的主要是假絲酵母和乳酸菌，在無氧條件下乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸。2、泡菜的制作流程是：選擇和處理原料、洗凈泡菜壇、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵。【詳解】A、將白蘿卜切成小塊可以擴大白蘿卜與腌料的接觸面積，縮短腌制時間，A正確；B、泡菜制作所需菌種為乳酸菌，制作過程中應(yīng)保持無氧環(huán)境，向容器中通入無菌空氣不利于腌制，B錯誤；C、泡菜汁中含有一定量的發(fā)酵菌種，所以在腌制過程中，加入一些已經(jīng)腌制過泡菜汁可縮短腌制時間，C正確；D、用沸水短時處理，可抑制某些微生物的繁殖，提高泡菜品質(zhì)，也可縮短腌制時間，D正確。故選B。6．C【分析】實驗室常用的消毒和滅菌方法的比較：1、消毒：煮沸消毒法（一般物品）、巴氏消毒法（一些不耐高溫的液體，如牛奶）、化學(xué)藥劑消毒法（如用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源等）、紫外線消毒法（接種室、操作臺）；2、滅菌：灼燒滅菌（接種工具）、干熱滅菌（玻璃器皿、金屬用具）、高壓蒸汽滅菌（培養(yǎng)基及容器）?！驹斀狻緼、為避免雜菌污染干擾，需對配制的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌，A正確；B、葡萄球菌需從人體皮膚的微生物中分離，為避免雜菌污染，故需要使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣，B正確；C、用取樣后的棉拭子浸出液在固體培養(yǎng)基上涂布，C錯誤；D、根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進行鑒別，D正確。故選C。7．B【分析】能量流動的特點：單向流動、逐級遞減。物質(zhì)可以循環(huán)利用，但能量是單向流動的，不能循環(huán)利用。【詳解】A、此類草本植物根系發(fā)達可以固定更多的土壤，故種植此類草本植物可以減少水土流失，A正確；B、能量可多級利用，但不能循環(huán)利用，B錯誤；C、草本植物含有蛋白質(zhì)和纖維素，可給食用菌提供碳源和氮源，C正確；D、草本植物可栽培食用菌，而菌渣可作肥料或飼料，故實現(xiàn)了物質(zhì)在植物、真菌和動物間的轉(zhuǎn)移，D正確。故選B。8．C【分析】滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細胞、芽孢和孢子的過程，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。【詳解】A、用免洗酒精凝膠擦手屬于消毒，A錯誤；B、制作泡菜前用開水燙洗容器屬于消毒過程，B錯誤；C、在火焰上灼燒接種環(huán)能達到滅菌目的，C正確；D、防疫期間用石炭酸噴灑教室，屬于消毒，D錯誤。故選C。9．

菌種

發(fā)酵時間

好氧菌

延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間

氨基酸和肽

脂肪酸和甘油【試題分析】本題以傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)為背景，考查考生獲取信息能力和解決問題的能力。從題干可知本實驗有兩個自變量，不同的菌種和發(fā)酵時間；發(fā)酵容器內(nèi)上層有氧氣，發(fā)酵效果好，說明該發(fā)酵菌是好氧菌；32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，無下降趨勢說明發(fā)酵時間不夠，需延長發(fā)酵時間才能有下降趨勢，才能確定最高點。（1）根據(jù)題干信息可知，該實驗的自變量是菌種和發(fā)酵時間。

（2）發(fā)酵容器內(nèi)上層為有氧環(huán)境，底層為無氧環(huán)境，若發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，則說明該發(fā)酵菌是好氧（需氧）微生物。

（3）如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32

h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，可在原操作的基礎(chǔ)上，繼續(xù)延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳的發(fā)酵時間。（4）從大豆到豆豉的過程中，蛋白質(zhì)被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸，脂肪被脂肪酶分解成甘油和脂肪酸。10．

體外重組DNA可以進入受體細胞；真核生物基因可在原核細胞中表達

轉(zhuǎn)化

外殼蛋白質(zhì)（或噬菌體蛋白）

細菌

蛋白酶缺陷型

蛋白酶【分析】本題考查基因工程中目的基因與質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒后導(dǎo)入受體細胞的過程，目的基因進入受體細胞的方法，以及目的基因的檢測與鑒定的方法。【詳解】（1）將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿細胞中進行了表達，該過程證明了體外重組的質(zhì)?？梢赃M入體細胞，真核生物基因可在原核細胞中表達等。（2）體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2+處理，目的是以增大細胞的通透性，使重組的質(zhì)粒能夠?qū)氲绞荏w細胞內(nèi)，因此體外重組的質(zhì)粒可通過Ca2+參與的轉(zhuǎn)化方法導(dǎo)入大腸桿菌細胞。體外重組的噬菌體DNA通常需與蛋白質(zhì)外殼組裝成完整的噬菌體后，才能通過侵染的方法將重組噬菌體DNA導(dǎo)入受體細胞，噬菌體侵染的是細菌，而不能寄生在其它細胞中，因此可作為重組噬菌體宿主細胞的是細菌。（3）真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細胞內(nèi)表達時,表達出的蛋白質(zhì)可能會被降解,為防止蛋白質(zhì)被降解,可以選用不能產(chǎn)生該蛋白酶的缺陷細菌以及使用能夠抑制蛋白酶活性的藥物，因此為防止蛋白質(zhì)被降解,在實驗中應(yīng)選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細胞，在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加蛋白酶的抑制劑?！军c睛】解答第（2）小題，要理清將目的基因?qū)胧荏w細胞的方法，根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。11．

W

乙

乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W

將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源

緩沖液

緩沖液不能降解W

酶E與天然酶降解W的能力相近【分析】篩選培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)δ承┗瘜W(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的，能選擇性地區(qū)分這種微生物的培養(yǎng)基。利用選擇培養(yǎng)基，可使混合菌群中的目標菌種變成優(yōu)勢種群，從而提高該種微生物的篩選效率?！驹斀狻浚?）該研究小組的目標菌是能夠降解物質(zhì)W的細菌，而物質(zhì)W是一種含氮有機物，故可作篩選培養(yǎng)基中的氮源。（2）研究小組的目標菌，是能夠降解物質(zhì)W的細菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌落能夠降解物質(zhì)W，故乙菌落為該小組的目標細菌。（3）目標菌能夠利用空氣中的氮氣作為氮源，故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠在無氮源的培養(yǎng)基上生存的細菌便是目的細菌，故實驗操作為：將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。（4）①C處作為空白對照，要排除作為溶劑的緩沖液對實驗可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖液，且保持滴加量相同；②培養(yǎng)基中的透明圈表示物質(zhì)W被降解的情況，若C處不出現(xiàn)透明圈，則說明緩沖液不能降解物質(zhì)W；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明物質(zhì)W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近?！军c睛】本題考查篩選培養(yǎng)基的配置和使用，針對不同要求的目標菌種，選擇不同物質(zhì)配制不同篩選作用的培養(yǎng)基。并且要求學(xué)生理解識別目標菌種篩選的現(xiàn)象，判斷篩選結(jié)果。12．

可以

在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少

破壞DNA結(jié)構(gòu)

消毒液

氯氣

未將鍋內(nèi)冷空氣排盡【分析】由題意“通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染”可知，本題考查的是“無菌技術(shù)”。理清實驗室和日常生產(chǎn)、生活中常用的消毒和滅菌方法是解答此題的關(guān)鍵?！驹斀狻浚?）能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。（2）煮沸消毒法即在100℃煮沸5～6min可以殺死微生物細胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70～75℃煮30min或在80℃煮15min，可以殺死微生物，并且保證營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點是在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。（3）因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前，適量噴灑消毒液，可強化消毒效果。（4）通常乙醇消毒是75%的酒精，有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無法使用；因此水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。

（5）采用高壓蒸汽滅菌時，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會出現(xiàn)壓力達到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象?！军c睛】（1）消毒與滅菌的區(qū)別：比較項目消毒滅菌條件使用較為溫和的理化方法使用強烈的理化因素結(jié)果殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子適用實驗操作的空間、操作者的衣服和手微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等常用方法煮沸消毒法（如在100℃，煮沸5～6min）、巴氏消毒法（如在80℃，煮15min）；使用酒精、氯氣、石炭酸等化學(xué)藥劑進行消毒灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌（2）三種常用滅菌方法的比較：滅菌方法滅菌條件滅菌時間適用材料或用具灼燒滅菌酒精燈火焰的充分燃燒層直至燒紅接種環(huán)、接種針或其他金屬工具干熱滅菌干熱滅菌箱內(nèi)，160～170℃1～2h玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等高壓蒸汽滅菌100kPa，121℃15～30min培養(yǎng)基等13．

脲酶

分解尿素的細菌是異養(yǎng)型生物，不能利用CO2來合成有機物

為細胞生物生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料

尿素

其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用

為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定【分析】考查微生物分離，培養(yǎng)，培養(yǎng)基中物質(zhì)作用相關(guān)知識。【詳解】（1）細菌分解尿素是由于細菌體內(nèi)合成脲酶的結(jié)果，尿素是有機物，分解尿素的細菌是分解者，而不是生產(chǎn)者，只有生產(chǎn)者才能利用CO2作為碳源合成有機物，而分解尿素的細菌是異養(yǎng)型生物，不能利用CO2來合成有機物。進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用：為細胞生物生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料。（2）篩選分解尿素的細菌，通常只能用尿素作為唯一氮源，對于“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”均含有無機氮源，不能起到篩選作用。（3）KH2PO4和Na2HPO4為微生物提供P元素和無機鹽離子如鉀離子和鈉離子，還可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定。【點睛】本題考查分解尿素的微生物的分離、培養(yǎng)及培養(yǎng)基中物質(zhì)的作用，要求考生掌握微生物分離須用微生物特定需要的培養(yǎng)基來培養(yǎng)，微生物培養(yǎng)中必須有碳源、氮源、能源、生長因子、水和無機鹽等。14．

細菌

選擇

碳源、無機鹽

蛋白質(zhì)、DNA、RNA

碘液

淀粉遇碘顯藍色，產(chǎn)淀粉酶菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈

乙同學(xué)的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差【分析】本題考查篩選某種微生物的原理，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分等相關(guān)知識點，在利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計數(shù)目時，要注意稀釋倍數(shù)的選取以及平板數(shù)一般要滿足30-300個才符合要求?！驹斀狻浚?）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說明M培養(yǎng)基能滿足真菌的生長，而能抑制其它微生物的生長，鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細菌的生長。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。（2）微生物生長需要多種營養(yǎng)物質(zhì)除氮源外，還需要碳源、無機鹽、水以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)等。氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸（DNA、RNA）。（3）淀粉與碘液會變成藍色，篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物，依據(jù)淀粉遇碘液顯藍色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈，再根據(jù)透明圈，來篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物。（4）乙同學(xué)結(jié)果不合理，因為1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊較大，結(jié)果的重復(fù)性差，不能簡單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果?！军c睛】解答第（4）小題，要注意在設(shè)計該實驗時，一定要涂布至少3個平板作為重復(fù)組，才能增強實驗的說服力與準確性，在分析實驗結(jié)果時，一定要考慮所設(shè)置的重復(fù)組的結(jié)果是否相當(dāng)，結(jié)果差距太大，意味著操作有誤，需要重新實驗。15．

PCR

多肽（或蛋白質(zhì)）

載體

總RNA

非天然氨基酸（Uaa）

D

細胞【分析】本題以甲型流感病毒為素材，考查了基因工程、基因的表達、免疫調(diào)節(jié)的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的理解能力，綜合運用所學(xué)知識解決問題的能力?？梢愿脑觳《镜牟糠只?，使其失去在正常宿主細胞內(nèi)的增殖能力，此過程中需要用到PCR技術(shù)，然后通過基因工程構(gòu)建適合改造病毒增殖的轉(zhuǎn)基因宿主細胞。最后利用轉(zhuǎn)基因宿主細胞制備疫苗，以預(yù)防該病毒再次侵染?！驹斀狻浚?）PCR技術(shù)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火（復(fù)性）及適溫延伸等反應(yīng)組成一個周期，循環(huán)進行，使目的DNA得以迅速擴增，具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。因此以病毒RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄成對應(yīng)DNA后，利用PCR技術(shù)擴增，由于將其中某些基因（不包括表面抗原基因）內(nèi)個別編碼氨基酸的序列替換成編碼終止密碼子的序列，因此肽鏈合成提前終止，這樣與改造前的基因相比，改造后的基因表達時不能合成完整長度的多肽（或蛋白質(zhì)），因此不能產(chǎn)生子代病毒。（2）基因工程的核心步驟為基因表達載體的構(gòu)建，將該基因與載體連接后才能導(dǎo)入宿主細胞，檢測目的基因是否成功表達上述tRNA時，利用核酸分子雜交技術(shù)，即用相應(yīng)的DNA探針與宿主細胞的總RNA分子進行雜交鑒定，進而篩選獲得成功表達上述tRNA的轉(zhuǎn)基因宿主細胞。（3）因為設(shè)計的宿主細胞具有能合成一種特殊tRNA的基因，其產(chǎn)物的反密碼子能與（1）中的終止密碼子配對結(jié)合，并可攜帶一個非天然氨基酸（Uaa），因此可在補加非天然氨基酸（Uaa）的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，篩選出宿主細胞。進而利用該宿主細胞，翻譯出改造病毒基因的完整蛋白，產(chǎn)生大量子代病毒，用于制備疫苗。因為轉(zhuǎn)錄在宿主細胞內(nèi)進行，且啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，因此需要使用宿主細胞的RNA聚合酶。故選D。（4）不具侵染性的流感病毒滅活疫苗，不能侵入細胞內(nèi)部，只能引起體液免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體與記憶細胞，而該疫苗能夠侵入細胞，引起的免疫屬于細胞免疫。【點睛】解答本題需要考生掌握基因工程的原理、操作步驟及其一些細節(jié)問題，同時還要熟練掌握有關(guān)基因的表達及免疫調(diào)節(jié)方面的問題。16．

E1和E4

甲的完整

甲與載體正確連接

轉(zhuǎn)錄

翻譯

細胞核

去核卵母細胞

核DNA【分析】本題以圖文結(jié)合的形式綜合考查學(xué)生對基因工程、核移植等相關(guān)知識的識記和理解能力。解答本題需熟記并理解核移植技術(shù)的過程、基因工程的基本操作程序，特別是明確PCR技術(shù)的原理和過程、基因表達載體的組成及其作用、限制酶的作用等相關(guān)知識并形成清晰的知識網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問題情境，從題圖中提取有效信息進行相關(guān)問題的解答?！驹斀狻浚?）要保證目的基因在受體細胞中能夠正確表達，目的基因的首端應(yīng)有啟動子，尾端應(yīng)有終止子。甲是將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5ˊ末端而獲得的L1-GFP融合基因，據(jù)此結(jié)合題意并分析圖示可知：該團隊在將甲插入質(zhì)粒P0時，如果用E2或E3，則目的基因不完整，而使用E1和E4這兩種限制酶進行酶切保證了甲的完整，而且也保證了甲與載體正確連接，因此，使用的兩種限制酶，是E1和E4。（2）構(gòu)建的真核表達載體P1中含有GFP基因，而GFP基因的表達產(chǎn)物“某種熒光蛋白（GFP）”在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光。若在導(dǎo)入P1的牛皮膚細胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了表達。基因的表達過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。（3）若要獲得含有甲的牛，可采用核移植技術(shù)，即將能夠產(chǎn)生綠色熒光細胞的細胞核移入牛的去核卵母細胞中獲得重組細胞，并將該重組細胞在體外培養(yǎng)成重組胚胎，再經(jīng)過胚胎移植等獲得含有甲的牛。（4）PCR是多聚酶鏈式反應(yīng)的縮寫，是一種在生物體外復(fù)制特定DNA片斷的核酸合成技術(shù)。若利用PCR方法檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細胞中，則應(yīng)分別以該牛不同組織細胞中的核DNA作為PCR模板。【點睛】本題的難點在于對（1）的解答。解題的關(guān)鍵是：以題意“獲得L1-GFP融合基因（簡稱為甲）”的過程為切入點，圍繞“基因表達載體的組成及其作用”和圖示呈現(xiàn)的“酶切位點的”信息進行綜合分析。17．

班氏

加熱（加熱至沸騰）

4

紅黃色

不同酶的氨基酸序列不同（不同酶的空間結(jié)構(gòu)不同）

微生物B

葡萄糖可用作制取酒精的原料；用纖維素代替化石燃料【詳解】從表中可以看出，實驗者是用第4支試管來作為對照的，在實驗步驟中，要達到每支試管中溶液總量均為2.0ml,比較各組中的變量關(guān)系,就會發(fā)現(xiàn)1、2、3支試管中的區(qū)別應(yīng)該是酶的種類不同，第4支試管中不加酶，而加入等量的蒸餾水，其它因素均相同。故在1號試管中應(yīng)補充等量的緩沖液，2號試管中應(yīng)補充等量的微生物B的提取物，3號試管中也補充與其它試管等量的纖維素縣浮液，4號試管中應(yīng)補充的蒸餾水量=1.4+0.1=1.5ml。欲檢測四支試管的實驗產(chǎn)物的量，可用班氏試劑或斐林試劑，出現(xiàn)的現(xiàn)象是紅黃色或磚紅色，含糖量越多，顏色越深。上述結(jié)果中，若不考慮酶的最適pH和最適溫度的差異，在酶濃度也相同時，酶活性的差異就應(yīng)該是酶本身的差異了，如酶的氨基酸序列不同或空間結(jié)構(gòu)不同。上述三種微生物中，產(chǎn)物中含糖量最大的說明其酶的活性最強，即微生物B最有開發(fā)的價值。開發(fā)此酶可以解決農(nóng)產(chǎn)品秸稈轉(zhuǎn)化問題，可以為利用農(nóng)產(chǎn)品的廢棄物來生產(chǎn)飼料或酒精等開辟新機遇等。18．

牛肉膏、蛋白胨

X

下降

不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細菌能夠增殖

稀釋涂布平板法

能量

合成其他物質(zhì)的原料【分析】1、選擇培養(yǎng)基的概念：在微生物學(xué)中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基必須是固體培養(yǎng)基，本題中選擇培養(yǎng)基中的唯一碳源是有機物X，這樣能分解X的微生物能夠從該有機物獲得碳源，其他微生物由于無法獲得碳源而不能生存。2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養(yǎng)基上，進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細胞繁殖而來的菌落，微生物的計數(shù)通常采用稀釋涂布平板法。【詳解】（1）氮源是微生物生長需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，是含氮化合物，可為微生物的生長提供氮元素，牛肉膏、蛋白胨來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)，因此在1號培養(yǎng)基中，可為微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生長所需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，可為微生物的生長提供碳元素，而有機物均含碳元素，II、III號培養(yǎng)基均含有有機物X，因此，II、III號培養(yǎng)基為微生物的生長提供碳源的均為有機物X。（2）由于II號培養(yǎng)基含有的碳源只有有機物X，因此若將土壤懸浮液接種在II號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌由于無法獲得碳源而無法增殖導(dǎo)致其比例減少。（3）微生物的接種方法很多，最常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法，由于稀釋涂布平板法中，稀釋度足夠高的菌液經(jīng)涂布培養(yǎng)后，在培養(yǎng)基表面形成的一個菌落是由菌液中的一個活菌繁殖而來，所以常用來進行微生物的計數(shù)。（4）丙酮酸參與有氧呼吸的第二階段，能被分解產(chǎn)生能量，且丙酮酸可作為許多物質(zhì)合成的中間產(chǎn)物，因此其可為微生物的生長提供能量和合成其他物質(zhì)的原料?！军c睛】選擇培養(yǎng)基能選擇特定的微生物。微生物的接種方法有多種，其中稀釋涂布平板法常用來進行微生物的計數(shù)。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有水、碳源、氮源、無機鹽等。19．

蛋白胨

不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同

能夠

硝化細菌可以利用空氣中的CO2作為碳源

倒置

在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征

滅菌【分析】1、微生物培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：①各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽；②不同培養(yǎng)基還要滿足不同微生物對pH