探討無創(chuàng)DNA技術(shù)在性染色體非整倍體檢測(cè)中的應(yīng)用

探討無創(chuàng)DNA技術(shù)在性染色體非整倍體

檢測(cè)中的應(yīng)用摘要：目的探討無創(chuàng)DNA技術(shù)在胎兒性染色體非整倍體檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法選擇2016年10月至2019年12月，孕周12-22+6之間，在天津?yàn)I海新區(qū)婦女兒童保健和計(jì)劃生育服務(wù)中心自愿選擇無創(chuàng)DNA篩查的孕婦21881例，采集外周血5ml,檢測(cè)周期7-10天，經(jīng)過無創(chuàng)DNA全基因測(cè)序，除檢測(cè)21三體、18三體、13三體外，還發(fā)現(xiàn)性染色體非整倍體異常75例。結(jié)果針對(duì)性染色非整倍篩查結(jié)果異常的孕婦，建議在羊水穿刺明確診斷的基礎(chǔ)上，結(jié)合專業(yè)的遺傳咨詢，妊娠結(jié)局的選擇更加慎重。結(jié)論無創(chuàng)DNA對(duì)性染色體非整倍體檢測(cè)，經(jīng)產(chǎn)前診斷羊水穿刺報(bào)告結(jié)合遺傳咨詢，成為評(píng)判孕期妊娠結(jié)局的重要手段。關(guān)鍵詞：無創(chuàng)DNA，產(chǎn)前診斷，羊水穿刺，核型分析，遺傳咨詢?nèi)旧w病是由于先天性的染色體數(shù)目異?；蚴墙Y(jié)構(gòu)畸變引起的疾病，針對(duì)染色體異常造成的出生缺陷是嚴(yán)重的出生缺陷之一［1］。無創(chuàng)DeoxyriboNucleicAcid（簡(jiǎn)稱DNA）檢查是通過對(duì)母體外周血中游離胎兒DNA應(yīng)用高通量測(cè)序技術(shù)，結(jié)合生物信息分析，計(jì)算出胎兒患染色體非整倍體，即胎兒染色體數(shù)目異常⑵。本檢測(cè)技術(shù)為全基因組測(cè)序，除檢測(cè)21三體、18三體、13三體外，還發(fā)現(xiàn)性染色體非整倍體異常75例。選取2016年10月至2019年12月之間，在天津市濱海新區(qū)婦女兒童保健和計(jì)劃生育服務(wù)中心自愿選擇無創(chuàng)DNA篩查的孕婦21000例，進(jìn)行回顧性分析以探討該技術(shù)在檢測(cè)性染色體非整倍體異常的臨床應(yīng)用。1資料與方法1.1.一般資料選擇2016年10月-2019年12月之間，于天津市濱海新區(qū)婦女兒童保健和計(jì)劃生育服務(wù)中心自愿接受無創(chuàng)DNA篩查孕婦21881例，高齡孕婦4091例，均簽署產(chǎn)前篩查與診斷知情告知書，年齡在20-45歲之間，單胎妊娠，孕周12—22+6周。高齡孕婦年齡截?cái)嘀禐榇笥诨虻扔?5歲。2.方法采集孕婦外周血（EDTA管＞5ml），檢測(cè)周期7-10個(gè)工作日，分離血漿后提取胎兒游離NDA進(jìn)行高通量測(cè)序并結(jié)合生物信息分析，發(fā)現(xiàn)胎兒常見的性染色體非整倍體異常的孕婦再通過羊水穿刺，得到染色體核型分析和染色體熒光原位雜交技術(shù)報(bào)告（fluorescenceinsituhybridization）FISH報(bào)告明確診斷，結(jié)合專業(yè)的遺傳咨詢選擇繼續(xù)或者終止妊娠，電話追訪妊娠結(jié)局，了解胎兒預(yù)后情況。2結(jié)果2.1本次篩查陽性的孕婦共有75例，選擇產(chǎn)前診斷羊水穿刺有54人；包括XO綜合征陽性36例，其中高齡孕婦14例，行羊水穿刺檢查有23例，4例羊穿驗(yàn)證陽性及時(shí)終止妊娠；選擇繼續(xù)妊娠至分娩的有27例，其中有10例未行羊水穿刺而直接分娩；電話追訪分娩結(jié)局，分娩女嬰24例，男嬰5例；其中分娩5例男嬰的孕婦無創(chuàng)結(jié)果報(bào)告均提示有母體干擾。XXX綜合征陽性11例，高齡孕婦5例，行羊水穿刺檢查有7例，羊穿驗(yàn)證陽性5人，分娩的孕婦有9例，其中有4例未行羊水穿刺，兩例引產(chǎn)。XXY綜合征有陽性16例，高齡孕婦2例，行羊水穿刺確診13例，分娩5例，其中有3例孕婦未行羊水穿刺直接分娩；經(jīng)羊水穿刺驗(yàn)證陽性的孕婦11例，通過專業(yè)遺傳咨詢，選擇引產(chǎn)終止妊娠。XYY綜合征陽性12例，高齡孕婦1人，11例行羊水穿刺，羊水穿刺驗(yàn)證陽性6例，10例孕婦選擇分娩，2例選擇引產(chǎn)。（見表1）表175例性染色體非整倍檢測(cè)結(jié)果及妊娠結(jié)局、篩高羊經(jīng)分未引經(jīng)失綜查陽 齡孕 穿人 羊穿 娩人 行羊 產(chǎn)人 羊穿 訪人合性 婦數(shù) 驗(yàn)證數(shù) 穿分?jǐn)?shù) 確診數(shù)征（例（例（例陽性（例娩（例引產(chǎn)（例）))（例)（例）)（例)))XXXYYY2.2無創(chuàng)DNA針對(duì)性染色體非整倍檢測(cè)為附加報(bào)告，經(jīng)羊水穿刺核型分析54例，驗(yàn)證陽性27例，整體符合率（驗(yàn)證陽性/核型分析）為50%。XO綜合征和XXX綜合征與孕婦高齡關(guān)系密切；XO綜合征和XXY綜合征經(jīng)核型驗(yàn)證陽性的孕婦多選擇引產(chǎn)終止妊娠，XXX綜合征和XYY綜合征驗(yàn)證陽性的孕婦多選擇繼續(xù)妊娠至分娩。2.3本次大樣本追訪過程中XO綜合征失訪病例2例，一例篩查年齡為高齡孕婦44歲，另外一例為乙肝大三陽患者，孕婦本人及家屬均拒絕羊水穿刺和隨訪調(diào)查。3討論關(guān)于性染色體非整倍體異常在普通人群中正常存在，XO綜合征發(fā)病率為1/4000，XXX綜合征、XXY綜合征和XYY綜合征為1/1000的發(fā)病率；在分娩結(jié)局的選擇上，不同于21三體、18三體、13三體的處理原則明確診斷終止妊娠，分娩結(jié)局的選擇上要更為慎重。本樣本對(duì)21881例孕婦無創(chuàng)DNA檢測(cè)結(jié)果的臨床分析，針對(duì)性染色非整倍體篩查結(jié)果陽性的孕婦，首先完善產(chǎn)前診斷羊水穿刺明確診斷，再結(jié)合專業(yè)的遺傳咨詢，讓孕婦充分了解檢測(cè)結(jié)果，并根據(jù)孕婦自身的年齡，孕周，孕產(chǎn)史，超聲軟指標(biāo)異常情況，孕期有無嚴(yán)重并發(fā)癥，包括傳染性疾病（妊娠合并梅毒，妊娠合并病毒性肝炎等），尊循國家有關(guān)優(yōu)生優(yōu)育政策，尊重孕婦意愿，最終獲得較為滿意的妊娠結(jié)局。羊水穿刺為有創(chuàng)性的產(chǎn)前診斷方法，也是診斷非整倍體染色體疾病的金標(biāo)準(zhǔn)，在檢查過程中存在出血，流產(chǎn)和感染風(fēng)險(xiǎn)，實(shí)際操作中會(huì)給孕婦帶來極大的心理負(fù)擔(dān)34]，因此會(huì)有少數(shù)孕婦選擇拒絕產(chǎn)前診斷，選擇繼續(xù)妊娠或放棄丘。參考文獻(xiàn)1.溫靜，常紅，董玲，等.天津市21-三體綜合征產(chǎn)前篩查結(jié)果分析[J].中國生育健康雜志，2013,2（2）:157.2.楊樹法，李嘉琪,司艷梅.無創(chuàng)游離DNA檢測(cè)高齡孕婦的染色體畸變漏診預(yù)測(cè)[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志，2019,27（11）:1333-1334.3.EddlemanKA,MaloneFD.Sullivanl,etal.Pregnancylossratesaftermidtrimesteramniocentsis[J].ObsterGynecol,2006,108(5):1067-1072.4.RhoadsGG,JacksonLG,SchlesselmanSE,etal.Thesafetyandefficacyofchorivillussamplingforearlyprenataldiagnosisofcytogeneticabno