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血流感染實(shí)驗(yàn)室的診斷第一頁,共二十九頁,2022年,8月28日1血流感染概述2自動(dòng)化血培養(yǎng)系統(tǒng)3標(biāo)本采集和運(yùn)送4陽性報(bào)警后處理方法5如何判斷是否污染第二頁,共二十九頁,2022年,8月28日一、血流感染概述第三頁,共二十九頁,2022年,8月28日(一)血流感染的定義血流感染(bloodstreaminfections,BSI)是指各種病原微生物侵入血循環(huán),釋放毒素和代謝產(chǎn)物,并誘導(dǎo)細(xì)胞因子釋放,對(duì)機(jī)體所有臟器造成損害,嚴(yán)重者可導(dǎo)致休克、多臟器衰竭、彌散性血管內(nèi)凝血,甚至死亡,是一種嚴(yán)重的全身感染性疾病。第四頁,共二十九頁,2022年,8月28日(二)血流感染的類型菌血癥(bacteremia):細(xì)菌侵入血流,尚未大量繁殖且未引發(fā)臨床癥狀,往往是一過性的。敗血癥(septicemia):細(xì)菌進(jìn)入血液大量繁殖,分泌毒素或代謝產(chǎn)物,產(chǎn)生嚴(yán)重的臨床癥狀。膿毒敗血癥(pyemia):細(xì)菌進(jìn)入血液大量繁殖,分泌毒素或代謝產(chǎn)物,產(chǎn)生嚴(yán)重的臨床癥狀,常伴有多發(fā)性膿腫或敗血性休克。毒血癥(toxemia):細(xì)菌毒素或代謝產(chǎn)物進(jìn)入血液引起的臨床病癥。第五頁,共二十九頁,2022年,8月28日(三)血培養(yǎng)的現(xiàn)狀送檢率低送檢量(瓶/日)床位中國大陸三甲醫(yī)院20~501000中國香港瑪麗醫(yī)院2001400中國臺(tái)灣臺(tái)大醫(yī)院3002000美國JohnHopinks300~4001039第六頁,共二十九頁,2022年,8月28日(三)血培養(yǎng)的現(xiàn)狀不正確采樣污染問題皮膚定植菌群是血培養(yǎng)污染的最常見細(xì)菌。陽性檢出率低檢驗(yàn)周期長
第七頁,共二十九頁,2022年,8月28日二、全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)第八頁,共二十九頁,2022年,8月28日二、自動(dòng)化血培養(yǎng)系統(tǒng)我院使用的是BacT/ALERT3D全自動(dòng)細(xì)菌、分枝桿菌培養(yǎng)系統(tǒng)工作原理:細(xì)菌在培養(yǎng)基中代謝基質(zhì)時(shí)產(chǎn)生CO2,并水解成H+,H+透過瓶底濾過膜,瓶底乳膠感應(yīng)器顏色由墨綠色變成黃色。第九頁,共二十九頁,2022年,8月28日二、自動(dòng)化血培養(yǎng)系統(tǒng)儀器培養(yǎng)孔底的光電探測(cè)器測(cè)量反射光變化并按相應(yīng)公式計(jì)算。判讀公式:加速度法速率法起始閾值法第十頁,共二十九頁,2022年,8月28日三、標(biāo)本采集和運(yùn)送第十一頁,共二十九頁,2022年,8月28日(一)標(biāo)本采集采集時(shí)間1.盡可能在抗菌藥物使用前;2.對(duì)已經(jīng)使用抗菌藥物的病人,最好在下次用藥前采集;3.寒戰(zhàn)和發(fā)熱初起時(shí)采血可提高培養(yǎng)陽性率,心內(nèi)膜炎(持續(xù)性菌血癥)例外;4.懷疑血流感染時(shí)應(yīng)盡早采血,不要強(qiáng)調(diào)體溫超過39℃才抽血,而錯(cuò)過時(shí)機(jī)。第十二頁,共二十九頁,2022年,8月28日(一)標(biāo)本采集寒戰(zhàn)后體溫高峰前細(xì)菌含量最高。血液細(xì)菌含量隨著體溫從最高峰逐漸下降而越來越少。血液采樣的最佳時(shí)間是在寒戰(zhàn)后和發(fā)熱高峰前,此時(shí)陽性檢出率最高。第十三頁,共二十九頁,2022年,8月28日(一)標(biāo)本采集采血量成人采血量為5~10ml/瓶,分別采取需氧瓶和厭氧瓶,雙部位抽血。兒童采血量為3~5ml/瓶,采取兒童瓶。第十四頁,共二十九頁,2022年,8月28日(二)標(biāo)本運(yùn)送采血后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)立即送檢,不得超過2h。不能放入冰箱或冷凍,有些苛養(yǎng)菌如肺炎鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。如在培養(yǎng)之前不得不放置一段時(shí)間,應(yīng)置于室溫。第十五頁,共二十九頁,2022年,8月28日四、陽性報(bào)警后處理方法第十六頁,共二十九頁,2022年,8月28日血培養(yǎng)陽性報(bào)警后,如何處理?觀察培養(yǎng)曲線涂片、轉(zhuǎn)種血平板革蘭染色鏡檢報(bào)告危急值若革蘭染色鏡檢未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌,怎么辦?重新涂片,作瑞氏染色以培養(yǎng)曲線作初步判斷是否假陽性,次日觀察血平板上是否生長第十七頁,共二十九頁,2022年,8月28日第十八頁,共二十九頁,2022年,8月28日第十九頁,共二十九頁,2022年,8月28日陽性曲線第二十頁,共二十九頁,2022年,8月28日陰性曲線第二十一頁,共二十九頁,2022年,8月28日假陽性曲線第二十二頁,共二十九頁,2022年,8月28日五、如何判斷是否污染?第二十三頁,共二十九頁,2022年,8月28日五、如何判斷是否污染?(一)陽性檢出瓶數(shù)(二)細(xì)菌種類(三)陽性檢出時(shí)間(四)重復(fù)培養(yǎng)結(jié)果第二十四頁,共二十九頁,2022年,8月28日(一)陽性檢出瓶數(shù)兩瓶血培養(yǎng),檢出一瓶,考慮污染兩瓶血培養(yǎng),檢出兩瓶,即使是凝固酶陰性的葡萄球菌,也應(yīng)考慮為致病菌第二十五頁,共二十九頁,2022年,8月28日(二)細(xì)菌種類檢出金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌及其他腸桿科細(xì)菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌時(shí),90%以上是致病菌。檢出化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌、腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌、新生隱球菌及其他假絲酵母菌,污染的可能性更低。檢出棒桿菌、微球菌、氣球菌、芽胞桿菌、凝固酶陰性葡萄球菌,污染的可能性很大。第二十六頁,共二十九頁,2022年,8月28日(三)陽性檢出時(shí)間陽性檢出時(shí)間與血標(biāo)本中含菌量呈反比關(guān)系。陽性報(bào)警出現(xiàn)時(shí)間小于24h,一般為血流感染大于48h,多為污染第二十七頁,共二十九頁,202
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