鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵數(shù)據(jù)處理

鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵數(shù)據(jù)處理正式處理數(shù)據(jù)前，先明確實(shí)驗(yàn)用到的一些理論和原理：有色物質(zhì)能夠吸收可見(jiàn)光，所以可見(jiàn)光穿過(guò)有色物質(zhì)后，能量減弱。Fe2+離子無(wú)色，所以不能吸收可見(jiàn)光，而鄰二氮菲與Fe2+形成的絡(luò)合物為橙色。朗伯比爾公式為A=Kbc,即吸光度值與吸摩爾收系數(shù)K、溶液濃度c、（吸收層厚度）光程有關(guān)b。同時(shí)，摩爾吸收系數(shù)K與光的波長(zhǎng)人有關(guān)。數(shù)據(jù)處理：（一）確定最大吸收波長(zhǎng).此次實(shí)驗(yàn)的光的波長(zhǎng)測(cè)量范圍是450—580nm.以去離子水為參比溶液，掃描得到的吸收曲線，A與人關(guān)系如圖（近似圖像）選取最大波長(zhǎng)入max（二）顯色劑用量的確定.將實(shí)驗(yàn)測(cè)得的7組A和對(duì)應(yīng)的顯色劑用量輸入Excel表格中，繪制A和顯色劑用量的關(guān)系圖像，然后選取合適的用量。.理論上，吸光度和顯色劑用量的關(guān)系可能有三種：第一種情況，為線性關(guān)系，需要選定一個(gè)固定的用量。第二種情況，選取拐點(diǎn)處的值對(duì)應(yīng)的用量。第三種情況，選取最大值對(duì)應(yīng)的用量。.實(shí)際數(shù)據(jù)整理成的圖像雖然圖像從2.00ml之后近似為水平直線（僅為趨勢(shì)），但是從應(yīng)在實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中選擇A最大值所對(duì)應(yīng)的顯色劑用量。（三）鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度及對(duì)應(yīng)的吸光度值.同上述方法，把實(shí)驗(yàn)測(cè)得的5組A和對(duì)應(yīng)的濃度c（Fe2+）繪成函數(shù)圖像。.理論上A=Kbc是一條過(guò)坐標(biāo)原點(diǎn)的直線，但實(shí)際實(shí)驗(yàn)得到的圖像往往縱截距不為零，于是得到的關(guān)系式為A=Kbc+a。令k=Kb,則A=kc+ao這里k的單位是ug/nilo利用圖像求出線性回歸方程，算出k和ao（四）待測(cè)樣品的吸光度值.計(jì)算吸光度A的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。.將A的平均值帶入已求得的回歸方程中，得到相對(duì)應(yīng)的濃度c'。.待測(cè)溶液濃度為c=c'*稀釋倍數(shù)，即求得樣品中鐵的含量（ug/ml）（五）思考題（1）溶液中加鹽酸羥胺的原因：鹽酸羥胺可以把Fe3+還原成Fe2+。（2）溶液中加醋酸鈉的目的：調(diào)節(jié)pH。（3）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算絡(luò)合物最大摩爾吸收系數(shù)Kmax：由標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得到直線斜率k\進(jìn)行單位換算就可以求出摩爾吸收系數(shù)K,K=k'4-0.001XM（Fe2+）由于實(shí)驗(yàn)選取的吸光度最大時(shí)對(duì)應(yīng)的可見(jiàn)光的波長(zhǎng)為510nm,因此對(duì)應(yīng)的摩爾吸收系數(shù)也為最大。此外，還要注意一下兩個(gè)式子中的單位。A二Kbc中，K的單位是L/(mol-cm),b的單位是cm,c的單位是mol/L。鐵溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程是由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)得到的關(guān)系A(chǔ)=k'c(Fe2+)+a,實(shí)驗(yàn)中c(Fe2+)的單位是Ug/mlo需要注意的是，鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液的溶質(zhì)化學(xué)式為(NH4)2Fe(S04)2-6H2