甘肅省蘭州市蘭大附中2022-2023學(xué)年高三下學(xué)期一?？荚嚿镌囶}含解析

2023年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng)1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項(xiàng)的方框涂滿、涂黑；如需改動(dòng)，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．在人和動(dòng)物體內(nèi)由特殊腺體和細(xì)胞分泌的物質(zhì)，能起到化學(xué)信號的作用。請根據(jù)圖分析（圖中A代表下丘腦神經(jīng)細(xì)胞，B代表垂體細(xì)胞，D代表血管），下列說法正確的是()A．A分泌的物質(zhì)作用于B，進(jìn)而提高機(jī)體耗氧率和興奮性，則A分泌的物質(zhì)名稱是促甲狀腺激素B．若A分泌的物質(zhì)進(jìn)入血液后，最終調(diào)節(jié)C細(xì)胞對水的重吸收，則A分泌的物質(zhì)名稱是抗利尿激素C．E作用于B，對應(yīng)的E細(xì)胞末端處發(fā)生的信號變化電信號→化學(xué)信號→電信號D．如果A突觸小體釋放的遞質(zhì)與突觸后膜結(jié)合，只可導(dǎo)致突觸后膜神經(jīng)元產(chǎn)生興奮2．下列關(guān)于生物技術(shù)實(shí)踐的敘述中，錯(cuò)誤的是A．常用巴氏消毒法、紫外線殺菌法、高壓蒸汽滅菌法為培養(yǎng)基消滅雜菌B．腐乳制作過程中，添加料酒、香辛料和鹽，均可以抑制雜菌的生長C．在DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中常用雞血細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料D．加酶洗衣粉中添加的酶通常含纖維素酶、脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶等3．細(xì)胞增殖嚴(yán)格有序地進(jìn)行與細(xì)胞內(nèi)的周期蛋白依賴性激酶(簡稱CDK)密切相關(guān)，CDK的活性受周期蛋白(簡稱cyclin)的調(diào)節(jié)。CDK在連續(xù)分裂的細(xì)胞中一直存在，cyclin的含量在細(xì)胞周期中呈現(xiàn)有規(guī)律的變化，細(xì)胞分裂間期積累，分裂期消失。下圖表示cyclinB與CDK1活性調(diào)節(jié)的過程。下列敘述正確的是（）A．cyclinB在G2期開始合成B．CDK1可能具有促進(jìn)染色質(zhì)凝縮的作用C．CDK1持續(xù)保持較高活性的細(xì)胞，細(xì)胞周期會(huì)縮短D．CDK1的活性下降是因?yàn)閏yclinB在M期不能合成所致4．如圖表示水稻根尖細(xì)胞呼吸與氧氣濃度的關(guān)系，下列說法正確的是A．酵母菌的細(xì)胞呼吸和根尖細(xì)胞的呼吸類型相同B．氧氣濃度為a時(shí)，Ⅰ、Ⅲ單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的能量相等C．根尖細(xì)胞的細(xì)胞呼吸與細(xì)胞內(nèi)的吸能反應(yīng)直接聯(lián)系D．曲線Ⅲ中產(chǎn)生能量最多的場所主要是線粒體基質(zhì)5．將活的紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞置于蔗糖溶液中，短時(shí)間后細(xì)胞形態(tài)不再發(fā)生變化，則此時(shí)（）A．細(xì)胞必定處于質(zhì)壁分離狀態(tài) B．細(xì)胞液中的蔗糖濃度比實(shí)驗(yàn)開始時(shí)高C．可在光鏡下觀察到水分子在進(jìn)出細(xì)胞 D．細(xì)胞液與蔗糖溶液可能仍存在濃度差6．控制哺乳動(dòng)物的性別對于畜牧業(yè)生產(chǎn)具有十分重要的意義。SRY基因是Y染色體上決定雄性性別的基因，SRY一PCR胚胎性別鑒定技術(shù)是現(xiàn)階段進(jìn)行胚胎性別鑒定最準(zhǔn)確和最有效的方法。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．可利用Y精子DNA含量比X精子低的差異篩選兩種精子，從而對胚胎性別進(jìn)行控制B．從Y染色體DNA分子上獲取SRY基因，可用SRY基因的部分核苷酸序列作引物C．SRY—PCR胚胎性別鑒定技術(shù)中，要用到SRY基因特異性探針進(jìn)行檢測D．利用PCR經(jīng)過3次循環(huán)，理論上獲得的SRY基因占擴(kuò)增產(chǎn)物一半二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細(xì)胞活性并啟動(dòng)其凋亡，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進(jìn)行克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點(diǎn)見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計(jì)含有不同的限制酶切點(diǎn)的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達(dá)載體。該表達(dá)載體的組成，除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴(kuò)增重組DNA。（4）將擴(kuò)增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達(dá)外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時(shí)間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，檢測細(xì)胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，則可裂解293T細(xì)胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會(huì)有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，其目的是_________________________。8．（10分）回答下列（一）（二）小題（一）回答下列與果酒和果醋的制作的有關(guān)問題：（1）葡萄酒是酵母菌在無氧條件下的發(fā)酵產(chǎn)物，即將__________氧化成乙醇，當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過_________時(shí)，酵母菌就會(huì)死亡。果醋則是醋桿菌在有氧條件下將____________氧化而來的。如能獲得醋化醋桿菌的菌種，可先在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)繁殖。用300mL的錐形瓶并用___________振蕩培養(yǎng)48小時(shí)后，再接種到發(fā)酵瓶中。（2）用葡萄汁制葡萄酒：發(fā)酵瓶裝量不能超過________。開始時(shí)，酵母菌的____________會(huì)使發(fā)酵瓶出現(xiàn)負(fù)壓，若這種負(fù)壓情況持續(xù)3天以上，必須加入___________，使發(fā)酵盡快發(fā)生。（二）某研究小組欲利用抗病毒基因，通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育抗病毒玫瑰。圖1和圖2分別表示出了抗病毒基因和農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點(diǎn)和抗生素抗性基因（PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ表示限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)；amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因）。請回答：（1）為獲得大量抗病毒基因，且保證形成重組質(zhì)粒時(shí)，目的基因以唯一方向接入，可選用________________________________分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接，形成重組DNA分子，再與經(jīng)過______________處理的_________（A．有amp和tetB．有amp，無tetC．無amp，有tetD．無amp和tet）農(nóng)桿菌液混合，使重組DNA進(jìn)入農(nóng)桿菌。再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入培養(yǎng)的玫瑰細(xì)胞，使目的基因?qū)朊倒寮?xì)胞中。（2）將含有導(dǎo)入了目的基因的玫瑰細(xì)胞的試管放在搖床上，進(jìn)行____________________獲得胚性細(xì)胞，進(jìn)而培育成抗蟲玫瑰。（3）這種借助基因工程方法，將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，再通過這些轉(zhuǎn)基因細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，獲得具有特定性狀的新植株的技術(shù)就是______________。（4）當(dāng)前多地過度開發(fā)旅游造成生態(tài)環(huán)境的破壞，為減緩生態(tài)環(huán)境的破壞，可發(fā)展_______工程，并在旅游區(qū)種植抗蟲玫瑰，可有效降低農(nóng)藥對環(huán)境的污染，并獲得較佳的經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益和________________。9．（10分）黃瓜花葉病毒（CMV）是能侵染多種植物的RNA病毒，可危害番茄的正常生長并造成減產(chǎn)。研究人員通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)將該病毒外殼蛋白的cDNA導(dǎo)入番茄植株中，成功獲得抗CMV的番茄植株。（1）獲得CMV的RNA后，在__________的催化下才能合成CMV外殼蛋白的cDNA。（2）獲得cDNA后，需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌的__________片段中，然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)，以實(shí)現(xiàn)對番茄細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。（3）將經(jīng)共同培養(yǎng)后的番茄外植體接種于含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間，只有部分外植體生出愈傷組織。研究人員據(jù)此確定這些生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA，你認(rèn)為他們做出以上判斷的理由是_________________。（4）要想確定轉(zhuǎn)基因番茄已經(jīng)成功表達(dá)出CMV外殼蛋白，需要進(jìn)行____________實(shí)驗(yàn)。（5）若要驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力，請寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路__________。轉(zhuǎn)基因番茄自交，子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3：1，由此可以得出的結(jié)論是_________（答出兩點(diǎn)）。10．（10分）為探究全球氣候變暖和人類活動(dòng)對海洋藻類生長的影響，科研人員以某種海洋單細(xì)胞綠藻為材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（1）配制人工海水時(shí)，要控制氮、磷元素的含量。若這兩種元素偏少，可能使該種綠藻生長過程中，光反應(yīng)的產(chǎn)物___________減少，從而影響C3的___________，導(dǎo)致光合速率下降。（2）若配制的人工海水鹽度較正常海水過高，該種綠藻不能存活，分析其原因：___________。（3）探究CO2濃度對該種綠藻生長速率的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，CO2濃度為___________時(shí)，該種綠藻的生長速率較慢。據(jù)圖分析原因是：___________。11．（15分）PD-1是表達(dá)在多種活化T細(xì)胞表面的一種受體，PD-L1是一種能夠與之結(jié)合的蛋白質(zhì)（見圖1）。PD-1和PD-L1結(jié)合會(huì)抑制T細(xì)胞的活化、增殖。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1數(shù)量較多，更有一些類型的腫瘤細(xì)胞除了表面有PD-L1，還分泌出大量的PD-L1（見圖2）。（1）請寫出題干中未使用過的特異性免疫過程中的五個(gè)術(shù)語（專業(yè)名詞）。________________（2）目前已研發(fā)出針對PD-L1的單克隆抗體（mAb）。結(jié)合圖1信息，mAb能治療腫瘤是因?yàn)槭褂胢Ab時(shí)，mAb通過與_________結(jié)合，阻止了__________結(jié)合，從而______________。（3）臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，相同劑量的mAb對有的腫瘤患者治療有效，有的無明顯效果。請根據(jù)以上信息分析其可能的原因。_______________________

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、B【解析】

本題考查神經(jīng)調(diào)節(jié)和激素調(diào)節(jié)的有關(guān)知識，意在考查考生識圖能力和理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力?！驹斀狻緼、下丘腦的神經(jīng)分泌細(xì)胞分泌的物質(zhì)名稱為促甲狀腺激素釋放激素，A錯(cuò)誤；

B、抗利尿激素是由下丘腦分泌后，由垂體后葉釋放到血液中，促進(jìn)腎小管和集合管對水分的重吸收，B正確；

C、E作用于B，對應(yīng)的E細(xì)胞末端發(fā)生的信號變化為電信號→化學(xué)信號，C錯(cuò)誤；

D、如果A突觸小體釋放的神經(jīng)遞質(zhì)與突觸后膜結(jié)合，可以導(dǎo)致突觸后神經(jīng)元產(chǎn)生興奮或抑制，D錯(cuò)誤。

故選B。

2、A【解析】

A、常用巴氏消毒法進(jìn)行牛奶消毒，用紫外線殺菌法進(jìn)行環(huán)境滅菌，用高壓蒸汽滅菌法為培養(yǎng)基消滅雜菌，A錯(cuò)誤；

B、腐乳制作過程中，添加料酒、香辛料和鹽，均可以抑制雜菌的生長，同時(shí)調(diào)味，B正確；

C、在DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中常用雞血細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料，C正確；

D、加酶洗衣粉中添加的酶通常含纖維素酶、脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶等，D正確。

故選A。3、B【解析】

根據(jù)圖形和題干信息分析，CDK1在連續(xù)分裂的細(xì)胞中一直存在，在間期活性逐漸升高，分裂期活性逐漸下降；cyclinB的含量在細(xì)胞周期中呈現(xiàn)有規(guī)律的變化，細(xì)胞分裂間期積累，分裂期消失。細(xì)胞分裂間期又可以分為三個(gè)階段：G1期進(jìn)行相關(guān)RNA和蛋白質(zhì)的合成，為S期做物質(zhì)上的準(zhǔn)備；S期進(jìn)行DNA的復(fù)制過程；G2期進(jìn)行相關(guān)RNA和蛋白質(zhì)的合成，為分裂期做物質(zhì)上的準(zhǔn)備?！驹斀狻緼、由圖形分析可知cyclinB在S期開始合成，A錯(cuò)誤；B、圖中CDK1活性在S期開始升高，分裂期M活性逐漸下降，是細(xì)胞由DNA復(fù)制后進(jìn)入分裂期的主要酶，可能具有促進(jìn)染色質(zhì)凝縮的作用，B正確；C、CDK1持續(xù)保持較高活性的細(xì)胞，則細(xì)胞周期可能會(huì)一直處于分裂期，細(xì)胞周期增長，C錯(cuò)誤；D、CDK1是細(xì)胞由DNA復(fù)制后進(jìn)入分裂期的主要酶，其活性下降是因?yàn)閏yclinB在M期含量逐漸減少的原因，而非“不能合成”，D錯(cuò)誤。故選B。4、A【解析】

水稻根尖細(xì)胞的有氧呼吸和無氧呼吸過程：（1）有氧呼吸可以分為三個(gè)階段：第一階段：在細(xì)胞質(zhì)的基質(zhì)中，1C6H12O6（葡萄糖）→2C3H4O3（丙酮酸）+4[H]+少量能量（2ATP）第二階段：在線粒體基質(zhì)中進(jìn)行，2C3H4O3（丙酮酸）+6H2O→20[H]+6CO2+少量能量（2ATP）第三階段：在線粒體的內(nèi)膜上，24[H]+6O2→12H2O+大量能量（34ATP）。（2）無氧呼吸的二個(gè)階段：第一階段：在細(xì)胞質(zhì)的基質(zhì)中，1C6H12O6（葡萄糖）→2C3H4O3（丙酮酸）+4[H]+少量能量（2ATP）第二階段：在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，2C3H4O3（丙酮酸）+4[H]→2C2H5OH（酒精）+2CO2【詳解】酵母菌的細(xì)胞和根尖細(xì)胞均既進(jìn)行有氧呼吸，也進(jìn)行無氧呼吸（產(chǎn)物都是酒精和二氧化碳），A正確；氧氣濃度為a時(shí)，Ⅰ、Ⅲ單應(yīng)時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的CO2量相等，Ⅰ是無氧呼吸，產(chǎn)生能量少，Ⅲ是有氧呼吸，產(chǎn)生能量多，B錯(cuò)誤；根尖細(xì)胞的呼吸作用產(chǎn)生ATP與細(xì)胞內(nèi)的放能反應(yīng)直接聯(lián)系，C錯(cuò)誤；曲線Ⅲ中產(chǎn)生能量最多的場所主要是線粒體內(nèi)膜，D錯(cuò)誤?！军c(diǎn)睛】注意：當(dāng)有氧呼吸和無氧呼吸產(chǎn)生的CO2量相等時(shí)，由于前者消耗的葡萄糖較后者少，所以有氧呼吸的強(qiáng)度小于無氧呼吸的強(qiáng)度。5、D【解析】

將活的紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞置于蔗糖溶液中，短時(shí)間后細(xì)胞形態(tài)不再發(fā)生變化時(shí)的狀態(tài)為滲透平衡狀態(tài)，由于蔗糖溶液未知，故無法判斷處于平衡狀態(tài)之前的水分子的流動(dòng)方向，即無法判斷該洋蔥也外表皮細(xì)胞是失水還是吸水?！驹斀狻緼、蔗糖溶液濃度未知，洋蔥表皮細(xì)胞可能失水，也可能吸水，A錯(cuò)誤；B、短時(shí)間后基本無蔗糖分子進(jìn)入細(xì)胞液內(nèi)，B錯(cuò)誤；C、顯微鏡下觀察不到水分子的運(yùn)動(dòng)，C錯(cuò)誤；D、植物細(xì)胞達(dá)到平衡狀態(tài)時(shí)，細(xì)胞液與蔗糖溶液可能無濃度差，也可能存在濃度差，D正確。故選D。6、D【解析】

SRY一PCR胚胎性別鑒定技術(shù):利用PCR技術(shù)擴(kuò)增被測胚胎的DNA時(shí)，需要以SRY基因的一段核苷酸序列作引物，用被測胚胎的DNA作模板；檢測擴(kuò)增的DNA產(chǎn)物，應(yīng)采用DNA分子雜交技術(shù)。在檢測的過程中，需用放射性同位素標(biāo)記的SRY基因作探針?！驹斀狻緼、由于人類的Y染色體比X染色體短小，故含Y精子DNA含量比含X精子低，根據(jù)該差異可以篩選兩種精子，實(shí)現(xiàn)對胚胎性別的控制，A正確；B、從Y染色體DNA分子上獲取SRY基因，然后用SRY基因的部分核苷酸序列作引物進(jìn)行擴(kuò)增，B正確；C、SRY—PCR胚胎性別鑒定技術(shù)中，要用到放射性同位素標(biāo)記的SRY基因特異性探針進(jìn)行檢測，C正確；D、因?yàn)榻?jīng)過3次循環(huán)之后才能出現(xiàn)目的基因的片段，故利用PCR經(jīng)過3次循環(huán)，理論上獲得的SRY基因占擴(kuò)增產(chǎn)物1/4，D錯(cuò)誤。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、cDNAPCRXhoIEoRI啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進(jìn)行PCR技術(shù)擴(kuò)增短時(shí)間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達(dá)載體?；虮磉_(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時(shí)間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，可以檢測細(xì)胞膜表面是否具有PD-1基因表達(dá)的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細(xì)胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實(shí)驗(yàn)的可信度，還需要設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，因?yàn)椴缓琍D-1基因，所以“PD-1與PDL-1信號通路”不會(huì)阻斷?！军c(diǎn)睛】題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識在新的情景材料下分析運(yùn)用。8、葡萄糖16%乙醇搖床2/3需氧呼吸（或有氧呼吸）酵母SmaI和PstICaCl2D液體懸浮培養(yǎng)植物細(xì)胞工程生態(tài)（旅游）生態(tài)效益【解析】

釀酒和制醋是最古老的生物技術(shù)，至今已經(jīng)有五六千年的歷史。與酒與醋的生產(chǎn)有關(guān)的微生物，分別是酵母菌（真菌）和醋桿菌（細(xì)菌），它們各有不同的菌種，菌種的不同，所產(chǎn)生的酒和醋的風(fēng)味也不同。釀酒所用的原料是葡萄或其它果汁，酵母菌在無氧條件下利用葡萄糖進(jìn)行酒精發(fā)酵，當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時(shí)，酵母菌就會(huì)死亡。果醋的制作是以果酒為原料，利用醋化醋桿菌，將酒精氧化成醋酸的過程?；蚬こ淌仟M義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定高效地表達(dá)。為了實(shí)現(xiàn)基因工程的目標(biāo)，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素，并按照一定的程序進(jìn)行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞也稱（宿主）細(xì)胞、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個(gè)方面?！驹斀狻浚ㄒ唬?）酵母菌是兼性厭氧型生物，在無氧條件下可將葡萄糖氧化成乙醇。乙醇對酵母菌的生長不利，當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時(shí)，酵母菌就會(huì)死亡。醋桿菌是好氧型生物，在有氧條件下將乙醇氧化成醋酸。液體培養(yǎng)可擴(kuò)增菌種，常用搖床振蕩提高溶氧量以及菌和營養(yǎng)物質(zhì)的接觸。（2）用葡萄汁制葡萄酒：發(fā)酵瓶裝量不能超過2/3，否則溢出易染菌。酵母菌的需氧呼吸（或有氧呼吸）會(huì)消耗瓶內(nèi)的O2，而CO2易溶于水，因此發(fā)酵瓶出現(xiàn)負(fù)壓。使發(fā)酵盡快發(fā)生，必須增加菌種的量，使酵母菌快速進(jìn)行厭氧呼吸。（二）（1）AluI會(huì)破壞目的基因，使用兩種不同的限制性核酸內(nèi)切酶（Sma和Pst）可防止質(zhì)粒自連，且能保證目的基因接入方向唯一。重組DNA分子中的標(biāo)記基因?yàn)閍mpr，再與經(jīng)過CaCl2處理(使其成為感受態(tài)細(xì)胞)的無ampr和tet的農(nóng)桿菌液混合，使重組DNA進(jìn)入農(nóng)桿菌。（2）將含有導(dǎo)入了目的基因的玫瑰細(xì)胞的試管放在搖床上，這種培養(yǎng)稱為液體懸浮培養(yǎng)。（3）從細(xì)胞和基因的角度，將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，再通過將這些轉(zhuǎn)基因細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，獲得具有特定性狀的新植株的技術(shù)就是植物細(xì)胞工程技術(shù)。（4）生態(tài)旅游工程生態(tài)（旅游）工程是指不消耗、不破壞當(dāng)?shù)刈匀宦糜钨Y源，旅游設(shè)施盡量生態(tài)化，促進(jìn)地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展。的可以減緩生態(tài)環(huán)境的破壞。發(fā)展生態(tài)旅游工程，可減緩生態(tài)環(huán)境的破壞。在旅游區(qū)種植抗蟲玫瑰，可有效降低農(nóng)藥對環(huán)境的污染，并獲得較佳的經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益和生態(tài)效益?！军c(diǎn)睛】熟悉微生物的培養(yǎng)以及基因工程的原理及過程是解答本題的關(guān)鍵。9、逆轉(zhuǎn)錄酶Ti質(zhì)粒的T-DNA重組表達(dá)載體同時(shí)含有卡那霉素和青霉素抗性基因，只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織抗原-抗體雜交用等量強(qiáng)致病力的CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄（普通番茄），在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察它們對CMV的抗性目的基因整合到受體細(xì)胞的一條染色體上，獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不同。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。4、目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)；④個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體DNA上。因此，獲得cDNA后，需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA片段中，然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)，以實(shí)現(xiàn)對番茄細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。（3）重組表達(dá)載體同時(shí)含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織，據(jù)此可知生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA。（4）檢測目的基因是否表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)，需要進(jìn)行抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)。（5）若要驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力，應(yīng)進(jìn)行個(gè)體水平上的鑒定，自變量為番茄植株的種類，即用等量強(qiáng)致病力的CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄（普通番茄），在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察它們對CMV的抗性。轉(zhuǎn)基因番茄自交，子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3:1，符合基因分離定律，由此可以得出的結(jié)論是目的基因整合到受體細(xì)胞的一條染色體上，獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子?！军c(diǎn)睛】本題的難點(diǎn)在于結(jié)合了基因工程和遺傳的基本規(guī)律。由于受體細(xì)胞為植物細(xì)胞，經(jīng)過植物組織培養(yǎng)可以獲得攜帶目的基因的幼苗，所以在最終鑒定的時(shí)候通常應(yīng)用雜交或自交實(shí)驗(yàn)完成。10、[H]、ATP還原海水鹽度過高，綠藻細(xì)胞因滲透失水過多而死亡800ppmCO2濃度為800ppm時(shí)，葉綠素含量較低，光合速率降低，而呼吸速率基本相同【解析】

影響光合作用的外界因素主要包括：光照強(qiáng)度、二氧化碳濃度、溫度等。光合作用是指綠色植物通過葉綠體，利用光能把二氧化碳和水轉(zhuǎn)變?yōu)閮?chǔ)存著能量的有機(jī)物，并釋放出氧氣的過程。光合作用的光反應(yīng)階段（場所是葉綠體的類囊體薄膜）：水的光解產(chǎn)生[H]和氧氣，以及ATP的形成。光合作用的暗反應(yīng)階段（場所是葉綠體基質(zhì)）：CO2被C5固定形成C3，C3在光反應(yīng)提供的ATP和[H]的作用下還原生成糖類等有機(jī)物?！驹斀狻浚?）光反應(yīng)的產(chǎn)物中[H]和ATP組成元素需要氮、磷。光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP用于暗反應(yīng)C3的還原。（2）綠藻置于人工配制的較高濃度的海水中，由于細(xì)胞液濃度低于外界濃度，會(huì)發(fā)生滲透性失水，細(xì)胞過度失水死亡，綠藻因而不能成活。（3）從圖中分析，CO2濃度為800ppm時(shí)，葉綠素a、b含量較CO2濃度為380ppm時(shí)下降，則吸收和轉(zhuǎn)化、利用的光能減少，光合速率下降，而兩種CO2濃度下的呼吸速率基本相同，因此CO2濃度為800ppm時(shí)凈光合速率較高，積累有機(jī)物也較少?！?/p>