課題開題報(bào)告模板

課題開題報(bào)告模板一、課題目的及研究義1、題目的本課題主要目的是解決生理?xiàng)l件下荷正電的多肽類藥物口服給藥生物利用度低的問題肽（CPPs）是一種具有穿細(xì)胞膜能力的短肽，因攜帶大量的正電荷，可通過靜電相互作用與荷負(fù)電的多肽蛋白類藥物自組裝形成納米粒助穿過消化道上皮進(jìn)入血液循環(huán)對(duì)于荷正電的生物大分子無(wú)吸收促進(jìn)作用。本課題擬構(gòu)建一種由CPPs介的納米遞藥系統(tǒng)，以乳酸羥基乙酸共聚物為架材料，制備可生物降解米粒，通過表面修飾寡聚精氨酸賦予該納米粒穿膜能力，用其包載多肽藥物和熒光探針，Caco-2細(xì)為體外模型，評(píng)價(jià)CPPs的鏈度和納米載藥系統(tǒng)的粒徑對(duì)于多肽藥物穿透生物膜能力的影響。2、究意義（）種新型的給藥系統(tǒng)，其表面修飾的寡聚精氨酸可以提高荷正電多穿透消化道上皮進(jìn)入血液循環(huán)的能力多肽藥物經(jīng)由口服途徑給藥可以到達(dá)所需的治療濃度于載藥物的納米粒可防止藥物在化道的分解，提高藥物在消化道中的穩(wěn)定性。因此寡聚精氨酸修飾的納米粒能夠增加多肽口服給藥的血藥濃度患由于頻繁靜脈注射帶來(lái)的痛苦。（用載體包載藥物以減少穿膜肽直接與多肽藥物結(jié)合產(chǎn)生的電荷損失攜帶藥物穿透單層細(xì)胞的能力。因此，縮短肽鏈的CPP可能具有與原長(zhǎng)度CPP同樣的生物活性，對(duì)于降低藥物的毒副作用有著重要意義。二課研狀隨著生物技術(shù)的發(fā)展，蛋白質(zhì)多肽類藥物在臨床上的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。多肽涉及人體的激素、神經(jīng)、細(xì)胞生長(zhǎng)和生殖等各個(gè)領(lǐng)域，可被廣泛地應(yīng)用于醫(yī)療、衛(wèi)生、保健、食品、化妝品等方面。多肽類藥物的主要特點(diǎn)是用量小，生物活性強(qiáng)，對(duì)癌癥、自身免疫性疾病、記憶力減退、精神失常、高血壓和某些心血管及代謝等疾病有顯著的療效和廣泛的應(yīng)用前途。<?xml:namespaceprefixons="urn:schemas-microsoft-com:office:office"常用的多肽蛋白類藥物因?yàn)榫哂幸韵绿匦?，?dǎo)致難以透過細(xì)胞膜進(jìn)入血液：（）體消化道內(nèi)存在多種降解多肽蛋白的酶，藥物口服進(jìn)入體內(nèi)后易被分。

（）肽蛋白親水性強(qiáng)，親脂性弱，不易透過由脂質(zhì)雙分子層構(gòu)成的細(xì)胞膜（）肽蛋白類分子水化半徑較大，無(wú)法通過自由擴(kuò)散或膜通道等形式穿過胞膜。由于口服給藥方式的多肽蛋白類藥物無(wú)法入血，不能達(dá)到治療劑量的血藥濃度，故臨床上一般常用劑型為注射劑或凍干粉針劑糖病為例為嚴(yán)重的病人一般一天要接受兩至三次的注射，不僅患者的依從性差，也增加了藥物的毒副作用。因此，相對(duì)于注射制劑，蛋白質(zhì)多肽類藥物的口服給藥制劑更具優(yōu)越性多肽類口服給藥的研究方向主要集中在生物粘附，消化道蛋白酶抑制劑，吸收促進(jìn)劑的開發(fā)等方面。近年來(lái)，一些具有細(xì)胞膜穿透能力的多肽，如ATMPGPEP-1、penetratin、寡聚精氨酸等由于它們具有能穿過胞膜而保持其完好無(wú)損的特點(diǎn)而逐漸成為關(guān)注的焦點(diǎn)類天然或合成具水溶性低解性并通過非吞噬作用進(jìn)入各種細(xì)胞膜的多肽為穿膜肽cell-permeablepeptides,CPPs)目前對(duì)穿膜肽的穿膜機(jī)制還不完全清楚。穿膜肽對(duì)生物大分子的轉(zhuǎn)運(yùn)效率高不能基本無(wú)毒其以通過共價(jià)鍵或非共價(jià)鍵偶合等方式攜帶各種生物大分子透過細(xì)胞膜經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)的這些大分子有基因白質(zhì)和多肽以及納米顆粒和脂質(zhì)體等于穿膜肽具有極佳的穿膜效率和較高的安全性此望成為促進(jìn)生物大分子藥物口服吸收的有力工具。寡聚精氨酸penetratin等CPPs已在促進(jìn)胰島素的口服吸收研究中取得了顯著效果。組成這些小分子穿膜肽的氨基酸大多是堿性氨基酸帶有正電荷通過與細(xì)胞表面的負(fù)電荷靜電結(jié)合可能引起胞吞用和核小體蛋白的聚集導(dǎo)藥物穿透細(xì)胞膜目前已有文獻(xiàn)報(bào)道利用穿膜肽攜帶正電的特征過電相互作用與荷負(fù)電的多肽蛋白類藥物自組裝形成納米粒助穿過消道上皮進(jìn)入血液循環(huán)對(duì)荷正電的生物大分子無(wú)吸收促進(jìn)作用題擬構(gòu)建一種由介的納米遞藥統(tǒng)酸羥基乙酸共聚(PLGA)為骨架材料，制備可生物降解納米粒，打破CPPs只能攜帶荷負(fù)電大分子局限性，通過表面修飾寡聚精氨酸賦予該納米粒穿膜能力，用其包載多肽藥物和熒光探針，Caco-2細(xì)胞為體外模型，評(píng)價(jià)肽鏈長(zhǎng)度和納米載藥系統(tǒng)的粒徑對(duì)于單層細(xì)胞穿透能力的影響。主要參考文獻(xiàn)[1]YoshioHayashi,KentaroTakayama,YukaSuehisa,etal.Developmentoligoarginine-drugconjugateslinkedtonewpeptidicself-cleavablespacerstowardeffectiveintestinalabsorption[J].Bioorganic&MedicinalChemistryLetters.2007;17:51295132[2]SonaliFonseca,MarkP.Pereira,ShanaO.Kelley.Recentadvancestheuseofcell-penetratingpeptidesformedicalandbiologicalapplications[J].AdvancedDrugDeliveryReviews.2009;61:–964

[3]NoriyasuKamei,MarikoMorishita,YoshimiEdaetal.Usefulnesscell-penetratingpeptidestoimproveintestinalinsulinabsorption[J].JournalControlledRelease.2008;132:–25[4]尹,郝.穿肽HIV蛋的研究進(jìn)[J].免學(xué)雜志2005,Vol.23,No.12:77-81[5]El-SayedKhafagy,MarikoMorishita,NoriyasuKameietEf?ciencyofcell-penetratingpeptidesonthenasalandintestinalabsorptionoftherapeuticpeptidesandproteins[J].InternationalJournalPharmaceutics.2009;381:–[6]崔殉李來(lái),張振清.胞模型在藥物制劑學(xué)研究中的應(yīng)[J].解軍藥學(xué)學(xué)報(bào)2009,Vol.25,No.1:59-61三、課題主要內(nèi)容與基本思路1、要內(nèi)容（）文獻(xiàn)報(bào)道的活性較高的，，中篩出穿透單層細(xì)胞能力最強(qiáng)的穿膜肽。（）建本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的遞藥系統(tǒng)。（）過Caco-2細(xì)模型，利用熒光探針示蹤和HPLC評(píng)本課題構(gòu)建的遞藥系統(tǒng)的透過細(xì)胞能力。2、本思路（）用固相合成法合成R6、R8R10系列多聚精氨酸類的穿膜肽。（）立Caco-2細(xì)模型。（）過Caco-2細(xì)模型體外模擬消化道上皮細(xì)胞，利用HPLC篩出透過細(xì)胞能力最強(qiáng)的穿膜肽。

（）別使用亮丙瑞林和具有熒光的香豆素作為模型藥物，使用P、PLGA-PEG-NHS-CPP混包載，建不同粒徑的納米遞藥系統(tǒng)。（）過Caco-2細(xì)模型，利用HPLC和光針示蹤進(jìn)行不同粒徑的納米遞藥系統(tǒng)的包封率、載藥量、透過細(xì)胞能力等參數(shù)的測(cè)定，篩選出最優(yōu)的遞藥系統(tǒng)。3、新點(diǎn)本課題建立的納米遞藥系統(tǒng)解決帶正電荷的多肽無(wú)法通過電性作用與穿膜肽結(jié)合的問題更的多肽類藥物可經(jīng)由口服途徑給藥時(shí)該系統(tǒng)的構(gòu)建有望降低穿膜肽介導(dǎo)過程中產(chǎn)生的的毒副作用。以上兩點(diǎn)都具有很強(qiáng)的創(chuàng)新性。4、點(diǎn)（）如何使表面修飾多聚精氨酸膜肽的納米粒具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性和透過細(xì)胞的能力（）何使遞藥系統(tǒng)獲得較高的包封率和載