人體組織及其他斑痕法醫(yī)學(xué)

人體組織及其他斑痕法醫(yī)學(xué)第1頁/共47頁概述毛發(fā)檢驗(yàn)軟組織檢驗(yàn)其他組織檢驗(yàn)第2頁/共47頁

概述人體組織是重要的法醫(yī)物證之一在案發(fā)現(xiàn)場常遺留有組織，器官骨骼碎片，牙齒，指甲，毛發(fā)等第3頁/共47頁法醫(yī)物證鑒定就是通過對(duì)人體組織的遺傳標(biāo)記的檢測來進(jìn)行個(gè)人識(shí)別和親子鑒定用于法醫(yī)檢案的人體組織如下：

軟組織（皮膚，肌肉，臟器）硬組織（骨骼，牙齒）角化組織（毛發(fā)，指趾甲等）角化組織和硬組織對(duì)腐敗有較高的抵抗力，往往能保存很長時(shí)間，在個(gè)體識(shí)別鑒定中有實(shí)用價(jià)值第4頁/共47頁概述毛發(fā)檢驗(yàn)軟組織檢驗(yàn)其他組織檢驗(yàn)第5頁/共47頁毛發(fā)檢驗(yàn)毛發(fā)的特點(diǎn)，結(jié)構(gòu)毛發(fā)檢驗(yàn)的目的和要求與毛發(fā)相關(guān)的鑒別毛發(fā)的脫落和損傷毛發(fā)的個(gè)人識(shí)別毛發(fā)微量元素的分析第6頁/共47頁分布廣泛：除手掌、足底、唇外，身體其它部位均有毛發(fā)。生長較快：毛發(fā)由皮膚毛囊細(xì)胞產(chǎn)生，生長的速度不一，健康人頭發(fā)約0.2-0.3mm/日；胡須約0.4mm/日。耐久性極好：距今2000多年古尸（馬王堆古尸）的毛發(fā)，其結(jié)構(gòu)保存良好。

位于體表：受外力作用，易脫落而長期遺留于現(xiàn)場。

較少檢材量：一小段毛發(fā)即可進(jìn)行ABO血型、線粒體DNA、基因組DNA等多態(tài)性檢測。

毛發(fā)的一些特點(diǎn)第7頁/共47頁毛發(fā)的結(jié)構(gòu)大體結(jié)構(gòu)

毛干(hairshaft):

毛小皮

毛皮質(zhì)

毛髓質(zhì)（外內(nèi)）皮質(zhì)，髓質(zhì)內(nèi)含色素顆粒、角蛋白、ABH血型物質(zhì)等。

毛根(hairroot):

毛球，毛囊，毛乳頭

毛尖(hairtip)(圖)第8頁/共47頁

毛發(fā)的超微結(jié)構(gòu)

1、毛干：第9頁/共47頁第10頁/共47頁

毛囊：包圍毛根，由表皮內(nèi)根鞘、外根鞘、

真皮的結(jié)締組織鞘組成。

第11頁/共47頁毛發(fā)的形態(tài)與顏色人類毛發(fā)形態(tài)與種族，遺傳，生長部位有關(guān)顏色除于上述因素有關(guān)外，還與年齡相關(guān)。毛發(fā)的理化性質(zhì)：是一種角蛋白，耐腐敗，可溶于弱堿性溶液毛發(fā)中含有多種微量元素，其含量具有個(gè)體差異，可供個(gè)體識(shí)別。第12頁/共47頁毛發(fā)檢驗(yàn)應(yīng)解決的問題是否毛發(fā)？是人毛還是動(dòng)物毛？是誰的毛發(fā)？什么部位的毛發(fā)？是自然脫落還是暴力拔脫的毛發(fā)？毛發(fā)有無損傷？第13頁/共47頁毛發(fā)的鑒別毛發(fā)與其它纖維的區(qū)別（鏡檢）

毛發(fā)有皮、髓質(zhì)之分，其它纖維無。

人毛與動(dòng)物毛的區(qū)別（鏡檢）

人毛皮質(zhì)發(fā)達(dá)，髓質(zhì)不發(fā)達(dá)且多有間斷；動(dòng)物毛皮質(zhì)不發(fā)達(dá)，髓質(zhì)發(fā)達(dá)少有間斷。部位的確定（肉眼觀察）

頭發(fā)/陰毛/其他部位毛發(fā)毛發(fā)長度，形狀，染色的為頭發(fā)，色素顆粒附在毛小皮外緣

第14頁/共47頁毛發(fā)損傷1、自然脫落與暴力拔脫的鑒別：*肉眼觀察：自然脫落的毛發(fā)無毛囊附著；暴力拔脫的毛發(fā)常有毛囊附著。*顏色反應(yīng)：5-10%亞硝基鐵氰化鈉使拔脫毛發(fā)的毛球處呈鮮紅色。2、鈍器傷與銳器傷的鑒別：*鈍器傷：斷端鋸齒或撕裂狀。*銳器傷：斷端整齊、銳利。

第15頁/共47頁毛發(fā)的個(gè)人識(shí)別：1.形態(tài)學(xué)觀察2.ABO血型測定3.酶型檢測4.

毛發(fā)DNA分析第16頁/共47頁形態(tài)學(xué)觀察1。毛發(fā)的形態(tài)學(xué)和附著物檢查觀察和記錄：

數(shù)目、長短、形狀、顏色、大體結(jié)構(gòu)、附著物性狀、根據(jù)附著物的成分可獲得有關(guān)職業(yè)毛發(fā)來源等信息。毛發(fā)是游離存在還是附著在其它物品上、附著物品是否兇器。必要時(shí)可借助放大鏡或顯微鏡進(jìn)行檢查。第17頁/共47頁

2.毛發(fā)結(jié)構(gòu)觀察

洗凈毛發(fā)經(jīng)脫色處理后在顯微鏡下觀察觀察色素顆粒毛皮質(zhì)、髓質(zhì)的狀態(tài)毛小皮紋理（毛小皮印痕）計(jì)算毛發(fā)直徑頭皮毛發(fā)鏡檢第18頁/共47頁毛發(fā)直徑的測定：顯微測微計(jì)（接物計(jì)、接目計(jì)）接物計(jì)：1mm范圍內(nèi)刻成100格，每格寬10um。接目計(jì)：中央刻100格。將接物計(jì)與接目計(jì)起始刻線重疊，數(shù)接物鏡的一格（10um）相當(dāng)于接目計(jì)的多少格（設(shè)為n格）則接目鏡的每格寬=10um/n在鏡下觀察毛發(fā)直經(jīng)占接目計(jì)的格數(shù)，即可算出毛發(fā)直經(jīng)是多少。第19頁/共47頁ABO血型測定（解離試驗(yàn)）：步驟：水洗/脫脂/壓扁/抗體浸泡/離心/冷卻/

洗滌（5-10次）/加指示紅細(xì)胞/鏡檢注意：壓扁毛發(fā)是關(guān)鍵，充分暴露皮、髓質(zhì)，使其血型物質(zhì)與抗體充分接觸而吸附。抗體效價(jià)64倍以上；浸泡1-2小時(shí)，離心15-20分鐘洗滌次數(shù)是關(guān)鍵，最好用已知毛發(fā)作先行試驗(yàn)探索洗滌次數(shù)。第20頁/共47頁

酶型檢測：

有毛囊的毛發(fā)，可檢測PGM1、

ESD、GLOI等酶型。第21頁/共47頁毛發(fā)的DNA分析1.帶毛囊的毛發(fā)擴(kuò)增片段長度多態(tài)性（毛囊內(nèi)含有核DNA)chelex-100提取STR基因座分析性別分析Y染色體上STR位點(diǎn)檢測擴(kuò)增X-Y染色體牙釉基因

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毛干的線粒體測序毛干可進(jìn)行線粒體DNA測序，但需排除同一母系其它個(gè)體的可能性。第23頁/共47頁毛發(fā)中微量元素分析通過檢測頭發(fā)種微量元素的含量和種類可以幫助判斷是否中毒，還可作個(gè)人識(shí)別某種元素超出正常范圍可幫助推斷生活環(huán)境和相關(guān)職業(yè)等如長期接觸鉛作業(yè)者毛發(fā)中含鉛量高第24頁/共47頁概述毛發(fā)檢驗(yàn)軟組織檢驗(yàn)其他組織檢驗(yàn)第25頁/共47頁軟組織檢驗(yàn)軟組織的特性軟組織檢驗(yàn)的目的和要求種屬鑒定性別鑒定個(gè)人識(shí)別第26頁/共47頁軟組織特性在兇殺、碎尸案、交通事故、意外事故等案件中,人體軟組織可遺留在現(xiàn)場或附著在致傷物上。常有病理組織(蠟塊、切片）需要個(gè)人認(rèn)定。在親子鑒定案中，也會(huì)遇到需取尸體軟組織作為標(biāo)本的情況。軟組織在失去生理功能后容易自溶和腐敗，要及時(shí)檢查，還應(yīng)警惕組織高度腐敗時(shí)產(chǎn)生的獲得性B物質(zhì)。第27頁/共47頁軟組織檢驗(yàn)?zāi)康暮鸵?.是否組織？2.是人體還是動(dòng)物組織？（種屬鑒定）3.是人體的何種組織？4.個(gè)體識(shí)別。

免疫沉淀環(huán)實(shí)驗(yàn)ALU序列種屬鑒定第28頁/共47頁提取和送檢軟組織比較容易腐敗，送檢時(shí)需注意的事項(xiàng)：1.盡快送檢。2.低溫保存或干燥處理，不宜用甲醛固定！3.一般情況下取材應(yīng)選擇降解相對(duì)慢的，如肌肉，腦組織比肝脾等內(nèi)臟組織降解慢。

第29頁/共47頁個(gè)人識(shí)別ABO血型測定丙酮浸泡除脂組織勻漿后粘附紗布上，其后步驟同血痕。同工酶測定DNA分析

酚氯仿提取

chelex-100提取

STR分型

第30頁/共47頁概述毛發(fā)檢驗(yàn)軟組織檢驗(yàn)其他組織檢驗(yàn)第31頁/共47頁其他組織檢驗(yàn)指趾甲檢驗(yàn)骨及牙髓檢驗(yàn)第32頁/共47頁指趾甲指（趾）甲是角化組織，耐腐敗對(duì)mtDNA多態(tài)性檢測有實(shí)用性價(jià)值含有較多的ABH血型物質(zhì)，用吸收試驗(yàn)測定肥皂水洗凈檢材，蒸餾水沖洗，生理鹽水軟化2h,水浴，DNA-STR分析。

NS

水浴第33頁/共47頁骨及牙髓碎尸，高度腐敗，白骨化，火災(zāi)時(shí)的燒焦尸骸關(guān)鍵是提取基因組DNA制備骨粉，牙粉DNA提取液：

Tis-Hcl：

EDTA:SDS:DTT:NaCl,酚氯仿等第34頁/共47頁

其它斑痕檢驗(yàn)

第35頁/共47頁尿斑檢驗(yàn)1.尿斑的證明2.尿斑的ABO血型檢測3.尿斑的DNA檢測第36頁/共47頁尿斑的證明1可見尿道上皮細(xì)胞、腎盂上皮細(xì)胞、蛋白管型等。2尿斑中含脲，其水溶液與濃硝酸作用生成結(jié)晶狀的硝酸脲。3

尿素（尿斑）尿素酶氨奈氏試劑棕色或黃色沉淀。

凃片檢查：

脲結(jié)晶試驗(yàn)：氨的檢出：第37頁/共47頁人尿斑的證明

1.用人尿斑的固有成份免疫家兔，制備相應(yīng)抗體。沉淀素血清經(jīng)人血清、唾液吸收后，對(duì)人尿起特異性沉淀反應(yīng)。

2.用瓊脂糖擴(kuò)散試驗(yàn)、免疫電泳檢測。第38頁/共47頁

三、尿斑的ABO血型檢測尿斑中的ABO血型物質(zhì)含量很少（僅為唾液的1/256），要經(jīng)數(shù)次濃縮才能檢出。步驟：尿斑生理鹽水浸泡離心取上清蒸干（重復(fù)數(shù)次）少許生理鹽水溶解。中和試驗(yàn)、ELISA進(jìn)行檢測。第39頁/共47頁

四、尿斑的DNA檢測尿斑中含脫落上皮細(xì)胞，同樣可抽提出DNA，進(jìn)行性別基因及DNA多態(tài)性檢測。第40頁/共47頁乳汁斑檢驗(yàn)1.乳汁斑的證明2.乳汁斑的ABO血型檢測3.乳汁斑的DNA檢測第41頁/共47頁乳汁斑的證明肉眼觀察：灰白色，有一定硬度。鏡檢：取1滴乳汁斑浸泡液于鏡下觀察---可見：乳汁球（脂肪球）初乳則可見初乳小體（由變性脂肪細(xì)胞組成）。產(chǎn)后2-3天分泌初乳（淡黃色）；第4天開始分泌乳汁（乳白色）。第42頁/共47頁人乳汁斑的證明：

抗人血清環(huán)狀沉淀試驗(yàn)：陽性。紫外燈檢查：人乳呈淡紫白色；牛乳呈淡黃色。濃硫酸檢查試驗(yàn)乳汁+濃硫酸人乳（褐色）；