內(nèi)毒素的檢測(cè)及意義演示文稿

內(nèi)毒素的檢測(cè)及意義演示文稿當(dāng)前1頁(yè)，總共32頁(yè)。內(nèi)毒素的檢測(cè)及意義當(dāng)前2頁(yè)，總共32頁(yè)。內(nèi)毒素的基礎(chǔ)知識(shí)儀器試劑的簡(jiǎn)單介紹及實(shí)驗(yàn)原理臨床檢驗(yàn)關(guān)心的問(wèn)題132三大知識(shí)點(diǎn)當(dāng)前3頁(yè)，總共32頁(yè)。1892年,科學(xué)家Richard在研究霍亂弧菌的時(shí)候,發(fā)現(xiàn)革蘭陰性菌細(xì)胞壁外膜中有一種不溶性成分,它能夠引起人體發(fā)熱、休克、器官損害等病理表現(xiàn)，因其毒性效應(yīng)和性質(zhì)與外毒素有顯著差異，就用內(nèi)毒素這一術(shù)語(yǔ)來(lái)描述該物質(zhì)。隨后多年對(duì)革蘭陰性菌細(xì)胞壁外膜的超微結(jié)構(gòu)技術(shù)和生物分析技術(shù)，證實(shí)內(nèi)毒素是磷脂雙分子層結(jié)構(gòu)。內(nèi)毒素發(fā)現(xiàn)的歷史當(dāng)前4頁(yè)，總共32頁(yè)。內(nèi)毒素的組成O–特異性抗原脂質(zhì)A核心多糖當(dāng)前5頁(yè)，總共32頁(yè)。內(nèi)毒素的定義和危害內(nèi)毒素（Endotoxin）是革蘭陰性菌細(xì)胞壁外膜的脂多糖（LPS）成分，是革蘭陰性菌生長(zhǎng)時(shí)釋放或死亡后裂解出來(lái)的毒性產(chǎn)物，其中起主要致病作用的是非結(jié)合的游離脂多糖（FLPS）。內(nèi)毒素能夠直接作用于人體，激活組織內(nèi)的炎性細(xì)胞和炎癥因子，導(dǎo)致機(jī)體發(fā)熱并產(chǎn)生全身性炎癥反應(yīng)，繼而引起彌散性血管內(nèi)凝血、休克、多臟器功能衰竭等嚴(yán)重的病理生理癥狀，危及生命。定義危害當(dāng)前6頁(yè)，總共32頁(yè)。內(nèi)毒素的理化性質(zhì)可濾過(guò)性：能夠穿透濾過(guò)膜水溶性：LPS的O-特異性Ag呈親水性被吸附性：可被活性碳所吸附易被強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和強(qiáng)氧化劑破壞耐熱性：徹底滅活需250高溫干烤一小時(shí)當(dāng)前7頁(yè)，總共32頁(yè)。人體內(nèi)毒素的來(lái)源內(nèi)源性途徑外源性途徑注射藥品及溶液開(kāi)放性創(chuàng)傷燒傷骨折感染休克大手術(shù)術(shù)后肝臟疾病當(dāng)前8頁(yè)，總共32頁(yè)。儀器試劑的介紹及實(shí)驗(yàn)原理BET-24A細(xì)菌內(nèi)毒素分析儀天津大學(xué)天大天發(fā)科技有限公司生產(chǎn)人體液檢測(cè)專(zhuān)用鱟試劑盒湛江博康海洋生物制品有限公司生產(chǎn)當(dāng)前9頁(yè)，總共32頁(yè)。鱟20世紀(jì)六十年代，人們發(fā)現(xiàn)一種古老的海洋生物，被稱(chēng)為“海洋活化石”的鱟，它的血液與內(nèi)毒素接觸后會(huì)發(fā)生特異性的凝集反應(yīng)，人們經(jīng)過(guò)大量研究和實(shí)驗(yàn)從它的血液中提取出了用來(lái)檢測(cè)內(nèi)毒素的“鱟試劑”。當(dāng)前10頁(yè)，總共32頁(yè)。當(dāng)前11頁(yè)，總共32頁(yè)。鱟試劑的發(fā)明

1968年1月JackLevin和FrederikB.Bang教授在美國(guó)馬塞諸塞州WoolsHole海洋生物實(shí)驗(yàn)室成功分離提取鱟血細(xì)胞并研制成能夠檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素的鱟試劑，開(kāi)辟了人類(lèi)認(rèn)識(shí)和檢測(cè)內(nèi)毒素的新紀(jì)元！當(dāng)前12頁(yè)，總共32頁(yè)。試劑盒特點(diǎn)鱟試劑是唯一能夠檢測(cè)內(nèi)毒素水平的生物試劑采用更為準(zhǔn)確的動(dòng)態(tài)濁度法進(jìn)行檢測(cè)鱟試劑盒由鱟試劑、I號(hào)II號(hào)檢測(cè)前處理液、除菌除熱原試管和采血管、吸頭及檢測(cè)用水組成精心設(shè)置血液前處理流程，有效去除血細(xì)胞和蛋白的干擾，準(zhǔn)確評(píng)估待測(cè)樣本中的內(nèi)毒素水平采用內(nèi)毒素國(guó)家工作標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行質(zhì)控測(cè)評(píng)，保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤采用國(guó)際通用的內(nèi)毒素活性單位（EU/ml）來(lái)準(zhǔn)確衡量待測(cè)樣本中的內(nèi)毒素致病效能當(dāng)前13頁(yè)，總共32頁(yè)。內(nèi)毒素的單位—EU/ml1BET-24A采用國(guó)際通用的內(nèi)毒素活性單位EU/ml來(lái)表示檢測(cè)出的內(nèi)毒素結(jié)果；2活性單位指的是在生物試劑在檢測(cè)某些具有某些活性的生物時(shí)，它測(cè)得的是這種生物說(shuō)是致病力，而不是這種生物的重量；3不同的Gˉ菌釋放的內(nèi)毒素活性不同，而對(duì)臨床最有診斷價(jià)值的是觀測(cè)到的內(nèi)毒素的致病力大小，所以?xún)?nèi)毒素水平用活性單位來(lái)表示更客觀，更有科學(xué)意義。當(dāng)前14頁(yè)，總共32頁(yè)。實(shí)驗(yàn)原理

通過(guò)鱟試劑與內(nèi)毒素溶液混合會(huì)發(fā)生凝集反應(yīng)產(chǎn)生濁度變化，通過(guò)濃度—時(shí)間反應(yīng)曲線，得出待測(cè)樣品的內(nèi)毒素濃度；當(dāng)前15頁(yè)，總共32頁(yè)。實(shí)驗(yàn)原理當(dāng)前16頁(yè)，總共32頁(yè)。實(shí)驗(yàn)原理

鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)是特異性的“S”曲線，取光密度值為0.02點(diǎn)時(shí)作為反應(yīng)終點(diǎn)時(shí)間，內(nèi)毒素的濃度與反應(yīng)時(shí)間成反比當(dāng)前17頁(yè)，總共32頁(yè)。BET檢測(cè)標(biāo)本范圍

尿液胸腔積液血液腦脊液透析液和透析用水腹腔積液當(dāng)前18頁(yè)，總共32頁(yè)。檢測(cè)內(nèi)毒素的方法定性檢測(cè)凝膠法定量檢測(cè)光度（濁度）法顯色（比色）法動(dòng)態(tài)濁度法終點(diǎn)濁度法動(dòng)態(tài)顯色法終點(diǎn)顯色法當(dāng)前19頁(yè)，總共32頁(yè)。幾種檢測(cè)方法的比較

凝膠法檢測(cè)的特點(diǎn)“限量”檢測(cè)，是一種傳統(tǒng)經(jīng)典的檢測(cè)方法；凝膠法是以試管內(nèi)反應(yīng)物凝膠牢固程度為判斷標(biāo)準(zhǔn)，易受人為因素影響；限量檢查的最低檢測(cè)限僅為0.035EU/ml，因供試品稀釋倍數(shù)所限，容易被供試品干擾，誤差大。因此，凝膠法不適合在臨床用于體液的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查；顯色法檢測(cè)的特點(diǎn)顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團(tuán)的多少而測(cè)定內(nèi)毒素含量的方法，根據(jù)產(chǎn)物顏色判斷內(nèi)毒素濃度。此法試劑較昂貴，操作較復(fù)雜，在一定范圍之內(nèi)靈敏度、特異性較高，但檢測(cè)范圍窄；當(dāng)前20頁(yè)，總共32頁(yè)。動(dòng)態(tài)濁度法檢測(cè)的特點(diǎn)動(dòng)態(tài)濁度法檢測(cè)的特點(diǎn)利用細(xì)菌內(nèi)毒素在與鱟試劑形成凝膠過(guò)程中濁度動(dòng)態(tài)變化定量測(cè)定細(xì)菌內(nèi)毒素水平動(dòng)態(tài)濁度法法檢測(cè)范圍寬，檢測(cè)范圍為0.005EU/ml100EU/ml，應(yīng)用范圍廣對(duì)樣本的內(nèi)毒素含量可以定量檢測(cè)，標(biāo)準(zhǔn)化程度高，適合用于臨床體液細(xì)菌內(nèi)毒素引起發(fā)熱及重癥疾病的早期診斷檢測(cè)當(dāng)前21頁(yè)，總共32頁(yè)。發(fā)熱原因的快速輔助診斷（<1小時(shí)）內(nèi)毒素定量檢測(cè)的臨床意義早期判斷革蘭陰性菌的感染情況（Gˉ菌所致）重癥疾患的早期診斷幫助臨床醫(yī)生快速合理篩選適當(dāng)?shù)目股嘏袛嗫垢腥局委熜Ч邦A(yù)后腸源性?xún)?nèi)毒素血癥的預(yù)判及評(píng)估當(dāng)前22頁(yè)，總共32頁(yè)。惡性腫瘤感染結(jié)締組織GˉG+發(fā)熱發(fā)熱原因的快速輔助診斷病毒真菌等細(xì)菌當(dāng)前23頁(yè)，總共32頁(yè)。幫助臨床醫(yī)生快速篩選合理抗生素Gˉ內(nèi)毒素頭孢菌素類(lèi)喹諾酮類(lèi)碳?xì)涿瓜╊?lèi)氨基糖甙類(lèi)當(dāng)前24頁(yè)，總共32頁(yè)。當(dāng)前25頁(yè)，總共32頁(yè)。第82回日本泌尿器科學(xué)會(huì)1994.4當(dāng)前26頁(yè)，總共32頁(yè)。內(nèi)毒素檢測(cè)與微生物培養(yǎng)的關(guān)系內(nèi)毒素檢測(cè)微生物培養(yǎng)確定菌種菌種確定精確確定指導(dǎo)用藥√√檢測(cè)速度≯1h快3～7天，慢評(píng)估病情輕重√×重疾早期預(yù)警√×陽(yáng)性率＞80%＜20%當(dāng)前27頁(yè)，總共32頁(yè)。內(nèi)毒素與血培養(yǎng)的結(jié)果比較

科室內(nèi)毒素結(jié)果(EU/ml)血培養(yǎng)結(jié)果

腦外科0.4808大腸埃希菌ICU0.2136大腸埃希菌ICU0.5904鮑曼不動(dòng)桿菌ICU0.1408鮑曼不動(dòng)桿菌腎內(nèi)科13.4727大腸埃希菌

肝移植科2.1大腸埃希菌肝移植科16.8792大腸埃希菌內(nèi)毒素超標(biāo),血培養(yǎng)陽(yáng)性當(dāng)前28頁(yè)，總共32頁(yè)。內(nèi)毒素與痰培養(yǎng)的結(jié)果比較

科室內(nèi)毒素結(jié)果(EU/ml)痰培養(yǎng)結(jié)果腦外科3.0096肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌腦外科3.2064肺炎克雷伯菌腦外科11.2776銅綠假單胞菌鮑曼不動(dòng)桿菌腎內(nèi)科1.8264肺炎克雷伯菌銅綠假單胞菌腎移植科10.204陰溝腸桿菌ICU8.0672大腸埃希菌肝移植科2.79鮑曼不動(dòng)桿菌當(dāng)前29頁(yè)，總共32頁(yè)。BET和PCT(降鈣素原)的區(qū)別PCT本身無(wú)致病作用，而LPS能直接導(dǎo)致人體發(fā)熱及產(chǎn)生炎癥反應(yīng)PCT也是在以LPS為首的炎癥因子作用下刺激機(jī)體靶細(xì)胞產(chǎn)生PCT僅能判斷是否是細(xì)菌感染，BET能判斷是否為Gˉ菌感染，檢測(cè)更精準(zhǔn)對(duì)于某些腫瘤患者、新生兒及接受移植手術(shù)患者而言，如感染則檢測(cè)PCT有制約，而B(niǎo)ET對(duì)此毫無(wú)制約當(dāng)前30頁(yè)，總共32頁(yè)。分段區(qū)間的解釋0～0.035EU/ml無(wú)明顯內(nèi)毒素血癥0.035

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