蛋白操作相關(guān)試劑

-.z.蛋白操作相關(guān)試劑1)蛋白Marker

SDS(聚丙烯酰胺凝膠電泳)低等分子量蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)

使用說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品介紹：

本試劑為冰凍枯燥的六種分子量的蛋白質(zhì)混合物，用于SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，快速測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量，測(cè)定范圍為14,400-97,400道爾頓。

中等分子量蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)的組成：

RabbitphosphorylaseB97,400Dalton、

BovineSerumAlbumin66,200Dalton、

Ovalbumin42,700Dalton、

CarbonicAnhydrase31,000Dalton、

TrypsinInhibitor20,100Dalton、

Lysozyme14,400Dalton)

使用方法：

**后溶于60ul的雙蒸水，分裝于３個(gè)小管內(nèi)〔每管20ul〕，于沸水中加熱5分鐘后，保存于-20℃。使用前于室溫融化，加DTT至100mM,于沸水中加熱5分鐘后上樣。

如果用銀染檢測(cè)蛋白，須將本產(chǎn)品用1×的上樣緩沖液〔50mMTris-HCl,PH6.8,10%甘油，2%SDS，0.05%溴酚藍(lán)，100mMDTT〕稀釋50倍后再上樣。

產(chǎn)品電泳圖譜：10-20%SDSgelandCoomassieBlueR-250stained

建議使用別離膠濃度：

10%或12%的均一膠，10%-20%的梯度膠

使用次數(shù)：

用CoomassieBlueR-250染色每個(gè)包裝可使用3次，假設(shè)用銀染可使用150次

儲(chǔ)存條件：

未**的冰凍枯燥試劑可保存于4℃，**溶解后保存于-20℃，可保存1年以上。

注意：試劑溶解后防止反復(fù)凍融，可根據(jù)使用量分裝于小管保存于-20℃。2)蛋白酶抑制劑3)WestBlot試劑HRP偶聯(lián)二抗

抗小鼠IgGAP或HRP偶聯(lián)物

山羊抗鼠IgGAP或HRP偶聯(lián)物專(zhuān)為Wstern雜交，噬菌斑/克隆篩選實(shí)驗(yàn)中獲得最大信噪比而設(shè)計(jì)。以抗IgG抗體親和純化。假設(shè)用于ELISA,推薦工作稀釋度高于雜交。

特異性山羊抗鼠IgGAP偶聯(lián)，鼠IgG,H+L鏈

穿插反響？？？與細(xì)菌，昆蟲(chóng)及哺乳動(dòng)物細(xì)胞的穿插反響最小

提供形式穩(wěn)定溶液，-20℃保存

工作濃度山羊抗鼠IgGAP偶聯(lián)：1：5000-1：10000〔ELISA1：50000〕

山羊抗鼠IgGHRP偶聯(lián)：1：5000-10000(ELISA1:50000)

AP和HRP印跡顯色底物

底物適用于Western.斑點(diǎn)印跡顯色，滿(mǎn)足顯色所需要的靈敏和低背景。經(jīng)檢測(cè)與Novagen所提供的相關(guān)檢測(cè)試劑盒配合使用，具良好重現(xiàn)性。

AP檢測(cè)試劑包括BCIP和NBT標(biāo)準(zhǔn)溶液，提供20ⅹAP緩沖液，用于A(yíng)P偶聯(lián)物的高靈敏度生色檢測(cè)。采NBT/BCIP系統(tǒng)，陽(yáng)性條帶會(huì)產(chǎn)生深藍(lán)紫色條帶，不易褪色。

假設(shè)要獲得更高靈敏度，推薦使用化學(xué)發(fā)光方法檢測(cè)。CDP-Star"AP底物和SuperSignal"HRP底物都具備低于納克級(jí)的靈敏度，可直接使用。CDP-Star"底物還包括Nitro-Block"Ⅱ信號(hào)增強(qiáng)劑以增加標(biāo)準(zhǔn)NC膜的信噪比。

顯色劑：PIERCE化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑

A-B液用于檢測(cè)HRP偶聯(lián)的二抗，如ELISA、WesternBlot等酶底物反響，可做定量分析。

產(chǎn)品分為兩個(gè)級(jí)別：

SuperSignalELISAFemtoma*imumSensitySubstrate，檢測(cè)下限10-11g

產(chǎn)品特點(diǎn)：

37℃或室溫下工作，產(chǎn)生強(qiáng)烈的光信號(hào)

低背景，高信噪比

檢測(cè)下限Fg級(jí)，適于大規(guī)模篩選試驗(yàn)

室溫保存和運(yùn)輸，不必要4℃保存

室溫六個(gè)月4℃12個(gè)月的保質(zhì)期，6小時(shí)的工作液穩(wěn)定性

信號(hào)可以在黑色或白色背景下讀取數(shù)值

37075SuperSignalELISAFemtoma*imumSensitySubstrate100ml

SuperSignalPicoChemiluminescentSubstrate檢測(cè)下限10-12g

產(chǎn)品特點(diǎn)：

37℃或室溫下工作，產(chǎn)生強(qiáng)烈的光信號(hào)

低背景，高信噪比

檢測(cè)下限Pg級(jí)，完全滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)需求

室溫保存和運(yùn)輸，不必要4℃保存

8小時(shí)工作液的穩(wěn)定性，只有10％的信號(hào)削減

信號(hào)可以在黑色或白色背景下讀取數(shù)值

37070SuperSignalPicoChemiluminescentSubstrate100ml4)總蛋白純化試劑細(xì)菌裂解試劑概述

從細(xì)胞或組織中純化蛋白時(shí)，第一步是破碎樣品和抽提相關(guān)蛋白組分，這一步驟十分關(guān)鍵，通常用劇烈的機(jī)械或酶處理使蛋白暴露于降解性條件，會(huì)直接影響目的蛋白的完整性和活性。

為了解決這一問(wèn)題，研究者用Novagen開(kāi)發(fā)的BugBuster,YeasBuster和CytoBuster等蛋白抽提試劑，是特別組方的去污劑，分別用于從細(xì)菌，酵母和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中溫和、有效的抽提可溶性蛋白，防止采用機(jī)械處理造成的蛋白破壞。rLysozyme"溶液與Bugbuster試劑配合使用可以增加細(xì)菌的裂解效果。參加Benzonase"核酸酶可特異性降解污染的DNA和RNA，以制備可以立即用于目的蛋白純化的無(wú)核酸，低粘度的抽提物。蛋白酶抑制劑"雞尾酒〞式混合試劑可防止粗提物中目標(biāo)蛋白降解。

PopCulture"試劑用于從液體培養(yǎng)的E.coli抽提蛋白，不需要離心收集細(xì)胞。直接將0.1體積的PopCulture加到相應(yīng)體積的培養(yǎng)基和細(xì)胞中可以在抽提時(shí)完整地保存蛋白的生物活性。PopCulture試劑可以與rLysozyme溶液，蛋白酶抑制劑以及Benzonase核酸酶配合使用，以便得到最正確的細(xì)胞裂解效果和低粘度的，已經(jīng)去除核酸的抽提液。這種抽提方法與磁性的或?yàn)V膜親和純化機(jī)制的機(jī)器人自動(dòng)純化RoboPop"試劑盒結(jié)合使用，可以完成高通量蛋白純化工作。

昆蟲(chóng)細(xì)胞專(zhuān)用PopCulture試劑用于從培養(yǎng)體系中的桿狀病毒感染的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，或者組織培養(yǎng)板貼壁培養(yǎng)細(xì)胞抽提蛋白，不需要離心操作。采用這種改良方法，可以使純化操作更為流暢，提高目的蛋白產(chǎn)量，也更適合表達(dá)篩選和親和純化的自動(dòng)化。

BugBuster蛋白抽提試劑BugBuster"蛋白抽提試劑用于溫和破啐大腸桿菌細(xì)胞壁并釋放可溶性蛋白，可以替代機(jī)械方法，如弗氏壓啐或超聲處理等劇烈處理，具有簡(jiǎn)單，快速，低本錢(qián)的特點(diǎn)。用于在純化的準(zhǔn)備階段或其它應(yīng)用中釋放表達(dá)產(chǎn)物蛋白。該專(zhuān)利配方采用的是一種能夠使細(xì)胞壁穿孔而不使可溶性蛋白變性的去污劑混合物設(shè)計(jì)。

實(shí)際操作時(shí)將離心收集的細(xì)胞懸于BugBuster中。此時(shí)，參加Benzonase"核酸酶可將低抽提物中由于染色體釋放而導(dǎo)致的高粘度。簡(jiǎn)單孵育后，離心去除不可溶的細(xì)胞啐片。澄清的抽提物可立即用于Novagen提供的親和介質(zhì)〔包括GST"Bind",His"Bind"和S"Tag"樹(shù)脂，或其它層析基質(zhì)〕純化。結(jié)合到親和樹(shù)脂上后，過(guò)量的BugBuster可通過(guò)用相應(yīng)緩沖液洗柱子輕易去除。在表達(dá)蛋白不可溶的時(shí)，BugBuster也可用于制備高純度包涵體。

BugBuster試劑，BugBuster加Benzonase,BugBuster純化試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)BugBuster試劑以室溫穩(wěn)定，Tris-緩沖的"1ⅹ〞即用型液體形式提供。500ml試劑與10000uBenzonase核酸酶捆綁提供，用于制備低粘度抽提物并從蛋白制備物中去除核酸。BugBuster和Benzonase與普通蛋白酶抑制劑兼容。BugBuster純化試劑盒含有純化His"Tag"和GST"Tag"融合蛋白所必需的BugBuster,Benzonase.緩沖液和樹(shù)脂。

BugBuster"HT高通量蛋白抽提試劑

BugBusterHT包括BugBuster蛋白抽提試劑和Benzonase"核酸酶。BugBusterHT根本可以解決常規(guī)細(xì)胞裂解程序?qū)е碌某Ｒ?jiàn)的生物工藝問(wèn)題，只需一步就可以從大腸桿菌中溫和抽提可溶性蛋白，而且可以防止蛋白暴露于熱和氧化性環(huán)境所遭到的破壞，并可通過(guò)核酸消化降低粗提物粘度。制備的蛋白抽提物很容易通過(guò)常規(guī)純化技術(shù)分級(jí)。BugBusterHT特別適用于高通量蛋白純化。

BugBuster10ⅹ濃縮型蛋白抽提試劑BugBuster10ⅹ濃縮型是BugBuster蛋白抽提試劑系列專(zhuān)利產(chǎn)品中特有有濃縮配方，不含鹽或緩沖成分。用它替代即用型標(biāo)準(zhǔn)1ⅹBugBuster,研究者可以根據(jù)實(shí)際需要的稀釋度參加緩沖成分。BugBuster10ⅹ具有標(biāo)準(zhǔn)BugBuster的所有生物工藝優(yōu)點(diǎn)，還可以自由控制目標(biāo)蛋白最大抽提效率和活性所必需的PH，試劑濃度和緩沖添加劑。

BugBuster〔無(wú)一級(jí)氨基〕蛋白抽提試劑

BugBuster(無(wú)一級(jí)氨基)是BugBuster的一種特殊配方，用于蛋白抽提物中一級(jí)氨基干擾的情況，如蛋白固定化或交聯(lián)。BugBuster(無(wú)一級(jí)氨基)使用的PIPPS緩沖液具有與Tris-緩沖BugBuster相似的緩沖容量和PH范圍，但不與金屬離子形成復(fù)合物，使它特別適合于抽提金屬依賴(lài)性蛋白。

PopCulture試劑

PopCulture試劑是一種濃縮去污劑配方試劑，可以不需要離心收集細(xì)胞，直接參加E-coli培養(yǎng)物并高效抽提蛋白。重組蛋白在粗提物中即可分析，也可以參加親和樹(shù)脂，洗基質(zhì)—目的蛋白復(fù)合物以去除培養(yǎng)基和細(xì)胞殘片，接著從基質(zhì)上交純化的蛋白洗提下來(lái)。整個(gè)培養(yǎng)，抽提和純化步驟都可以在原來(lái)的培養(yǎng)管或多孔板里進(jìn)展。這種直接在培養(yǎng)基體系中進(jìn)展蛋白檢測(cè)和純化操作特別適合蛋白組學(xué)研究和其它高通量操作要求，它使整個(gè)過(guò)程變得省時(shí)而方便。用這種方法，用His"Bind"和GST"Bind"樹(shù)脂〔1，2〕純化培養(yǎng)物，已經(jīng)獲得了非常完整的融合蛋白。采用His"Mag"或GST"Mag"磁化瓊脂糖珠注可以實(shí)現(xiàn)全部操作在一個(gè)管里進(jìn)展，而且也不需要純化柱和離心(3).參加rLysozyme"溶液或采用pLysS宿主菌有助于提高本方法抽提蛋白的效率。也可以考慮參加Benzonase"核酸酶以降低抽提物的粘度。

PopCulture試劑以即用型Tris—緩沖試劑形式提供，室溫條件下很穩(wěn)定。

特點(diǎn)

不用從培養(yǎng)基中別離細(xì)胞

不用機(jī)械方法破壞細(xì)胞

純化前不需要對(duì)細(xì)胞粗提物進(jìn)展處理

直接從培養(yǎng)體系粗提物中親和純化目的蛋白

在一個(gè)培養(yǎng)管或孔中完成所有的細(xì)胞培養(yǎng)和純化操作

PopCulture純化試劑盒

PopCulture試劑也和His"Mag或GST"Mag瓊脂糖珠和相應(yīng)的緩沖試劑組成試劑盒一起提供，也有加上rLysozyme溶液的試劑盒，采用磁化別離，使抽提和親和純化更加方便。這些試劑盒足夠用于40ⅹ3ml培養(yǎng)物純化，依瓊脂糖珠結(jié)合能力不同，3ml培養(yǎng)物的融合蛋白產(chǎn)量達(dá)His"Tag"375ug或GST"Tag"150ug。

rLysozyme溶液

rLysozyme溶液包含高純度的，功能穩(wěn)定的重組溶菌酶，用于裂解E.coli。該酶催化細(xì)菌細(xì)胞壁中N-乙酰胞壁酰胺鍵水解。rLysozyme特殊的大腸桿菌裂解活性〔1700KU/mg〕比雞蛋白裂解酶高250倍。裂解酶的活性在生理PH條件下最高。在使用BugBuster,BugBusterHT和PopCulture溶液的同時(shí)，只需參加極少量的rLysozyme(3-5000U/g細(xì)胞糊)，即可加強(qiáng)蛋白抽提效果。不使用蛋白抽提試劑時(shí)，直接裂解E.coli也可按每1.0g細(xì)胞糊45-60KUrLysozyme到達(dá)很好的效果。該產(chǎn)品以即用型形式提供，裂解酶保存在50%甘油，50MmTris-HCL(Ph7.5),0.1NaCL,0.1MmEDTA,1MmDTT以及0.1%Triton*-100中，濃度為30KU/ul.裂解酶溶液保存條件為-20℃.單位定義：1u裂解酶是25℃時(shí)，每分鐘使1.0ml以50mMTris-HCL,Ph7.5稀釋的0.5*BugBuster重懸的〔1mg/ml〕Tuner(DE3)cells降低0.025A450單位所需的酶量。

Benzonase核酸酶

Benzonase核酸酶是來(lái)自Serratiamarcescens,經(jīng)基因工程改良的核酸內(nèi)切酶。它能降解所有形式〔包括單鏈，雙鏈，線(xiàn)性和環(huán)狀〕的DNA和RNA而沒(méi)有蛋白裂解活性，在廣泛條件范圍具有很高的特異性。它將核酸完全消化成3-5堿基長(zhǎng)度〔雜交限度以下〕的5’-單磷酸寡核苷酸，最適合從重級(jí)蛋白中去除核酸的操作，符合FDA關(guān)于核酸污染的處理規(guī)程。Benzonase迅速水解核酸的能力使該酶成為降低粘度以減少處理時(shí)間和增加蛋白產(chǎn)量的最正確選擇。該酶與BugBuster蛋白抽提試劑配合使用，可以一起參加細(xì)菌，從而消除粗提物中的核酸，降低粘度。

該酶包括兩個(gè)30KDa亞基，在PH6-10,0-42℃發(fā)揮功能，活化要求1-2MmMg2.該酶在存在離子和非離子去污劑，復(fù)原劑，PMSF〔1mM〕,EDTA(1mM)和尿素條件下也有活性?；钚员?50mM單價(jià)陽(yáng)離子，100mM磷酸根，100mM硫酸胺或"100mM鹽酸胍所抑制。Benzonase核酸酶以超純〔SDS%〕和純品〔90%〕級(jí)提供。這兩種產(chǎn)品都沒(méi)有可檢測(cè)的蛋白酶活性〔"1ⅹ106單位/毫克蛋白〕。99%純度級(jí)產(chǎn)品經(jīng)過(guò)內(nèi)毒素測(cè)試，0.25EU/1000單位。產(chǎn)品以含50%甘油的0.2um過(guò)濾溶液提供，-20℃保存。

單位定義：1單位定義為在30分鐘內(nèi)使⊿A260值降低1.0〔相當(dāng)于完全消化37ugDNA〕.

YeastBuster酵母專(zhuān)用蛋白抽提試劑

YeastBuster酵母專(zhuān)用蛋白抽提試劑用于從Saccharomycescerevisiae和Pichiapastoris酵母細(xì)胞中，快速，高效而溫和地抽提可溶活性蛋白。采用試劑處理，可以防止劇烈的機(jī)械處理造成的氧化和熱度升高對(duì)目的蛋白的破壞作用。這種Novagen的專(zhuān)利配方包括性質(zhì)溫和的去污劑，蛋白穩(wěn)定試劑，tris磷酸〔THP〕復(fù)原試劑〔THP濃縮液?jiǎn)为?dú)提供〕。這種使用方便的試劑可以防止采用玻璃珠研磨細(xì)胞，超聲波處理或壓榨法等的傳統(tǒng)機(jī)械式操作或用β-1，3-葡聚糖酶裂解酶消化。使用時(shí)，先離心收集細(xì)胞，再將細(xì)胞用YeastBuster重懸。短時(shí)孵育后，離心去掉細(xì)胞殘片，粗提物即可用于下步操作。這樣處理得到的粗提物中蛋白產(chǎn)量大，活性蛋白比例高，并且完全適合用GSTBind和Ni-NTAHisBind固定化金屬親和色譜〔IMAC〕純化方法進(jìn)展純化。該試劑以100ml和500ml兩種包裝形式提供。

特點(diǎn)

溫和，快速，高效地從酵母細(xì)胞抽提蛋白

防止了重復(fù)性差的研磨法，超聲波法或壓榨法對(duì)酵母細(xì)胞的破壞

與傳統(tǒng)方法相比，可溶蛋白產(chǎn)量大，活性高

粗提物可以直接用于Ni-NTAHisBind和GSTBind親和純化

CytoBuster蛋白抽提試劑

CytoBuster蛋白抽提試劑采用可以從哺乳動(dòng)物和昆蟲(chóng)細(xì)胞中高效抽提可溶性蛋白的去污劑專(zhuān)利配方。CytoBuster溫和的非離子成分可以別離功能活性的內(nèi)源或表達(dá)蛋白，而不需要諸如超聲處理或凍融等二級(jí)處理。CytoBuster配方獨(dú)特，可以直接用于Western雜交，免疫沉淀和激酶/磷酸酶分析。該試劑與蛋白酶抑制劑，激酶抑制劑和磷酸酶抑制劑兼容。室溫保存。

用GeneJuice轉(zhuǎn)染試劑編碼S"Tag融合蛋白的pTriE*載體轉(zhuǎn)染COS-1細(xì)胞。48h后，用CytoBuster蛋白抽提試劑處理細(xì)胞。等體積樣品經(jīng)SDS后用考馬斯亮藍(lán)染色和Westernblot.STag融合蛋白用S-蛋白AP底物和NBT/BCIPAP底物Westernblot檢測(cè)。PerfectProteinWesternMarkers同時(shí)用S-proteinAP底物檢測(cè)。

昆蟲(chóng)PopCulture試劑

昆蟲(chóng)PopCulture試劑是一種新型去污劑配方的裂解液。這種試劑專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于從培養(yǎng)的昆蟲(chóng)細(xì)胞抽提蛋白，不需要離心操作。這種改良的方法能同時(shí)獲得細(xì)胞內(nèi)的和釋放到培養(yǎng)基中的蛋白，使純化蛋白的操作更加簡(jiǎn)便，目的蛋白產(chǎn)量也有所提高。昆蟲(chóng)PopCulture試劑適合自動(dòng)化表達(dá)水平監(jiān)測(cè)，也能與Ni-NTAHisBindIMAC和GSTBind親和純化配合使用。昆蟲(chóng)PopCulture試劑純化的細(xì)胞來(lái)源可以是培養(yǎng)板中的懸浮或巾壁培養(yǎng)的昆蟲(chóng)細(xì)胞。

特點(diǎn):

不必從培養(yǎng)基中別離細(xì)胞

親和純化前，不需要對(duì)細(xì)胞抽提物進(jìn)展分級(jí)別離

同時(shí)從細(xì)胞和培養(yǎng)基中收集蛋白，蛋白產(chǎn)量更高

直接將目的蛋白從培養(yǎng)體系親和吸附到樹(shù)脂上

可以和蛋白酶抑制劑混合試劑〔cocktails〕配合使用

為高通量自動(dòng)表達(dá)水平和純化監(jiān)測(cè)設(shè)計(jì)

適合用于桿狀病毒感染培養(yǎng)細(xì)胞a.細(xì)菌中抽提可溶性蛋白

b．酵母細(xì)胞中抽提可溶性蛋白

c．哺乳動(dòng)物中抽提可溶性蛋白

d.昆蟲(chóng)細(xì)胞中抽提可溶性蛋白

e.蛋白提取液中去除核酸Benzonase核酸酶

f.溶菌酶5)融合蛋白純化融合蛋白His.BindHisMag純化試劑盒概況

His"Bind"家族產(chǎn)品品種齊全，研究者可以根據(jù)實(shí)際需要選擇到最為適宜的純化試劑盒，采用固定化金屬親和色譜〔IMAC〕一步法快速純化帶有His"Tag"序列的融合蛋白。His"Tag序列〔6，8或10連續(xù)的組氨酸殘基〕與固定化在NTA-和IDA-基質(zhì)樹(shù)脂上的二價(jià)陽(yáng)離子〔Ni2〕結(jié)合。當(dāng)未結(jié)合的蛋白被淋洗掉后，目的蛋白即可采用咪唑或PH較低的緩沖液洗脫下來(lái)。Novagen的這套通用的純化系統(tǒng)可以被用來(lái)在溫和，非變性的條件下，或6M胍鹽或尿素的條件下純化蛋白。

Novagen提供的各種His"Bind基質(zhì)可以滿(mǎn)足幾乎所有融合蛋白純化要求。具體包括：小規(guī)模纖維素基質(zhì)的柱或筒，可以同時(shí)純化多種樣品：大包裝易用型瓊脂糖基質(zhì)，進(jìn)展批量純化的重力流柱；用于最短時(shí)間快速處理多個(gè)樣品的His"Mag瓊脂糖磁珠；以及到達(dá)生產(chǎn)級(jí)高速純化要求的Superflow"和Fractogel樹(shù)脂?；|(zhì)有些預(yù)結(jié)合了Ni2,有些沒(méi)有結(jié)合；NTA和IDA構(gòu)造的都有。

BugBuster"Ni-NTAHis"Bind和His"Bind純化試劑盒

BugBuster蛋白抽提試劑是用于從E.coli高效抽提可溶性蛋白的即用型溶液，可以防止機(jī)械處理破壞細(xì)胞。

BugBuster"Ni-NTAHis"Bind純化試劑盒和BugBusterHis"Bind純化試劑盒包括BugBuster試劑和相應(yīng)的樹(shù)脂，將準(zhǔn)備可溶性細(xì)胞粗提物親和純化His"Tag融合蛋白結(jié)合起來(lái)。

PopCulture"His"Mag磁化純化試劑盒

PopCulture試劑是一種全新的去污劑緩沖液，用于不需要從E.coli培養(yǎng)體系收集細(xì)胞而直接抽提蛋白的操作。PopCultureHis"Mag純化試劑盒結(jié)合了PopCulture和His"Mag瓊脂糖磁珠，緩沖液以及rLysozyme"溶液，適合小規(guī)模培養(yǎng)物。

PopCulture"His"Mag"磁化純化試劑盒

PopCulture"His"Mag"純化試劑盒用于從E.coli純化帶有His"Tag"融合標(biāo)簽的蛋白，而有需要收獲細(xì)胞的操作。試劑盒將以PopCulture抽提培養(yǎng)體系和以His"Mag瓊脂糖磁珠親和純和結(jié)合起來(lái)。

PopCulture試劑是一種以去污劑為主要成分的濃縮試劑，可以直接參加E.coli培養(yǎng)體系，高效抽提蛋白，整個(gè)操作都不需要進(jìn)展離心；而采用His"Mag磁化瓊脂糖珠純化，使純化操作完全在一個(gè)試管中完成，不需要過(guò)柱和離心。

PopCultureHis"Mag純化試劑盒包括PopCulture試劑，His"Mag瓊脂糖磁珠，相應(yīng)的緩沖液以及rlysozyme"溶液。這個(gè)試劑盒可以用于40ⅹ3ml培養(yǎng)物，3ml培養(yǎng)物的His"Bind"融合蛋白產(chǎn)量可達(dá)375ug,實(shí)際產(chǎn)量依磁珠結(jié)合能力不同而不同。這個(gè)試劑盒與Novagen的Magnetight"磁性別離架配合使用。

特點(diǎn)

不需要從培養(yǎng)基中別離細(xì)胞

不需要機(jī)械操作破壞細(xì)胞

不需要在純化前對(duì)細(xì)胞抽提物進(jìn)展分級(jí)別離

直接將培養(yǎng)抽提物用親和純化樹(shù)脂純化目的蛋白

實(shí)現(xiàn)在單一的試管或孔中快速完成對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)體系的培養(yǎng)，抽提和純化操作

BugBuster"Ni-NTAHis"Bind"和His"Bind純化試劑盒

BugBuster"Ni-NTAHis"Bind"和His"Bind純化試劑盒分別包含Ni-NTAHis"Bind或His"Bind樹(shù)脂，His"Bind緩沖試劑盒〔僅限His"Bind試劑盒〕，Benzonase核酸酶以及BugBuster蛋白抽提試劑，可以方便地進(jìn)展可溶性細(xì)胞抽提物以及親和純化His"Tag"融合蛋白。BugBuster蛋白抽提試劑可以溫和的瓦解E.coli細(xì)胞壁并釋放出可溶性蛋白。

操作時(shí)，一般將離心收獲的細(xì)胞重懸在BugBuster中。此時(shí)，可以參加Benzonase"核酸酶以降低因染色體DNA釋放造成的抽提物過(guò)高的黏性。抽提較大的蛋白時(shí)，也可參加rLysozyme"溶液以增強(qiáng)抽提效率。短進(jìn)孵育后，離心除去不溶的細(xì)胞殘片。抽提物上清液即可用于Ni-NTAHis"Bind和His"Bind樹(shù)脂親和純化。當(dāng)目的蛋白與親和樹(shù)脂結(jié)合后，多余的BugBuster很容易用相應(yīng)的緩沖液洗掉。

采用BugBusterNi-NTAHis"Bind試劑盒，是在復(fù)原環(huán)境純化蛋白

如果考慮屢次反復(fù)使用His"Bind樹(shù)脂，可以選用BugBusterHis"Bind純化試劑盒。

His"Tag"親和樹(shù)脂和"緩沖液試劑盒

NTA和IDA化學(xué)基團(tuán)

使用His"Tag"/His"Bind"技術(shù)，可根據(jù)作為序列的組氨酸與固定化金屬離子〔通常為Ni2或Cu2〕的親和力來(lái)進(jìn)展純化。金屬螯合到固相支持物共價(jià)結(jié)合的反響性基團(tuán)上，最學(xué)用的螯合物包括氮川乙酸〔NTA〕和亞氨二乙酸〔IDA〕，它們分別具有四個(gè)和三個(gè)與金屬離子相互作用的位點(diǎn)。在天然和變性條件下，這兩種化學(xué)基團(tuán)和親和介質(zhì)以及其目標(biāo)蛋白的結(jié)合，洗滌和洗脫條件的特性不盡一樣。實(shí)際應(yīng)用中，NTA因多一個(gè)螯合位點(diǎn)，使純化過(guò)程中金屬浸出最小，并與復(fù)原三硫鍵的20Mmβ-巰基乙醇相容。緩沖液中存在其它螯合或復(fù)原成分時(shí)，由于IDA樹(shù)脂的高金屬浸出率純化結(jié)果通常不夠好。然而，IDA介質(zhì)可以循環(huán)使用幾百次而性能根本保持不變。對(duì)于不同介質(zhì)，可以通過(guò)改變條件以形成最優(yōu)化的特定的純化系統(tǒng)，從而使目的蛋白的純化效果到達(dá)最正確。最為常見(jiàn)的就是通過(guò)調(diào)整天然條件下洗滌和洗脫緩沖液的咪唑濃度，盡量減少非特異結(jié)合蛋白的共純化。HisBind和HisMag基質(zhì)選擇指南HisTag親和樹(shù)脂和緩沖液試劑盒

HisBind柱

為方便使用而設(shè)計(jì)的His"Bind柱預(yù)裝了1.25ml柱訂體積的Ni結(jié)合His"Bind樹(shù)脂。頂部和底部的玻璃絲確保上樣和走柱時(shí)緩沖液均勻流動(dòng)而干擾最小。使用BugBuster"和Benzonase"核酸酶制備的細(xì)菌裂解物進(jìn)展純化，效果更好。

HisBind和His"Bind快速純化緩沖液試劑盒

HisBind緩沖液試劑盒是一套經(jīng)過(guò)測(cè)試優(yōu)化的緩沖液，配合IDAHis"Bind樹(shù)脂一起使用，通過(guò)金屬螯合層析方便快速地一步純化蛋白。試劑盒包括的溶液可用于10根2.5ml柱的Ni結(jié)合，洗滌和洗脫。除了不包括8ⅹNi結(jié)合緩沖液〔相應(yīng)樹(shù)脂已經(jīng)預(yù)結(jié)合了Ni〕，His"Bind快速純化緩沖液試劑盒與前者成分一樣。

Ni-NTA緩沖液試劑盒

Ni-NTA緩沖液試劑盒提供了一套使用方便的緩沖液，優(yōu)化用于與Ni-NTAHis"Bind樹(shù)脂一起在天然條件下純化His"Tag融合。這些緩沖液是磷酸緩沖液，與His"Bind緩沖液試劑盒中的基于Tris的溶液不同。請(qǐng)參考相應(yīng)的操作說(shuō)明使用.

His"Tag"單克隆抗體

His"Tag"單克隆抗體是小鼠來(lái)源的單抗〔IgG1〕,與許多Novagen的表達(dá)載體或其它商品化的表達(dá)載體上的組氨酸標(biāo)簽序列發(fā)生專(zhuān)一反響。該抗體識(shí)別連續(xù)5個(gè)組氨酸殘基，與相鄰氨基酸序列無(wú)關(guān)。這個(gè)反響的親和力非常高〔K=5ⅹ10-8-1ⅹ10-9M〕,采用抗體濃度為0.1-0.2ug/ml,即可非常特異而靈敏地檢測(cè)His-Tag融合蛋白。His-Tag單抗可以與N-端，C-端和序列內(nèi)部的His-Tag序列反響。這種抗體也可以用來(lái)檢測(cè)PerfectProtein"和TrailMi*"WesternMarkers條帶，使Westernblots反響的內(nèi)參能被非常方便地顯示出來(lái)。為了使Westernblotting的背景更干凈，推薦使用溶于堿溶液的酪蛋白作為陰斷劑。

100ug包裝提供的高純度抗體足夠用于配制1000ml工作液。

His-Tag"Western和LumiBlot"試劑

His-Tag"試劑盒含有使用His-Tag單克隆抗體進(jìn)展雜交檢測(cè)的優(yōu)化組分。試劑盒包括用于稀釋和孵育的濃縮緩沖液，堿溶性酪蛋白封閉蛋白，抗小鼠IgGAP或HRP結(jié)合物和可選擇的顯色或化學(xué)熒光底物。這些試劑與His-Tag單克隆抗體一起使用，可確保在Western雜交應(yīng)用中獲得最優(yōu)的靈敏度和低背景。

His-Tag"抗體板His-Tag是抗體酶標(biāo)板固定了His-Tag單抗的ELISA的96孔板?？贵w以一種特別技術(shù)共價(jià)固定于酶標(biāo)板外表，并最大限度保持抗體的結(jié)合能力。此抗體特異性識(shí)別五個(gè)連續(xù)組氨酸序列，故能與任何His-Tag融合蛋白暴露于外的His-Tag高親和力結(jié)合〔k=5ⅹ10-8-1ⅹ10-9M〕.此產(chǎn)品具極高的結(jié)合能力，每孔結(jié)合容量大于100ngHis-Tag融合蛋白，且非特異性結(jié)合少，每孔差異小于5%，在4℃枯燥條件下保持穩(wěn)定超過(guò)兩年。His-Tag"抗體板適用于需要特異性捕獲固定His-Tag融合蛋白的多種結(jié)合檢測(cè)。

GST"Bind"和GST"Mag"純化試劑盒概況

GST"Bind"和GST"Mag"純化系統(tǒng)的原理基于谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶融合蛋白對(duì)固定化谷胱甘肽的親和力。通過(guò)一步簡(jiǎn)單層析，蛋白可快速簡(jiǎn)便地純化至接近完全均一。谷胱甘肽樹(shù)脂的純化要求GST構(gòu)造域可溶并下確折迭。溫和洗脫條件〔10mMg復(fù)原型谷胱甘肽〕防止了目標(biāo)蛋白的變性。

GSTBind樹(shù)脂利用11原子間隔臂通過(guò)二硫鍵共價(jià)交聯(lián)復(fù)原谷胱甘肽。谷胱甘肽的高度置換確保高結(jié)合載量。每毫升樹(shù)脂可生產(chǎn)5-8毫克GST融合蛋白。樹(shù)脂可重復(fù)使用幾次而不喪失載量。

GST-Mag瓊脂糖珠可用于最短操作時(shí)間骨快速純化多個(gè)樣品。小珠直徑3um,結(jié)合容量可達(dá)2mg/mlGST融合蛋白，可通過(guò)磁鐵方便地收集。結(jié)合，洗滌，洗脫步驟都可以在一個(gè)小管或一孔中進(jìn)展。

BugBuster"GST-Bind"純化試劑盒

BugBuster"GST-Bind純化試劑盒組全了GST-Bind樹(shù)脂，GST-Bind緩沖液試劑盒和BugBuster蛋白抽提拭劑，用于制備可溶性細(xì)胞抽提物和GST-Tag融合蛋白的親和純化。

PopCorlture"GST-Mag"純化試劑盒

PopCorlture"試劑是一種新穎的濃縮去污劑配方試劑，可以直接參加E.coli培養(yǎng)物中高效抽提蛋白，不需離心收集細(xì)胞。PopCorlture"GST-Mag"純化試劑盒包含Popculture試劑，GST-Mag瓊脂糖珠，相應(yīng)緩沖液和rLysozyme溶液，使小量抽提純化更加方便。

PopCorlture"GST-Mag"純化試劑盒可以直接從大腸桿菌培養(yǎng)菌液中親和純化GST-Tag融合蛋白，不需收獲細(xì)胞。本試劑盒采用PopCulture直接抽提菌液，GST-Mag瓊脂糖珠進(jìn)展磁性親和純化。

PopCorlture"試劑是一種新穎的濃縮去污劑配方試劑，可以直接參加E.coli培養(yǎng)物中高效抽提蛋白，不需離心收集細(xì)胞。使用GST-Mag瓊脂糖珠，使整個(gè)步驟可在一個(gè)離心管中操作，不需離心和過(guò)柱步驟。

PopCorlture"GST-Mag"純化試劑盒包含Popculture試劑，GST-Mag瓊脂糖珠，相應(yīng)緩沖液和rLysozyme溶液，這些試劑盒足夠用于40ⅹ3ml培養(yǎng)物純化，依瓊脂糖珠結(jié)合能力不同，每3ml培養(yǎng)物融合蛋白產(chǎn)量可達(dá)150ug,試劑盒與Novagen和Magnetight"別離架配合使用。

特點(diǎn)不需離心別離菌體

不需機(jī)械破碎細(xì)胞

純化前不需離心別離細(xì)胞抽提物

總抽提物中的目的蛋白直接與樹(shù)脂親和結(jié)合從而獲得純化

可在單一的管或孔中完成細(xì)胞培養(yǎng)和蛋白純化

BugBustser"GST-Bind"純化試劑盒

BugBustser"GST-Bind"純化試劑盒包含GST-Bind樹(shù)脂，GST-Bind緩沖液試劑盒以及BugBuster蛋白抽提試劑，可方便快捷的制備可溶性細(xì)胞抽提物，并通過(guò)親和純化得到GST融合蛋白。BugBuster蛋白抽提試劑用于溫和破碎大腸桿菌細(xì)胞壁，釋放中溶蛋白。細(xì)胞按通常方法離心收集，重懸于BugBuster蛋白抽提試劑中，經(jīng)簡(jiǎn)單孵育，可溶蛋白即可釋放。抽提物經(jīng)離心除去細(xì)胞碎片和包涵體。澄清的上清局部可直接用GST-Bind樹(shù)脂純化。

GST"Tag"親和純化樹(shù)脂和緩沖液試劑盒

GST-Bind"和GST-Mag"純化系統(tǒng)是基于谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶融合蛋白對(duì)固定化谷胱甘肽的親和力。通過(guò)一步簡(jiǎn)單層析，蛋白可快速簡(jiǎn)便地純化至接近完全均一。谷胱甘肽樹(shù)脂的純化要求GST構(gòu)造域可溶并正確折迭。溫和洗脫條件〔10mM復(fù)原型谷胱甘肽〕防止了目標(biāo)蛋白的變性。

GST-Bind樹(shù)脂

GST-Bind樹(shù)脂利用11原子間隔臂通過(guò)二硫鍵共價(jià)交聯(lián)復(fù)原谷胱甘肽。谷胱甘肽的高度置換確保高結(jié)合載量。每毫升樹(shù)脂可制備5-8毫克GST融合蛋白。樹(shù)脂可重復(fù)使用幾次而不喪失載量。

GST-Mag瓊脂糖珠

GST-Mag瓊脂糖珠可用于最短操作時(shí)間內(nèi)快速純化多個(gè)樣品。小珠直徑3um，結(jié)合容量可達(dá)2mg/mlGST融合蛋白，可通過(guò)磁鐵方便地收集。結(jié)合，洗滌，洗脫步驟都可以在一個(gè)小管或一孔中進(jìn)展。

GST-Bind緩沖液試劑盒

GST-Bind緩沖液試劑盒包含一套經(jīng)過(guò)測(cè)試的緩沖液，涵蓋了GST-Tag融合蛋白通過(guò)GST-Bind樹(shù)脂或GST-Mag瓊脂糖珠純化各步驟一結(jié)合，洗滌，洗脫所需的緩沖液。所含組分足夠10次2.5mlGST-Bind柱純化過(guò)程。

GST.Tag"檢測(cè)試劑盒

GST.Tag"檢測(cè)試劑盒專(zhuān)為比色法定量檢測(cè)GST或GST融合蛋白設(shè)計(jì)。此試劑盒可用于初提物或純化樣品中GST活性的定量檢測(cè)。由于試劑盒適用于初提物，可以迅速通過(guò)比擬GST活力水平優(yōu)化表達(dá)條件。此試劑盒提供的反響緩沖液中結(jié)合，測(cè)試340nm的吸光度值，A340的變化速率與樣本中的GST活力成比例。檢測(cè)靈敏度可達(dá)8pmol,相當(dāng)于大約250ng未融合的GST.

GST.Tag"單克隆抗體

GST.Tag"單克隆抗體是小鼠單克隆抗體〔IgG1〕,對(duì)26KDa的GST構(gòu)造域〔SchistosomaJaponicum〕具高親和性。該高純度抗體，可用于檢測(cè)由Pet-41,Pet-42,或其它GST編碼載體表達(dá)的GST.Tag融合蛋白。

50ug包裝提供的純化抗體足夠用于50次Westernblot(10cmⅹ10cm).

Magnetight"HT96"別離架

Magnetight"HT96"高通量別離架專(zhuān)為96孔板進(jìn)展高通量磁性別離的應(yīng)用而設(shè)計(jì)。別離架具有24個(gè)極強(qiáng)永磁且?guī)缀鯚o(wú)地磁的磁棒，每根磁棒吸引鄰近四個(gè)孔中的磁珠，使其巾于孔壁上，可方便的除去緩沖液，在洗滌和洗脫步驟中，96孔板可以很方便的與磁棒別離，脫離磁場(chǎng)利于磁珠重懸。此別離架可與RoboPop"His-Mag"以及GST-Mag"純化試劑盒聯(lián)用。

Magnetight"別離架和多管支架

多功用的Magnetight"別離架可用1.5ml,15ml和50ml離心管進(jìn)展有效磁性別離。架子使用尼龍多聚物外殼保護(hù)的極強(qiáng)永磁且?guī)缀鯖](méi)有地磁，孔型使離心管壁可與磁鐵最嚴(yán)密靠近，能夠在最小時(shí)間內(nèi)進(jìn)展有效別離。由于緊湊設(shè)計(jì)，架子和插入管可容易地握于一手，而另一手用于從磁化沉淀中吸下上清液。架子有四個(gè)1.5ml管位以及15ml和50ml管位各一個(gè)。

Magnetight多管支架用于多個(gè)1.5ml離心管。支架上有10個(gè)位置可移動(dòng)的磁鐵固定器，可有效別離Magnetight或MagPrep"顆粒和珠子。支架可容納30個(gè)離心管，以及易于操作的方便間隔。

VacuumManifold真空別離裝置

Novagen的多關(guān)抽真空裝置包括透明的強(qiáng)化玻璃真空腔，化學(xué)穩(wěn)定性聚丙烯蓋子，以及系列方便樣品處理的附件?？梢苑奖愕赝瑫r(shí)處理多達(dá)12個(gè)樣品。上樣，洗滌和洗脫步驟可快速完成，架子的獨(dú)特設(shè)計(jì)確保所有組分可分別收集在不同試管中。各組分可以收集于1.5ml2.0ml,15ml離心管。安裝大的儲(chǔ)存器可使玻璃腔容納1升液體。

此抽真空裝置可用于從兼容的任何介質(zhì)或柱子中抽樣品，安裝于玻璃真空腔的可調(diào)式架子可與多種樣品收集管兼容。尤其適合與Novagen的His-Bind"快速純化筒聯(lián)用。

外接真空源控制抽真空的程度〔配合壓力釋放閥門(mén)〕：針對(duì)每個(gè)流路的單獨(dú)活塞設(shè)計(jì)使得單獨(dú)控制*個(gè)純化柱成為可能。強(qiáng)化玻璃腔和聚丙烯蓋子經(jīng)鑒定可承受高達(dá)20英寸汞柱的壓力。

系統(tǒng)還包括：真空腔，量表和閥門(mén)組合，蓋子及墊圈，12個(gè)聚四氟乙烯注射針，收集架，12個(gè)尼龍/聚丙烯活塞，儲(chǔ)水襯墊。His-Tag融合蛋白

His-Bind純化試劑盒

His-Mag純化試劑盒

His-Tag單抗

b.Gst-Tag融合蛋白

Gst-Bind純化試劑盒

Gst-Mag純化試劑盒

Gst-Tag單抗

c.融合標(biāo)簽蛋白的去除限制級(jí)凝血酶和生物素化凝血酶

限制級(jí)凝血酶

限制級(jí)凝血酶特異性切割帶有識(shí)別位點(diǎn)〔LerValProArgGlySer〕的目標(biāo)蛋白。產(chǎn)品經(jīng)過(guò)對(duì)融合蛋白切割活性的功能性測(cè)試，不含任何雜蛋白酶。凝血酶與10ⅹ凝血酶切割緩沖液和對(duì)照蛋白一起提供。

單位定義：一單位定義為20℃200ul反響體系中〔20MmTris-HCLPh8.4150MmNaCl2.5MmCaCL250ug融合蛋白和酶〕16小時(shí)切割1mg融合蛋白所需要的酶量。

生物素化凝血酶

生物素化凝血酶與限制級(jí)凝血酶相似，但共價(jià)結(jié)合了生物素，可在酶切反響完畢后，通過(guò)固定化鏈親和至少方便地致病除蛋白酶。生物至少化凝血酶的使用方法與未修飾凝血酶一樣，與鏈親和素瓊脂糖的結(jié)合率大于99%。

凝血酶切割/去除試劑盒

該試劑盒包括進(jìn)展凝血酶酶切以及用于酶切完成后以親和結(jié)合方式即將除生物素化凝血酶的試劑。試劑盒中的對(duì)照蛋白，用于實(shí)驗(yàn)樣品平行的對(duì)照消化，或測(cè)試特定條件下的切割效果。對(duì)照蛋白被切割成兩個(gè)片段，可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)SDS和考以斯亮藍(lán)染色檢測(cè)。對(duì)照蛋白也可單獨(dú)購(gòu)置，用于監(jiān)測(cè)凝血酶或腸激酶的性能。48KDa對(duì)照蛋白被切割成35和13KDa的兩個(gè)片段，通過(guò)SDS可容易地看到。

限制級(jí)*a因子

限制級(jí)*a因子是從牛血漿別離并經(jīng)過(guò)Russell蝰蛇蛇毒活化的高純度蛋白酶。產(chǎn)品中沒(méi)有任何雜蛋白酶，因此不會(huì)產(chǎn)生二級(jí)切割。該限制級(jí)的蛋白酶的質(zhì)量經(jīng)過(guò)對(duì)融合蛋白的活性功能性檢測(cè)。*a因子的切割識(shí)別位點(diǎn)是〔LLeGluGlyArg〕的羧基末端，因此可以從相應(yīng)的重組蛋白中去除所有載體編碼的序列。

單位定義：一單位限制級(jí)*a因子在21℃和50mMTris-HCL(Ph8.0)100MmNaCL5MmCaCL2緩沖液條件下，16小時(shí)切割95%以上的50ug*a對(duì)照蛋白。

*a因子切割/去除試劑盒

*a因子切割/去除包括用于高特異性酶切的*a因子，以及用于酶切完成后以親和結(jié)合方式去除*a因子的試劑。目標(biāo)蛋白經(jīng)酶切后，通過(guò)*arrest"瓊脂糖親和結(jié)合可從反響體系中去除99%以上的*a因子，并可通過(guò)離心過(guò)濾去除瓊脂糖。由于酶切和親和結(jié)合使用一樣緩沖條件，因此操作中不需要變換緩沖液。試劑盒中還包括對(duì)照蛋白，用于實(shí)驗(yàn)樣品平行的對(duì)照消化，或測(cè)試特定條件下的切割效果。49KDa的*a對(duì)照蛋白被切割成32和17KDa的兩個(gè)片段，可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)SDS和考馬斯亮藍(lán)染色檢測(cè)。對(duì)照蛋白同時(shí)具有氨基末端S"Tag"序列，可用Western雜交準(zhǔn)確檢測(cè)17KDa蛋白裂解產(chǎn)物。

重組腸激酶〔rEK〕為牛腸激酶催化亞基的高純度制品，識(shí)別的切割位點(diǎn)與天然酶一樣〔AspAspAspAspLys〕,活性也與天然酶相似，但Rek切割速率較快。與一些天然牛腸激酶制品不同，Novagen的Rek純化到幾乎完全均一，不會(huì)發(fā)生任何雜蛋白酶引起的二級(jí)切割。

單位定義：一單位定義為23℃和20MmTris-HCL(Ph7.4)50MmNaCL2.5MmCaCL2緩沖液中，16小時(shí)切割50ug融合蛋白所需要的酶量。

腸激酶切割/去除試劑盒

腸激酶切割去除試劑盒用于高特異性切割融合蛋白，隨后快速親和捕獲和去除腸激酶。

目標(biāo)蛋白切割后，通過(guò)Ekapture"瓊脂糖親和捕獲從反響中去除99%以上的Rek.捕獲rEK后，通過(guò)離心過(guò)濾去除Ekapture瓊脂糖。由于切割和捕獲使用一樣緩沖條件，因此不需要更換緩沖液。

試劑盒還包括對(duì)照蛋白，用于實(shí)驗(yàn)樣品平行的對(duì)照消化，或測(cè)試用戶(hù)緩沖條件下的切割效果。48KDa對(duì)照蛋白被切割成32和16KDa兩個(gè)片段，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)SDS和考以斯亮藍(lán)染色可容易地看到。對(duì)照蛋白還具有氨基末端S"Tag"序列，可用Western雜交試劑靈敏檢測(cè)16KDa蛋白裂解產(chǎn)物。

凝血酶

*a因子

腸激酶

d蛋白酶抑制劑：蛋白酶抑制劑混合物系列Ⅰ〔含EDTA〕

蛋白酶抑制劑混合物系列Ⅰ為五種蛋白酶抑制的混合物，廣泛抑制多種不同蛋白酶及酯酶的活力。以====凍干粉形式提供，并有10瓶及1瓶包裝。每瓶以1ml水重溶，制成1ml100ⅹ儲(chǔ)液。

重溶后的每瓶蛋白酶抑制劑混合物系列Ⅰ包含：50MmAEBSF-HCL15MmAprotinin0.1MmE-64,50MmEDTA以及0.1MmLeupeptinHemisulfate.請(qǐng)注意細(xì)胞抽提物直接參加IDA或Ni-NTA樹(shù)脂中進(jìn)展His"Tag"融合蛋白的純化時(shí)，EDTA的存在可能干擾其純化。在這種情況下，我們推薦使用蛋白酶抑制劑混合物系列Ⅲ。

蛋白酶抑制劑混合物系列Ⅱ〔含EDTA〕

蛋白酶抑制劑混合物系列Ⅱ?yàn)閮龈煞坌问教峁┑奈宸N蛋白酶抑制劑的混合物，可廣泛抑制精氨酸，半胱氨酸，絲氨酸，金屬蛋白酶和氨肽酶活力。推薦用于細(xì)菌細(xì)胞抽提物〔除了用于金屬鰲合層析的情況〕。每管混合物加1mlDMSO和4ml水配制成5ml的貯存液，假設(shè)出現(xiàn)輕微渾濁為正常情況。重溶后每管含：20MmAEBSF-HCL,1.7MmBestatin,200UmE-64,85MmEDTA,2MmPepstatinA.

提供一管五種蛋白酶抑制劑混合物的凍干粉和一管DMSO〔1ml〕.抽提20g大腸桿菌菌體建議參加5ml儲(chǔ)液。

蛋白酶抑制劑混合物系列Ⅲ〔不含EDTA〕

溶于1mlDMSO的蛋白酶抑制劑混合物，包含六種蛋白抑制劑，可廣泛抑制精氨酸，半膠氨酸，絲氨酸蛋白酶和氨肽酶活力。適用于采取金屬離子鰲合層析進(jìn)展純化的細(xì)菌抽提物，哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織抽提物。每1ml含有100MmAEBSF-HCL,80UmAprotinin,5MmBestatin,1.5MmE-64,2MmLeupeptin,2MmPepstatinA.不含金屬離子鰲合劑。抽提20g牛肝組織或大腸桿菌菌體建議參加1ml.

蛋白酶抑制劑混合物系列Ⅳ〔不含EDTA〕

溶于DMSO的蛋白酶抑制劑混合物，包含四種蛋白酶抑制，可廣泛抑制精氨酸，半胱氨酸，絲氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶活力。適用于真菌和酵母細(xì)胞抽提物。每1ml含有100MmAEBSF-HCL,1.5MmE-64,2MmPepstatinA,500Mm110-Phenanthroline.

蛋白酶抑制劑混合物系列Ⅴ無(wú)EDTA

含抑制絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶的中種抑制劑，不抑制金屬蛋白酶。以1ml水重溶，獲得1ml100*儲(chǔ)液。1ⅹ儲(chǔ)液包括500UmAEBSF-HCL,150MmAprotinin,1UmLeupeptinHemisulfate.注意：此產(chǎn)品吸濕。

e蛋白MarkerPerfectProtein"Western雜交試劑盒和分子量標(biāo)準(zhǔn)

PerfectProtein"Western分子量標(biāo)準(zhǔn)由7條含His"Tag/S"Tag融合標(biāo)簽的重組蛋白組成，用于在任何Wwstern雜交中使用偶聯(lián)AP或HRPHis"Tag單抗/S蛋白AP或HRP結(jié)合物，方便地看到PerfectProtein分子量標(biāo)準(zhǔn)。此分子量標(biāo)準(zhǔn)可與目的蛋白同時(shí)顯示于印跡雜交上，無(wú)糖基化，分子量準(zhǔn)確。Perfectprotein"Western雜交試劑盒除分子理標(biāo)準(zhǔn)外，還包含S-蛋白AP或HRP結(jié)合物。

特點(diǎn)

只要簡(jiǎn)單地將S-蛋白AP或S-蛋白HRP結(jié)合物加到樣品檢測(cè)的同一孵育液中

S-蛋白結(jié)合物〔試劑盒中提供〕不影響抗體或鏈親和素檢測(cè)

可使用AP或HRP底物進(jìn)展比色法或化學(xué)發(fā)光檢測(cè)

分子量標(biāo)準(zhǔn)皆為重組的，未修飾蛋白，提供清晰，大小準(zhǔn)確的條帶

分子量標(biāo)準(zhǔn)以工作濃度，電泳上樣緩沖液形式提供，可直接上樣；其濃度經(jīng)優(yōu)化，適于Wwstern檢測(cè)

各條帶蛋白大小為15，25，35，50，75，100和150KDa

TrailMi*"Western雜交試劑盒和分子量標(biāo)準(zhǔn)

TrailMi*"Wwstern蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)包含PerfectProtein"Western分子量標(biāo)準(zhǔn)和三