檢驗(yàn)分析方法的驗(yàn)證和確認(rèn)

關(guān)于檢驗(yàn)分析方法的驗(yàn)證和確認(rèn)第一頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一可靠的檢驗(yàn)結(jié)果方法驗(yàn)證儀器校準(zhǔn)培訓(xùn)第二頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一3內(nèi)容：

一、法規(guī)要求

二、分析方法驗(yàn)證

三、分析方法確認(rèn)四、分析方法驗(yàn)證和確認(rèn)總結(jié)第三頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一4

1、法規(guī)要求：新版GMP（2010年修訂）

第二百二十三條物料和不同生產(chǎn)階段產(chǎn)品的檢驗(yàn)應(yīng)當(dāng)至少符合以下要求：（一）企業(yè)應(yīng)當(dāng)確保藥品按照注冊(cè)批準(zhǔn)的方法進(jìn)行全項(xiàng)檢驗(yàn)；（二）符合下列情形之一的，應(yīng)當(dāng)對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證：

1.采用新的檢驗(yàn)方法；

2.檢驗(yàn)方法需變更的；

3.采用《中華人民共和國(guó)藥典》及其他法定標(biāo)準(zhǔn)未收載的檢驗(yàn)方法；

4.法規(guī)規(guī)定的其他需要驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法。（三）對(duì)不需要進(jìn)行驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法，企業(yè)應(yīng)當(dāng)對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行確認(rèn)，以確保檢驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠；第四頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一5

1、法規(guī)要求：中國(guó)藥典（2010年版）凡例

檢驗(yàn)方法和限度二十三、本版藥典正文收載的所有品種，均應(yīng)按規(guī)定的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。如采用其他方法，應(yīng)將該方法與規(guī)定的方法做比較試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果掌握使用，但在仲裁時(shí)仍以本版藥典規(guī)定的方法為準(zhǔn)。第五頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一6

1、法規(guī)要求：中國(guó)藥典（2010年版）凡例

檢驗(yàn)方法和限度二十三、本版藥典正文收載的所有品種，均應(yīng)按規(guī)定的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。如采用其他方法，應(yīng)將該方法與規(guī)定的方法做比較試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果掌握使用，但在仲裁時(shí)仍以本版藥典規(guī)定的方法為準(zhǔn)。第六頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

1、法規(guī)要求：

分析方法確認(rèn)或驗(yàn)證相關(guān)指南機(jī)構(gòu)或組織文件名稱美國(guó)藥典（USP）<1225>Validationofcompendialprocedures方法驗(yàn)證<1226>Verificationofcompendialprocedures方法確認(rèn)人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)（ICH）Q2（R1）ValidationofAnalyt8icalProceduresQ2（R1）分析方法驗(yàn)證《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄“中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則”二部附錄“藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則”。第七頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一8內(nèi)容：

一、法規(guī)要求

二、分析方法驗(yàn)證

三、分析方法確認(rèn)四、分析方法驗(yàn)證和確認(rèn)總結(jié)第八頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一9二、分析方法驗(yàn)證1、分析方法驗(yàn)證的定義2、分析方法驗(yàn)證的目的3、分析方法驗(yàn)證范圍4、分析方法驗(yàn)證的時(shí)機(jī)5、需驗(yàn)證的分析方法類型6、分析方法驗(yàn)證的具體內(nèi)容7、驗(yàn)證檢測(cè)項(xiàng)目小結(jié)8）分析方法驗(yàn)證的方式和步驟9）分析方法驗(yàn)證常見問(wèn)題

第九頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一10

二、分析方法驗(yàn)證

1、分析方法驗(yàn)證的定義：是根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的要求，預(yù)先設(shè)置一定的驗(yàn)證內(nèi)容，并通過(guò)設(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證所采用的分析方法能否符合檢測(cè)項(xiàng)目的要求。2、分析方法驗(yàn)證的目的：1）證明采用的分析方法是科學(xué)、合理，2）證明分析方法能有效控制藥品的內(nèi)在質(zhì)量。

?驗(yàn)證過(guò)程和結(jié)果均應(yīng)記載在標(biāo)準(zhǔn)起草或修訂說(shuō)明中。第十頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一二、分析方法驗(yàn)證3、分析方法驗(yàn)證范圍適用范圍化學(xué)藥品的理化分析方法和儀器分析方法的驗(yàn)證與確認(rèn)清潔驗(yàn)證方法的驗(yàn)證不適用化學(xué)藥品的微生物方法生物制品分析方法驗(yàn)證第十一頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一4、分析方法驗(yàn)證的時(shí)機(jī)1）建立新的藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；2）藥品生產(chǎn)工藝變更；3）制劑的組分變更；4）對(duì)原分析方法進(jìn)行修訂時(shí)。

方法驗(yàn)證理由、過(guò)程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品標(biāo)準(zhǔn)起草說(shuō)明或修訂說(shuō)明中。二、分析方法驗(yàn)證第十二頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一二、分析方法驗(yàn)證5、需驗(yàn)證的分析方法類型1）鑒別試驗(yàn)2）雜質(zhì)定量或限度檢查（儀器或非儀器檢測(cè)方法），3）原料藥或制劑中活性成分以及制劑中選定組分（如防腐劑等）的定量測(cè)定含量測(cè)定4）化學(xué)藥品/中藥制劑中其他需控制成分(如殘留物、添加劑等）的測(cè)定5）制劑溶出度、釋放度等檢查6）原料藥粒度檢測(cè)---第十三頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一1）專屬性2）線性3）范圍4）準(zhǔn)確性5）精密度6）檢測(cè)限7）定量限8）耐用性9）系統(tǒng)適用性

6、分析方法驗(yàn)證的具體內(nèi)容根據(jù)檢測(cè)的類型采用的技術(shù)檢測(cè)方法確定具體方法擬訂驗(yàn)證的內(nèi)容二、分析方法驗(yàn)證第十四頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一1）專屬性

鑒別、雜質(zhì)和含量測(cè)定的方法學(xué)驗(yàn)證中應(yīng)進(jìn)行專屬性研究，證明專屬性所采用的方法取決于分析方法的預(yù)定檢測(cè)對(duì)象。

一種分析方法不太可能對(duì)某一特定的被分析物具有專屬性(完全辨別)，在此情況下，建議采用兩種或兩種以上的分析方法以達(dá)到所需的辨別水平。第十五頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

1）專屬性鑒別

合適的鑒別實(shí)驗(yàn)應(yīng)能區(qū)別出可能存在結(jié)構(gòu)相似的化合物?？梢酝ㄟ^(guò)與已知參比物比較，從含有被分析物的樣品中得到的正結(jié)果和不含被分析物的樣品中得到的負(fù)結(jié)果來(lái)確定。此外，也可以采用與被測(cè)物結(jié)構(gòu)相似或相關(guān)的物質(zhì)進(jìn)行鑒別實(shí)驗(yàn)。對(duì)于這些可能會(huì)有潛在干擾的物質(zhì)的選擇應(yīng)當(dāng)基于對(duì)這些干擾的物質(zhì)做出合理的科學(xué)評(píng)判。第十六頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

1）專屬性

含量測(cè)定和雜質(zhì)檢測(cè)

對(duì)于色譜方法來(lái)說(shuō)，應(yīng)當(dāng)用具有代表性的色譜圖來(lái)證明專屬性，并在圖上適當(dāng)?shù)貥?biāo)出每一種成分，其他分離技術(shù)也應(yīng)當(dāng)有相似的考慮。應(yīng)當(dāng)在適合的程度上研究關(guān)鍵的色譜分離度。對(duì)于關(guān)鍵的分離度，能夠通過(guò)兩個(gè)洗脫最靠近的化合物之間的分辨率來(lái)證明方法的專屬性。

當(dāng)用非專屬性方法做含量測(cè)定時(shí)，應(yīng)當(dāng)采用其他輔助性的分析方法來(lái)證明整體的專屬性，例如：當(dāng)為了放行而采用滴定法測(cè)定原料藥含量時(shí)，可以合并采用這種含量測(cè)定方法以及一種適當(dāng)?shù)碾s質(zhì)檢查方法。

第十七頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

1）專屬性常用的試驗(yàn)方法:

空白陰性對(duì)照試驗(yàn)比較同一分析系統(tǒng)對(duì)照品與供試品相應(yīng)色譜峰的吸收光譜色譜-質(zhì)譜聯(lián)用驗(yàn)證待測(cè)成分第十八頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一2）線性

線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與供試品中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。試驗(yàn)方法制備至少包含5個(gè)濃度（梯度濃度）的對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣測(cè)定以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性最小二乘法進(jìn)行線性回歸

數(shù)據(jù)要求：

應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖第十九頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一3）范圍

范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。

確認(rèn)方法是通過(guò)把含有被測(cè)物的樣品在范圍的兩個(gè)極端和范圍內(nèi)進(jìn)行測(cè)試，考察是否可達(dá)到精密度、準(zhǔn)確度的線性的要求。

第二十頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

3）范圍實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目限度范圍含量測(cè)定標(biāo)示量90-110%測(cè)試濃度80-120%雜質(zhì)檢查限度值限度值的50-120%溶出度限度值限度值的±20%釋放度1小時(shí)后20%，24小時(shí)后達(dá)到90%，

應(yīng)為標(biāo)示量的0-110%。含量均勻度測(cè)試濃度測(cè)試濃度的70-130%第二十一頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

3）范圍（中藥和復(fù)方制劑）含量限度有上下限的，一般設(shè)定范圍低限為含量限度下限的50～70％，范圍的高限為含量限度上限的130～150％。含量限度僅有低限的，一般設(shè)定范圍為含量限度的50％～70％至含量限度的2～5倍以上。以標(biāo)示量規(guī)定含量限度的，可參照化學(xué)藥，一般設(shè)定范圍為標(biāo)示量的80％～120％。

第二十二頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一中藥含量限度的確定

含量限度應(yīng)根據(jù)中藥制劑實(shí)測(cè)結(jié)果與原料藥材的含量情況確定。盡可能多的測(cè)定數(shù)據(jù)才有足夠的代表性，至少應(yīng)有10批以上樣品與原料藥材數(shù)據(jù)為依據(jù)，一般原粉入藥的轉(zhuǎn)移率要求在90%以上。

有毒成分及中西藥復(fù)方制劑中化學(xué)藥品的含量應(yīng)規(guī)定上下限，上下限幅度應(yīng)根據(jù)測(cè)試方法、品種情況、轉(zhuǎn)移率及理論值確定，一般應(yīng)在±5%～±20%之間，并在安全有效范圍內(nèi)，制定上下限應(yīng)有充分依據(jù)。第二十三頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一4）準(zhǔn)確度

系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般用回收率(%)表示。

a.以經(jīng)典方法的測(cè)定值作為真值，建立方法的測(cè)定數(shù)據(jù)與之比較（該法適用于化學(xué)藥品）b.以加入對(duì)照品測(cè)定的回收率表示，一般有空白回收（制劑空白）和加樣回收測(cè)定的方法（中藥材、復(fù)方制劑等）

第二十四頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

4）準(zhǔn)確度

回收試驗(yàn)：

加樣回收試驗(yàn)：

第二十五頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一4）準(zhǔn)確度—原料藥用已知純度的被分析物(如參比物質(zhì))進(jìn)行測(cè)定用提出的分析方法的檢測(cè)結(jié)果與第二種成熟的分析方法的檢測(cè)結(jié)果做比較，而后者的準(zhǔn)確性是有規(guī)定的和(或)經(jīng)確定的。準(zhǔn)確性可以在精密度、線性和專屬性建立后，推論而得.第二十六頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一4）準(zhǔn)確度

—制劑用該分析方法測(cè)定藥物制劑成分與添加的已知量被分析原料藥的混合物?如在不能獲得制劑所有成分的樣品時(shí)，可以將已知量的被分析物加入到制劑中，或者將測(cè)得的結(jié)果與另一種已鑒定分析方法的分析結(jié)果進(jìn)行比較，而后者的準(zhǔn)確性是有規(guī)定的和（或)經(jīng)確定的。在精密度、線性和專屬性建立后，可以推斷準(zhǔn)確性。第二十七頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一4）準(zhǔn)確度-雜質(zhì)的定量測(cè)定應(yīng)當(dāng)通過(guò)用已知量雜質(zhì)加強(qiáng)樣品(原料藥／制劑)檢測(cè)信號(hào)的方式來(lái)評(píng)價(jià)準(zhǔn)確性。

在不能獲得特定雜質(zhì)和（或）降解產(chǎn)物樣品的情況下，可以考慮與另一種成熟的方法所測(cè)得的結(jié)果做比較?？梢允褂迷纤幍捻憫?yīng)因子。如藥典方法或經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的方法。

應(yīng)當(dāng)明確如何確定每個(gè)單一雜質(zhì)或總雜質(zhì)：如：所有成分相對(duì)于主摹被分析物的重量／重量首分比或峰面積百分比。第二十八頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

某成分含量測(cè)定－回收率1編號(hào)樣品含量(mg)加入對(duì)照品的量(mg)測(cè)得總量回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)18819301853104.5297.223.712877178597.633875176495.594884176794.955883177395.76878176194.95第二十九頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一某成分－回收率2編號(hào)樣品含量(mg)加入對(duì)照品的量(mg)測(cè)得總量回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)18819301853104.52

2877178597.6399.25

4.71

3875176495.597881

465134198.92

8882134098.4997.71.799883132895.7

10885

1395224097.13

11884225498.2197.510.6212881223797.2

進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果平均回收率為98.15，RSD=2.65%。第三十頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一某成分含量測(cè)定－回收率3編號(hào)樣品含量(mg)加入對(duì)照品的量(mg)測(cè)得總量回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)1881

1853104.52

2877930

178597.6399.25

4.71

3875176495.5913228

45396.98

1422823245396.9897.991.7815229

461100

161322

265695.63

1713211395264094.5595.030.58181319

264394.91

進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果平均回收率為97.42，RSD=3.13%。第三十一頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一5）精密度

精密度系指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。重復(fù)性

中間精密度

重現(xiàn)性

第三十二頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一5）精密度--驗(yàn)證方法名稱定義驗(yàn)證方法重復(fù)性在相同條件下，由一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性。在規(guī)定的線性范圍內(nèi)至少測(cè)定9次(例如3種濃度／每種濃度3次)，或在100％的實(shí)驗(yàn)濃度下，至少測(cè)定6次。中間精密度在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員,用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果之間的精密度，稱為中間精密度。應(yīng)根據(jù)方法使用的環(huán)境而定，確定隨機(jī)事件對(duì)分析方法精密度的影響。變動(dòng)因素為：不同日期不同分析人員不同設(shè)備重現(xiàn)性在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測(cè)定結(jié)果之間的精密度

通過(guò)實(shí)驗(yàn)室之間的檢測(cè)來(lái)評(píng)價(jià)；如果方法需要標(biāo)準(zhǔn)化如收載到藥典中的方法，則應(yīng)考慮重現(xiàn)性。這些資料不是申請(qǐng)上市文檔的三部分。協(xié)作標(biāo)定能力驗(yàn)證藥品標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)復(fù)核第三十三頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

6）檢出限（LimitofDetection，LOD)

檢測(cè)限系指供試品中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量。

a.非儀器分析目視法通過(guò)對(duì)一系列含有已知濃度分析物的樣品進(jìn)行分析，以確定能夠被可靠測(cè)定的分析物的最低濃度。b.儀器法（信噪比法）該方法僅適用于出現(xiàn)基線噪音的分析方法。信噪比的確定是通過(guò)比較含已知低濃度被分析物樣品與空白樣品的測(cè)試信號(hào)，確定被分析物可以靠被檢測(cè)到的最小濃度。通常信噪比為3：1或2：1時(shí)，檢測(cè)限可以被接受。

第三十四頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

6）檢出限（LimitofDetection，LOD)

檢測(cè)限系指供試品中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量。

c.響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差和斜率檢測(cè)限(DL)可以表達(dá)為：DL=3.3σ/S式中，σ為響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差；S為校正曲線的斜率。斜率s可從被分析物的校正曲線來(lái)估算，而σ值可由多種途徑估算。例如：基于空白的標(biāo)準(zhǔn)差基于校正曲線第三十五頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一6）檢出限（LimitofDetection，LOD)數(shù)據(jù)要求應(yīng)當(dāng)提供檢測(cè)限和測(cè)定檢測(cè)限的方法如果方法采用目測(cè)法和信噪比法，應(yīng)提供測(cè)試圖譜如果通過(guò)計(jì)算或外推法得到檢測(cè)限的估算值，可對(duì)一系列或等于檢測(cè)限樣品的獨(dú)立分析來(lái)驗(yàn)證這一估算值。第三十六頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一7）定量限（LimitofQuantitative,LOQ）定義：定量限系指供試品中被測(cè)成分能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測(cè)定方法研究時(shí)，應(yīng)確定定量限。試驗(yàn)方法：目測(cè)法：信噪比法：以信噪比10:1時(shí)的濃度(或量)進(jìn)樣測(cè)定,重復(fù)測(cè)定的響應(yīng)值應(yīng)滿足精密度要求?；陧憫?yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差和斜率第三十七頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一8）耐用性定義：耐用性系指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度。耐用性進(jìn)行評(píng)估應(yīng)當(dāng)在研制階段就加以考慮，它取決于所研究的分析方法類型。應(yīng)表明在對(duì)方法參數(shù)進(jìn)行有意改變后，分析方法依然可靠如果測(cè)定的結(jié)果表明該方法對(duì)分析條件的變化是敏感的，那么這些分析條件就應(yīng)適當(dāng)?shù)丶右钥刂苹蛟诜椒ㄖ蓄A(yù)先提出告誡。因此應(yīng)當(dāng)對(duì)耐用性進(jìn)行評(píng)估，并建立一系列的系統(tǒng)適用性參數(shù)(如分離度實(shí)驗(yàn))，以確保該分析方法在任何時(shí)候都可以保持有效性。如果測(cè)試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫明。

第三十八頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一8）耐用性--考察因素分析溶液的穩(wěn)定性樣品的提取次數(shù)、時(shí)間液相色譜方法

流動(dòng)相pH值變化的影響

流動(dòng)相組分變化的影響；

不同色譜柱(不同的批號(hào)和／或供應(yīng)商)；

溫度；

流速。第三十九頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一8）耐用性--考察因素氣相色譜方法：

不同色譜柱(不同的批號(hào)和／或供應(yīng)商)；

溫度

流速

固定相

不同類型的載體第四十頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一8）耐用性---考察因素薄層色譜法：不同品牌的薄層板點(diǎn)樣方式薄層展開時(shí)溫度及相對(duì)濕度的變化第四十一頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一8）耐用性：試驗(yàn)示例--不同柱溫比較

柱溫分離度測(cè)定的平均含量（mg/g）RSD%20℃4.25.72

30℃4.15.690.3040℃3.25.72

第四十二頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一8）耐用性試驗(yàn)示例--不同檢測(cè)波長(zhǎng)的比較

檢測(cè)波長(zhǎng)分離度測(cè)定的平均含量（mg/g）RSD%260nm4.15.68

270nm4.15.690.57280nm4.15.63

第四十三頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一8）耐用性試驗(yàn)示例-流動(dòng)相組成比例變化比較

流動(dòng)相分離度測(cè)定的平均含量（mg/g）RSD%甲醇-水（22：78）4.35.75

甲醇-水（27：73）4.15.692.64甲醇-水（32：68）2.15.98

第四十四頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一

8）耐用性---試驗(yàn)示例

某含量測(cè)定－提取條件選擇選擇50ml甲醇超聲提取40分鐘第四十五頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一9）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)是許多分析方法的組成部分，這些實(shí)驗(yàn)的基本概念是要把由分析設(shè)備、電子儀器、實(shí)驗(yàn)操作和被分析樣品所組成的完整系統(tǒng)進(jìn)行整體評(píng)估。對(duì)于特定方法的系統(tǒng)適應(yīng)性參數(shù)的建立依賴于被驗(yàn)證方法的類型。進(jìn)一步信息可參考藥典。第四十六頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一二、分析方法驗(yàn)證

7、驗(yàn)證檢測(cè)項(xiàng)目小結(jié)1、鑒別

鑒別的目的在于判定被分析物是目標(biāo)化合物，而非其它物質(zhì)，用于鑒別的分析方法要求具有較強(qiáng)的專屬性。2、雜質(zhì)檢查（限度試驗(yàn)、定量試驗(yàn)）

雜質(zhì)檢查主要用于控制主成分以外的雜質(zhì)，如有機(jī)雜質(zhì)、無(wú)機(jī)雜質(zhì)等。

雜質(zhì)檢查要準(zhǔn)確反應(yīng)供試品的純度特性，可分為限度試驗(yàn)和定量試驗(yàn)兩種情況。用于限度試驗(yàn)的分析方法驗(yàn)證側(cè)重專屬性和檢測(cè)限。用于定量試驗(yàn)的分析方法驗(yàn)證強(qiáng)調(diào)專屬性、準(zhǔn)確度和定量限。第四十七頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一3、定量測(cè)定

定量測(cè)定包括含量測(cè)定、制劑的溶出度（釋放度）測(cè)定等，由于此類項(xiàng)目對(duì)準(zhǔn)確性要求較高，故所采用的分析方法要求具有一定的專屬性、準(zhǔn)確度和線性。4、其他特定檢測(cè)項(xiàng)目。其他特定檢測(cè)項(xiàng)目包括粒徑分布、旋光度、分子量分布等，由于這些檢測(cè)項(xiàng)目的要求與鑒別、雜質(zhì)檢查、定量測(cè)定等有所不同，對(duì)于這些項(xiàng)目的分析方法驗(yàn)證應(yīng)有不同的要求。二、分析方法驗(yàn)證

7、驗(yàn)證檢測(cè)項(xiàng)目小結(jié)第四十八頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一需驗(yàn)證項(xiàng)目注意：-表示通常不需要做的項(xiàng)目：+表示通常需要做的項(xiàng)目。①假如已做了重現(xiàn)性（見術(shù)語(yǔ)表），就不需再做中間精密度；②分析方法缺乏專屬性，可以由其他分析方法來(lái)補(bǔ)充；③有些情況下可能需要。項(xiàng)目?jī)?nèi)容鑒別雜質(zhì)測(cè)定含量測(cè)定及溶出量測(cè)定定量限度準(zhǔn)確度－+－+精密度－－－+重復(fù)性－+－+中間精密度－+①－+①專屬性②＋＋＋＋檢測(cè)限－－③＋－定量限－＋－－線性－＋－＋范圍－＋－＋耐用性＋＋＋＋第四十九頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一8）分析方法驗(yàn)證的方式和步驟分析方法應(yīng)給出完成每個(gè)分析試驗(yàn)所需的詳細(xì)步驟?？赡馨ü┰嚻?、對(duì)照品和試劑的配制和制備；儀器的使用說(shuō)明；標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；計(jì)算公式的使用等信息，當(dāng)然，分析方法的內(nèi)容不僅限于上述信息。在實(shí)際工作中，可以對(duì)實(shí)驗(yàn)工作進(jìn)行充分的設(shè)計(jì)，使得可以同時(shí)考察多個(gè)適當(dāng)?shù)尿?yàn)證項(xiàng)目，提供分析方法科學(xué)的、綜合的能力情況，比如：專屬性、線性、范圍、準(zhǔn)確度和精密度等。二、分析方法驗(yàn)證第五十頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一9）分析方法驗(yàn)證常見問(wèn)題藥味的選擇問(wèn)題供試品溶液制備考察不全面對(duì)照品溶液濃度與供試品不匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備樣品測(cè)定不在線性范圍之內(nèi)取樣、范圍太小、單位等問(wèn)題色譜條件的選擇應(yīng)詳述理由并附相關(guān)圖譜方法改變后應(yīng)與原方法作比較對(duì)照品溶液的制備對(duì)照品稱量難以達(dá)到精密稱定的要求回收率測(cè)定問(wèn)題第五十一頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一9）分析方法驗(yàn)證常見問(wèn)題耐用性考察問(wèn)題特殊劑型如分散片建議研究建立主要成分的溶出度檢查方法，限度的制定有時(shí)不能照搬二部藥典單味制劑應(yīng)作輔料空白樣品，進(jìn)行空白對(duì)照試驗(yàn)正文不規(guī)范

第五十二頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一53內(nèi)容：

一、法規(guī)要求

二、分析方法驗(yàn)證

三、分析方法確認(rèn)四、分析方法驗(yàn)證和確認(rèn)總結(jié)第五十三頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一三、分析方法確認(rèn)分析方法確認(rèn)一個(gè)闡述通過(guò)已驗(yàn)證方法進(jìn)行產(chǎn)品測(cè)試的條件確實(shí)適合于該驗(yàn)證方法的過(guò)程適用范圍物料和產(chǎn)品中不需要進(jìn)行驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法以及藥典方法和其他已驗(yàn)證的法定標(biāo)準(zhǔn)。通過(guò)方法確認(rèn)來(lái)證明在本實(shí)驗(yàn)室條件下的適用性。不適用于：日常檢驗(yàn)一般理化方法。如干燥失重、熾灼殘?jiān)?。分析方法的?yàn)證通常在產(chǎn)品的研發(fā)階段已經(jīng)進(jìn)行。

應(yīng)關(guān)注不同實(shí)驗(yàn)室之間方法轉(zhuǎn)移時(shí)的確認(rèn)。第五十四頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一5555三、分析方法確認(rèn)采用藥典規(guī)定的檢驗(yàn)方法需要確認(rèn)的目的：

在于提供第一次使用實(shí)驗(yàn)室的人員、設(shè)備和試劑進(jìn)行法定分析方法確認(rèn)時(shí)得到可接受結(jié)果的基本信息。確認(rèn)包括所選擇的方法性能參數(shù)，如那些在USP<1225>中描述的，是產(chǎn)生相關(guān)數(shù)據(jù)而不是重復(fù)驗(yàn)證過(guò)程。方法使用者應(yīng)有相當(dāng)?shù)慕?jīng)驗(yàn)、知識(shí)并經(jīng)過(guò)培訓(xùn)能夠按照書面的法定方法進(jìn)行操作。由使用者進(jìn)行方法確認(rèn)可以提供法定方法能夠適合相應(yīng)的測(cè)試目的的信心。盡管缺認(rèn)法定方法在真實(shí)條件下使用時(shí)的適應(yīng)性不需要進(jìn)行完整的再驗(yàn)證過(guò)程，列在<1225>表2中的一些分析參數(shù)可以在確認(rèn)過(guò)程中使用。特定方法的確認(rèn)僅需要對(duì)被認(rèn)為適宜的參數(shù)進(jìn)行評(píng)估。第五十五頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一56<1226>法定方法確認(rèn)

除非有跡象顯示法定方法不適應(yīng)各論下測(cè)試要求，一些基本的常規(guī)方法不需要做驗(yàn)證?；痉ǘǚ治龇椒òǖ幌抻冢焊稍锸е?、熾灼殘?jiān)?、各種化學(xué)檢測(cè)如酸度檢測(cè)，簡(jiǎn)單的儀器分析如用pH值測(cè)試儀測(cè)定pH值。藥典建議，對(duì)于首次使用藥典方法進(jìn)行常規(guī)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)，應(yīng)考慮到任何新的或不同的樣品或溶液的處理要求。第五十六頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一三、分析方法確認(rèn)比對(duì)人員儀器實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)確認(rèn)方式檢驗(yàn)項(xiàng)目確認(rèn)鑒別--專屬性雜質(zhì)—專屬性、精密度、定量限含量—準(zhǔn)確度、專屬性第五十七頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一58原料藥檢測(cè)方法示例Identification鑒別IR,UVHPLCPuritytest檢查?Lossondrying干燥失重,

residueonignition,熾灼殘?jiān)麳eavymetals重金屬pHRelatedsubstances有關(guān)物質(zhì)Assay含量測(cè)定Titrimetry滴定法HPLC內(nèi)容驗(yàn)證確認(rèn)準(zhǔn)確度NoNo精密度NoNo專屬性YesMaybe檢測(cè)限NoNo定量限NoNo線性NoNo范圍NoNo第五十八頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一59原料藥檢測(cè)方法示例Identification鑒別IR,UVHPLCPuritytest檢查?Lossondrying干燥失重,

residueonignition,熾灼殘?jiān)麳eavymetals重金屬pHRelatedsubstances有關(guān)物質(zhì)Assay含量測(cè)定Titrimetry滴定法HPLC內(nèi)容驗(yàn)證確認(rèn)準(zhǔn)確度NoNo精密度NoNo專屬性YesNo檢測(cè)限YesNo定量限NoNo線性NoNo范圍NoNo第五十九頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一60原料藥檢測(cè)方法示例Identification鑒別IR,UVHPLCPuritytest檢查L(zhǎng)ossondrying干燥失重,

residueonignition,熾灼殘?jiān)麳eavymetals重金屬pHRelatedsubstances有關(guān)物質(zhì)Assay含量測(cè)定Titrimetry滴定法HPLC內(nèi)容驗(yàn)證確認(rèn)準(zhǔn)確度YesNo精密度YesMaybe專屬性YesYes檢測(cè)限NoNo定量限YesYes線性YesNo范圍YesNo第六十頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一61原料藥檢測(cè)方法示例Identification鑒別IR,UVHPLCPuritytest檢查L(zhǎng)ossondrying干燥失重,

residueonignition,熾灼殘?jiān)麳eavymetals重金屬pHRelatedsubstances有關(guān)物質(zhì)Assay含量測(cè)定Titrimetry滴定法HPLC內(nèi)容驗(yàn)證確認(rèn)準(zhǔn)確度YesNo精密度YesMaybe專屬性YesNo檢測(cè)限NoNo定量限NoNo線性YesNo范圍YesNo第六十一頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一62原料藥檢測(cè)方法示例Identification鑒別IR,UVHPLCPuritytest檢查?Lossondrying干燥失重,

residueonignition,熾灼殘?jiān)麳eavymetals重金屬pHRelatedsubstances有關(guān)物質(zhì)Assay含量測(cè)定Titrimetry滴定法HPLC內(nèi)容驗(yàn)證確認(rèn)準(zhǔn)確度YesNo精密度YesMaybe專屬性YesMaybe檢測(cè)限NoNo定量限NoNo線性YesNo范圍YesNo第六十二頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一63制劑檢測(cè)方法示例Identification鑒別HPLCPuritytest檢查?ParticleininjectionsUniformityDissolutionImpurities:雜質(zhì)relatedsubstancesresidualsolventsAssay含量測(cè)定內(nèi)容驗(yàn)證確認(rèn)準(zhǔn)確度NoNo精密度NoNo專屬性YesYes檢測(cè)限NoNo定量限NoNo線性NoNo范圍NoNo第六十三頁(yè)，共七十頁(yè)，編輯于2023年，星期一64制劑檢測(cè)方法示例Identification鑒別HPLCPuritytest檢查?ParticleininjectionsUniform