福建師范大學14春學期課程考試《分子生物學》作業(yè)考核試題

福建師大網(wǎng)絡學《

分子生物

》期末試一．名詞解釋1．增色應：DNA性時吸光度增加的現(xiàn)象。2．核酶具有催化活性的RNA在RNA的接加工過程中起到自我催化的作用。3．半不連續(xù)復制：一條新鏈連續(xù)合成而另一條鏈不連續(xù)合成的模式。4．操縱子細菌基因表達和調(diào)控的單位，包括結(jié)構(gòu)基因和能被調(diào)控基因物識別的DNA控元件。5．增強：

是一個順式作用序列，能夠提高一些真核生物啟動子的利用，并能夠在啟動子任何方向以及任何位置（上游或者下游）作用。6．核小：色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)亞單位，由200bpDNA和蛋白質(zhì)八聚體組成。7．核糖體：核糖體是細胞內(nèi)一種核糖核蛋白顆其能按照mRNA指令將氨基酸合成蛋白質(zhì)多肽鏈，所以核糖體是細胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的分子機器。8．啟動：合聚合并起始轉(zhuǎn)錄的DNA區(qū)。9．終止：錄本后部所代表的序列能夠引起聚合終止轉(zhuǎn)錄。10DNA克隆：指體外對子按照既定目的和方案進行人工重組，將重組分子導入適當細胞內(nèi)其細擴增和繁殖而獲得該分大量拷貝的過程稱為分子克隆，又叫基因克隆或重組DNA技術(shù)。二．請選擇正確的選項1．以下個是核蛋白（B）A．角蛋B．染色質(zhì)C．組蛋白D．蛋白聚糖2中的一段5''-AGTCTGACT-3''序列等同于RNA中的哪一（A．5''-AGUCUGACU-3''B．5''-UGTCTGUTC-3''C．5''-UCAGUCUGA-3''D．5''-AGUCAGACU-3''3．解鏈溫度是指（B）A．A達到最大值時的溫度

D）

B．A達到最大值50的溫度C．開始解鏈時所需要的溫度D．DNA完全解鏈時所需要的溫度4．年和Crick提出（A）A．多苷酸DNA鏈通過氫鍵連接成一個雙螺旋B．DNA復制是半保留的，常常形成親本－子代雙螺旋雜合鏈C．三個連續(xù)的核苷酸代表一個遺傳密碼D．遺傳物資通常是非RNA5．以下哪個在260nm波長下具有最大的單位質(zhì)量吸收（B）A．雙鏈B．單核苷酸C．RNAD．蛋白質(zhì)6．系列載體是第一次利用藍-白斑進行篩選的載體，藍-白斑篩選被用于（B）A．檢測源DNA片段是否在細菌中表達B．檢質(zhì)粒是否插入外源DNA段C．檢測細菌是否含有質(zhì)粒D．提示克隆化外源段的性質(zhì)7．以下哪一個是大腸桿菌和真核生物染色體的共同之處（D）A．是環(huán)狀B．被裝成核小體C．位于核中D．DNA是負超螺旋8．反密碼中哪個堿基對參與了密碼子的簡并性（搖擺）（A）A．第個B．第個C．第三個D．第一個和第二個9．擴增目的片段時，在第幾個循環(huán)后才出現(xiàn)目的片段長度的雙鏈分子（C）A．第一循環(huán)B．第二個循環(huán)C．第三個循環(huán)D．第四個循環(huán)10原核生物中，后隨鏈的引物是被（C）清除的A．’至5外切核酸酶B．連酶C．聚合酶ID．DNA聚合酶III11.核生物啟動序列－區(qū)的共有序列稱（C）A．盒B．CAAT盒C．Pribnow盒

D．GC12由146bpDNA段，組蛋白八聚體構(gòu)成的復合體稱為（B）A．核小B．核小體核心C．核糖體D．螺線管13人體中的脫輔基脂蛋白肝細胞中產(chǎn)生一個的載脂蛋白，而在腸細胞中，由于脫輔基脂蛋白mRNA第6666位的一個堿基變換為U，結(jié)果產(chǎn)生一個終止密碼子，因此在腸細胞中，脫輔基脂蛋白產(chǎn)生一個241kDa的截短的載脂蛋白B48，產(chǎn)生這種現(xiàn)象是因為（B）的結(jié)果A．可變剪接B．RNA編C．RNA翻譯后加工D．偶然突變14某限制性內(nèi)切酶酶切割5’…GG↓AATTCC…’序列后產(chǎn)生（A）A．’突出末端B．’突出末端C．5’及3突出末端D．平末端15原核生物的起始氨基酸是（A）A．甲酰硫氨酸B．甲氨酸C．組氨酸D．色氨酸16下面哪個結(jié)構(gòu)域是DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（A）A．螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋結(jié)構(gòu)域B．螺旋-環(huán)螺旋結(jié)構(gòu)域C．亮氨酸拉鏈D．酸性激活結(jié)構(gòu)域17光復活修復中哪種酶起關(guān)鍵作用（A）A．光解酶B．烷基轉(zhuǎn)移酶C．糖基化酶D．AP內(nèi)切核酸酶18轉(zhuǎn)化是（A）A．細菌收一個質(zhì)粒B．細菌表達一個基因C．細菌吸收一個噬菌體D．從細菌中分離一個質(zhì)粒19一種細菌由360核苷酸組成，它所編碼的蛋白質(zhì)長度是（D）A．約360個氨基酸B．約1080氨基酸C．120氨基酸D．少于120氨基酸

20基因組是（B）A．雙鏈狀DNAB．雙鏈環(huán)狀DNAC．單鏈線狀DNAD．單鏈環(huán)狀三．問答題1.請簡述遺傳密碼的特性答(1)、碼子的連續(xù)性（無標、無重疊(2)、密碼子的簡并性(3)、密碼子的擺動性（變偶性(4)密碼子的通用性（近于完全通用）2.請簡要說明cDNA文庫構(gòu)建的步驟答cDNA文的構(gòu)建的步驟分為六個階段。階段1：反轉(zhuǎn)錄酶催化合成cDNA一鏈階段2：cDNA第鏈的合階段3：cDNA的基化階段4：接頭或銜接子的連接階段5：SepharoseCL-4B凝過濾法分離cDNA階段6：與λ噬菌體臂的連接3.在色氨酸操縱子中，弱化作用是如何實現(xiàn)對色氨酸合成的調(diào)控答：弱作用其實就是衰減作用。弱化子為衰減子。當色氨酸達到一定濃度、但還沒有高到能夠活化R使起遏作用的程度時色酸合成酶類的量已經(jīng)明顯降低且產(chǎn)生的酶量與色氨酸濃度呈負相關(guān)種控現(xiàn)象受轉(zhuǎn)錄弱化作用的調(diào)節(jié)。在色氨酸操縱子Ptrp-O與一結(jié)構(gòu)基因trpE之間有一162bp的導序列構(gòu)成弱化子區(qū)域，研究證明當色氨酸有一定濃度時聚酶的轉(zhuǎn)錄會終止在這里。當色氨酸的濃度較高或很高時，核糖體能夠很快的通過序列1，并封閉序列2，這種與轉(zhuǎn)錄偶聯(lián)的過程導序列、形一個不依ρ因的轉(zhuǎn)錄終止結(jié)構(gòu)——弱化子得方的RNA合酶脫落錄止色氨酸缺乏時，沒有色氨酰tRNA提，糖體的翻譯停止在序列1和2的氨酸密碼子前，序列23得形成發(fā)夾式結(jié)構(gòu)阻止序列4形成弱化子結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)繼續(xù)進行。因此轉(zhuǎn)錄衰減的實質(zhì)是轉(zhuǎn)錄與一個前導肽翻譯過程的偶聯(lián)，

4．原核生物與真核生物蛋白質(zhì)合成有何異同點答：原生物和真核生物蛋白合成的相同點是基因指導下蛋白質(zhì)合成的過程，多需要形成mRNA，起導，在核糖體中合成蛋白質(zhì)的過程都是將氨基酸按一定順序合成肽鏈。原核生物和真核生物蛋白質(zhì)合成的不同點生物轉(zhuǎn)錄和翻譯同步進行，真核生物轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物要加工后才進行翻譯原核生物核糖體為70S，由與兩亞基組成；真核生物核糖體為80S，由60S與40S兩個亞基組成）原核生物的蛋白質(zhì)合成起始于甲酰甲硫氨酸，需起始因子、IF-2、IF-3及GTP、參。真核生物的蛋白質(zhì)合成起始于甲硫氨酸，起始因子為eIF-1、、eIF-3eIF-4eIF-5和eIF-6）原核生物在起始密碼上游的SD序可與亞基16SrRNA′末端的序列互補，從而確定起始密碼的位置生核糖體與5末端的帽子結(jié)構(gòu)結(jié)合之后，通過消耗ATP的描機制向3端移動來尋找起始密碼。（）原核生物的延長因子有EF-Ts、EF-Tu和EF-G。真核生物的延長因子是和eEF-2。（肽合成的終止需要有肽釋放因子核生物釋放因子有3種RF-1、RF-2RF-1識終止密碼UAARF-2識別止密碼UAA是一種與GTP形復合體的GTP結(jié)蛋白不參與終止密碼的識別是促進核糖體與RF-1、RF-2的合。在真核生物中，僅1釋放因子eRF，它可以識別3種止密碼。5.請你談談的原理及應用前景。答：RNAi即RNA干，是近來發(fā)現(xiàn)的在生物體內(nèi)普遍存在的一種古老的生物學現(xiàn)象,是由雙鏈RNA（dsRNA介導的、由特定酶參與的特異性基因沉默現(xiàn)象它轉(zhuǎn)錄水平轉(zhuǎn)錄后水平翻譯水平上阻斷基因的表達RNAi廣存在于從真菌到高等植物無脊椎物到哺乳動物各種生物中時為一項新興生物技術(shù)有廣泛的用前景。下面談談RNAi的用前景。（）究因功能的新工具已有研究表明RNAi能夠在哺乳物中滅活或降低特異性基因的表達多種表型而且抑制基因表達的間可以隨意控制在發(fā)育的任何階段生似基因敲除的效應與傳統(tǒng)的基敲除技術(shù)相比一技術(shù)具有投入少周期短，操作簡單等優(yōu)勢，是研究基因功能不可或缺的工具。（）研究信號傳導通路的新途聯(lián)合利用傳統(tǒng)的缺失突變技術(shù)和RNAi術(shù)可以很容易地確定復雜的信號傳導途徑中不同基因的上下游關(guān)系Clemensy等應RNAi研究果蠅細胞系中胰島素信息傳導途,取得了與已知胰島素信息傳導通路完全一致的結(jié),在此基礎上分析了DSH3PX1與之間的關(guān),證實是位于DSH3PX1磷酸化的上游激酶.RNAi技術(shù)傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染實驗簡單、快速、重復性好，克服了轉(zhuǎn)染實驗中重組蛋白特異性聚集和轉(zhuǎn)染效率不高的缺點，因此為RNAi技術(shù)將可能成為研究細胞信號傳導通路的新途徑。（）展因治療的新策略

RNAi具抵抗病毒入侵，抑制轉(zhuǎn)座子活動，防止自私基因序列過量增殖等作用，因此可以利用現(xiàn)產(chǎn)生抗病毒的植物和動物，并可利用不同病毒轉(zhuǎn)錄序列中高度同源區(qū)段相應的抵抗多種病毒。6.核酸具有哪些物理化學特性、光譜學和熱力學特性？答）核酸的理化特性穩(wěn)定性核酸螺旋的穩(wěn)定性是疏作用和堆積在堿基對間的偶極矩作用的共同作用結(jié)果酸效應：強酸條件下核酸可水解為堿基、糖和磷酸，中度的酸性可使嘌呤的糖苷鍵水解而產(chǎn)生脫嘌呤核酸。堿效應強堿條件下DNA和RNA其堿基的互變異構(gòu)態(tài)的改變以及特異氫鍵被破壞而變性。強堿條件下RNA也易發(fā)生水解?；瘜W變性：某些化學試劑，如尿素和甲酰胺，在中性條件下能夠破壞堆積于堿基間的疏水作用而使和RNA變。黏性：分很細長，因此其液具有較高的粘性。浮力密度：的度約為1.7g/cm3可以通過氯化銫密度梯度離心法加以分析和純化。（）酸的光譜學和熱力學特性紫外光吸收：核酸因含有共軛的苯環(huán)而吸收紫外光，核算中的芳香族堿基在260nm處有最大光吸收。減色性：由于堿基在疏水環(huán)境中的堆積造成雙鏈DNA相對單鏈DNA吸值減少的現(xiàn)象稱為減色效應。核酸定量A260/280比可用于計雙鏈DNA樣的純度對于純DNA該比值為1.8，若比值大于1.8，意著有污染：若比值小于則味著有蛋白質(zhì)污染。熱變性：升高溫度可使DNA和RNA變性。復性:降溫可使DNA復性，但僅這一過程進行的足夠緩慢時才能使互補鏈退火而形成完全的非變性雙鏈DNA.7.真核生物mRNA前體如何加工成成熟的答：hnRNA是mRNA的體，其工成成熟的mRNA經(jīng):（）’-cap：在RNA5’端經(jīng)化修飾加一個T-甲基鳥苷殘基（）’剪切及加尾：許多真生物的前mRNA在多聚A點被剪切后，多聚體A聚合酶在形成的’加ployA尾巴形成成熟的’端。（）接：在真核生物前mRNA加工過程中，打斷編碼區(qū)的內(nèi)含子序列被切除，然后兩側(cè)的外顯子片段相連接。

8.克隆載體應具備哪些特性，并簡述克隆過程。答：克隆載體應具備哪些特性有復制