肉羊胚胎移植的技術要點和操作方法

肉羊胚胎移植的技術要點和操作方法胚胎移植叉稱人工授胎,是提高種母羊生殖力的一種方法.此技術便利_『優(yōu)良品種的引進及資源保存,同時使母羊一胎多羔,有利于優(yōu)良品種的快速擴群,從而加速育種Ⅲl:作的進程.胚胎移植的根本過程包括供體和受體選擇,供體超數排卵和受體同期發(fā)情處理,沖卵,檢卵和移植.同期發(fā)情為受精卵供給先決條件.要求供體羊與受體羊情根本全都,情愈接近則受胎率愈高.試驗證明,綿羊受精卵移植時,4-24h70%以.},4-48h50%.近年來,由于前列腺素的消滅,期.15mg的前列腺素,即可到達發(fā)情同期化的目的.超數排卵可促使卵巢在一個發(fā)情期內自然狀態(tài)下多排出數倍的成熟卵子.據日本報道,用孕馬血清促性腺激素或人類絨毛膜促性腺激索注射山羊,一次發(fā)情可排出2O3O個卵子,70%80%.超數排卵一般都承受孕馬血清促性腺激素皮下注射法,劑量為1000～2O00IU.4d,12—13d注射.待消滅發(fā)情后,在人工授精或配種的同時,靜脈注射人類絨毛7501O00IU.采卵方法有輸卵管法,子宮法,沖卵管法.目前大多采取輸卵管法.步驟:23d采卵,將沖卵管一端由輸卵管傘部的嗽叭捕人,2～3era深(打活結或用鈍圓的夾子固定),另一端接集卵『丌L.37’E的沖卵液5～lOmL,在子宮角靠近輸卵管的部位,將針頭朝輸卵管方向扎入.一人操作,一只手的手指在針頭前方捏緊子宮角,另一只手推注射器,沖卵液由宮管結合部流人輸卵管,經輸卵管流至集卵肌.此種方法的優(yōu)點是卵的回收率高,沖卵液用量少,檢卵省時間.缺點是簡潔造成輸卵管傘部粘連:檢卵及受精卵的培育目的是為r使脫離母體的受精卵連續(xù)發(fā)育,進而使其能異地移植.同收的受精卵必需在實體顯微鏡下觀看,選擇卵裂球完整清楚,透亮帶邊緣光滑透亮的,適合移植的正常受精卵,放人有密閉蓋的玻璃容器內,置于37℃的沖洗液中做短期保存..如須進展較長的時間保存,1O宜,35d,1Od.據報道,發(fā)育較早階段的受精卵,在兔體內可存活較長時間.因此,可將受精卵先移植到母兔體內,用兔體作”活體溫箱”,然后外運進展移植.移植對受體羊可承受簡易手術法移植胚胎.術部清毒后,拉緊皮膚.1.5～2cm的口,用一個手指仲進腹腔,摸到子宮角引導至切口外,確認排卵側黃體發(fā)育向各插入官腔,推出胚胎,隨即予宮復位.皮膚復位后馬上腹擘切口擅蓋,皮膚切口用碘酒,酒精消毒,一般無須縫合.假設切口增大或糙蓋不嚴密,應進展縫合.8主要的器械和設備(1)叫收卵器械:沖卵管:7號針頭(鈍彤).回收管:帶硅膠管的l6號針頭(鈍形).腸鉗套乳膠管:帶}手20mL或30mI.集卵杯:50mI燒杯.(2)檢卵與分割設備:體視顯微鏡,培育nn(35mmx15mm,90ramx15ram),外表呷..巴氏玻璃管,培育箱,二氧化碳培育罐及二氧化碳氣體,娃微操作儀及附件..(3)移植:微量注射器,l2號移植管,內200～300L玻璃管或前端細且局部膨大的(套在注射器上)塑料細管.,外科剪(圓頭,尖頭);活動刀柄,刀片,外科刀,止血鉗(彎頭,直頭),蚊式止血鉗,創(chuàng)巾央,持針器,手術鑷(帶齒,不帶齒),縫合針(針,),縫合線(絲線,腸線),創(chuàng)巾假設干,手術保定架,手術燈,活動手術器械車.(5)其他:蒸1,f:1臺,1臺,濾器假設干,0,22L0.45L濾器膜,025mL塑料細管;1臺.(6)藥品及試劑t配制PBS所需試劑:促索和促黃