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文檔簡介
利用柱層析、液相等分離，從九節(jié)龍植物中分離出具有抗腫瘤活性的皂苷單Zn、Ni、Cu、Cr、Co對系列化合物采用腫瘤細(xì)胞體外活性測試方法（MTT法）進(jìn)行活性測試，應(yīng)用細(xì)胞培HD50、IC505倍以上的化合物。 SchiffSchiff建立將提取工藝與色譜分離相結(jié)合的分離ADSI單體的方法，最佳提取條件是：75%乙醇，第一次8倍量（g/mL）提取4h，第二次6倍量提取3h，提取所得ADSI的干浸膏得率94%；色譜條件：色譜條件：色譜柱（10.0mm×250mm，sinochromODS-BP為柱填充料；流動(dòng)相：甲醇-水（80:20；流速：1.5mL/min；檢測波長：205nm。ADSIHOOHOOR OOROORADSHOOHOOOR OOOR②28Smith降解法得到酯化苷元。 CH3 S CH3 OCH3
OPR'RO
RO
RO
羧酸 磺酸 磷酸 CH3
CH3 R'COCl(等當(dāng)量
CH3
O
CH3
RO
RO
RH3C柱層析分離
CH3 CH34RO
③ OOCH3 OOCH3
OOCH3OOCH3O CH3ORO
RO
RO
OCH3OCH3
O* *
O
CH3
OCH3OOOOCH3
H
CH3RO
O
ROO
RO
* *
CH3 OCH3OCH3O*HR
CH3
N
R
CH3 N
CH3
ADSI IIID-葡萄糖、D-半乳糖、D-鼠李糖、L-糖進(jìn)行糖苷化反應(yīng)。以D-葡萄糖及羧酸酯類苷元為例：
OOO CH3 CH3
CH3 CH3 OOCH3
+
CH3
CH3ONa CH3 CH3 CH3 O
O CH3
rpm/min，5min1%的紅細(xì)胞溶液；以二甲基亞砜/磷酸緩沖液（DMSO/PBS）5：1梯度濃度皂苷樣品，160μL1%40μL9637℃60min，離心，轉(zhuǎn)出上清液，540nmHD50Hela、U87、U251等人胰蛋白酶消化2～5min，用RPMI-1640培養(yǎng)液單細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度至103/ml，96孔培養(yǎng)板，100μl/孔，37℃，5CO224h后加入不同濃度的藥物，100μL細(xì)胞懸液+100μL62d5mg/mlMTT20μL4hDMSO150μL10minMTT結(jié)晶完全溶解，酶聯(lián)免疫檢測分析儀測定490nm的吸光度值。計(jì)算抑
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