百合的組織培養(yǎng)課件

百合的組織培養(yǎng)種子生產與經營11001班百合花的簡介種類：百合科屬多年生草本鱗莖植物原產地：澳洲它是著名的球根花卉主要分布在北半球的溫帶和寒帶地區(qū)，少數種類分布在熱帶高海拔地區(qū)。

形態(tài)特征

多年生球根草本花卉，株高40～60cm，還有高達1m以上的。莖直立，不分枝，草綠色

莖稈基部帶紅色或紫褐色斑點。

地下具鱗莖，鱗莖由闊卵形或披針形，白色或淡黃色，直徑由6～8cm的肉質鱗片抱合成球形，外有膜質層。多數須根生于球基部。單葉，互生，狹線形，無葉柄，直接包生于莖稈上，葉脈平行。有的品種在葉腋間生出紫色或綠色顆粒狀珠芽，其珠芽可繁殖成小植株?；ㄖ谇o稈頂端，呈總狀花序，簇生或單生，花冠較大，花筒較長，呈漏斗形喇叭狀，六裂無萼片，因莖稈纖細，花朵大，開放時常下垂或平伸；花色，因品種不同而色彩多樣，多為黃色、白色、粉紅、橙紅，有的具紫色或黑色斑點，也有一朵花具多種顏色的，極美麗?；ò暧衅秸沟?，有向外翻卷的，故有“卷丹”美名。有的花味濃香，故有“麝香百合”之稱?；浣Y長橢圓形蒴果。

關于百合的組織培養(yǎng)最早是Dobreaux等人（1950）首次用純白百合（Liliumcandidum）的花蕾成功地誘導出小鱗莖。黃濟明（1979~1984）對25個種或品種進行了組培試驗，證明百合的珠芽、鱗片、鱗莖盤、根、莖、葉、莖尖、花梗、花柱和未成熟胚等外植體均能被促進形態(tài)發(fā)生。新美芳二（1980）對百合鱗片、花被片、花絲、花柄等也組培成功，認為開花時各花器官和莖所形成小鱗莖的能力最高。程治英等人（1991~2001）對30多種或品種的百合進行組培證實的結果如下：（1）用百合根、葉作為外植體，也與鱗片一樣，不同部位分化叢芽的能力都是近軸端大于遠軸端。（2）鱗莖鱗片分化能力（分化苗的頻率和速度）都是外部大于內部。雜種品種的分化能力大于野生種，低海拔種大于高海拔種。鱗片組培得到小鱗莖的試管鱗片其分化能力大于原始培養(yǎng)鱗片的分化能力。

有效的組培方法1、培養(yǎng)基配方

誘導培養(yǎng)基：MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L

增殖培養(yǎng)基：MS+BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L

生根培養(yǎng)基：1/2MS+NAA0.1mg/L

培養(yǎng)的前處理2、培養(yǎng)程序

取材及滅菌優(yōu)選生長健壯、開花性狀好的種球作為外植體。在取材前，最好將準備接種的鱗莖在4~5℃的低溫下處理6~8周，然后經洗衣粉常規(guī)清洗后，剝去鱗莖外皮及外部2~3層鱗片，切去少許頂部及基部，先用75%的酒精浸泡30~60S，然后在0.1%升汞溶液中處理15~20分鐘，次氯酸鈉處理10~15分鐘，無菌水洗3~4次，即可進行無菌操作切塊（段）接種。根的培養(yǎng)以毛百合為材料，在MS+NAA0.5-0.1mg/L培養(yǎng)基上，形成腫脹的粗根，將其切成小段MS+B2mg/L+NAA0.2mg/L的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，便能分化出苗。毛百合試管苗5-6個月，能形成直徑17mm左右的鱗莖，移栽后成活情況良好。

胚培養(yǎng)在雜交育種工作中，為防止雜種胚和母體胚乳間不親和，有可能造成胚敗育的情況下，可采取胚培養(yǎng)，以克服不親和現象，有利于育種工作的順利進行。培養(yǎng)時仍以MS培養(yǎng)基較好，糖濃度是種類而異常在20-40之間pH5.0較為適宜，NAA用量只宜在0.1-0.001之間。加入適量BA有利于幼胚成活，高BA會抑制胚根的產生，并促進胚組織愈傷組織化，通常MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)促進愈傷組織生長，然后將長大的愈傷組織轉移到1/2MS不加任何激素的培養(yǎng)基上，約2個月后，可形成大量的不定芽，延長培養(yǎng)時間，就會生根，產生出完整的雜交后代。影響百合小鱗莖形成的因素季節(jié)（春、夏、秋、冬）鱗片不同部位的影響（上、中、下）小鱗片培養(yǎng)后形成小鱗莖的大小分布小鱗莖形成的重量與培養(yǎng)及用量的關系（成反比）快速繁殖的實例把最初培養(yǎng)得到的小鱗莖，每兩個月用20x90mm的培養(yǎng)皿，加入MS+NAA0.1+蔗糖9%+活性炭0.5%的瓊脂培養(yǎng)基，繼代一次。2個月后獎得到的小鱗片切割，轉移到MS+KT10的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，給予25℃和2.5w/㎡的連續(xù)光照。在經過2個月在原小鱗片的表面再生出無數成堆的、新的小鱗片。再將這些成堆的小鱗片轉移到加100mLMS液體培養(yǎng)基的300mL錐形瓶中