臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)蛋白質(zhì)與非蛋白含氮化合物檢驗(yàn)

臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)蛋白質(zhì)與非蛋白含氮化合物檢驗(yàn)第1頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三教學(xué)內(nèi)容第2頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三第一節(jié)概述一、血漿蛋白質(zhì)血漿蛋白質(zhì)功能1.直接在血液中發(fā)揮作用

在血漿中運(yùn)載弱水溶性物質(zhì)維持血漿膠體滲透壓組成血液pH緩沖系統(tǒng)參與凝血與纖維蛋白溶解血漿固有酶在血漿發(fā)揮作用2.需要時(shí)進(jìn)入組織發(fā)揮作用對(duì)組織蛋白起修補(bǔ)作用組成體液免疫防御系統(tǒng)抑制組織蛋白酶參與代謝調(diào)控作用的激素第3頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三血漿蛋白質(zhì)的功能分類運(yùn)輸載體血漿脂蛋白(CM、VLDL、LDL、HDL等)

白蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合珠蛋白血色素結(jié)合蛋白銅藍(lán)蛋白視黃醇結(jié)合蛋白甲狀腺素結(jié)合球蛋白皮質(zhì)素結(jié)合球蛋白類固醇激素結(jié)合球蛋白

第4頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三蛋白酶抑制物：α1-抗胰蛋白酶、α1-抗糜蛋白酶

α2-巨球蛋白等6種以上血漿酶：卵磷脂膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶、假性膽堿酯酶等

蛋白類激素：胰島素、胰高血糖素、生長(zhǎng)激素等凝血與纖溶蛋白：纖維蛋白原，凝血酶原，凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、

Ⅺ、Ⅻ、ⅩⅢ，前激肽釋放酶、HMW激肽原，抗凝血酶Ⅲ,纖維蛋白溶酶原等

免疫球蛋白和補(bǔ)體蛋白：IgG、A、M、D、EC1q、C1r、C1s、C2、C3、C4、C5、C6、

C7、C8、C9、B因子、D因子、備解素等血漿蛋白質(zhì)的功能分類第5頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三血漿蛋白質(zhì)的電泳分類醋纖膜電泳或瓊脂糖電泳：白蛋白

α1球蛋白

α2球蛋白

β球蛋白

γ球蛋白分辨率高時(shí)：可有β1和β2α2中也可有兩條

采用聚丙烯酰胺凝膠電泳，在適當(dāng)條件下可以分出30多個(gè)區(qū)帶第6頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三各電泳區(qū)帶的主要血漿蛋白質(zhì)前白蛋白甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白

0.2~0.4g/L白蛋白 白蛋白 35~55 α1-球蛋白 α1-抗胰蛋白酶 0.9~2.0α1-酸性糖蛋白 0.5~1.5

甲胎蛋白 3×10-5

高密度脂蛋白 1.7~3.25α2-球蛋白 結(jié)合珠蛋白 0.3~2.0 α2-巨球蛋白 1.25~4.1

銅藍(lán)蛋白 0.2~0.5β-球蛋白 轉(zhuǎn)鐵蛋白 2.0~3.5

低密度脂蛋白 0.6~1.55 C4 0.1~0.4 β2-微球蛋白 0.001~0.002

纖維蛋白原 2.0~4.0 C30.7~1.5γ-球蛋白 IgA0.7~4.0 IgG 7.0~16 IgM 0.4~2.3C-反應(yīng)蛋白 0.008

第7頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（一）前白蛋白（prealbumin,PA）即甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(transthyretin，TTR)電泳顯示在白蛋白前方故名PA，肝臟合成，55kD，半壽期僅2.5天。50％～70％與視黃醇結(jié)合蛋白組成復(fù)合體。能轉(zhuǎn)運(yùn)甲狀腺素和三碘甲腺原氨酸，大約結(jié)合血漿中10％的甲狀腺激素。必需氨基酸含量很高，是組織修補(bǔ)材料。第8頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（二）視黃醇結(jié)合蛋白

（retinol-bindingprotein，RBP

）肝臟合成，僅21kD，半壽期12h攜帶視黃醇從肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)到各種靶組織。與TTR以1:1比例結(jié)合，避免RBP從腎小球?yàn)V過(guò)，在靶細(xì)胞，TTR-RBP降解，視黃醇被攝入細(xì)胞，無(wú)視黃醇的RBP載體蛋白與TTR無(wú)親和性，被腎小球?yàn)V出，腎近端小管細(xì)胞吸收并降解。

第9頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（三）白蛋白（albumin，ALB）

生化特性占血漿總蛋白的57％～68％，不含糖，66.3kD由肝臟合成，11～14.7g/d，半壽期約18～20天合成儲(chǔ)備大，由血漿膠體滲透壓和蛋白質(zhì)攝入量調(diào)節(jié)腎病綜合征時(shí)合成量可增高到正常的300％以上遺傳性變異可發(fā)生電泳遷移率變化，出現(xiàn)雙白蛋白區(qū)帶第10頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（三）白蛋白生理作用最重要血漿營(yíng)養(yǎng)蛋白，胞飲進(jìn)入細(xì)胞，氨基酸合成組織蛋白最重要血漿載體蛋白維持血漿膠體滲透壓的最重要成分緩沖酸堿物質(zhì)的主要血漿蛋白質(zhì)高度溶于水，能運(yùn)載許多疏水分子生理pH中為負(fù)離子，每分子帶200個(gè)負(fù)電荷運(yùn)輸膽紅素.長(zhǎng)鏈脂肪酸.膽汁酸鹽.前列腺素.類固醇激素?zé)o機(jī)離子(如Ca2+、Cu2+、Ni2+).藥物(如阿司匹林、青霉素)結(jié)合型激素和藥物無(wú)活性，ALB含量或pH變化時(shí)其活性變化第11頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（四）α1-抗胰蛋白酶（α1-antitrypsin，α1AT或AAT）蛋白酶和抗蛋白酶蛋白酶：清除病原微生物、壞死組織和衰老紅細(xì)胞蛋白酶過(guò)多或活性過(guò)強(qiáng)可破壞正常組織和細(xì)胞抗蛋白酶：機(jī)體為對(duì)抗蛋白酶的異常作用而產(chǎn)生抗蛋白酶減少可導(dǎo)致某些疾病發(fā)生第12頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（四）α1-抗胰蛋白酶

生理功能占血清中抑制蛋白酶活力的90％左右能抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、膠原蛋白酶及白細(xì)胞釋放的溶酶體蛋白水解酶

形成不可逆的酶-抑制物復(fù)合體

第13頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（四）α1-抗胰蛋白酶

AAT的多種遺傳表型至少有75種，表達(dá)的蛋白質(zhì)有M型和Z型、S型

PiMM型最多，占人群95%以上類型：PiMM、PiMS、PiMZ、PiSS、PiSZ、PiZZ活力：100%、80％、60％、60％、35％、15％

第14頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（五）α1-酸性糖蛋白

(α1-acidglycoprotein，α1–AG或AAG)主要的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白急性炎癥時(shí)增高，與免疫防御功能有關(guān)AAG可以結(jié)合利多卡因和心得安等急性心肌梗死時(shí)升高，藥物結(jié)合狀態(tài)增加游離狀態(tài)減少，需要增加藥物劑量。肝臟合成，40kD，又稱血清類黏蛋白，含糖約45％，包括11％～20％唾液酸，血清黏蛋白的主要成分，黏蛋白是能被高氯酸和其它強(qiáng)酸沉淀的一組蛋白質(zhì)。

第15頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（六）結(jié)合珠蛋白（haptoglobin，Hp）

生化特性和表型由肝臟合成，85kD～400kD，分子量變化很大α2β2四聚體，α亞基不同而形成的四聚體表型不同

α亞基有三種遺傳表型α1F、Α1s、α2，氨基酸數(shù)不同有些表型的四聚體又形成聚合體，在電泳中出現(xiàn)多條帶第16頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三結(jié)合珠蛋白的幾種遺傳表型

表型亞單位的結(jié)構(gòu)組成Hp1-1(α1F)2β280kD，α鏈氨基酸83個(gè)

α1Fα1Sβ2β鏈氨基酸245個(gè)

(α1S)2β2Hp2-1(α1Sα2β2)n120kD-200kD的聚合體

(α1Fα2β2)nn不同在電泳中呈多條帶Hp2-2(α2β)n160kD-400kDn=3-8n不同在電泳中呈多條帶第17頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三能與RBC中釋放的游離Hb結(jié)合每分子Hp結(jié)合兩分子Hb

防止Hb從腎丟失而保留鐵，避免Hb對(duì)腎臟損傷。Hp不能被重新被利用，溶血后其含量急劇降低，血漿Hp濃度多在一周內(nèi)由再生而恢復(fù)。

（六）結(jié)合珠蛋白

生理功能第18頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，分子量約720kD血漿最大的蛋白質(zhì)，不能從血管擴(kuò)散至細(xì)胞外液也是主要的蛋白酶抑制劑能結(jié)合并抑制各種類型的蛋白酶，如纖維蛋白溶酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶等酶與α2MG處于復(fù)合物狀態(tài)時(shí)酶底物為大分子，蛋白水解酶活性被抑制酶底物為小分子，仍能被α2MG-蛋白酶水解

（七）α2巨球蛋白

(α2-acroglobulin，α2MG或AMG)第19頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（八）銅藍(lán)蛋白（ceruloplasmin,Cp）

生化特性肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，132kD，α2球蛋白每分子含6～8個(gè)銅原子，含銅而呈藍(lán)色95%的血清銅存在于Cp中，另5%呈可擴(kuò)散狀態(tài)血循環(huán)中Cp為銅沒(méi)有毒性的代謝庫(kù)。第20頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三與氧化還原反應(yīng)有關(guān)，既能起氧化作用又能起抗氧化作用。具有鐵氧化酶作用，能將Fe2+氧化為Fe3+Fe3+再結(jié)合到轉(zhuǎn)鐵蛋白上，使鐵不具毒性還有抑制膜脂質(zhì)氧化的作用（八）銅藍(lán)蛋白

生理功能第21頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（九）轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TRF）

生化特性肝細(xì)胞合成，79.6kD，β區(qū)帶，半壽期10.5d能可逆結(jié)合多價(jià)陽(yáng)離子鐵、銅、鋅、鈷等，但已知其對(duì)鐵的結(jié)合具有臨床重要性第22頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（九）轉(zhuǎn)鐵蛋白

生理功能從小腸進(jìn)入血液的Fe2+被Cp氧化為Fe3+，再被TRF的載體蛋白結(jié)合。每種細(xì)胞表面都有TRF受體，對(duì)TRF-Fe3+

復(fù)合物比對(duì)TRF的載體蛋白親和力高得多TRF-Fe3+將大部分Fe3+運(yùn)輸?shù)焦撬韬铣蒆b

小部分則運(yùn)輸?shù)礁鹘M織細(xì)胞，形成鐵蛋白及合成肌紅蛋白、細(xì)胞色素等第23頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（十）β2-微球蛋白

（β2-microglobulin，β2M，BMG）存在于各種有核細(xì)胞表面，僅11.8kD是HLA的輕鏈或β鏈，可從細(xì)胞表面尤其是淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞表面脫落到血漿中從腎小球?yàn)V過(guò)，再被腎近端小管重吸收和分解

第24頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（十一)C-反應(yīng)蛋白

（C-reactiveprotein,CRP）

生化特性因在急性炎癥病人血清中出現(xiàn)的可以結(jié)合肺炎球菌細(xì)胞壁C-多糖的蛋白質(zhì)而命名由肝細(xì)胞所合成，115kD電泳分布在慢γ區(qū)帶，有時(shí)可延伸到β區(qū)帶第25頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三不僅結(jié)合多種細(xì)胞、真菌及原蟲等多糖物質(zhì)在鈣離子存在下，還可以結(jié)合卵磷脂和核酸可引發(fā)對(duì)侵入細(xì)胞的免疫調(diào)理作用和吞噬作用結(jié)合后的復(fù)合體具有對(duì)補(bǔ)體系統(tǒng)的激活作用表現(xiàn)炎癥反應(yīng)(十一)C-反應(yīng)蛋白

生理功能第26頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、體液氨基酸（aminoacid，AA）

氨基酸由消化道吸收、體內(nèi)合成、組織蛋白分解作用：合成蛋白質(zhì)，轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌锘钚晕镔|(zhì)分解途徑：脫氨基成氨及α-酮酸(轉(zhuǎn)變?yōu)樘?、脂肪或分解供?小部分脫羧基生成CO2和胺類體液氨基酸含量可反映體內(nèi)氨基酸代謝紊亂情況氨基酸代謝紊亂有遺傳性性和繼發(fā)性

第27頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（一）遺傳性氨基酸代謝紊亂

為遺傳性代謝酶缺陷引起，種類很多是相關(guān)基因突變所致，至今已發(fā)現(xiàn)70余種絕大多數(shù)疾患罕見，而病情卻嚴(yán)重如果診斷足夠早，某些疾患可以治療第28頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三1.氨基酸血癥（Aminoacidemia）酶缺陷在氨基酸代謝起點(diǎn)，其催化氨基酸在血中增加酶缺陷在代謝途徑中間，酶催化前的中間代謝物堆積有時(shí)因正常途徑受阻，通過(guò)旁路代謝的產(chǎn)物可增多氨基酸血癥：氨基酸、或其中間代謝物、或其旁路代謝物在血液中增高稱之。如酪氨酸血癥、組氨酸血癥、精氨酸血癥等第29頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2.氨基酸尿癥（Aminoaciduria）血漿增多的氨基酸及其代謝物均從腎小球?yàn)V過(guò)超出腎小管重吸收能力從尿排出即為氨基酸尿癥尿液中濃度經(jīng)常比血漿更高血漿和尿液氨基酸增多可同時(shí)存在稱某種氨基酸血癥或氨基酸尿癥有時(shí)是傳統(tǒng)習(xí)慣腎小管細(xì)胞膜存在氨基酸載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白當(dāng)某種載體缺乏時(shí)，相應(yīng)氨基酸從尿中排出增加血漿中這些氨基酸濃度可在正常范圍或偏低

第30頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

遺傳性氨基酸代謝紊亂的缺陷酶

及其血和尿中增高的成分(帶*為尿中氨基酸)

疾病名稱缺乏的酶血漿中增高的成分苯丙酮酸尿癥苯丙氨酸羥化酶苯丙氨酸、苯丙酮酸I型酪氨酸血癥延胡索酸乙酰乙酸酶酪氨酸、甲硫氨酸尿黑酸尿癥尿黑酸氧化酶尿黑酸（輕度）同型胱氨酸尿癥胱硫醚合成酶甲硫氨酸、同型胱氨酸組氨酸血癥組氨酸酶組氨酸、丙氨酸甘氨酸血癥甘氨酸氧化酶甘氨酸支鏈酮酸尿癥支鏈酮酸氧化酶

纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸等胱硫醚尿癥胱硫醚酶胱硫醚Ｉ型高脯氨酸血癥脯氨酸氧化酶脯氨酸精氨酸琥珀酸尿癥精氨酸琥珀酸酶谷氨酰胺、脯氨酸、甘氨酸等精氨酸血癥精氨酸酶精氨酸胱氨酸尿癥腎小管堿性氨基酸載體*胱氨酸.精氨酸.賴氨酸.鳥氨酸色氨酸代謝綜合癥腎小管中性氨基酸載體*所有中性氨基酸二羧基氨基酸尿癥腎小管酸性氨基酸載體*谷氨酸、天冬氨酸亞氨基甘氨酸尿癥腎小管亞氨基酸載體*脯氨酸、羥脯氨酸、甘氨酸第31頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（二）繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂

若與氨基酸代謝有關(guān)的器官出現(xiàn)嚴(yán)重病變也可發(fā)生某種氨基酸血癥或氨基酸尿癥見于肝臟和腎臟疾患、蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良、燒傷等肝功能衰竭：支鏈氨基酸/芳香族氨基酸比值（BCAA/AAA比值）下降繼發(fā)性腎性氨基酸尿：由腎小管損害、腎近曲小管功能障礙，使氨基酸重吸收減少而引起

第32頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、嘌呤核苷酸

（一）嘌呤核苷酸代謝

嘌呤核苷酸的合成：從頭合成途徑、補(bǔ)救途徑嘌呤核苷酸的分解：終產(chǎn)物是尿酸，人類不能再分解第33頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三嘌呤核苷酸合成代謝主要原料：5-磷酸核糖氨基酸一碳單位第34頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三第35頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、高尿酸血癥（hyperuricemia）

可分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類，以前者為多原發(fā)性高尿酸血癥：遺傳性嘌呤代謝紊亂和/或尿酸排泄障礙引起多數(shù)由多基因遺傳缺陷所致與代謝綜合征也關(guān)系密切繼發(fā)性高尿酸血癥：高嘌呤飲食、腎臟疾病、血液病、藥物等引起第36頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三嘌呤代謝紊亂

在原發(fā)性高尿酸血癥的病因中約占10％主要原因是嘌呤代謝酶缺陷其中大多數(shù)屬多基因遺傳缺陷，機(jī)制不明由單酶缺陷引起者僅占1％～2％

第37頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三單酶缺陷原因：①次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT)缺乏

②PRPP合成酶亢進(jìn)③G-6-P缺乏，引起G-6-磷酸增多沿磷酸戊糖途徑生成較多PRPP，嘌呤合成增多④腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(APRT)缺乏腺嘌呤不能經(jīng)補(bǔ)救途徑合成腺苷酸而出現(xiàn)堆積腺嘌呤代謝產(chǎn)物2，8-二羥腺嘌呤由尿排出增加可產(chǎn)生腎結(jié)石，不是高尿酸血癥第38頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2.尿酸排泄障礙原發(fā)性高尿酸血癥中80％～90％具有尿酸排泄障礙腎臟功能大多正常，僅存在尿酸排泄障礙屬多基因遺傳性疾病，易感基因和發(fā)病機(jī)制不明確

第39頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2.尿酸排泄障礙腎臟對(duì)尿酸鹽的排泄有四個(gè)階段：腎小球?yàn)V過(guò)血漿中的全部尿酸鹽濾液中大部分尿酸鹽被近曲小管重吸收近端小管再分泌尿酸鹽髓絆降支被動(dòng)重吸收尿酸鹽終尿排出尿酸鹽只占濾過(guò)量的6％～10％總量約為2.4mmol～3.0mmol/d腎臟尿酸排泄障礙涉及以上各個(gè)過(guò)程

第40頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三3.代謝綜合征與高尿酸血癥原發(fā)性高尿酸血癥與肥胖、原發(fā)性高血壓、血脂異常、糖尿病、胰島素抵抗關(guān)系密切。高尿酸血癥是代謝綜合征的一個(gè)組成部分肥胖和高甘油三酯血癥是高尿酸血癥的相關(guān)因素但血液尿酸和TG等之間相互作用的機(jī)制仍不清楚第41頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三4.高嘌呤飲食短時(shí)間內(nèi)從飲食攝入大量含嘌呤食物會(huì)生成大量尿酸超過(guò)腎臟排泄能力導(dǎo)致血液尿酸升高各類葷菜都含嘌呤，尤其是各種動(dòng)物內(nèi)臟和海鮮嘌呤極高：腦.肝.腎.心.蛤蜊.鳳尾魚.沙丁魚.肉汁等嘌呤較高蔬菜：菠菜.韭菜.扁豆.豌豆.大豆.豆制品等飲料：咖啡、濃茶含一定量嘌呤酒類：啤酒引發(fā)痛風(fēng)的可能性最大，烈性酒次之葡萄酒基本上不存在這種危險(xiǎn)雞蛋和牛奶含豐富蛋白質(zhì)而嘌呤較低，水果中嘌呤很少第42頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三5.各種腎臟疾病各種腎小球疾病因腎小球?yàn)V過(guò)功能等減退慢性鉛中毒造成腎小管損害藥物競(jìng)爭(zhēng)性抑制腎小管排泌尿酸：雙氫克尿塞/利尿酸/速尿/吡嗪酰胺/小劑量阿司匹林血液乳酸或酮酸等有機(jī)陰離子濃度增高：腎小管對(duì)尿酸的分泌受到競(jìng)爭(zhēng)性抑制而排出減少第43頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三6.細(xì)胞破壞增多使核酸分解及尿酸生成增多：骨髓增生性疾病核酸合成增加和周轉(zhuǎn)加速白血病、淋巴瘤、紅細(xì)胞增多癥等惡性腫瘤的化療和放療后細(xì)胞破壞過(guò)多溶血性貧血、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、心肌梗死、肺結(jié)核等組織細(xì)胞破壞增多第44頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三高尿酸血癥和痛風(fēng)的病因分類

類型 病因或遺傳特征原發(fā)性高尿酸血癥 尿酸排泄減少，占80％-90％ 多基因性常染色體顯性遺傳尿酸產(chǎn)生過(guò)多 從頭合成嘌呤過(guò)多(占原發(fā)性10％-20％)多基因性常染色體顯性遺傳特異性酶缺陷(占原發(fā)性1％)

青春性原發(fā)性痛風(fēng)

HGPRT部分缺乏，X-連鎖青春期尿酸結(jié)石癥 （突變型）PRS活性增強(qiáng)

Lesch-Nyhan綜合征HGPRT完全缺乏，X-連鎖

Congierke病葡萄糖-6-磷酸酶缺乏或不足繼發(fā)性高尿酸血癥 尿酸排泄減少 腎功能減退 慢性腎疾患腎小球?yàn)V過(guò)減少 糖尿病腎病腎小管排泌尿酸減少 高血壓、內(nèi)分泌疾病、有機(jī)酸增加、鉛中毒腎病尿酸產(chǎn)生過(guò)多 骨髓增殖性疾?。喊籽?、多發(fā)性骨髓瘤、紅細(xì)胞增多癥慢性溶血性貧血全身擴(kuò)散的癌癥，惡性腫瘤化療或放療嚴(yán)重的剝脫性牛皮癬第45頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三一、體液總蛋白二、體液白蛋白三、血清蛋白質(zhì)電泳四、免疫固定電泳五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)六、體液氨基酸七、體液尿酸

第二節(jié)常用體液蛋白質(zhì)與非蛋白含氮化合物檢測(cè)項(xiàng)目

第46頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三一、體液總蛋白體液總蛋白包括數(shù)量眾多的各種蛋白質(zhì)定量測(cè)定時(shí)作了如下假定：1.所有血漿蛋白是單純的多肽鏈，糖脂類和金屬有機(jī)物等均不計(jì)在內(nèi)，其含氮量平均為16％2.各種蛋白質(zhì)理化性質(zhì)雖不同，但與化學(xué)試劑的反應(yīng)性（如呈色、沉淀）一致。第47頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三測(cè)定蛋白質(zhì)時(shí)利用蛋白質(zhì)特有的結(jié)構(gòu)或性質(zhì)：①重復(fù)的肽鏈結(jié)構(gòu)；②分子中均含有氮原子；③與色素結(jié)合的能力；④沉淀后借濁度或光折射測(cè)定；⑤酪氨酸和色氨酸殘基對(duì)酚試劑反應(yīng)或紫外光吸收臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定體液蛋白質(zhì)的方法有多種各種方法性能和應(yīng)用情況不同最多用的是雙縮脲法，以下將重點(diǎn)介紹

一、體液總蛋白第48頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（一）雙縮脲法（biureamethod）【測(cè)定原理】蛋白質(zhì)中兩個(gè)相鄰肽鍵(-CO-NH-)在堿性溶液與二價(jià)銅離子作用產(chǎn)生穩(wěn)定的紫紅色絡(luò)和物。此反應(yīng)與雙縮脲(兩個(gè)尿素縮合物H2N-OC-NH-CO-NH2)在堿性溶液與Cu2+作用形成紫紅色反應(yīng)相似。因此將蛋白質(zhì)與堿性銅反應(yīng)的方法稱為雙縮脲法第49頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（一）雙縮脲法【參考區(qū)間】隨年齡增大有所增高，60歲后則稍有下降。新生兒:46～70g/L，數(shù)月到2歲:51～75g/L，

3歲及以上:60～80g/L。成人:64～83g/L(直立行走)和60～78g/L(臥床)【臨床意義】濃度下降常由白蛋白濃度下降而引起濃度增高見于慢性炎癥等多克隆免疫球蛋白增多，以及漿細(xì)胞病的單克隆免疫球蛋白增多癥。第50頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（一）雙縮脲法【方法評(píng)價(jià)】（1）特異性：至少含兩個(gè)-CONH-才能與Cu2+絡(luò)合，氨基酸及二肽無(wú)反應(yīng)，三肽以上才能反應(yīng)。體液小分子肽含量極低，可忽略不計(jì)。（2）呈色一致性：因呈色強(qiáng)度與肽鍵數(shù)量即蛋白質(zhì)含量成正比，故各種蛋白質(zhì)呈色強(qiáng)度基本相同，此為目前所有總蛋白測(cè)定方法中最好。第51頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（一）雙縮脲法【方法評(píng)價(jià)】（3）臨床應(yīng)用：檢測(cè)范圍10～120g/L靈敏度不高，但很適合血清總蛋白濃度對(duì)胸腹水總蛋白的檢測(cè)低限為0.47g/L

生物檢測(cè)限為1.33g/L

胸腹腔積液TP在4.5～50g/L，能采用該法蛋白質(zhì)濃度很低的腦脊液和尿液無(wú)法定量第52頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（二）測(cè)定體液總蛋白的其他方法

1.染料結(jié)合法

酸性環(huán)境蛋白質(zhì)帶正電荷，可與染料陰離子反應(yīng)而產(chǎn)生顏色改變。染料有氨基黑、麗春紅、考馬斯亮藍(lán)、鄰苯三酚紅鉬等，前兩種常作血清蛋白電泳的染料?？捡R斯亮藍(lán)可用于尿液、腦脊液等定量測(cè)定，雖簡(jiǎn)便和靈敏，但比色杯對(duì)染料有吸附作用。鄰苯三酚紅鉬法沒(méi)有考馬斯亮藍(lán)法的缺點(diǎn)。各法均存在與不同蛋白質(zhì)結(jié)合力不一致的問(wèn)題第53頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

（二）測(cè)定體液總蛋白的其他方法

1.染料結(jié)合法

鄰苯三酚紅鉬法（pyrogallolredmolybdate，PRM）原理：在酸性介質(zhì)中，鄰苯三酚紅-鉬酸鹽與蛋白質(zhì)形成復(fù)合物，最大吸收峰從467nm轉(zhuǎn)移至594nm。靈敏度高，檢測(cè)下限約10～20mg/L，上限約2g/L

試劑不吸附比色杯，可用于自動(dòng)生化分析儀中各種蛋白質(zhì)呈色程度不同，球蛋白約為白蛋白70％加入適量十二烷基磺酸鈉，球蛋白反應(yīng)性有所升高該法適用于蛋白質(zhì)濃度低的尿液、腦脊液等

第54頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（二）測(cè)定體液總蛋白的其他方法

2.凱氏定氮法（Kjeldahlmethod）1883年建立，是經(jīng)典的蛋白質(zhì)測(cè)定方法。原理：測(cè)定樣品中的含氮量，推算出蛋白質(zhì)含量。蛋白質(zhì)中含氮量較為恒定，平均16％,即1克氮相當(dāng)于6.25克蛋白質(zhì)。

準(zhǔn)確性好，精密度高，靈敏度高，適用于任何形態(tài)的樣品測(cè)定，至今仍被認(rèn)為是測(cè)定許多生物樣品中蛋白質(zhì)含量的參考方法。但操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)，不適合臨床常規(guī)測(cè)定。第55頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（二）測(cè)定體液總蛋白的其他方法

3．比濁法（turbidimetry）某些酸如三氯乙酸、磺基水楊酸等能與蛋白質(zhì)結(jié)合而產(chǎn)生微細(xì)沉淀，由此產(chǎn)生的懸浮液濁度大小與蛋白質(zhì)的濃度成正比。優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、靈敏度高，可測(cè)定尿液、腦脊液等蛋白質(zhì)較低的樣品。缺點(diǎn)是影響濁度大小的因素較多，包括加入試劑的手法、混勻技術(shù)、反應(yīng)溫度等，且各種蛋白質(zhì)形成的濁度亦有較大的差別。第56頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

（二）測(cè)定體液總蛋白的其他方法

3．比濁法

芐乙氯銨法是目前臨床上較多應(yīng)用的比濁法原理：芐乙氯銨在堿性條件下與蛋白質(zhì)形成沉淀，其懸浮液穩(wěn)定，660nm處進(jìn)行濁度測(cè)定。靈敏度、準(zhǔn)確度、對(duì)白蛋白和球蛋白的反應(yīng)一致性都優(yōu)于其他比濁法，檢測(cè)范圍較廣。精密度仍不夠理想。

第57頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

（二）測(cè)定體液總蛋白的其他方法

4.酚試劑法（phenolreagentmethod）Folin在1921年首創(chuàng)，用于酪氨酸和色氨酸測(cè)定后由吳憲用于蛋白質(zhì)定量原理：蛋白質(zhì)中酪氨酸和色氨酸使磷鎢酸和磷鉬酸還原為鎢藍(lán)和鉬藍(lán)。靈敏度較高各種蛋白質(zhì)酪氨酸和色氨酸含量不同，如ALB含色氨酸0.2％，球蛋白色氨酸2％～3％因此只適合測(cè)定單一蛋白質(zhì)。受還原性物質(zhì)干擾(帶-SH化合物、糖類、酚類等)

第58頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

（二）測(cè)定體液總蛋白的其他方法

5．直接紫外吸收法根據(jù)蛋白質(zhì)在280nm或215/225nm紫外吸收值，計(jì)算蛋白質(zhì)含量。蛋白質(zhì)濃度（g/L）＝1.45A280nm-0.74A260nm

準(zhǔn)確性受蛋白中芳香族氨基酸含量影響甚大而且尿酸和膽紅素在280nm附近有干擾。不適合血清、尿液等組成復(fù)雜的體液蛋白質(zhì)，常用于較純的酶、免疫球蛋白等測(cè)定。第59頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、體液白蛋白

【檢測(cè)方法】包括電泳法、免疫化學(xué)法和染料結(jié)合法。電泳法只能測(cè)其百分含量，乘TP濃度得其濃度用于ALB定量不方便且精密度不如直接定量免疫化學(xué)法包括免疫比濁法和放射免疫法等特異性好、靈敏度高，ALB易純化、抗血清易制備，適合尿液和腦脊液等低濃度ALB的測(cè)定血清ALB測(cè)定可采用染料結(jié)合法

第60頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、體液白蛋白

【檢測(cè)方法】

染料結(jié)合法

原理：陰離子染料溴甲酚綠(bromcresolgreen，BCG)

溴甲酚紫(bromcresolpurple，BCP)能與ALB結(jié)合，其最大吸收峰發(fā)生轉(zhuǎn)移。

BCG與ALB形成的藍(lán)綠色復(fù)合物在630nm處有吸收峰，

BCP與ALB形成的綠色復(fù)合物在603nm處有吸收峰。而球蛋白基本不結(jié)合這些染料。第61頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、體液白蛋白【參考區(qū)間】隨年齡有所變化，0～4天：28～44g/L4天～14歲：38～54g/L，此后下降成人：35～52g/L，＞60歲為32～46g/L

走動(dòng)者比臥床者平均高3g/L【醫(yī)學(xué)決定水平】：＞35g／L時(shí)正常

28～34g／L為輕度缺乏

21～27g／L為中度缺乏＜21g／L則嚴(yán)重缺乏低于28g／L時(shí)，會(huì)出現(xiàn)組織水腫第62頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三【臨床意義】ALB增高僅見于嚴(yán)重失水時(shí)，無(wú)重要臨床意義低ALB血癥見于下述許多疾病情況：（1）白蛋白合成不足：①嚴(yán)重肝臟合成功能下降如肝硬化、重癥肝炎②蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良或吸收不良ALB受飲食蛋白質(zhì)攝入量影響，可作為營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的評(píng)價(jià)指標(biāo)，早期缺乏時(shí)不易檢出。

二、體液白蛋白第63頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三【臨床意義】

（2）白蛋白丟失：①尿中丟失如腎病綜合征、慢性腎小球腎炎、糖尿病腎病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡性腎病等②胃腸道蛋白質(zhì)丟失，因黏膜炎癥壞死③皮膚丟失如燒傷及滲出性皮炎等（3）白蛋白分解代謝增加：①組織損傷如外科手術(shù)和創(chuàng)傷②組織分解增加如感染性炎癥疾病等

二、體液白蛋白第64頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三【臨床意義】（4）白蛋白的分布異常：門靜脈高壓時(shí)大量ALB從血管內(nèi)漏入腹腔（5）無(wú)白蛋白血癥：極少見的遺傳性缺陷，血漿ALB含量常低于1g/L二、體液白蛋白第65頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三【方法評(píng)價(jià)】（1）兩種染料結(jié)合法均操作簡(jiǎn)便、重復(fù)性好（2）特異性BCG與ALB為快反應(yīng)，30秒基本完全血清α和β球蛋白能起慢反應(yīng)，程度較ALB低縮短反應(yīng)時(shí)間能避免非特異性反應(yīng)BCP與ALB即時(shí)完全反應(yīng)無(wú)球蛋白非特異性干擾但BCP與牛、豬等ALB的反應(yīng)性比人ALB程度低二、體液白蛋白第66頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三【方法評(píng)價(jià)】

（3）臨床應(yīng)用：兩法均適合于血清白蛋白測(cè)定BCP法檢測(cè)范圍為5～50g/L，上限較低BCG法檢測(cè)范圍為5～60g/L，應(yīng)用更方便BCG法測(cè)定胸腹腔積液ALB檢測(cè)低限為0.44g/L

生物檢測(cè)限0.98g/L，胸腹腔積液1.5～35g/L

能采用BCG法測(cè)定尿液和腦脊液ALB定量則不適宜采用該法二、體液白蛋白第67頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、血清蛋白電泳

（serumproteinelectrophoresis,SPE）

【檢測(cè)原理】pH8.6緩沖液中血清中各種蛋白質(zhì)都電離成負(fù)離子，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)；因各種蛋白質(zhì)pI不同，在相同pH下帶電荷量有差異，各蛋白質(zhì)分子大小與分子形狀也不相同，故在同一電場(chǎng)中泳動(dòng)速度不同。血清蛋白質(zhì)被分成5個(gè)主要區(qū)帶從正極起依次為ALB、α1、α2、β、γ球蛋白第68頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、血清蛋白電泳【參考區(qū)間】白蛋白57％～68％α1球蛋白1.0％～5.7％α2球蛋白4.9％～11.2％β球蛋白7％～13％γ球蛋白9.8％～18.2％不同染色劑和電泳條件參考區(qū)間不同各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考區(qū)間正常人SPE圖譜第69頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、血清蛋白電泳

圖譜類型TPAlbα1α2βγ低蛋白血癥型↓↓↓↓N↑N↓N↑腎病型↓↓↓↓N↑↑↑↑↓N↑肝硬化型N↓↑↓↓N↓N↓β-γ↑（融合）彌漫性肝損害型N↓↓↓↑↓↑M蛋白血癥型在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)M蛋白區(qū)帶慢性炎癥型↓↑↑↑急性時(shí)相反應(yīng)型N↓N↑↑N高α2(β)-球蛋白血癥型↓↑↑↑妊娠型↓N↓↑↑N蛋白質(zhì)缺陷型個(gè)別區(qū)帶出現(xiàn)特征性缺乏【臨床意義】1.血清蛋白電泳異常圖譜

第70頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、血清蛋白電泳【臨床意義】

2.血清蛋白電泳典型圖譜（1）腎病型：ALB下降，α2顯著升高

β明顯升高，γ不變或相對(duì)下降（2）肝硬化型：ALB下降，γ明顯升高典型者β和γ區(qū)帶融合，見β-γ橋腎病型肝硬化型第71頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、血清蛋白電泳【臨床意義】

3.免疫球蛋白增多

（1）單克隆免疫球蛋白增多：γ或γ～β間色澤深染的窄區(qū)帶,單克隆免疫球蛋白或其輕鏈或重鏈片段，稱M蛋白(monoclonalprotein)，見于漿細(xì)胞病。M蛋白電泳位置大致反應(yīng)Ig類型，IgA位于β區(qū)后部或β和γ之間，IgM位于γ區(qū)中部，IgG位于γ區(qū)后部。第72頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、血清蛋白電泳【臨床意義】

3.免疫球蛋白增多

（2）多克隆免疫球蛋白增多為各種合成Ig細(xì)胞的全面增殖

γ區(qū)帶呈彌散性升高見于慢性肝病、肝硬化、結(jié)締組織病、慢性感染、惡性腫瘤、獲得性免疫缺陷綜合征、淋巴母細(xì)胞性淋巴結(jié)病。第73頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、血清蛋白電泳【方法評(píng)價(jià)】影響精密度的因素很多，如電泳介質(zhì)性質(zhì)，緩沖液成分和濃度、電壓大小、電泳時(shí)間、染色液成分、電泳時(shí)溫度。實(shí)驗(yàn)室之間的精密度較差，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度也遠(yuǎn)不如生化指標(biāo)定量測(cè)定。采用自動(dòng)電泳儀及其配套的商品試劑，每次電泳時(shí)電壓.時(shí)間.甚至溫度等都能準(zhǔn)確控制，精密度明顯提高。第74頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三四、蛋白質(zhì)免疫固定電泳

（Immunofixationelectrophoresis,IFE）

能確定蛋白質(zhì)的單克隆屬性，從而診斷漿細(xì)胞病等檢測(cè)標(biāo)本可以是血清、尿液、腦脊液或其他體液以血清蛋白免疫固定電泳較多用

第75頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三四、蛋白質(zhì)免疫固定電泳【檢測(cè)原理】包括蛋白電泳和免疫沉淀兩個(gè)過(guò)程電泳：同一份標(biāo)本加樣在6個(gè)不同位置。加抗血清：抗IgG、IgA、IgM、κ鏈和λ鏈分別加到各份電泳區(qū)帶表面孵育，在適當(dāng)?shù)膮^(qū)帶位置抗原抗體復(fù)合物形成并沉淀。清洗：電泳區(qū)帶中未被固定的ALB.α1.α2.β球蛋白，及未結(jié)合的游離抗原或抗體被洗去。染色：考馬斯亮藍(lán)等靈敏度較高的染色液。觀察：有否單克隆免疫球蛋白，其抗原特異性、電泳位置、該蛋白質(zhì)量及其與其他蛋白質(zhì)的大概比例。第76頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三四、蛋白質(zhì)免疫固定電泳【區(qū)帶表現(xiàn)】對(duì)照電泳見血清蛋白電泳區(qū)帶第2至6份電泳分別顯示IgG、IgA、IgM、κ鏈、λ鏈與其相應(yīng)抗體的蛋白質(zhì)復(fù)合物區(qū)帶。正常區(qū)帶染色程度依次是IgG＞IgA和κ鏈＞λ鏈＞IgM，均呈寬而彌散的區(qū)帶。單克隆蛋白為邊界清晰的局部致密條帶，條帶寬度和深度與其含量成正比，多數(shù)出現(xiàn)在γ或β區(qū)，偶見于α區(qū)。第77頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三四、蛋白質(zhì)免疫固定電泳【臨床意義】惡性漿細(xì)胞病診斷；與多克隆增殖的鑒別診斷；腦脊液寡克隆蛋白的判斷。惡性漿細(xì)胞病包括骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥、重鏈病、原發(fā)性淀粉樣變性等。各種單克隆蛋白頻率：IgG52％.IgA21％.IgM12％.IgD2％.IgE0.01％.輕鏈(κ或λ)11％.重鏈(γ.α.μ或δ)1％，兩種或多種克隆蛋白0.5％

第78頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三四、蛋白質(zhì)免疫固定電泳【方法評(píng)價(jià)】檢測(cè)速度較快，整個(gè)過(guò)程約1.5至2h敏感性高，能檢測(cè)到0.5～1.5g/L的單克隆抗體分辨率高，很短的電泳距離分離出單克隆蛋白組分抗原抗體沉淀模式對(duì)照常規(guī)血清蛋白電泳模式分析區(qū)帶，結(jié)果較容易判斷但良性M蛋白血癥(BMG)也表現(xiàn)為類似的單克隆條帶第79頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【檢測(cè)方法】蛋白質(zhì)都由氨基酸組成，性質(zhì)相似，除ALB等極少數(shù)因有某種特性可用，能用染料結(jié)合法外，都需制備特異性抗體，用免疫化學(xué)法測(cè)定。包括免疫比濁法、發(fā)光免疫法、放射免疫法、酶免疫法等。靈敏度均很高，適用于血、尿、腦脊液等大部分標(biāo)本，目前以免疫比濁法最多用。第80頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)

免疫比濁法原理：體液中的某種蛋白質(zhì)與其特異性抗體形成抗原抗體復(fù)合物使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度反應(yīng)液保持抗體過(guò)量時(shí)復(fù)合物隨抗原量增加反應(yīng)液濁度隨之增加，與一系列校準(zhǔn)品對(duì)照計(jì)算免疫比濁法包括透射比濁法和散射比濁法透射比濁法檢測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)或一定時(shí)間后吸光度值散射比濁法檢測(cè)入射光遇到復(fù)合物后呈一定角度散射的光量，常測(cè)定濁度形成的速率。第81頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【參考區(qū)間】

參見表2-2?！九R床意義】1.血漿PA

下降是肝功能不全的靈敏指標(biāo)。指示蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良：200mg/L～400mg/L正常

100mg/L～150mg／L輕度缺乏

50mg/L～100mg／L中度缺乏＜50mg／L嚴(yán)重缺乏第82頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】2.RBP

血漿RBP增高見于腎小球損傷血漿RBP下降見于：急性時(shí)相反應(yīng)、肝臟疾病和蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良尿液RBP排泄量增加可反映腎小管功能損害第83頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】3.血漿AAT（1）AAT缺陷與肺氣腫PiZZ型、PiSZ型個(gè)體常出現(xiàn)年青時(shí)肺氣腫低血漿AAT還可出現(xiàn)在胎兒呼吸窘迫綜合征（2）AAT缺陷與肝?。盒律鷥篜iZZ型和PiSZ型與其膽汁淤積、肝硬化和肝細(xì)胞癌的發(fā)生有關(guān)PiZZ表型的某些成人也會(huì)發(fā)生肝損害第84頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】4.血漿AAG

作為急性時(shí)相反應(yīng)的指標(biāo)在風(fēng)濕病、惡性腫瘤及心肌梗死等炎癥或組織壞死時(shí)48h后濃度迅速增高

3～5天時(shí)出現(xiàn)高峰，一般增加3～4倍第85頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】

5.血漿Hp（1）溶血性疾?。汉棵黠@下降；因參考范圍較寬，一次測(cè)定價(jià)值不大，需連續(xù)觀察。生化組合試驗(yàn)：血漿Hp、LDH和游離Fb；血管外溶血可使后兩者增高，Hp則不會(huì)變化。（2）燒傷和腎病綜合征：ALB大量丟失時(shí)，大分子Hp可代償性明顯增加。但Hp1-1（兩個(gè)α均為α1表型）個(gè)體選擇性蛋白尿時(shí)血漿Hp通常下降

第86頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】

6.血漿α2MG

低白蛋白血癥尤其是腎病綜合征時(shí)血漿α2MG含量可顯著增高可能為代償機(jī)制以保持血漿膠體滲透壓

第87頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】7.血漿Cp

主要作為Wilson病的輔助診斷指標(biāo)Wilson病：一種常染色體隱性遺傳病，因血漿Cp減少，血漿游離銅增加并沉積在肝引起肝硬化，沉積在腦基底節(jié)豆?fàn)詈藢?dǎo)致豆?fàn)詈俗冃浴Ｔ摬∮址Q為肝豆?fàn)詈俗冃?。患者：血清總銅降低、游離銅增加、尿銅增加

第88頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】8.血漿TRF

貧血的鑒別診斷和鐵缺乏的治療監(jiān)測(cè)：缺鐵性低血色素貧血時(shí)，TRF代償性合成增加；血漿鐵低，結(jié)合到TRF的鐵少，鐵飽和度下降（正常參考值為30％～38％）再生障礙性貧血，血漿TRF正?；虻拖录t細(xì)胞對(duì)鐵的利用障礙，使鐵飽和度增高第89頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】8.血漿TRF總鐵結(jié)合力(totalironbindingcapacity,TIBC)

血漿蛋白質(zhì)對(duì)鐵的結(jié)合容量(主要是TRF對(duì)鐵結(jié)合容量)，單位與血清鐵相同。鐵飽和度（％）＝血清鐵/TIBC×％兩者尤其是后者對(duì)貧血診斷和鑒別診斷更好第90頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】9.BMG

血漿BMG增高：見于腎衰竭、炎癥、腫瘤尤其是與B淋巴細(xì)胞相關(guān)的腫瘤尿液BMG排泄量增加：可反映腎小管功能損害第91頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】10.血漿CRP

（1）急性時(shí)相反應(yīng)極靈敏的指標(biāo)：在急性心肌梗死、創(chuàng)傷、感染、炎癥、外科手術(shù)、腫癌浸潤(rùn)等時(shí)迅速顯著增高，心肌梗死6～12h即升高，可達(dá)正常水平的2000倍。>5mg/L作為明顯的炎癥信號(hào)1～5mg/L為慢性低程度的炎癥或急性時(shí)相反應(yīng)始

第92頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【臨床意義】10.血漿CRP

（2）做為心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因子為血漿CRP低濃度增高，須用更靈敏測(cè)定方法大多健康成年人<1mg/L作為心血管疾病危險(xiǎn)因子的標(biāo)記：

<1mg/L為低風(fēng)險(xiǎn)

1.0～3.0mg/L為中度危險(xiǎn)性

>3.0mg/L為高度危險(xiǎn)性。

第93頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【方法評(píng)價(jià)】免疫比濁法檢測(cè)限為10～20mg/L精密度較好，批內(nèi)變異系數(shù)通常小于5％需加促聚劑聚乙二醇加速大的免疫復(fù)合物形成抗原或抗體量大大過(guò)剩時(shí)易出現(xiàn)可溶性復(fù)合物受血脂影響，尤其是低稀釋度時(shí)，脂蛋白的小顆?？尚纬蓾岫龋箿y(cè)定值假性升高。

第94頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、體液個(gè)別蛋白質(zhì)【方法評(píng)價(jià)】免疫化學(xué)法已應(yīng)用于許多體液蛋白質(zhì)測(cè)定

ALB、PA、AAT、AAG、HAP、AMG、CER、TRF、CRP、IgG、IgM、IgA、C3、C4和α1抗糜蛋白酶共15種蛋白質(zhì)均已有國(guó)際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)CRM470（CertifiedReferenceMaterial）。免疫球蛋白輕鏈κ和λ、β2-mG、α1-mG、RBP、IgD、IgE等，也可采用免疫比濁法測(cè)定第95頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三六、體液氨基酸

（一）過(guò)篩試驗(yàn)檢測(cè)氨基酸1．氨基酸薄層層析

能將體液中氨基酸分離，并常用茚三酮顯色大多數(shù)氨基酸與茚三酮反應(yīng)呈紫色第96頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三六、體液氨基酸

（一）過(guò)篩試驗(yàn)檢測(cè)氨基酸試驗(yàn)和顏色被檢測(cè)的代謝物被檢測(cè)疾病三氯化鐵暗藍(lán)綠（持久）苯丙酮酸苯丙酮酸尿癥綠（短暫）對(duì)–羥苯丙酮酸酪氨酸血癥藍(lán)（短暫）尿黑酸尿黑酸尿癥灰綠咪唑、丙酮酸組氨酸血癥灰藍(lán)支鏈酮酸支鏈酮酸尿癥藍(lán)綠5-羥吲哚乙酸類癌紫色水楊酸鹽（干擾物）紫褐吩噻嗪（干擾物）氰化物/硝基氰酸鹽櫻桃紅胱氨酸胱氨酸尿癥同型胱氨酸同型胱氨酸尿癥胱氨酸–同型胱氨酸二硫化物同型胱氨酸尿癥青霉胺-胱氨酸二硫化物（治療）2,4-二硝基苯肼黃白色支鏈酮酸，苯丙酮酸支鏈酮酸尿癥，苯丙酮酸尿癥亞硝基萘酚：橙紅色酪氨酸及其代謝物酪氨酸代謝紊亂，酪氨酸血癥2．尿氨基酸顏色試驗(yàn)

第97頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三六、體液氨基酸

（一）過(guò)篩試驗(yàn)檢測(cè)氨基酸3.Guthrie微生物試驗(yàn)

瓊脂培養(yǎng)基中含有能特異針對(duì)某種待檢氨基酸的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，結(jié)構(gòu)與待檢氨基酸相似。將枯草芽孢桿菌芽孢加入，樣品點(diǎn)到紙片上并放到瓊脂表面，瓊脂板孵育后觀察細(xì)菌生長(zhǎng)。若有高濃度待檢氨基酸，氨基酸抑制劑的作用減弱或被克服，能觀察到菌株生長(zhǎng)。將系統(tǒng)設(shè)計(jì)成待檢氨基酸超過(guò)其參考上限時(shí)顯示細(xì)菌生長(zhǎng)，來(lái)檢測(cè)疾病。第98頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三六、體液氨基酸

（二）氨基酸定量1．色譜法

GC法：樣品用量少、靈敏和快速，但在儀器所具有的溫度下可揮發(fā)性低。臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用少HPLC法：分辨率和靈敏度均高，分析時(shí)間相對(duì)短，較廣泛地應(yīng)用于體液氨基酸的測(cè)定。

第99頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三六、體液氨基酸

（二）氨基酸定量2.酶法

L-苯丙氨酸：L-苯丙氨酸脫氫酶法

L-苯丙氨酸氧化酶法，生成醌亞胺苯丙酮酸：L-苯丙氨酸脫氫酶法。谷氨酰胺：谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶催化。支鏈氨基酸（亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸）：亮氨酸脫氫酶法，氧化脫氨生成酮酸，NAD還原成NADH第100頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三七、體液尿酸【檢測(cè)方法】早期常采用氧化還原法，以磷鎢酸法較常用，特異性差，臨床實(shí)驗(yàn)室已不再采用。尿酸酶紫外吸收法是測(cè)定尿酸的參考方法。尿酸酶-過(guò)氧化物酶法：目前常采用原理：尿酸酶氧化尿酸生成尿囊素和H2O2，后者在過(guò)氧化物酶催化下，使2，4-二氯酚和4-氨基安替比林縮合生成醌類有色化合物。第101頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三七、體液尿酸【參考區(qū)間】1．血清尿酸

男性210～420μmol/L，女性150～350μmol/L2．尿液尿酸

膳食嘌呤含量對(duì)尿酸排出量影響很大無(wú)嘌呤膳食：男＜2480μmol/d，女稍低低嘌呤膳食：男＜2830μmol/d，女＜2360μmol/d高嘌呤膳食：＜5900μmol/d均衡膳食：1480～4430μmmol/d第102頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三七、體液尿酸【臨床意義】1．血清尿酸為發(fā)現(xiàn)高尿酸血癥，后者的主要危害是引起痛風(fēng)2．尿尿酸排出量可判斷腎臟排泄尿酸的能力分析高尿酸血癥是否由腎臟排泄障礙所引起第103頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三七、體液尿酸【方法評(píng)價(jià)】尿酸酶-過(guò)氧化物酶法過(guò)氧化物酶催化反應(yīng)特異性較差，維生素C、膽紅素等還原性物質(zhì)有負(fù)干擾。血清尿酸濃度在幾百μmol/L水平，遠(yuǎn)低于血糖、總膽固醇等，膽紅素等負(fù)干擾容易被觀察到。試劑中加入膽紅素氧化酶能消除膽紅素干擾?？捎糜谘搴湍蛞耗蛩釡y(cè)定檢測(cè)上限約為700μmol/L，尿液尿酸應(yīng)稀釋測(cè)定

第104頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

一、蛋白質(zhì)代謝紊亂的生物化學(xué)診斷蛋白質(zhì)的變化與人類許多疾病密切相關(guān)病理情況下血漿蛋白質(zhì)的變化資料已越來(lái)越多隨技術(shù)發(fā)展許多微量血漿蛋白質(zhì)分析已較容易第三節(jié)體液蛋白質(zhì)與非蛋白含氮化合物檢測(cè)的臨床應(yīng)用第105頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（一）肝臟疾病的血漿蛋白質(zhì)變化1.多種血漿蛋白質(zhì)含量下降

ALB為血漿中含量最多的蛋白質(zhì)，是肝病最常用的蛋白質(zhì)指標(biāo)，因半壽期長(zhǎng)而不很靈敏，在嚴(yán)重慢性肝炎、肝硬化以及重癥肝炎時(shí)有明顯下降。PA是肝臟合成功能的敏感指標(biāo)，肝功能下降時(shí)顯著降低。肝病時(shí)血漿膽堿酯酶因合成減少而降低。其他如轉(zhuǎn)鐵蛋白、結(jié)合珠蛋白、銅藍(lán)蛋白、α1-酸性糖蛋白等在肝功能明顯下降時(shí)也可出現(xiàn)減少。第106頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（一）肝臟疾病的血漿蛋白質(zhì)變化2.凝血蛋白質(zhì)和凝血酶原時(shí)間(PT)嚴(yán)重肝臟疾病有明顯Fg缺乏和某些凝血因子減少凝血酶原時(shí)間是真正的功能性試驗(yàn)，延長(zhǎng)提示嚴(yán)重肝功能障礙，對(duì)肝合成功能的快速變化敏感。PT對(duì)輕微的肝細(xì)胞功能障礙不敏感，急性病毒性或中毒性肝炎若PT延長(zhǎng)，是爆發(fā)性肝衰竭早期指標(biāo)。第107頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（一）肝臟疾病的血漿蛋白質(zhì)變化3.免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）增高

慢性肝病網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)受損或門靜脈旁路形成時(shí)升高急性肝炎輕度升高，慢性活動(dòng)性肝炎和肝硬化顯著升高尤其是自身免疫性肝炎IgG升高常見于慢性活動(dòng)性肝炎IgA升高常見于各種肝硬化，酒精性肝硬化時(shí)尤其顯著原發(fā)性膽汁性肝硬化IgM大量升高病毒性肝炎早期可出現(xiàn)IgM升高第108頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（二）對(duì)某些疾病的重要診斷意義1.遺傳性蛋白合成缺陷與疾病

年輕肺氣腫者應(yīng)檢測(cè)α1-抗胰蛋白酶是否缺陷wilson病時(shí)可能存在銅藍(lán)蛋白遺傳性合成減少2.貧血的診斷和鑒定

缺鐵性貧血患者轉(zhuǎn)鐵蛋白升高溶血性貧血時(shí)結(jié)合珠蛋白減少

第109頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（三）急性時(shí)相反應(yīng)

（acutephasereaction，APR）急性時(shí)相反應(yīng)是對(duì)炎癥(如感染、自身免疫性疾病等)和組織損傷(如創(chuàng)傷、手術(shù)、心肌梗死、腫瘤等)的非特異性反應(yīng)，血漿蛋白質(zhì)如AAT、AAG、Hp、Cp、C4、C3、Fg和CRP等顯著升高或升高，PA、ALB、TFR出現(xiàn)下降。這些血漿蛋白質(zhì)統(tǒng)稱為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白（acutephaseproteins,APPs）增加的蛋白質(zhì)稱為正向APPs

下降的蛋白質(zhì)稱為負(fù)向APPs

第110頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三APR的機(jī)制是對(duì)炎癥的一般反應(yīng)損傷部位釋放的細(xì)胞因子引發(fā)肝細(xì)胞中上述蛋白質(zhì)合成量的改變。正向APPs是機(jī)體防御機(jī)制的一個(gè)部分尤其是活化補(bǔ)體、蛋白酶抑制劑對(duì)酶活性的控制Hp對(duì)被破壞紅細(xì)胞中釋放Hb的保護(hù)作用等作為營(yíng)養(yǎng)蛋白的負(fù)向APPs此時(shí)合成減少可為合成正向APPs提供更多的氨基酸原料第111頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三APR的時(shí)相C-反應(yīng)蛋白首先升高12小時(shí)內(nèi)AAG也升高然后AAT、Hp、C4和Fg升高最后是C3和銅藍(lán)蛋白升高通常在2~5天內(nèi)這些APPs達(dá)到最高值第112頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（四）類固醇激素對(duì)血漿蛋白質(zhì)的影響雌激素增多：如妊娠、使用避孕藥

AAT、TRF升高，Cp顯著增加，AMG增加

AAG和Hp合成減少糖皮質(zhì)激素增加：包括庫(kù)欣綜合征和外源性強(qiáng)的松、地塞米松等可引起AAG升高第113頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（五）器官組織損傷導(dǎo)致的血漿蛋白質(zhì)變化正常血漿含來(lái)源于組織細(xì)胞的各種各樣蛋白質(zhì)，但相當(dāng)微量。某些器官或組織病變時(shí)，如肝炎、心肌損傷、胰腺炎、惡性腫瘤等，則能向血漿中釋放出更多的某種蛋白質(zhì)或酶。檢測(cè)這些蛋白質(zhì)有助于以上疾病的診斷，這些將在其他相關(guān)章中敘述。

第114頁(yè)，共127頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、氨基酸代謝紊亂的生物化學(xué)診斷遺傳性氨基酸代謝紊亂可從三個(gè)水平上診斷：①異常的DNA檢測(cè)②產(chǎn)前篩查和產(chǎn)后檢測(cè)酶缺陷③血清和尿液氨基酸檢測(cè)血清或尿液氨基酸