




下載本文檔
版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
隨著社會(huì)的迅猛發(fā)展,科技的不斷創(chuàng)新,小小的微生物受到了高度的重視,就如杠桿的支點(diǎn),起著舉足輕重的作用。微生物蘊(yùn)藏著無(wú)限的商機(jī)。植物組織培養(yǎng)擴(kuò)繁制藥金線蓮保健品、微生物發(fā)酵工程釀酒做飲品、微生物飼料發(fā)酵劑發(fā)酵飼料養(yǎng)豬、微生物肥料發(fā)酵劑發(fā)酵園林廢棄物作有機(jī)肥、微生物做菌種原種栽培種種植杏鮑菇等等,這些都蘊(yùn)藏著無(wú)限的商機(jī),造就了成千上萬(wàn)的企業(yè),解決了許多高校大學(xué)生以及社會(huì)人士的就業(yè)。然而,菌種的制作過(guò)程是比較復(fù)雜的,需要經(jīng)過(guò)將樣品的土著微生物在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)經(jīng)過(guò)涂布法篩選等分離單一菌株(計(jì)數(shù)、提純、復(fù)壯、種子培養(yǎng)、擴(kuò)大培養(yǎng)(種子罐X各菌種按一定比例混合等一系列過(guò)程。農(nóng)戶、種植戶等可以通過(guò)簡(jiǎn)易的方法采集繁育原種、一級(jí)種就可以節(jié)省成本,而且簡(jiǎn)單易行。1:土著菌采集方法土著菌的概念:土著菌就生活在我們周?chē)淖匀画h(huán)境中,走進(jìn)闊葉樹(shù)林或竹林,在落葉且腐殖質(zhì)多地方,扒開(kāi)樹(shù)葉或雜草就可以看到細(xì)絲壯白色菌落(沒(méi)有雜菌污染的),這就是有益的土著微生物。土著微生物是多種有益微生物的混合群,土著微生物按好嫌氣性分有好氣菌、嫌氣菌;按菌種分有酵母菌、曲霉菌、放線菌、乳酸菌、芽抱菌等??梢栽诓煌募竟?jié)、不同的地點(diǎn)采集不同的菌種。采集到的原始菌種應(yīng)放在室內(nèi)陰涼、干燥處保存。土著菌采集方法:1、采集方法有三種:1) 水田土著微生物采集方法在剛收割后的水稻、玉米、高粱或大豆秸稈上有白色液體溢出。把裝好米飯并蓋宣紙的木箱倒扣在秸稈上,讓秸稈茬穿透宣紙接觸米飯,約7天后,木箱的米飯變成粉紅色稀泥狀態(tài),同①方法,米飯與紅糖以2:1比例拌勻裝壇子、蓋宣紙、系繩。5-7后內(nèi)容物變成原液(原原種)。2) 林蔭落葉區(qū)采集法在受人類(lèi)活動(dòng)影響較小的山上和溝谷喬木、灌木及竹林落葉豐富且腐殖質(zhì)較多的地方,挖一個(gè)30厘米的坑。把做的稍微有一點(diǎn)硬約八成熟的大米飯裝入瓷碗中,米飯高7厘米;用宣紙封好,用繩子系好口,置于坑內(nèi)(也有用干凈杉木板做的小木箱(25cmX20cmX10cm)約三分之一,大米飯上面蓋上宣紙,封好口),用樹(shù)葉和腐殖質(zhì)土將其埋好。為防止野生動(dòng)物糟蹋,最好罩上鐵絲網(wǎng)和遮雨用的塑料膜。夏季經(jīng)3-5天,春秋經(jīng)6-7天,周邊的土著微生物潛入到米飯中,溫度18。。左右大約放置7天左右在米飯上形成白色菌落(放置時(shí)間稍長(zhǎng)時(shí)會(huì)形成各種顏色菌落,雖然也能利用,但最
好還是用白色菌落;如發(fā)現(xiàn)有黑色的菌落,則表明有雜菌侵入,需要重新制作)。米飯就會(huì)變成液體狀態(tài),飯粒多少會(huì)有些殘留,但不礙事。將米飯與紅糖以:1比例拌勻裝壇子、蓋宣紙、系繩。放在18。的陰涼處,5-7后內(nèi)容物變成稀泥狀原液,這就是土著微生物菌種(原原種)。2、提純復(fù)壯:以下步驟適用于菌種生產(chǎn)單位實(shí)驗(yàn)室!普通用戶可以不做!有條件的可以在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。一般情況下,采來(lái)的樣品可以直接進(jìn)行分離,但是如果樣品中我們所需要的菌類(lèi)含量并不很多,而另一些微生物卻大量存在。此時(shí),為了容易分離到所需要的菌種,讓無(wú)關(guān)的微生物至少是在數(shù)量上不要增加,即設(shè)法增加所要菌種的數(shù)量,以增加分離的幾率??梢酝ㄟ^(guò)選擇性的配制培養(yǎng)基(如營(yíng)養(yǎng)成分、添加抑制劑等),選擇一定的培養(yǎng)條件(如培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基酸堿度等)來(lái)控制。具體方法是根據(jù)微生物利用碳源的特點(diǎn),可選定糖、淀粉、纖維素,或者石油等,以其中的一種為唯一碳源,那么只有利用這一碳源的微生物才能大量正常生長(zhǎng),而其他微生物就可能死亡或淘汰。對(duì)G-菌(G-桿菌是指革蘭氏陰性桿菌,G+桿菌,是革蘭氏陽(yáng)性桿菌。是一種細(xì)菌染色方法。如果檢查結(jié)果是加號(hào),說(shuō)明有感染。如果是減號(hào)就沒(méi)啥。)有選擇的培養(yǎng)基(如結(jié)晶紫營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、紅一紫膽汁瓊脂、煌綠膽汁瓊脂等)通常含有5%-10%的天然提取物。在分離細(xì)菌時(shí),培養(yǎng)基中添加濃度一般為50Mg/ml的抗真菌劑(如放線菌酮和制霉素),可以抑制真菌的生長(zhǎng)。在分離放線菌時(shí),通常于培養(yǎng)基中加入1-5ml天然浸出汁(植物、巖石、有機(jī)混合腐質(zhì)等的浸出汁)作為最初分離的促進(jìn)因子,由此可以分離出更多不同類(lèi)型的放線菌類(lèi)型;放線菌還可以十分有效地利用低濃度的底物和復(fù)雜底物(如幾丁質(zhì))。因此,大多數(shù)放線菌的分離培養(yǎng)是在貧脊或復(fù)雜底物的瓊脂平板上進(jìn)行的,而不是在含豐富營(yíng)養(yǎng)的生長(zhǎng)培養(yǎng)基上分離的;在放線菌分離瓊脂中通常加入抗真菌劑制霉菌素或放線菌酮,以抑制真菌的繁殖。此外,為了對(duì)某些特殊種類(lèi)的放線菌進(jìn)行富集和分離,可選擇性地添加一些抗生素(如新生霉素)。在分離真菌時(shí),利用低C/N比的培養(yǎng)基可使真菌生長(zhǎng)菌落分散,利于計(jì)數(shù)、分離和簽定;在分離培養(yǎng)基中加入一定的抗生素如氯霉素、四環(huán)素、卡那霉素、青霉素、鏈霉素等即可有效地抑制細(xì)菌生長(zhǎng)及其菌落形成。抑制細(xì)菌的另外一些方法有:在使用平皿之前,將平皿先干燥3-4天;降低培養(yǎng)基的pH值或在無(wú)法降低pH時(shí),加入1:30000玫瑰紅。這樣有利于下階段的純種分離。通過(guò)增殖培養(yǎng),樣品中的微生物還是處于混雜生長(zhǎng)狀態(tài)。因此還必須分離,純化。在這一步,增殖培養(yǎng)的選擇性控制條件還應(yīng)進(jìn)一步應(yīng)用,而且要控制得細(xì)一點(diǎn),好一點(diǎn)。同時(shí)必須進(jìn)行純種分離,常用的分離方法有稀釋分離法、劃線分離法和組織分離法。稀釋分離法的基本方法是將樣品進(jìn)行適當(dāng)稀釋?zhuān)缓髮⑾♂屢和坎加谂囵B(yǎng)基平板上進(jìn)行培養(yǎng),待長(zhǎng)出獨(dú)立的單個(gè)菌落,進(jìn)行挑選分離。劃線分離法要首先倒培養(yǎng)基平板,然后用接種針(接種環(huán))挑取樣品,在平板上劃線。
劃線方法可用分步劃線法或一次劃線法,無(wú)論用哪種方法,基本原則是確保培養(yǎng)出單個(gè)菌落。組織分離法主要用于食用菌菌種或某些植物病原菌的分離。分離時(shí),首先用10%漂白粉或0.1%升汞液對(duì)植物或器官組織進(jìn)行表面消毒,用無(wú)菌水洗滌數(shù)次后,移植到培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基上,于適宜溫度培養(yǎng)數(shù)天后,可見(jiàn)微生物向組織塊周?chē)鷶U(kuò)展生長(zhǎng)。經(jīng)菌落特征和細(xì)胞特征觀察確認(rèn)后,即可由菌落邊緣挑取部分菌種進(jìn)行移接斜面培養(yǎng)。對(duì)于有些微生物如毛霉、根霉等在分離時(shí),由于其菌絲的蔓延性,極易生長(zhǎng)成片,很難挑取單菌落。常在培養(yǎng)基中添加0.1%的去氧膽酸鈉或在察氏培養(yǎng)基中添加0.1%的山梨糖及0.01%的蔗糖,利于單菌落的分離。經(jīng)過(guò)分離培養(yǎng),在平板上出現(xiàn)很多單個(gè)菌落,通過(guò)菌落形態(tài)觀察,選出所需菌落,然后取菌落的一半進(jìn)行菌種鑒定,對(duì)于符合目的菌特性的菌落,可將之轉(zhuǎn)移到試管斜面純培養(yǎng)。這種從自然界中分離得到的純種稱(chēng)為野生型菌株,它只是篩選的第一步,所得菌種是否具有生產(chǎn)上的實(shí)用價(jià)值,能否作為生產(chǎn)菌株,還必須采用與生產(chǎn)相近的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,通過(guò)三角瓶的容量進(jìn)行小型發(fā)酵試驗(yàn),以求得適合于工業(yè)生產(chǎn)用菌種。這一步是采用與生產(chǎn)相近的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,通過(guò)三角瓶的容量進(jìn)行小型發(fā)酵試驗(yàn),以求得適合于工業(yè)生產(chǎn)用菌種。如果此野生型菌株產(chǎn)量偏低,達(dá)不到工業(yè)生產(chǎn)的要求,可以留之作為菌種選育的出發(fā)菌株?;钚院玫耐林梢杂糜扇斯づ囵B(yǎng)、擴(kuò)陪成純度高的微生物菌群!土著菌發(fā)酵床養(yǎng)豬技術(shù)、養(yǎng)
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 2025連鎖餐飲企業(yè)節(jié)約方案自查自糾計(jì)劃
- 2025年度中心小學(xué)健康教育控?zé)煿ぷ饔?jì)劃
- 倉(cāng)庫(kù)上半年工作總結(jié)(14篇)
- 2025年體育科技管理服務(wù)項(xiàng)目合作計(jì)劃書(shū)
- 2025年蓄熱式高溫預(yù)熱燒嘴合作協(xié)議書(shū)
- 林業(yè)土地流轉(zhuǎn)合同范本
- 電子商務(wù)培訓(xùn)課程教學(xué)方案
- 2025春八年級(jí)語(yǔ)文寫(xiě)作能力培養(yǎng)計(jì)劃
- 2025年驗(yàn)孕棒項(xiàng)目發(fā)展計(jì)劃
- 小學(xué)心理健康教育培訓(xùn)計(jì)劃2025
- 橋隧建筑物安全監(jiān)控相關(guān)知79課件講解
- 九下 化學(xué) 科學(xué) 第七單元 跨學(xué)科實(shí)踐活動(dòng):海洋資源的綜合利用與制鹽
- 預(yù)防校園欺凌安全教育課件
- 全國(guó)園地、林地、草地分等定級(jí)數(shù)據(jù)庫(kù)規(guī)范1123
- 女性的中醫(yī)養(yǎng)生保健
- 2024年 廣西壯族自治區(qū) 數(shù)學(xué) 中考真題
- 汽車(chē)行業(yè)智能汽車(chē)維修與保養(yǎng)方案
- 繩子莫泊桑課件
- 中國(guó)國(guó)家圖書(shū)獎(jiǎng)歷屆獲獎(jiǎng)書(shū)目(第1-8屆)
- 自然辯證法學(xué)習(xí)通超星期末考試答案章節(jié)答案2024年
- 2024年國(guó)家危險(xiǎn)化學(xué)品經(jīng)營(yíng)單位安全生產(chǎn)考試題庫(kù)(含答案)
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論