合成抗菌藥分析

合成抗菌藥分析第1頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三第一節(jié)喹喏酮類藥物的分析一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)R1OCOOH12345678NR2R3R4R5X第2頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三基本結(jié)構(gòu):4-喹諾酮3位COOH和4位C=O為活性必需在C6、N1、C7、C8引入不同的基團(tuán)→改變抗菌譜、抗菌活性、脂溶性、光敏反應(yīng)→形成各具特點的喹諾酮類藥物。R1OCOOH12345678NR2R3R4R5X第3頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三【發(fā)展概況與分代】

分代代表藥

第一代(1962-1969)

萘啶酸(nalidixicacid)第二代(1969-1979)

吡哌酸(pipemidicacid,PPA）第三代(1980-1996)

諾氟沙星(norfloxacin)

(氟喹諾酮類)

第四代(1997-)

莫西沙星(moxifloxacin)

(新型氟喹諾酮類)第4頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三

萘啶酸第一代喹諾酮類抗菌藥第5頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三

吡哌酸第二代喹諾酮類抗菌藥第6頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三第三代喹諾酮類抗菌藥氟喹諾酮類6位引入氟原子，7位引入哌嗪基諾氟沙星第7頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三常用氟喹諾酮類藥物諾氟沙星(norfloxacin)環(huán)丙沙星(ciprofloxacin)氧氟沙星(ofloxacin)左氧氟沙星(levofloxacin)洛美沙星(lomefloxacin)氟羅沙星(fleroxacin)司氟沙星(sparfloxacin)培氟沙星(pefloxacin)依諾沙星(enoxacin)莫西沙星(moxifloxacin)吉米沙星(gemifloxacin)加替沙星（gatifloxacin）（后三種為第四代）第8頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三理化性質(zhì)外觀性狀：類白色或淡黃色結(jié)晶溶解性：在水及乙醇中的溶解度小，在酸性和堿性水溶液有一定的溶解度。如諾氟沙星25oC時在水中的溶解度約為0.027%，乙醇中的溶解度約0.076%。成鹽后在水中溶解:如鹽酸環(huán)丙沙星在水中溶解，在甲醇中微溶，在乙醇中極微溶解，在三氯甲烷中幾乎不溶。第9頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三酸堿兩性:

含有羧基和堿性氮原子，故顯酸堿兩性，易溶于酸和堿R1OCOOH12345678NR2R3R4R5X第10頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三紫外吸收光譜特征：分子結(jié)構(gòu)中具有共軛系統(tǒng)，在紫外區(qū)有特征吸收，利用此性質(zhì)可進(jìn)行鑒別或含量測定。1.0A0.0200350l/nm諾氟沙星片紫外吸收光譜第11頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三旋光性：左氧氟沙星具有旋光性，氧氟沙星、環(huán)丙沙星等無旋光性。分解反應(yīng)：遇光照可分解，使用前后均應(yīng)注意避光。第12頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三離子絡(luò)合反應(yīng):

極易和金屬離子如鈣、鎂、鐵、鋅等形成螯合物:3,4-位羧基和羰基R1OCOOH12345678NR2R3R4R5X第13頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三二、鑒別試驗（1）與丙二酸的反應(yīng)（反應(yīng)機(jī)制尚未清楚）喹諾酮類藥物為叔胺化合物，與丙二酸在酸酐中共熱時，有棕色、紅色、紫色或藍(lán)色呈現(xiàn)。R1OCOOH12345678NR2R3R4R5X第14頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三示例:

ChP2010諾氟沙星乳膏的鑒別

【鑒別】取含量測定相下供試品溶液5ml，置水浴上蒸干，殘渣中甲丙二酸約50mg與酸酐1ml,在水浴中加熱約10分鐘，溶液顯紅棕色。第15頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三（2）紫外-可見分光光度法ChP2010利用紫外-可見分光光度法對多種喹諾酮類藥物進(jìn)行鑒別1.0A0.0200350l/nm諾氟沙星片紫外吸收光譜第16頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三示例:

ChP2010左氧氟沙星的UV鑒別

【鑒別】取供試品適量,加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含5mg的溶液,在226nm與294nm的波長處有最大吸收,在263nm的波長處有最小吸收。第17頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三（3）薄層色譜法ChP2010對氧氟沙星、諾氟沙星和氟羅沙星用本法鑒別.系統(tǒng)適用性實驗:斑點的檢測靈敏度、比移值(Rf)和分離效能。第18頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三xxx對照品供試品混合對照品第19頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三(4)高效液相色譜法含量測定項下供試品主峰應(yīng)與相應(yīng)對照品主峰的保留時間一致。對照品供試品對照品第20頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三（5）紅外光譜法

用本法鑒別藥物時，中國藥典要求按指定條件繪制供試品的紅外光吸收圖譜，與《藥品紅外光譜集》中的相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)圖譜對比，如果峰位、峰形、相對強(qiáng)度都一致時，即為同一種藥物。第21頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三諾氟沙星紅外光譜圖第22頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三2400～2100

1900～1650

1670～1500

C三C

乙炔基C＝O羰基C＝C苯環(huán)C三N

腈基1300～1000

1000～650

C-O醚＝CH苯(單取代)

酯第23頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三三、特殊雜質(zhì)檢查有關(guān)物質(zhì):工藝雜質(zhì)、降解產(chǎn)物ChP2010檢查喹諾酮類藥物有關(guān)物質(zhì)主要采用HPLC法（一般了解）第24頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三判斷：供試品溶液色譜圖中右氧氟沙星

峰面積不得大于對照溶液主峰面積(1.0%)。左氧氟沙星中的光學(xué)異構(gòu)體分離圖譜1.右氧氟沙星；2.左氧氟沙星配合交換手性流動相法第25頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三四、含量測定非水溶液滴定法紫外分光光度法高效液相色譜法第26頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三（1）非水溶液滴定法ChP2010吡哌酸的非水溶液滴定測定

【含量測定】取供試品約0.2g，精密稱定，加冰醋酸20ml溶解后，加結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯純藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于30.33mg的C14H17N5O3。第27頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三（2）紫外分光光度法ChP2010諾氟沙星乳膏含量的UV測定。【含量測定】精密稱取供試品適量(約相當(dāng)于諾氟沙星5mg)，置分液漏斗中，加三氯甲烷15ml，振搖，用氯化鈉飽和的0.1%NaOH溶液25、20、20和10ml分次提取，合并提取液，置100ml量瓶中，加0.1%NaOH溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，用0.4%NaOH溶液稀釋制成每1ml中約含5μg的溶液，在273nm波長處測定A；另取諾氟沙星對照品適量，精密稱定，加0.4%NaOH溶液溶解并定量稀釋制成每1ml約含5μg的溶液，同法測定，計算，即得。第28頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三（3）高效液相色譜法鹽酸洛美沙星含量的戊烷磺酸鈉離子對HPLC測定左氧氟沙星的高氯酸鈉離子對HPLC測定第29頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三第二節(jié)磺胺類藥物分析治療細(xì)菌感染性疾病的化學(xué)合成藥物

磺胺類藥物的發(fā)現(xiàn)，開創(chuàng)了化學(xué)治療的新紀(jì)元–使死亡率很高的細(xì)菌性傳染疾病得到控制.第30頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三(1)基本結(jié)構(gòu)——苯對氨基磺酰胺芳伯氨基磺酰胺基一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)第31頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三磺胺嘧啶（SD）嘧啶環(huán)較活潑第32頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三磺胺甲噁唑（SMZ）5-甲基異噁唑較活潑第33頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三(2)理化性質(zhì)性狀本類藥物多為白色或類白色結(jié)晶性粉末,在水中幾乎不溶,溶于鹽酸或氫氧化鈉溶液,易溶于乙醇、丙酮，具有一定的熔點。第34頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三例：磺胺嘧啶的性狀規(guī)定：磺胺嘧啶為白色或類白色結(jié)晶或粉末；無臭，無味；遇光色漸變暗。在乙醇或丙酮中微溶，在水中幾乎不溶；在氫氧化鈉試液或氨試液中易溶，在稀鹽酸中溶解。第35頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三（2）熔融變色不少磺胺類藥物以直火加熱熔融后，可呈現(xiàn)不同的顏色，產(chǎn)生不同的分解產(chǎn)物。如磺胺可顯紫藍(lán)色，磺胺嘧啶顯紅棕色等。第36頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三3.具有酸堿兩性堿性酸性pKa:7~8第37頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三4.芳伯胺基反應(yīng)重氮化-偶合反應(yīng)氧化反應(yīng)第38頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三5.磺酰氨基的反應(yīng)沉淀反應(yīng)第39頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三6

.苯環(huán)上的反應(yīng)鹵代反應(yīng)第40頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三含氮雜環(huán)具有較強(qiáng)的紫外吸收和紅外吸收特征在酸性條件下，還可與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)7.取代雜環(huán)的特性第41頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三1、金屬離子的取代反應(yīng)與硫酸銅的成鹽反應(yīng)活潑HOH-↓草綠噁磺胺嘧啶↓黃綠→↓紫色二、鑒別試驗第42頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三ChP磺胺甲噁唑與銅鹽反應(yīng)的鑒別ChP磺胺異噁唑與銅鹽反應(yīng)的鑒別第43頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三2、重氮化—偶合反應(yīng)芳伯氨基噁偶氮化合物~猩紅色橙黃色β-萘酚第44頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三ChP2010規(guī)定芳香胺類的反應(yīng)條件第45頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三3.鈉鹽反應(yīng)4.高效液相色譜法第46頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三5.紅外分光光度法磺胺類藥物具有相近的基本母核，其紅外光譜特征吸收峰特別相似紅外吸收譜圖中的特征吸收峰

γ/cm-1

3300～3500氨基

1610,1570,1480,1440苯環(huán)

1650～1600氨基

1350,1150磺?；?7頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三磺胺甲噁唑的紅外吸收圖譜第48頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三磺胺甲噁唑紅外吸收光譜鑒別本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集565圖）一致。具體操作：波數(shù)400cm-1開始，逐個查看供試品圖譜與對照圖譜吸收峰位，峰形，強(qiáng)弱，相對大小是否一致。400cm-1~2000cm-1，波數(shù)讀數(shù)誤差允許在±10cm-1

，2000cm-1~4000cm-1，波數(shù)讀數(shù)誤差允許在±20cm-1

，在400cm-1~2000cm-1

由于峰較多，所以誤差不能太大。第49頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三一般雜質(zhì)：氯化物、熾灼殘渣、重金屬。酸度溶液的澄清度與顏色三、雜質(zhì)檢查第50頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三酸度查什么？制備中的酸性中間體及副產(chǎn)物方法酸堿滴定，靈敏度法第51頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三堿性溶液的澄清度與顏色查什么？不溶于堿性溶液的雜質(zhì)和有色雜質(zhì)方法比色、比濁方法依據(jù)溶解性質(zhì)差異第52頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三2.特殊雜質(zhì)的檢查（有關(guān)物質(zhì)）TLC法（一般了解）復(fù)方磺胺甲噁唑注射液中磺胺、對氨基苯磺酸和甲氧芐啶降解產(chǎn)物的TLC檢查第53頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三四、含量測定高效液相色譜法滴定法：非水溶液滴定法、永停滴定法、沉淀滴定法第54頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三高效液相色譜法ChP復(fù)方磺胺嘧啶片含量的HPLC測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗第55頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三

ChP2010規(guī)定磺胺嘧啶鈉、磺胺嘧啶鋅、磺胺甲噁唑、磺胺多辛和磺胺醋酰鈉等原料藥和制劑、磺胺嘧啶原料藥采用永停滴定法。2.永停滴定法第56頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三【含量測定】精密稱定磺胺多辛約0.6g，置燒杯中，加水40ml與鹽酸溶液(1→2)15ml，置電磁攪拌器上，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，插入鉑-鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點時，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，至電流計指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點。每1ml亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于31.03mg的C12H14N4O4S?；前范嘈恋?7頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三3.非水溶液滴定法磺胺異噁唑原料藥及片劑的非水溶液滴定法第58頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三磺胺異噁唑片【含量測定】取磺胺異噁唑片20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于磺胺異噁唑0.5g)，加二甲基甲酰胺40ml使溶解，加偶氮紫指示液3滴，用甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液恰顯藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于26.73mg的C11H13N3O3S。第59頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三第三節(jié)體內(nèi)合成抗菌藥物分析一、水產(chǎn)品中殘留喹諾酮和磺胺類藥物的檢查（一般了解）第60頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三水產(chǎn)品中殘留喹諾酮和磺胺類藥物的檢查提取方法凈化方法第61頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三二、左氧氟沙星的血漿濃度測定第62頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三一、典型藥物的結(jié)構(gòu)二、鑒別：硫酸銅（黃綠-紫）；芳香第一胺（猩紅）三、化學(xué)性質(zhì)：酸堿兩性、取代雜環(huán)的特性四、含量測定：第63頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三具有丙二酸呈色反應(yīng)的藥物是：諾氟沙星磺胺嘧啶磺胺甲惡唑司可巴比妥鹽酸氯丙嗪第64頁，共72頁，2023年，2月20日，星期三ChP2010氧氟沙星中“有關(guān)物質(zhì)”的檢查方法是：紫外分光光度法薄層色譜法高效液