



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文檔簡介
臨床常用免疫學(xué)檢查演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有50頁\編輯于星期三優(yōu)選臨床常用免疫學(xué)檢查Ppt現(xiàn)在是2頁\一共有50頁\編輯于星期三概述:免疫學(xué)(Immunology)是研究免疫系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能,并通過對其在免疫應(yīng)答過程中所產(chǎn)生的免疫保護(hù)與免疫損傷機(jī)制的研究,探討有效的免疫措施,實(shí)現(xiàn)以防病、治病為目的的一門現(xiàn)代醫(yī)學(xué)學(xué)科。
臨床免疫學(xué)檢查常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、免疫缺陷病、腫瘤等疾病的診斷與療效監(jiān)測?,F(xiàn)在是3頁\一共有50頁\編輯于星期三一、免疫球蛋白(Ig)的檢測包括:IgG、A、M、D、E
Ig的產(chǎn)生、結(jié)構(gòu)與功能
Ig通常是指一組具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白,由漿細(xì)胞合成和分泌,有特異性識別抗原的功能,但必須與抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物后才能啟動(dòng)效應(yīng)功能?,F(xiàn)在是4頁\一共有50頁\編輯于星期三(一)IgG含量:7.0-16.6g/L,占70-80%(含量最多)特點(diǎn):再次免疫應(yīng)答抗體、具抗菌、抗病毒活性,能通過胎盤意義:感染(病毒、細(xì)菌)-多克隆↑免疫增殖病、MM-單克隆↑減低:免疫缺陷、重鏈病、輕鏈病、腎病現(xiàn)在是5頁\一共有50頁\編輯于星期三(二)IgA含量:,占10-15%特點(diǎn):分泌型(SIgA),局部粘膜抗感染功能可存在于各種分泌物中(初乳)
血清型(為單體,免疫作用弱)意義:↑IgA型MM,SLE,類風(fēng)關(guān)等↓反復(fù)呼吸道感染,非IgA免疫增殖病現(xiàn)在是6頁\一共有50頁\編輯于星期三(三)IgM含量:0.5-2.6g/L,占5-10%特點(diǎn):為五聚體,分子量最大的Ig
如天然凝集素抗A、抗B意義:早期抗體,出現(xiàn)早,消失快。
現(xiàn)在是7頁\一共有50頁\編輯于星期三(四)IgD、IgEIgD:含量低、作用不很明確測定較難,ELISA法測定IgE:含量最少,ELISA法測定為
與變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲病、皮膚過敏有關(guān)
現(xiàn)在是8頁\一共有50頁\編輯于星期三二、補(bǔ)體(Complement,C)的測定補(bǔ)體是存在血清及組織液中的一組具有酶原活性的糖蛋白,可溶解細(xì)胞,滅活病原體,清除免疫復(fù)合物1.總補(bǔ)體活性CH50測定(complementhemolysis50%)
溶血素(抗體)致敏綿羊紅細(xì)胞補(bǔ)體溶血溶血程度與補(bǔ)體正相關(guān),為S形曲線。正常參考值:50-100kU/L
意義:減低常見于各種免疫復(fù)合物性疾病溶血程度與補(bǔ)體含量的關(guān)系現(xiàn)在是9頁\一共有50頁\編輯于星期三2.補(bǔ)體C3與C4測定補(bǔ)體系統(tǒng)有C1、C2、……C9及其它成分組成C3含量最高,是傳統(tǒng)和旁路途徑激活的關(guān)鍵含量
補(bǔ)體測定的意義:↑:炎癥、腫瘤等↓:腎炎、自身免疫病等現(xiàn)在是10頁\一共有50頁\編輯于星期三三、細(xì)胞免疫的測定T細(xì)胞亞群的檢測
1.E玫瑰花結(jié)形成試驗(yàn)(ERFT):檢測T細(xì)胞數(shù)量原理:T細(xì)胞表面具SRBC受體正常58-72%左右意義:↑見于自身免疫性疾病及器官移植排斥反應(yīng)等↓見于免疫缺陷性疾病等。
2.淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(LCT):檢測T細(xì)胞的生物學(xué)功能原理:淋TPHA淋母細(xì)胞意義:轉(zhuǎn)化率降低,見于細(xì)胞免疫缺陷或細(xì)胞免疫功能低下患者。現(xiàn)在是11頁\一共有50頁\編輯于星期三
淋巴細(xì)胞亞群的分化抗原測定
(clusterdifferentiationCD)
﹡T細(xì)胞:CD3-總T標(biāo)志
CD4-TH標(biāo)志(helpTcell)CD8-Ts標(biāo)志(suppressorTcell)
CD4/CD8:TH/Ts,降低常見于AIDS。
﹡
B細(xì)胞:CD19、CD20、CD22等三、細(xì)胞免疫的測定現(xiàn)在是12頁\一共有50頁\編輯于星期三
細(xì)胞因子(Cytokine,CK)測定-活化的免疫細(xì)胞分泌產(chǎn)生的免疫調(diào)節(jié)性小分子多肽。
1.白介素2(IL-2)和IL-2R:白細(xì)胞介素(IL)多種細(xì)胞產(chǎn)生的能介導(dǎo)免疫細(xì)胞間的相互作用。IL-2是由活化T細(xì)胞產(chǎn)生,具有多向性作用的細(xì)胞因子
2.腫瘤壞死因子(TNF):引起腫瘤組織出血、壞死和殺傷作用。
3.干擾素(IFN):抗病毒、抗腫瘤作用三、細(xì)胞免疫的測定現(xiàn)在是13頁\一共有50頁\編輯于星期三四、腫瘤標(biāo)志物檢測
腫瘤標(biāo)志物(tumormarker)是指在腫瘤發(fā)生和增殖過程中,由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放或者是由機(jī)體對腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)。包括蛋白質(zhì)類、糖類和酶類腫瘤標(biāo)志物。腫瘤標(biāo)志物檢測的意義是:高危人群的篩查、輔助診斷、觀察療效和腫瘤復(fù)發(fā)檢測以及判斷預(yù)后?,F(xiàn)在是14頁\一共有50頁\編輯于星期三
腫瘤標(biāo)志物介紹以下6種甲胎蛋白(AFP)癌胚抗原(CEA)
前列腺特異抗原(PSA)糖鏈抗原199(
CA199)
癌抗原125(CA125)癌抗原15-3(CA15-3)
現(xiàn)在是15頁\一共有50頁\編輯于星期三1.甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)--AFP是胎兒發(fā)育早期合成的一種糖蛋白(α1球蛋白),分子量70kD,胎兒出生后不久即逐漸消失。
[參考值]:血清<25μg/L
(一)、蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物檢測:現(xiàn)在是16頁\一共有50頁\編輯于星期三AFP[臨床意義]:①原發(fā)性肝癌:特異--原發(fā)性肝細(xì)胞癌顯著增高
50%的患者AFP>300μg/L,但有部分患者AFP始終不升高;②病毒性肝炎與肝硬化患者,血清中AFP可有不同程度的增高,但一般在300μg/L以下;③生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤,如睪丸癌、畸胎瘤等升高;④妊娠三個(gè)月后,血清AFP含量開始升高,分娩后三周恢復(fù)正常。若孕婦血清中AFP異常升高,應(yīng)考慮有胎兒神經(jīng)管缺損畸形的可能性?,F(xiàn)在是17頁\一共有50頁\編輯于星期三[參考值]:血清<5.0μg/L[臨床意義]:①結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌,轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤也有不同程度的陽性率;在惡性腫瘤的隨訪,病情監(jiān)測,療效評價(jià)等方面有重要價(jià)值。②腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺部疾病也可有不同程度的升高;③吸煙者中有部分人CEA>5μg/L。2.癌胚抗原(carcino-embryonicantigen,CEA)現(xiàn)在是18頁\一共有50頁\編輯于星期三3.前列腺特異抗原(PSA)PSA是一種由前列腺上皮細(xì)胞分泌的單鏈糖蛋白。在血清中PSA以兩種生化形式存在:一部分(20%)是以低分子量(33kD)的游離PSA(f-PSA)形式存在;大部分(80%)是以PSA和α1–抗糜蛋白酶、
α2-巨球蛋白等結(jié)合的形式存在,稱復(fù)合PSA(c-PSA)??侾SA(t-PSA),包括血清中f-PSA和c-PSA。
參考值:血清t-PSA<4.0μg/L,
f-PSA<0.8μg/L,
f-PSA/t-PSA>0.25現(xiàn)在是19頁\一共有50頁\編輯于星期三PSA[臨床意義]血清PSA升高①前列腺癌患者升高,但大約25%患者,其PSA水平正常;而大約有50%的良性前列腺疾病患者PSA水平增高。為增加PSA對前列腺癌檢測的敏感性和特異性,可使用PSA年齡特異性參考范圍,PSA密度、PSA速率、f-PSA/t-PSA比值等;②前列腺肥大,前列腺炎和泌尿生殖系統(tǒng)的疾病,也可見血清PSA水平升高,故當(dāng)PSA在4.0μg/L~10.0μg/L的灰區(qū)時(shí),須進(jìn)行f-PSA和f-PSA/t-PSA比值的測定?!咀⒁馐马?xiàng)】在采集病人的血標(biāo)本前進(jìn)行直腸指診、前列腺按摩,導(dǎo)尿等,將會(huì)導(dǎo)致血清PSA升高,應(yīng)注意避免?,F(xiàn)在是20頁\一共有50頁\編輯于星期三(二)、糖脂類腫瘤標(biāo)志物檢測:(1)糖鏈抗原19-9(CA19-9)
(3)糖鏈抗原15-3(CA15-3)
(2)糖鏈抗原125(CA125)現(xiàn)在是21頁\一共有50頁\編輯于星期三(1)糖鏈抗原19-9(CA19-9)CA19-9是一種與胰腺癌,膽囊癌,結(jié)腸癌和胃癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物,又稱胃腸癌相關(guān)抗原。參考值:血清CA199<37kU/L①胰腺癌——首選指標(biāo),血清CA19-9水平明顯升高,尤其是胰腺癌晚期病人,血清CA19-9濃度可達(dá)40萬kU/L,是重要的輔助診斷指標(biāo);②膽囊癌、膽管壺腹癌、胃癌、結(jié)腸癌時(shí),血清CA19-9水平明顯升高。膽囊癌、膽管壺腹癌陽性率約為85%,胃癌、結(jié)腸癌陽性率約為40%;③急性胰腺炎,膽囊炎,膽汁淤積性膽管炎,肝硬化,肝炎等疾病,CA19-9也有不同程度的升高,注意與惡性腫瘤的鑒別?,F(xiàn)在是22頁\一共有50頁\編輯于星期三
(2)糖鏈抗原125(CA125)CA125是一種糖蛋白性腫瘤相關(guān)抗原,存在于卵巢腫瘤的上皮細(xì)胞內(nèi),對診斷卵巢癌有較大臨床價(jià)值。參考值:血清CA125<35kU/L①卵巢癌,陽性率可達(dá)50~90%。手術(shù)和化療有效者CA125水平很快下降,若有復(fù)發(fā),CA125升高可先于臨床癥狀出現(xiàn)之前。②其他惡性腫瘤,如乳腺癌、胰腺癌、胃癌47%、肺癌、結(jié)腸直腸癌、其他婦科腫瘤等也有一定的陽性反應(yīng)。③非惡性腫瘤,如子宮內(nèi)膜異位癥,盆腔炎,卵巢囊腫,胰腺炎,肝炎,肝硬化等疾病也有不同程度升高。④妊娠早期,CA125有升高?,F(xiàn)在是23頁\一共有50頁\編輯于星期三(3)糖鏈抗原15-3(CA15-3)
CA15-3是一種乳腺癌相關(guān)抗原,屬糖蛋白,分子量超過400kD,對乳腺癌有重要的輔助診斷作用。參考值:血清CA15-3<25kU/L①乳腺癌,但在乳腺癌的早期陽性率較低約為30%,轉(zhuǎn)移性乳腺癌陽性率可達(dá)80%;②其他惡性腫瘤,如肺癌,結(jié)腸癌,胰腺癌,卵巢癌,子宮頸癌,原發(fā)性肝癌等,也有不同程度的陽性率;③肝臟,胃腸道,肺,乳腺,卵巢等非惡性腫瘤疾病,陽性率一般低于10%。現(xiàn)在是24頁\一共有50頁\編輯于星期三(三)、腫瘤標(biāo)志物的選擇選擇特異性的腫瘤標(biāo)志物或最佳組合動(dòng)態(tài)檢測現(xiàn)在是25頁\一共有50頁\編輯于星期三常用腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測的臨床應(yīng)用
腫瘤首選標(biāo)志物補(bǔ)充標(biāo)志物肺癌NSE、CYFRA21-1CEA、TPA、SCC、ACTH、降鈣素肝癌AFPAFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌CA15-3、CA549CEA、hCG、降鈣素、鐵蛋白胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA50前列腺癌PSAf-PSA、c-PSA、PAP結(jié)腸直腸癌CEACA19-9、CA50胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125卵巢癌CA125CEA、hCG、CA72-4睪丸腫瘤AFP、hCG宮頸癌SCCCEA、CA125、TPA膀胱癌無TPA、CEA骨髓瘤β2-M、本周蛋白現(xiàn)在是26頁\一共有50頁\編輯于星期三五、自身抗體檢測--自身免疫病是指免疫系統(tǒng)對自身成分的免疫耐受性減低或破壞,產(chǎn)生自身抗體損傷含有相應(yīng)自身抗原的組織器官而造成的疾病?,F(xiàn)在是27頁\一共有50頁\編輯于星期三
--是變性IgG刺激機(jī)體產(chǎn)生的一種自身抗體,主要存在于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清和關(guān)節(jié)液中。主要為IgM型。
[臨床意義]:類風(fēng)濕性疾病時(shí),RF↑,陽性率達(dá)70-90%;其他自身免疫性疾病,RF亦↑
(一)類風(fēng)濕因子
(rheumatoidfactor,RF)現(xiàn)在是28頁\一共有50頁\編輯于星期三1.ANA(antinuclearantibody):指抗各種細(xì)胞核成分的自身抗體,是血清中存在的一類和自身組織細(xì)胞的細(xì)胞核發(fā)生反應(yīng)的自身抗體的總稱。無器官和種屬特異性
[臨床意義]:SLE(未治療的),陽性率達(dá)80%一100%,亦可見于其他自身免疫性疾病。
(二)抗核抗體檢測現(xiàn)在是29頁\一共有50頁\編輯于星期三抗核抗體檢測方法:
間接免疫熒光法(IIF)均質(zhì)型核膜型顆粒型核點(diǎn)型抗著絲點(diǎn)型現(xiàn)在是30頁\一共有50頁\編輯于星期三
ENA抗體譜-包括抗Sm、抗核糖體、抗ScL70、抗Jo-1、抗SSB、抗SSA和抗nRNP等的抗體。
[臨床意義]
抗Sm抗體:SLE的特異性標(biāo)志之一,抗dsDNA和抗Sm抗體同時(shí)檢測,可提高SLE的診斷率。
抗SSA、SSB抗體--干燥綜合征抗nRNP抗體--混合性結(jié)締組織病
2.可提取性核抗原(ENA)抗體譜的檢測現(xiàn)在是31頁\一共有50頁\編輯于星期三2.抗雙鏈DNA(doublestranded-DNA,ds-DNA)抗體抗dsDNA抗體靶抗原是細(xì)胞核中DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)。抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗體。其抗體滴度與疾病的活動(dòng)程度有相關(guān)性,抗體滴度的動(dòng)態(tài)測定為監(jiān)控治療提供了有效的實(shí)驗(yàn)室手段。抗dsDNA抗體診斷SLE的特異性可達(dá)95%~100%,但其敏感性僅為30%~50%,因此抗dsDNA抗體陰性不能排除SLE的診斷?,F(xiàn)在是32頁\一共有50頁\編輯于星期三
抗dsDNA抗體SLE特異性抗體,與病情活動(dòng)度相關(guān)?,F(xiàn)在是33頁\一共有50頁\編輯于星期三六、感染的免疫學(xué)檢查(434)(一)、抗鏈球菌溶血素“O”抗體(ASO)測定
A群溶血性鏈球菌意義:風(fēng)濕、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性心臟病、急性腎小球腎炎時(shí)↑
現(xiàn)在是34頁\一共有50頁\編輯于星期三
是利用傷寒和副傷寒沙門菌菌液為抗原,檢測病人血清中有無相應(yīng)抗體的一種凝集試驗(yàn)。傷寒第三周后陽性率達(dá)80%,初期陰性[參考值]:H<1:160,O<1:80,副傷寒甲、乙、丙<1:80[臨床意義]:①O、H均升高:傷寒②O不高、H升高:預(yù)防接種或回憶性反應(yīng)③O升高、H不高:感染早期或交叉反應(yīng)(二)、肥達(dá)氏反應(yīng)現(xiàn)在是35頁\一共有50頁\編輯于星期三七、病毒性肝炎檢測(P452)(一)甲型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(二)乙型肝炎病毒病毒標(biāo)志物檢測(三)丙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(四)丁型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(五)戊型肝炎病毒標(biāo)志物檢測現(xiàn)在是36頁\一共有50頁\編輯于星期三(一)甲型肝炎病毒標(biāo)志物檢測
免疫學(xué)檢測
特異性抗體檢測
IgM抗體
IgG抗體
HAV抗原檢測
病原學(xué)檢測
病毒分離
RT-PCR現(xiàn)在是37頁\一共有50頁\編輯于星期三現(xiàn)在是38頁\一共有50頁\編輯于星期三(二)乙型肝炎病毒病毒標(biāo)志物檢測乙型肝炎表面抗原(HBsAg)乙肝病毒前S1抗原抗乙肝病毒前S1抗體乙肝病毒前S2抗原抗乙肝病毒前S2抗體乙型肝炎核心抗原(HBcAg)乙肝核心抗體-IgM乙肝核心抗體-IgG乙型肝炎表面抗體(抗-HBs)乙型肝炎e抗原(HBeAg)乙型肝炎e抗體(抗-HBe)現(xiàn)在是39頁\一共有50頁\編輯于星期三1.最常用的檢測項(xiàng)目兩對半測定方法:ELISA、放射免疫法(RIA)、發(fā)光免疫法
(二)乙型肝炎病毒病毒標(biāo)志物檢測現(xiàn)在是40頁\一共有50頁\編輯于星期三2.乙肝DNA定量PCR檢測:病毒復(fù)制的指標(biāo)
(1)乙型肝炎的診斷:急性HBV感染的診斷提供直接證據(jù)(2)抗病毒治療方法及療效評價(jià):拉米夫定(賀普?。⒏蓴_素治療效果的主要指標(biāo)。
(3)分泌物傳染性判斷(乳汁等)(二)乙型肝炎病毒病毒標(biāo)志物檢測陰性:
〈最低檢測靈敏度拷貝/ml(如:〈500拷貝/ml)陽性:具體數(shù)據(jù)拷貝/ml(如:5.0E+6拷貝/ml)參考值:〈最低檢測靈敏度拷貝/ml結(jié)果的報(bào)告現(xiàn)在是41頁\一共有50頁\編輯于星期三(三)丙型肝炎病毒感染分子生物學(xué)檢測RT-PCR:有助于早期診斷免疫學(xué)檢測
特異性抗體檢測
抗HCV-IgM抗體抗HCV-IgG抗體
現(xiàn)在是42頁\一共有50頁\編輯于星期三(四)丁型肝炎病毒感染(五)戊型肝炎病毒感染HDV為缺陷病毒,需有HBV的存在方能復(fù)制和傳播實(shí)驗(yàn)室檢查
病毒分離免疫學(xué)檢查分子生物學(xué)檢測現(xiàn)在是43頁\一共有50頁\編輯于星期三ThankYouforYourAttention謝謝現(xiàn)在是44頁\一共有50頁\編輯于星期三
兩對半:HBsAg(表面抗原):存在于Dane顆粒的表面的糖蛋白。判斷HBV感染的指標(biāo)之一
???HBs(表面抗體):是一種保護(hù)性抗體。是機(jī)體感染或接種乙肝疫苗的標(biāo)志。HBeAg(e抗原):其陽性是乙型肝炎的重要標(biāo)志,病情活動(dòng)性較強(qiáng),傳染性較大。抗-HBe(e抗體):抗-HBe的出現(xiàn)意味著大部分HBV被消除,復(fù)制減少,傳染性降低???HBc(核心抗體):陽性者代表正在感染或以往感染過乙肝病毒?,F(xiàn)在是45頁\一共有50頁\編輯于星期三HBcAg(核心抗原):
是乙肝病毒存在的直接標(biāo)志,與HBV復(fù)制呈正相關(guān)。存在于肝細(xì)胞內(nèi),血中檢測不出。當(dāng)肝細(xì)胞破壞,HBcAg釋放出來,被酶水解成HBeAg,所以HBeAg提示肝細(xì)胞損傷.HBeAg陽性標(biāo)志著較強(qiáng)的感染和傳染性現(xiàn)在是46頁\一共有50頁\編輯于星期三9種常見模式
1-----
過去和現(xiàn)在未感染過HBV。
2----+(1)既往感染未能測出抗-HBs;(2)恢復(fù)期HBsAg已消,抗-HBs尚未出現(xiàn);
3---++(1)既往感染過HBV
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