活血熄風方對局灶性腦缺血大鼠血管內(nèi)皮生長因子mRNA表達的影響

可編輯精品文檔活血熄風方對局灶性腦缺血大鼠血管內(nèi)皮生積及腦組織中血管內(nèi)皮生長因子(VEGFmRNA)表達的影響。方法鏈式反應(RT-PCR)法測VEGFmRNA表達。結(jié)果與模型組比較，活血熄風方各劑量組的腦梗塞體積明顯減少(P＜0.01)，VEGFmRNA鼠腦梗塞體積，具有腦保護作用，其作用機制可能與增強VEGFmRNA可編輯精品文檔expressionofVEGFmRNA.心區(qū)細胞迅速死氧、低灌注狀態(tài)，及時恢復該區(qū)域血流供。而半暗區(qū)血流的恢復有賴于側(cè)枝循環(huán)的細胞存活的關(guān)鍵因素，與缺血性腦卒中病人的預后關(guān)系密切[1]。在血管再生過程中，眾多因子參與調(diào)節(jié)，血最強和特異性最高的促血管生長因子[2]，在血管生成和神經(jīng)保護方可編輯精品文檔淤為主，通過活血化淤以求逐淤熄風，經(jīng)滿意，已有實驗證實活血熄風方具有腦保護作用[4]。本實驗用TTC染色法觀察光化學法誘導的局灶性腦缺血大鼠腦梗塞體積大小，采用RT-PCR技術(shù)觀察VEGFmRNA的表達以及活血熄風生產(chǎn)，每片20mg，使用前用蒸餾水可編輯精品文檔PCRICYCLERBIORAD司)；DXY-22000型，美國BIO-RAD公司)；低溫高速離心機(Sigma3k30，德國Sigma公司)；紫外分光光度儀(UV-1601型，日本島津)；立體定位熄風方中劑量組、活血熄風低劑量組、尼莫手術(shù)組股靜脈注射藥物為生理鹽水，其余操導制備可編輯精品文檔mm的骨窗，去除顱骨表層骨板，保留下層骨2.4.1總RNA的提取用Trizol常規(guī)方法提取大腦皮層總RNA光度計260／280nm測RNA濃度，1％甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳鑒定RNA質(zhì)量?？删庉嬀肺臋n合成cDNA。VEGFmRNA和內(nèi)參照酸性核糖體磷蛋白P0(Acidic成。引物序列如下：VEGF：5-TGGACCCTGGCTTTACTGCTG-3(上游)，5-GGCAATAGCTGCGCTGGTAGA-3(下游)，擴增片段為127bp；Arbp：5-GCGTCTGTCTGCAGATTGGCTA-3'(上游)，5-CAGATGGATCGGCCAGGAA-3(下游)，擴增片段為150bp。采用行光密度掃描，測定各組PCR產(chǎn)物密度值與內(nèi)參照ArbpPCR產(chǎn)物可編輯精品文檔明造模成功?；钛L方各劑量組及尼的影響(略)3.2活血熄風方對局灶性腦缺血大鼠腦組織VEGFmRNA表達的影響與假手術(shù)組比較，模型組VEGFmRNA表達有所升高(P上調(diào)腦組織VEGFmRNA的表達(P＜0.01)，且活血熄風方各劑量組VEGFmRNA表達相對含量均明顯高于尼莫地平對照組(P＜0.01)。見表2，圖2。表2對局灶性腦缺血大鼠腦梗塞邊緣區(qū)VEGFmRNA表達的影響(略)可編輯精品文檔腦血管疾病的研究中人們注意到，VEGF及其受體的促血供的改善和側(cè)枝循環(huán)的建立具有重要意透性等生物學特性。腦缺血后，低氧可激活VEGF及其受組織的血流灌注和供氧量，減少神經(jīng)元的凋亡和死亡，減輕腦損傷程度[6]。發(fā)揮生物活性的主要受體[7]，VEGF與其受體結(jié)合后在血管生成和神經(jīng)保護方面發(fā)揮著重要作用[8]。當腦缺血時，VEGF表達增強，F(xiàn)lkl9]采用原位雜交方法，結(jié)果顯示，VEGFmRNA主要在缺血半暗區(qū)神經(jīng)元表達，同時在膠質(zhì)細能夠促進血管發(fā)生。目前的治療性血管新生方法中最常用的是外源性促血管生成生長因子的基因治療與重組蛋白質(zhì)治可編輯精品文檔血去則新血生，稱之“祛淤生，生新又反過來促進淤血的祛除，這與治療性VEGF已知作用最強和特異性最高的促血管。TTC組相比，光化學法誘導的局灶性腦缺血模型大鼠大腦皮層出現(xiàn)明顯的梗塞灶(P＜0.01)，同時發(fā)現(xiàn)梗塞區(qū)周圍腦組織VEGFmRNA表達有所升高(P＜0.01)。而與模型組相比，活血熄風方各劑量組能明顯減少梗塞灶體積(P＜0.01)，同時明顯上調(diào)VEGFmRNA的表達(P＜0.01)，且明顯優(yōu)于尼莫地平對照組(P＜0.01)。灶性腦缺血大鼠腦梗塞體積的影響，從基因水平上觀察了對腦組織VEGFmRNA表達的影響。本實驗結(jié)果顯示，活血熄風方可以明顯縮與增強局灶性腦缺血大鼠梗塞周圍腦組織VEGFmRNA表達，從而促進缺血半暗帶區(qū)的血管新生有關(guān)?？删庉嬀肺臋n[2]金惠銘,李先濤.血管新生的調(diào)控[J].中國微循環(huán)雜[4]高紅莉，劉昭純．活血熄風方