動物實驗與血清學(xué)試驗演示文稿

動物實驗與血清學(xué)試驗演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有29頁\編輯于星期四優(yōu)選動物實驗與血清學(xué)試驗現(xiàn)在是2頁\一共有29頁\編輯于星期四進行實驗操作前必須注意的事情1.實驗動物作為人類的替難者進行各種生物醫(yī)學(xué)研究。試驗中要從動物福利和動物實驗倫理學(xué)考慮，減少一些不必要的動物實驗，如若不得不做的動物實驗，要盡可能將動物的痛苦、壓迫和不適降到最低。2.動物實驗的實踐性非常強，不能僅靠書本理論知識，需要通過反復(fù)實踐加以掌握，以保證實驗的順利進行和減少動物承受的痛苦現(xiàn)在是3頁\一共有29頁\編輯于星期四國際上對動物實驗倫理有如下五項要求:

⑴動物居住空間應(yīng)符合標準,注意日常的飼育管理,不使動物饑餓、缺水和患病。⑵盡可能地采用代替法最少地使用和犧牲動物。⑶使用犬、貓和猴時，實驗前應(yīng)進行訓(xùn)練，盡可能地減少動物的恐懼和不安。⑷實驗結(jié)束和動物不可能恢復(fù)時，應(yīng)采取安樂死。⑸要愛護試驗動物和對由于實驗死亡的動物應(yīng)持有憐憫和感謝之情?，F(xiàn)在是4頁\一共有29頁\編輯于星期四一、動物的抓取現(xiàn)在是5頁\一共有29頁\編輯于星期四動物的抓取

小白鼠的捉持

捉拿時可先用右手抓住并提起鼠尾，置于實驗臺或鼠籠上，并稍向后拉；用左手的拇指和食指抓住小鼠兩耳后頸背部的皮膚，將鼠置于左手心中，拉直后肢，以無名指及小指按住鼠尾或小鼠的左后肢即可。小鼠抓取方法現(xiàn)在是6頁\一共有29頁\編輯于星期四

大白鼠的捉持

大白鼠的捉拿時，可戴上手套。實驗者可用右手捉住鼠尾，放在實驗臺或鼠籠上，并稍向后拉；左手掌面向鼠背，食指和中指壓住鼠的頭頂，拇指和無名指分別從鼠的兩腋下插入，將鼠的兩前肢卡住；或拽緊鼠后頸及后背皮膚即可。大鼠抓取方法動物的抓取現(xiàn)在是7頁\一共有29頁\編輯于星期四豚鼠的捉拿、固定

豚鼠膽小易驚，抓取時必須穩(wěn)、準、迅速。先用手掌扣住鼠背，抓住其肩胛上方，將手張開，用手指環(huán)握頸部，另一只手托住其臀部，即可輕輕提起、固定。豚鼠抓取方法動物的抓取現(xiàn)在是8頁\一共有29頁\編輯于星期四家兔的捉持

用一手抓住家兔頸背部皮膚，將兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿勢。犬抓取注意點

不要輕易使用長柄鐵鉗，鉗傷造成的傷害會使它對你更加恐懼，影響以后實驗的進行。抓取后用繩子將嘴綁住。狗嘴的捆綁方法家兔的抓取

動物的抓取現(xiàn)在是9頁\一共有29頁\編輯于星期四二、實驗動物的麻醉方法現(xiàn)在是10頁\一共有29頁\編輯于星期四實驗動物的麻醉方法對實驗動物進行麻醉的目的是：消除實驗過程中引起的痛苦和不適，確保實驗動物的安全和動物實驗的順利進行，是動物實驗倫理的一個重要方面。應(yīng)結(jié)合實驗?zāi)康摹嶒瀯游锓N類、日齡及健康狀況等因素進行綜合考慮，決定選用的麻醉劑和麻醉方法。麻醉方法有全身麻醉和局部麻醉兩種。在實驗動物的麻醉中絕大多數(shù)采用全身麻醉?，F(xiàn)在是11頁\一共有29頁\編輯于星期四吸入麻醉法：用揮發(fā)性麻醉藥。常用麻醉藥：乙醚氯仿全身麻醉注射麻醉法：用非揮發(fā)性麻醉藥。常用麻醉藥：戊巴比妥鈉硫噴妥鈉氯氨酮烏拉坦實驗動物的麻醉方法現(xiàn)在是12頁\一共有29頁\編輯于星期四常用非揮發(fā)性麻醉藥的劑量

藥物及常用的溶液濃度劑量（mg/kg)麻醉持續(xù)時間與特點小鼠大鼠豚鼠家兔烏拉坦（20～25%）1000～1500（ip）1000～1500（ip）1000～1500（ip）1000～1200（iv）2～4小時。對呼吸和神經(jīng)影響小，但可降低血壓1000～1500（ip）戊巴比妥鈉（1～4％）45～50（ip）40～50（ip）40～50（ip）30～40（ip）2～4小時。注射后作用迅速，一般最常用，肌松不夠完全。20～25（iv）硫噴妥鈉（2～4％）30～40（iv）約半小時。實驗動物的麻醉方法現(xiàn)在是13頁\一共有29頁\編輯于星期四實驗動物麻醉應(yīng)注意的事項麻醉之前應(yīng)禁食，準確稱量動物體重，作為計算麻醉劑用量的依據(jù)。應(yīng)注意不同麻醉藥對動物的作用是不同的，如戊巴比妥鈉、硫賁妥鈉等能抑制心肌收縮力，使肌肉松弛，而氯胺酮則相反。大動物犬、猴、羊等麻醉前半小時應(yīng)注射麻醉前給藥如阿托品和苯巴比妥鈉。靜脈注射麻醉藥是必須緩慢，邊注射邊觀察動物。在麻醉過程中密切觀察動物的反應(yīng)，動物在麻醉期間體溫下降，應(yīng)注意保溫。實驗動物的麻醉方法現(xiàn)在是14頁\一共有29頁\編輯于星期四三、實驗動物血液的采集方法現(xiàn)在是15頁\一共有29頁\編輯于星期四實驗動物血液的采集方法1、大鼠、小鼠的采血方法

尾部采血眼眶后靜脈叢采血頸(股)靜脈或頸(股)動脈采血摘眼球采血斷頭采血心臟采血尾部采血心臟采血現(xiàn)在是16頁\一共有29頁\編輯于星期四大小鼠不同采血方法的比較采血方法采血量（ml）應(yīng)用小鼠大鼠斷頭采血法0.2-1.01.5-5.0大批動物集中處死采血，速度快摘眼球采血法0.2-1.51.0-8.0大批動物集中采血，若一次少量采,可反復(fù)幾次尾靜脈切割采血法0.01-0.050.1-0.5用于用血量少的檢驗，如血常規(guī)，能長時期反復(fù)多次采血眼眶后靜脈采血法0.02-0.10.2-1.0能反復(fù)多次采血腋窩動靜脈采血法0.5-1.51.0-5.0需處死動物，麻醉后采血心臟采血法-0.2-1.0腹主動脈采血法-5.0-10.0需處死動物，麻醉后采血現(xiàn)在是17頁\一共有29頁\編輯于星期四2、豚鼠采血方法耳緣切口采血背中足靜脈采血心臟采血

3、兔的采血方法耳緣靜脈采血耳中央動脈采血頸靜脈采血頸動脈采血心臟采血實驗動物血液的采集方法現(xiàn)在是18頁\一共有29頁\編輯于星期四4、犬的采血方法

后肢外側(cè)小隱靜脈采血前肢背側(cè)皮下頭靜脈采血頸靜脈采血股動脈采血前肢靜脈采血后肢小隱靜脈采血實驗動物血液的采集方法現(xiàn)在是19頁\一共有29頁\編輯于星期四

各種實驗動物活體安全采血量和致死采血量動物種類最大安全采血量（ml）最小致死采血量（ml）小鼠0.30.5大鼠25豚鼠510兔1040犬50300猴1560實驗動物血液的采集方法現(xiàn)在是20頁\一共有29頁\編輯于星期四四、動物各種體液的采集方法現(xiàn)在是21頁\一共有29頁\編輯于星期四動物各種體液的采集方法1、尿液的采集方法

常用的采集方法較多，一般在實驗前需給動物灌服一定量的水。代謝籠法（適用于大、小鼠）導(dǎo)尿法（常用于雄性兔、狗）壓迫膀胱法（適用于兔、狗等較大動物）

輸尿管插管法膀胱插管法膀胱穿刺法剖腹采尿法反射排尿法現(xiàn)在是22頁\一共有29頁\編輯于星期四2、消化液的采集

唾液（直接抽取法；制造腮腺瘺法）

胃液（直接收集胃液法；制備胃瘺法）

胰液和膽汁（通過對胰總管和膽總管的插管而獲得）3、腦脊液的采集

狗、兔腦脊液的采集通常采取脊髓穿刺法大鼠腦脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法4、其他體液的采集胸水的采集腹水的采集骨髓的采集精液的采集陰道內(nèi)液體的采集

動物各種體液的采集方法現(xiàn)在是23頁\一共有29頁\編輯于星期四五、實驗動物的處死方法現(xiàn)在是24頁\一共有29頁\編輯于星期四實驗動物的處死方法安死術(shù)的概念

“安死術(shù)”是指以人道的方法處死動物的過程。在處死動物過程中減少動物的驚恐或焦慮，安靜地、無痛苦地死亡?，F(xiàn)在是25頁\一共有29頁\編輯于星期四1、大鼠小鼠處死方法頸椎脫臼法急性失血法麻醉致死法斷頭法擊打法實驗動物的處死方法現(xiàn)在是26頁\一共有29頁\編輯于星期四2、犬、兔、豚鼠處死方法空氣栓塞法優(yōu)點：方法簡單、迅速，缺點：動物死于急性循環(huán)衰竭，各臟器凝血十分明顯。急性失血法先行麻醉，再分離頸動脈或股動脈，將一根較粗的塑料管插入動脈內(nèi)放血。動物在3～5min內(nèi)即可死亡。優(yōu)點：動物十分安靜，對臟器無損傷，對活殺采集病理切片標本是一種比較好的方法?；瘜W(xué)藥物致死法通過注射一定量的化學(xué)藥物而使動物迅速致死。