Waters e2695型高效液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序終稿

華潤(rùn)三九醫(yī)藥股份有限公司第5頁(yè)/總NUMPAGES6頁(yè)第PAGE１頁(yè)/總NUMPAGES5頁(yè)標(biāo)題Waterse2695型高效液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序起草日期頒發(fā)部門(mén)：研發(fā)事業(yè)部頁(yè)數(shù)審核日期分發(fā)部門(mén)：QA審核日期批準(zhǔn)日期生效日期變更記載：原文件號(hào)批準(zhǔn)日期生效日期變更原因及目的：文件系統(tǒng)修訂。1目的：Waterse2695型高效液相色譜儀的一般標(biāo)準(zhǔn)操作程序。2范圍：Waterse2695型高效液相色譜儀。3責(zé)任人：相關(guān)實(shí)驗(yàn)人員4設(shè)備部件及名稱4.1Waterse2695分離單元．4.22998型二極管陣列檢測(cè)器．4.3Empower色譜工作站．各部件可獨(dú)立操作或通過(guò)色譜工作站控制，色譜數(shù)據(jù)處理由色譜工作站完成，其操作系統(tǒng)為WindowsXPProfesionalSP3，工作站軟件為色譜管理軟件。5標(biāo)準(zhǔn)操作程序5.1 開(kāi)機(jī)前準(zhǔn)備5.1.1檢查桌面是否清潔、整齊。5.1.2檢查設(shè)備是否清潔，連接管線是否正常，色譜柱是否需要更換。5.1.3檢查電源線有無(wú)破損。5.1.4接通電源，檢查插座上各插孔的指示燈是否顯示正常。5.1.5準(zhǔn)備好超聲過(guò)的流動(dòng)相和流路沖洗溶劑。流動(dòng)相和純水應(yīng)用微孔濾膜過(guò)濾（純有機(jī)相或含一定比便例有機(jī)相的用有機(jī)系的濾膜，水相或緩沖鹽的用水系濾膜）。一次制得的純水或緩沖鹽流動(dòng)相應(yīng)在連續(xù)24小時(shí)內(nèi)使用完，如未使用完也應(yīng)棄去不用，并重新配制新鮮的流動(dòng)相。如需使用，應(yīng)重新過(guò)濾。流動(dòng)相的pH值應(yīng)在色譜柱填料允許的范圍內(nèi)。該泵帶有真空脫氣機(jī)，可不超聲，但要在泵電源開(kāi)啟后，等脫氣機(jī)停止工作后（約需5分鐘）再進(jìn)行泵的其它操作。5.1.6準(zhǔn)備樣品。為延長(zhǎng)層析柱使用壽命，建議使用流動(dòng)相溶解樣品，如果不是，一定要做預(yù)試驗(yàn)，確保樣品在流動(dòng)相溶液中不出現(xiàn)沉淀。如果樣品中成份復(fù)雜，特別含有強(qiáng)保留成分，建議過(guò)C18小柱預(yù)處理。樣品在進(jìn)樣前必須經(jīng)0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，根據(jù)溶劑性質(zhì)選擇合適的濾膜。過(guò)濾完畢后，置于樣品盤(pán)上，記錄樣品所放的位置號(hào)。5.2開(kāi)機(jī)接通穩(wěn)壓電源，待電壓穩(wěn)定在220V時(shí)，依次打開(kāi)下列儀器的電源：高壓泵、柱箱、系統(tǒng)控制儀、色譜工作站。接通2695分離單元后，約20s儀器開(kāi)始自檢，約1min后，顯示主屏幕，此時(shí)繼續(xù)各部件的初始化，待主屏幕上方標(biāo)題區(qū)出現(xiàn)“Idle”時(shí)，儀器進(jìn)入待命狀態(tài)。5.3溶劑管理系統(tǒng)的準(zhǔn)備5.3.1流動(dòng)相脫氣確認(rèn)所有溶劑管路都充滿溶劑，按【Menu/Status】，進(jìn)入“Status（1）5.3.1.1濕啟動(dòng)在“Status（1）”屏幕下，光標(biāo)選“Compomtion”中欲使用的流動(dòng)相，輸入流動(dòng)相組成及比例，按【Enter】再用光標(biāo)選“Degasser”中的“Normal”，按【Enter】5.3.1.2當(dāng)溶劑的管路是干的或存在較多氣泡不易排出時(shí)，5.4樣品管理系統(tǒng)的準(zhǔn)備

5.4.1沖洗自動(dòng)進(jìn)樣器在“Status（1）”屏幕下，光標(biāo)選“Composition”，輸入流動(dòng)相的組成。按【DirectFunction】，光標(biāo)選“PurgeInjector”，按【Enter】，顯示“PurgeInjector”屏幕，輸入“SampleLoopVolumes5.4.25.4.35.4.45.5Empower色譜工作站操作5.5.1點(diǎn)擊桌面上Empower圖標(biāo)，出現(xiàn)Empower登錄窗口，輸入用戶名和密碼，然后單擊“確定”，進(jìn)入Empower。每次登錄前必須輸入用戶名和密碼。注：出廠設(shè)置的用戶名為system，密碼為manager。5.5.25.5.2.1注：項(xiàng)目名中不能出現(xiàn)空格?？墒褂孟聞澗€(_)分隔詞。另外，名稱不能以數(shù)字開(kāi)頭。項(xiàng)目是方法、結(jié)果、自定義字段、視圖篩選器和原始數(shù)據(jù)的集合，由用戶定義。該集合駐留在Empower數(shù)據(jù)庫(kù)中并在“瀏覽項(xiàng)目”中顯示。項(xiàng)目是為了方便用戶歸類、管理和檢索相應(yīng)的數(shù)據(jù)，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況來(lái)決定是否建立，并不是每次開(kāi)機(jī)都要?jiǎng)?chuàng)建。5.5.35.5.3.15.5.3.25.5.3.35.5.3.4待系統(tǒng)平衡后，即可單擊“停止注：“方法組”欄中，默認(rèn)會(huì)出現(xiàn)剛剛建立好的方法組的名稱，如果需要選擇其它已經(jīng)建立過(guò)的適用的采集方法組，則可從此欄的下拉菜單中選中即可。5.5.45.5.4.15.5.4.25.5.4.35.5.55.5.5.1注：如果在非“結(jié)果”選項(xiàng)卡（例如通道）中單擊預(yù)覽出版，則無(wú)法查看到積分結(jié)果。5.5.5.25.5.5.3如果想批處理打印，可以在“項(xiàng)目”窗口中，點(diǎn)擊“結(jié)果”標(biāo)簽，用“鍵盤(pán)Ctrl＋鼠標(biāo)左鍵”選黑要出報(bào)告的樣品，單擊（打印）在隨后出現(xiàn)的“后臺(tái)處理及生成報(bào)告”頁(yè)面中（見(jiàn)下圖），確認(rèn)“打印”方框中打勾，“處理”和“導(dǎo)出”方框中為空。選中‘使用指定的報(bào)告方法’，在其下拉菜單中選擇所需的報(bào)告方法，點(diǎn)擊‘確定’即可。5.6關(guān)機(jī)

5.6.1數(shù)據(jù)采集完畢后，關(guān)閉檢測(cè)器電源開(kāi)關(guān)。

5.6.25.6.36注意事項(xiàng)6.1更換溶劑時(shí)，若液體流路中有氣泡，可用注射器抽吸，徹底排除氣泡6.2流動(dòng)相禁止使用氯仿、三氯（代）苯、亞甲基氯、四氫呋喃、甲苯等；慎重使用四氯化碳、乙醚、異丙醚、酮、甲基環(huán)己胺等，以免造成對(duì)柱塞密封圈的腐蝕。6.3柱溫箱一旦發(fā)生報(bào)警，一定要及時(shí)找到原因。若實(shí)驗(yàn)室濕度太高，則需采取相應(yīng)的除濕措實(shí)。若柱溫箱中發(fā)生漏液現(xiàn)象，則需及時(shí)擰緊色譜柱并擦干漏液，長(zhǎng)時(shí)間的漏液極易損壞柱溫箱中的傳感器。6.4紫外檢測(cè)器要“晚開(kāi)、早關(guān)”，在流通池有溶液連續(xù)流動(dòng)幾分鐘后方可開(kāi)啟。若不需要做樣，可設(shè)置一個(gè)較低的流速（如0.05ml/min）。如果流動(dòng)池中有氣泡，則會(huì)提示漂移過(guò)大無(wú)法通過(guò)自檢和校正。7維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程7.1檢查HPLC的日常操作條件：7.1.1檢查溫度：10—30℃7.1.27.1.37.1.47.2泵的保養(yǎng)：7.2.17.2.27.2.27.2.27.2.37.3柱的保養(yǎng)：7.3.17.3.27.3.27.3.27.3.37.3.47.3.7.4檢測(cè)器(UV)的保養(yǎng)：7.4.17.5其它：7.5.1每?jī)芍芤鍧嵰淮蝺x器。7.5.2柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強(qiáng)烈震動(dòng)7.5.3防止過(guò)濾頭滋生細(xì)菌和微生物。7.5.47.5.57.5.67.6儀器維護(hù)保養(yǎng)項(xiàng)目周期表維護(hù)項(xiàng)目維護(hù)內(nèi)容維護(hù)周期1.日常操作條件檢查是否符合每次實(shí)驗(yàn)2.記錄檢查是否齊全3.廢液瓶檢查是否裝滿4.洗針液與洗泵液檢查是否充足5.泵通道檢查儀器方法與使用是否一致6.色譜柱使用與標(biāo)準(zhǔn)是否一致7.泵實(shí)驗(yàn)前排氣泡8.進(jìn)樣針實(shí)驗(yàn)前排氣